分光光度法测定红花黄色素含量

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中一组水溶性查耳酮类成分，研究结果表明，具有 抗血栓、抗心肌缺血等药理作用且其毒性较低。安 熙强
［#］
分离得到红花黄色素 I 和红花红色素，但由
于红花黄色素成分较复杂，单体制备困难，目前尚
万方数据 )(($ 年版中国药典收载的红花 无对照品出售，在
鲎试剂（ _I8，规格 *1) 68，灵敏度 *1!$ dJ ・ O) ・ 68 ，批号 68 ，批号 ***!)%；灵敏度 *1)!$ dJ 、内 毒 素 工 作 品（ X.d，规 格 每 支 )’ dJ， ((*()#）
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・ !76 ・ 表# )*+ # 化合物!和"的#$ %&’( 谱数据
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・ 交流 ・ 分光光度法测定红花黄色素含量!
臧宝霞 王玉琴!! 李家实!! 北京 陈文梅 !"""#$） （北京市心肺血管疾病研究所
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%&’( ,-./01*2 3*0* 451 ! *63 "
G#6?7# H!8 ，高效液相分析结果表明，羟基红花黄色 素 5 为 01 中含量较京市高科技实验室基金 !!北京中医药大学药学院中药鉴定教研室
万方数据
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药物分析杂志
!，"，#，$，%，&，’， (， )* + 测定。结果表明样 品 # , 保存较稳定，-./ 0 *1!(2 ，室温放置样品 .3 含量呈下降趋势， -./ 0 $1&2 。室温放置 ) +， 。 .3 含量下降（)1%* 4 *1!"） 2 （ ! 0 )*） !"# 超声时间对 .3 提取率的影响 取同一样品 ( 份，分 " 组，分别超声提取 *1$，)，)1$ 5，依上法 测定，结果表明 .3 提取率随超声时间延长呈下降 趋势，这可能与超声的热效应导致 .3 含量下降有 关，故本文实验超声提取时间定为 *1$ 5。 !"$ 重复性试验 红花样品粉碎过 %& 目筛，置硅 胶干燥器内干燥 !# 5，每份精密称取 )$ 67，分别 加水 $* 68，超声 "* 69:，过滤，水洗涤药渣 " 次， 合并滤液，定容至 )** 68 容量瓶刻度，混匀即得， 在波长 #*" :6 处测定吸光度。称量 " 批样品粉末， 每批 )* 份依上法平行测定，平均吸光度为 *1"%!， *1"&*，*1"&!， -./ 分 别 为 )1(2 ， )1%2 ， )1%2 ， （ ! 0 )*） ，批间 -./ 为 )1#2 （ ! 0 "） 。 !"’ 加样回收率试验 将已知含量样品适量共 (# 份分 成 ) 组， 各 组 精 密 加 入 的 对 照 品 约 *1*!$， *1*$，*1*&$ 67，依法测定，并计算回收率，结果 平均回收率分别为 (’1*2 ，(’1$2 ，)*)1#2 ； -./ 分别为 *1&#2 ，)1*2 ，*1#&2 ， ! 0 $。 !"* 样品测定 取红花干燥粉末，依“!1%”项下 方法称量、提取、稀释、测定，将吸收值代入回归 方程，计算样品中 .3 百分含量。原产 地 为 河 南、 四川、新疆吉木萨尔县及山东的商品红花中 .3 含 量测定结果见表 !，以新疆吉木萨尔县红花中 .3 含 量最高。
参考文献
) ， GMQ R9:7（金鸣） LMIN 3<:7 O P5@（朴永哲） S L><7>@;; <T ;A=+9@; <: 6U<?D>+9DV 9;?5@69D 9:59W9A9<: @TT@?A <T XD>A5D6=; A9:?A<>9=;（红花抗心 肌缺血 研 究 进 展） ， !**)， "! S "#$! %&’($) *+&, -&./0 （中 草 药） （$） ：#&"（ 9: X59:@;@） ! ， ZJ 89 O W<（付立波） ， [CIQY [59 O U= YJN R@9 O V9 （郭美丽） （张之玉） ， +) ’1 2 /@A@>69:DA9<: <T ;DTTV<\@> U@VV<\，]<VU;D??5D>9+@ D:+ D+@:<;9:@ 9: XD>A5D6=; A9:?A<>9=; WU JK D:+ CL8X（ JK， CL8X 测定红 花中黄色素、多糖和腺苷的含量） S "#$! 3#’&4 5 （中国药学杂 志） ，)(((，"#（’） ：$$*（ 9: X59:@;@） " R@;@V5U - R@;@V5U， .597@A<;59 ^D+<AD， 3D;=:<>9 R<6<;@， +) ’1 2 _\< :@\ ‘=9:<?5DV?<:@ U@VV<\ ]976@:A T><6 "’&)#’4.0 )$!6)7&$.0 D:+ XD! a D:b ： AD7<:9;A9? D?A9c9AU <T A9:?A<>69:@S "#+4 3#’&4 8.11 ， )(("， #) （ )* ） )&(% # ， 8M 3D: O 5<:7（李艳红） ， XCdQ G9@（陈 IQ E9 O ‘9D:7（安熙强） 杰） ， +) ’1 2 M;<VDA9<: D:+ 9+@:A9T9?DA9<: <T ;DTTV<\@> U@VV<\ D:+ ?D>A5D69: 9: "’&)#’4.0 )$!6)7&$.0 （红 花 中 黄 色 素 和 红 色 素 的 分 离 鉴 定 ） S ，)((*，!)（#） ：##（ 9: X59:@;@） "#$! %&’($) *+&, -&./0 （中草药） （本文于 !**) 年 ! 月 )! 日收到）
［7］ 与文献报道 的羟基红花黄色素 5（ " ）对照，数 据完 全 一 致，鉴 定 为 羟 基 红 花 黄 色 素 5，分 子 式
!"$ 线性关系 精密称取羟基红花黄色素 5 对照 品，加水溶 解 稀 释 得 "P"7# #: 9T・9% @ ! 对 照 品 溶 液。精 密 吸 取 对 照 品 溶 液 "P!， "P#， "P7， "P:， "PF，"P8 9%，置于 ! 9% 容量瓶中，加水稀释至刻 度，混匀。在波长 :"7 R9 处测定吸光度。以对照品 浓度（9T ・ 9% @ !）为自变量，求得回归方程： - Y "P"!# " M 76P# . # Y "P$$$ $ 在 !P"O Z !" @ #6PF8 Z !" @ # 9T ・ 9% @ ! 线性关系良好。 !"7 稳定性观察 取同一供试品溶液，分别室温 放置 "， !， #， 7， :， F <，依 前 法 测 定， B0[ Y !P!\ ，提示本法稳定性较好。取一供试品溶液依 本法测定，该溶液随后分别于室温及 : ] 放置 !，
［!］ 。 23 法测定 01 有抗凝、抗缺氧、降血压等作用 ［# 4 " 红花中 01 的含量已有报道 ，但该文以混合物
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01 对照品做标准曲线，使其测定结果偏高。本文 以羟基红花黄色素 5 做对照品，采用 23 法测定 01 含量，试图为红花质控提供一简便准确的方法。 ! 仪器与药材 23 6#7" 型分光光度计，上海分析仪器总厂； 岛津 23!8"5 型分光光度计；比色皿光径 !" 99， 宽 : 99。 红花购自北京、四川、新 疆 吉 木 萨 尔 县 药 批 （店）及安国药市，产地为河南、四川、新疆吉木 萨尔县、山东。经北京中医药大学李家实教授鉴定 为 !"#$%"&’( $)*+$,#)’( %& 。 01 对照品为羟基红花黄色素 5，由北京中医药 大学中药鉴定教研室提供。 ! 实验方法与结果 !"# 羟基红花黄色素 5 的制备和结构鉴定 取红 花水提液，聚酰胺层析法除杂质，经 0.;<(=.> %? @ #" 凝胶柱层析反复分离纯化，重结晶得化合物 !，
图!
羟基红花黄色素 5（!）与红花水提液（#）吸收光谱图 23 (U’+,;VS+R ’;.EV,W9 +) <-=,+>-’())*+, -.**+/ 5（!） (R= (XW.+W’ .>V,(EV +) ’())*+/.,（#）
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、苯环（! 8":，! F!F E9 @ ! ） 、苯环共 E9 @ ! ，钝峰） @! 轭反式双键（! 8#:，$#6 E9 ）及糖基中 G @ H（! !6#，! "6$， ! "!" E9 @ ! ） 的 吸 收。 质 谱 （ I5D @ J0） 9 K L 8F!（J M C）和 9 K L 867（ J M C M N( @ !） ! !7 表明其分子量为 8!#。 ?NJB， GNJB 数据（见表 !）