显色培养基在微生物检验初筛中的应用
显色培养基在检测食品中沙门氏菌的应用研究
·42· 食品安全导刊 2021年5月测中，不能忽略外部环境对测试结果的影响。
检验检测人员应采取有效措施，以减少外部因素对测试过程和结果的负面影响，并确保提供用于样品制备的工具。
工艺要符合要求、使用的仪器型号以及仪器的精度要满足实验要求。
在执行食品检测时，除了确保检验方法符合标准要求并确保操作流程标准化外，检验检测人员还必须积极了解使用网络的最新检验技术的应用。
在学习新的检测技能并不断提高能力的同时，可以参加更多的比较实验以了解实验室的检验检测水平。
结语随着我国科学技术的飞速发展，化学检测技术不断改善，检测效率提高，其应用范围也大大扩展。
在食品安全检验过程中应用化学技术可以有效地分析食品中的营养成分和污染物，而不受食品类型和用途的限制。
与过去相比，食品安全领域中的化学检测技术受到的限制正在逐渐缩小。
在这方面，必须继续加大对化学技术的探索及其在食品安全检测中的应用，不仅为促进我国食品安全和质量的提高，而且为我们的生活和健康提供重要保证。
参考文献[1]万峥,闵慧灵.浅析食品安全检测中化学检测技术的应用[J].现代食品,2019(21):112-114.□□李金霞邹城市疾病预防控制中心 山东邹城 邮编273500显色培养基在检测食品中沙门氏菌的应用研究.........................................................................................................................本文通过对显色培养基沙门氏菌检测方法进行研究，通过相关实践检测分析和对比，沙门氏菌是影响食品公共卫生安全的重要因素之一。
随着这些年的发展，显色培养基成为当前一种新型的食品沙门氏菌培养基。
在以往培养基的基础之上，增加了一种新型的具有组合式的特异发色性酶底物，一旦特异酶在细菌发酵过程中显现出特异性的发色底物以后，那么当目标菌落呈现出不同颜色，此时就能对目标菌落进行有效的鉴别和分离措施，也可以通过计数的方式进行。
浅谈显色培养基检测沙门氏菌的认识与体会
浅谈显色培养基检测沙门氏菌的认识与体会摘要：目的：总结本人在显色培养基检测沙门氏菌方面一些初步认识与体会；方法：通过查阅相关资料和本人在检验实践中的体会，进行分析；结果：沙门氏菌显色培养基种类、应用比对研究现状、注意事项等；结论：沙门氏菌是影响食品公共卫生安全的重要因素之一，目前沙门氏菌检测方法主要包括传统标准检测方法、显色培养基法、免疫学法等。
本文主要对显色培养基检测沙门氏菌的认识与体会，进行以下概述。
关键词：显色培养基；沙门氏菌；认识与体会[Abstract] Objective：To summarize in chromogenic medium for detection of Salmonella has some preliminary knowledge and experience；methods：through the analysis of relevant data and personal experience，in the test in practice；results：Salmonella chromogenic culture medium，application research on status quo，matters needing attention；conclusion：Salmonella Salmonella is one of the important factors affecting the food security of public health，the current detection methods of Salmonella detection methods，including traditional standard color medium method，immunological method etc.. In this paper，the recognition and experience of the detection of Salmonella in the color medium is summarized.[Key words] color medium；Salmonella；knowledge and experience显色培养基是近年来发展起来的一种新型培养基。
显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用
显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用显色培养基是一种鉴定微生物的快速检测技术，它的原理是通过在培养基中加入微生物自身代谢生产的酶，根据相应显色底物反应的颜色对菌种进行判断与鉴定。
显色培养基较传统培养基具有灵敏度高、特异性大的优点，是一种新型的分离培养。
大肠杆菌显色培养基、沙门氏菌培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、弧菌显色培养基、李斯特菌显色培养基等这几种食源性致病菌已经有效、广泛应用于食品、环境卫生、医药等领域，取得了一定的成效。
但显色培养基尚还存在一些假阳（阴）等问题，这就影响了检测的结果，因此还需要进一步的研究。
标签：显色培养基；食源性致病菌；快速检测；应用随着人们生活水平逐渐的提高和近年来一系列食品安全问题的出现，食品的安全问题越来越受到人们的重视。
食品安全问题与微生物密切相关，微生物可造成食品环境的污染，因此，微生物的检测技术已经成为检测食品安全问题的重要工具。
微生物传统的检测方法耗时长，操作步骤繁琐，已经不能满足当今食品、环境卫生、医药等领域检测的需要。
研究各种新型微生物的检测技术，提高检测的效率是有效预防和控制各种微生物感染的有效措施[1]。
本文就显色培养基在大肠杆菌显色培养基、沙门氏菌培养基、金黄色葡萄球菌显色培养基、弧菌显色培养基、李斯特菌显色培养基等食源性致病菌快速检测中的应用进行研究总结。
显色培养基的原理是通过在培养基上加入微生物自身代谢产生的酶的底物，底物是由发色基团和微生物可代谢物质组成，为无色，但在特异性酶作用下游离出发色基团并显示一定颜色，直接观察菌落颜色，对菌种做出鉴定，减少了对菌株进行纯培养和进一步生化鉴定的步骤[2]。
1 几种食源性致病菌应用显色培养基快速检测的近况1.1 显色培养基在大肠杆菌应用的研究研究表明，绝大多数的大肠杆菌具有β-D-葡萄糖苷酸酶（β-D-Gud），利用β-葡萄糖醛酸酶分解底物，使色源游离出来显色而区分大肠杆菌和其它的细菌。
沙门菌、志贺氏菌和耶尔森氏菌不能产生β-D-Gud，因此可以利用β-D-Gud底物有效检测大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌定性定量检测中显色培养基的作用探讨
146作者简介：王慧静（1978.10-），女，本科，副主任技师，研究方向为疾控微生物检验金黄色葡萄球菌定性定量检测中显色培养基的作用探讨王慧静（南京市溧水区疾病预防控制中心检验科，江苏 南京 211200）【摘要】目的：探究在金黄色葡萄球菌定性定量检测中应用显色培养基的作用与效果。
方法：对本中心2018年12月至2022年8月食品安全风险监测食品样本以及室内质控考核样本（奶粉）进行金黄色葡萄球菌定性定量检测。
分别使用显色培养基、Baird-parker 平板，以及半自动细菌生化鉴定分析系统完成实验研究，且以国标法完成检测鉴定等工作。
结果：在显色培养基中，金黄色葡萄球菌显粉紫色的，而其他葡萄球菌显示蓝色或者乳白色等，能够直观地就食品中金黄色葡萄球菌实施有效性辨别，并且在定量检测中目标菌于显色培养基中生长率优于Baird-parker 平板，计数结果与Baird-parker 平板相近（P ＞0.05）。
结合半自动细菌生化鉴定分析系统所得结果与国标方法保持一致。
结论：应用显色培养基，即可缩短培养周期、快速锁定目标菌，为突发事件溯源工作明确方向。
同时显色培养基使金黄色葡萄球菌定性、定量检测更为科学、直观，可有效提升常规检测的效率。
因此，显色培养基可广泛运用于疾控突发公共卫生事件实验室检测工作中。
【关键词】金黄色葡萄球菌；定性定量检测；显色培养基【中图分类号】R379.9 【文献标识码】A 【文章编号】2096-5249（2023）23-0146-04金黄色葡萄球菌是细菌性食物中毒重要的致病菌之一，可引起人及动物局部或全身性化脓性感染，属人畜共患病原菌。
其镜下呈球型，以葡萄串状排列、大小一致，革兰氏染色阳性，无鞭毛与芽孢等，通常无荚膜[1]，在自然界中广泛分布，如空气、水、人以及动物等排泄物当中，容易诱发食品污染问题。
其中最易感染到金黄色葡萄球菌的食物为肉类、蛋类、水产品及乳制品。
葡萄球菌肠毒素是导致食物中毒严重症状最关键的原因[2]。
应用产色培养基快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
Ｍ Ｒ Ａ 由 于 获 得 了 ｍｅＡ 基 因 ， 基 因 编 码 产 生 的 低 亲 和 Ｓ ｃ 该
力 青 霉 素结 合 蛋 白 ２ （ Ｐ ａ ， 所 有 口内 酰 胺 类 及 酶 复 合 剂 ａ Ｂ ２）对 一 抗 菌 剂 耐药 Ⅲ ， 时 ， 耐 药 性 的遗 传 物 质 能 够 在 细 菌 之 间 传 同 该
ＭＲｓ 产 色培 养 基 检 出 Ｍ Ｒ Ａ 比 常 规 方 法 缩 短 ２ ， 用 于 临 床 实验 室 快 速 、 Ａ ｓ ４ｈ 可 准确 地 检 测 ＭＲｓ Ａ。 关 键 词 ： 萄球 菌 ， 黄 色 ； 产 色培 养 基 ； 甲氧 西 林 ； 乳 胶 凝 集 实验 ； 耐 药 葡 金
凝 集 检 测 试 剂 盒 （ 国生 物 梅 里 埃 公 司 ） 哥伦 比亚 血 琼 脂 培 养 法 ， 基 （ 海科 玛嘉公司）Ｐ ２ 上 ， Ｃ ０细 菌 鉴 定 药 敏 复 合 板 、 ａ Ａｗ ｙ Ｗ ｌ ｋ ａ－ ４ Ｏ全 自动 鉴 定 仪 （ 国西 门子 公 司 ） 德 。 １ ３ 方 法 ． １ ３ １ Ｃ ｒ ｍＩ Ｓ 产 色 培 养 基 分 离 鉴 定 实 验 严 格 按 ． ． ｈ ｏ Ｄ ＭＲ Ａ
阳 性 率［ （／ ） ｎ ｎ］
照操作 规 程将 临床 标本 接 种 于产 色培 养基 上 ， 区画线 ， 分 于
（ ５ ） 有 氧条 件 下 进 行 孵 育 ， ４ ｈ观 察 结 果 ， 现 绿 色 菌 ３ ±１ ℃ ２ 出 落 为 阳 性 判 定 是 Ｍ Ｒ Ａ， 果 结 果 为 阴性 继 续 孵 育 至 ４ Ｓ 如 ８ ｈ再
临床 标 本 直 接 接 种 在 Ｃ ｒｍｌ ｈ ｏ Ｄ ＭＲＳ 产 色培 养 基 和 常 规 血 琼 脂 培 养 基 ， 用 ２ 、 ８ｈ两 个 孵 育 时 间 观 察 结 果 ， 琼 脂 培 养 基 疑 Ａ 采 ４ ４ 血
《显色培养基》课件
根据颜色变化判断细菌的种类 或特性，如耐药性等。
结果记录
详细记录实验结果，为后续分 析提供数据支持。
结果分析与应用
结合实验结果，对细菌进行鉴 定、药敏试验等后续分析，为
临床诊断和治疗提供依据。
05
显色培养基的发展趋势与展
望
新型显色培养基的研发
新型显色培养基的研发是显色培 养基领域的重要发展方向，旨在 提高培养基的灵敏度、特异性和
显色培养基的种类
根据用途分类
可分为选择性显色培养基和鉴别性显色培养基。选择性显色培养基主要用于分 离和鉴别某一类微生物，而鉴别性显色培养基则可对多种微生物进行鉴别。
根据指示剂种类分类
可分为酚红显色培养基、美蓝显色培养基、结晶紫显色培养基等。不同指示剂 可与不同微生物发生特异性反应，从而呈现不同颜色。
04
显色培养基的使用方法
操作步骤
制备培养基
按照说明书比例混合显色培养 基成分，加热溶解后冷却至室 温。
培养
将培养皿放入恒温培养箱中， 在适宜温度下培养一定时间。
准备工具与材料
显色培养基、接种环、酒精灯 、培养皿、手套等。
接种
使用接种环在菌落边缘取适量 细菌，划线接种于显色培养基 上。
观察结果
观察培养皿上细菌菌落的颜色 变化。
03
常见显色培养基介绍
乳糖发酵管
总结词
用于鉴别乳糖发酵的显色培养基。
详细描述
乳糖发酵管是一种常用的显色培养基，用于鉴别乳糖发酵的细菌。通过观察培养 基上菌落的颜色变化，可以初步判断细菌是否能够发酵乳糖。
伊红美蓝琼脂
总结词
用于鉴别大肠杆菌的显色培养基。
详细描述
伊红美蓝琼脂是一种专门用于鉴别大肠杆菌的显色培养基。大肠杆菌在此培养基上生长时，菌落呈现深紫色，与 其他细菌的菌落颜色有明显区别。
金黄色葡萄球菌显色培养基在临床细菌鉴定中的应用
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2017 Vo1.17 No.5134·药事管理·金黄色葡萄球菌显色培养基在临床细菌鉴定中的应用程聪，姜震（丽水学院，浙江 丽水 323000）0 引言金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）广泛分布自然界，多存在于环境中以及人与动物的皮肤粘膜上，可致多种化脓性感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因此，食品受到污染的机会很多。
美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，中国金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也时有发生。
目前金黄色葡萄球菌传统的检验方法（国标法）需要分离培养、镜检观察、生化鉴定等多个步骤，检测周期长，整个过程大约需要4~7 d，且操作复杂，已不能满足临床病原菌快速检测的现实需要[1]。
而金葡菌显色培养基中添加了针对金葡菌的选择性色素，因而具有较高的特异性和灵敏度[2]。
而且同常规培养基相比，能较好地消除假阳性。
金葡菌显色培养基仅需通过单一菌落的典型色彩即可进行初步鉴定，大大提高了对金葡菌的检出率。
为探讨显色法的实用价值，本研究在用传统方法处理细菌性食物中毒时，使用金葡菌显色培养基同时进行检测，为金葡菌显色培养基的应用提供借鉴。
1 材料与方法1.1 样本。
选取自2015年7月至2016年7月间浙江省丽水市中心医院150份送检样本作为研究对象，其中脓液82例、痰液23例、尿液10例、分泌物28例、血液7例。
1.2 试剂金黄色葡萄球菌显色培养基购于法国科玛嘉公司，革兰氏染色液购于杭州滨和微生物试剂有限公司。
科玛嘉显色培养基在念珠菌鉴定中的应用价值探讨
科玛嘉显色培养基在念珠菌鉴定中的应用价值探讨影像与检验CHINAFOREIGNMEDICAL墨固科玛嘉显色培养基在念珠菌鉴定中的应用价值探讨黄峰秦淑国边其侠(安徽省宿州市皖北煤电集团总医院检验科安徽宿州234000)【摘要】目的评价科玛嘉显色培养基在念珠茵鏊定中的应用价值.方法用法国生物梅里埃公司生产的ATBID32C鉴定卡和科玛嘉显色培养基同时鉴定190株念珠茵.结果190株念珠茼中,科玛嘉显色培养基鉴定出白色念球菌127株,光滑念珠茵35株,热带念珠茵21株,克柔念珠茵2株.ID32C鉴定卡鉴定出白色念珠茵127株,光滑念珠茵36株,热带念珠茵22株,克柔念珠茵2株.结论科玛嘉显色培养基在念珠茵鉴定中符合率高,方法简便,用时较短且价格便宜,能快速准确地整定出临床常见念珠茵.ID32C鉴定卡能将念球菌全部鉴定到种,但价格较贵,且用时较长.【关键词l科玛嘉显色培养基念珠茵【中图分类号】R37【文献标识码】A【文章编号】1674--0742(2009)02(b)--0149--02 近年来由于高效广谱抗生素,肾上腺皮质激素,免疫抑制剂,恶性肿瘤化疗及放疗,多种侵袭性操作手段的广泛应用,导致菌群失调的真菌感染日益增多,因此及时准确的培养及鉴定出念珠菌,成为了微生物室急需要解决的重要问题.科玛嘉显色培养基是通过培养基上产生颜色差异和菌落特征来进行快速鉴定念珠菌的培养基,我们将此培养基与ATBexpression自动细菌鉴定/药敏系统的配套ATBID32C鉴定卡作了如下对比.1材料与方法1.1标本我院门诊与住院患者真菌培养标本1356份.1.2培养基和试剂沙保罗培养基(SDA)干粉购自杭州天和微生物试剂有限公司,科玛嘉显色培养基干粉购自郑州博赛生物技术研究所.ATBID32C鉴定卡为法国生物梅里埃公司产品.1.3仪器法国梅里埃ATBexpression自动细菌鉴定/药敏系统;30~C孵育箱.1.4方法表1190酵母样真菌分类结果名称标本直颈分泌物痰p段尿其他合计(%)将SDA~N科玛嘉显色培养基按常规制成培养基,各类标本按常规同时分区划线接种于SDA培养基和科玛嘉显色培养基,30~C培养24～4gh后观察结果,在两种培养基上7d不生长判为阴性.(1)在SDA培养基上培养阳性者经革兰染色确认为酵母样菌后,严格按生物梅里埃ATBID32C的鉴定系统操作,24～48h后用ATBexpression自动细菌鉴定/药敏系统测定结果.(2)在科玛嘉显色培养基上生长为翠绿色菌落(直径约2ram)为白色念珠菌,蓝灰色菌落(直径约1.5mm)为热带念珠菌,紫红色边缘模糊有微毛(直径约4～5mm)为克柔念珠菌,整个菌落紫红色(直径约2ram)为光滑念珠菌,白色为其他念珠菌.2结果(1)1356份标本在SDA上培养出190株酵母菌,在SDA上用A TBID32C鉴定卡鉴定分类结果见表1,在科玛嘉显色培养基上鉴定分类结果见表2.(2)190株科玛嘉显色培养基可鉴定株为185株,占总株数的97.4%,而ATBID32C与科玛嘉显色培养基直接鉴定法鉴定符合率为98.4%.3讨论(1)本文的检测结果表明,白色念珠菌占酵母样真菌数量的66.8‰光滑念珠菌占18.4%,热带念珠菌占l1.1%,克柔念珠菌占1.1%,这4种念珠菌占总数的97.4%,由此可以看出,本地区的念珠菌感染还是以白色念珠菌为主,但是光滑念珠菌感染已经上升到第2位,热带念珠菌感染所占的比例有所下降.(2)由于科玛嘉显色培养基对于不同酵母菌菌落显现不同颜色及形态差别,据此可对常见四种念珠菌作出初步判断,对于白色念珠菌,光滑念珠菌,热带念珠菌,克柔念珠菌与ATBID32C鉴定符合率达到了98.4%,差异无显着性(,0.05),表明这与许宏涛报道的结果接近….(3)在实际工作中,我们发现,科玛嘉显色培养基能在24～72h鉴定出4种常见的念珠菌,尤其是白色念珠菌,克柔念珠菌,他们的颜色和菌落特征明显,能够快速准确地得到鉴定(24-48h),而光滑念珠菌,热带念珠菌有时则需要更长一点的时间,使菌落颜色得到充分的表现,才能得到准确的判断(48～72h).A TBID32C法鉴定的结果很准确,但其价格较高,且分离培养需要24-48h,接种ID32C鉴定板条后需再培养24-48h,方能得出结果,所需时间相对较长,并且需要配套的仪器,而应用科玛嘉显色培养基不仅缩短了检测时间,而且价袼适CHINAFOREIGNMEDICALTREA TMENT中罗医疗149影像与检验高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法研究谢智光(广西中医学院附属瑞康医院检验科广西南宁530011)【摘要】目的建立高密度脂蛋白胆固醇直接测定法法.方法用甾类糖苷化合物与胆固醇醴酶和胆固醇氧化酶制备的高亲和性酶化合物,结合特殊表面活性刺,通过对测定条件的优化,实现HD1-_C的直接测定.结果本方法与磷鸪酸镁(PTA—Mg2+)沉淀法…和葡聚糖一氯化镁(DS50--Mg)~淀结合ALBK法口相关性良好,分别为,=0.990I,Y=1.0l6X-O.0818和,=0.9960.Y=1.008X一0.063.批内cV<1.B%,日问cV<2.1%,线性范围逸5.4mmol/L,回收率!oo±5%.TG浓度迭30mmol/L,抗坏血酸<3.5mmol/1,血缸蛋白<4.8g/L和胆红素<540mol/L时无显着干扰.当用纯的不同浓度的LDL加入准确定值的新鲜血清中,观察脂蛋白在血清中的反应.结果纯LDL—C浓度在10.Ommol/L以内对本法无显着干扰.结论本文建立的高密度脂蛋白胆固醇直接法方法,其性能指标符合临床使用要求.标本无需预处理,精密度好,准确性高,适用于各种自动生化分析仅.【关键词l高密度脂蛋白胆固醇直接测定法【中图分类号lR44【文献标识码lA【文章编号l1674--0742(2009)o2(b)一ol50-02 近年来流行病学及大规模临床研究已经证实高密度脂蛋白(HDL)对动脉血管壁有直接的保护作用,并能促进动脉粥样斑快的消退,甚至部分研究发现高密度脂蛋白胆固醇(HDL—c)较LDL—C能更好地预测冠心病的危险】.高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)的直接测定法有不需要血清标本预处理的优点,适于直接上自动生化分析仪检测,目前已为各大医院所采用,也是今后发展的趋势.我们采用甾类糖苷化合物与胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶制备的高亲和性酶化合物,结合对高密度脂蛋白胆固醇具有较强作用的表面活性剂研制的直接测定HDL-C~/d的工作已获得成功,现报道如下.1材料与方法1.1仪器.罗氏全自动分析仪1.2试剂试剂I:缓冲液,高亲合酶胆固醇酯酶化合物,高亲合酶胆固醇氧化酶化合物,辣根过氧化物酶,抗坏血酸氧化酶,HDAOS,稳定剂和防腐剂;试剂II:缓冲液,4一氨基安替比林,表面活性剂,稳定剂和防腐剂.校准血清为:HBS抗原阴性,HCV和HIV阴性,无脂浊,黄疸,溶血的键康体检者的新鲜混合人血清,1mL分装冻干,然后用DS50一Mg法进行定值.1.3测定方法HITACHI7060型自动分析仪参数:反应类型:二点终点法;反应温度:3712;波长:(主)546/(次)700nml样品:3L,JJ~R1180"L,3～5min读取空白读数(A1),然后加R260L,5min后读取测定读数(A2).1.4比较方法磷钨酸镁(PTA—Mg)沉淀法和葡聚糖(DS50)-氯化镁沉淀法.2实验结果2.1特异性试验取新鲜混合血清对HDL—C进行定值,浓度为1.75mmol/L;将其分成9份,分别加入超速离心分离的LDL纯品组份,加入的LDL-C的量分别为1.2,2.4,3.6,4.8,6.0,7.2,8.4和9.4mmol/L,然后分别用本法测定上述9份样品的HDL-C值,经校准加入LDL组份的稀释因素,结果说明加入LDL—C达10.0mmol/L并不影响HDL—C的测定结果.2.2线性范围中,操作简便,适合我国大,中,小型实验室使用l2】.(4)对于混合念珠菌感染的判断,科玛嘉显色培养基显示了极大的优势,两种或多种念珠菌混合感染均可作出明确判断口l.(5)另外,我们在日常的念珠菌培养试验中发现,在科玛嘉显色培养基生长的念珠菌,将其用ATBID32C鉴定卡进行试验并不影响结果的确认,有关文献对此曾有报道NI.因此,有条件的医院可以采用科玛嘉显色培养基与仪器法结合的方法,真菌培养的标本可以直接接种科玛嘉显色培养基,这样可以快速,简便地分离鉴定出大部分临床常见的念珠菌,对于少数不能显色或显色不充分有疑问的菌株可以用仪器鉴定,这样既可以降低成本,又可以提高鉴定的准确性.参考文献【1】许宏涛,张秀珍.科玛嘉念珠菌显色培养基的应用【J】.中华检验医学杂志,2000,23(5):298～299.15O中岁医疗CHINAFOREIGNMEDICALTREATMENT【2]周广,谢元宏,王知秋.科玛嘉显色培养基与API鉴定念珠菌的分析比较【J】.Jll;lls医学院学报,2004,19(1).[3】周燕等.科玛嘉念珠菌显色培养基与沙保罗培养基的应用比较【J】.现代检验医学杂志,2005,5:54.【4】朱成宾,夏永祥,窦露.科玛嘉念珠菌显色培养基的临床应用与评价【J】.实用医技杂志,2003,10(6).【收稿日期】2008—11—12。
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Guan g xi Prev Med ,Februar y 2001,Vol 7No.1
44
文章编号:1007-158X (2001)01-0044-02
中图分类号:R117文献标识码:A
显色培养基在微生物检验初筛中的应用
广西壮族自治区食品卫生监督检验所(南宁530021)
卢汉兴车光王红李秀桂
作者简介:卢汉兴(1940-),男,广西宾阳县人,副主任技师,主要从事食品卫生监督监测工作。
目前,国内检查沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、假单胞菌属等都按照国标方法进行常规的检测,但对一些突发事件的紧急检验,却争取不了时间。
我们应用CHROMa g ar Paris France 显色培养基分离致病菌,并同时与标准菌株、地方株(食物中毒菌株)作对比试验,获得较为满意的效果,现将方法介绍如下。
1
材料与方法
1.1
样品来源显色培养基购自郑州博赛科技有限责任公司,由法国进口分装成品;实验用沙门氏菌、大肠埃希氏菌、蜡样芽胞杆
菌、金黄色葡萄球菌购自中国药品生物制品检定所,其余为地方株及盲样考核中的未知菌株。
1.2方法与步骤
1.2.1显色培养基的配制将购置的干燥培养基成品沙门氏菌显色培养基、定位显色培养基按说明称取一定分量,分别放入盛有100ml 无菌蒸馏水或纯净水的灭菌三角烧瓶内,搅拌均匀,然后在电炉上加热至琼脂完全溶解,待冷却至50℃左右,即可倒入直径为
9cm 无菌平皿内,100ml 培养基约倒6～7个
平皿,冷却凝固后翻转平板并包好置冰箱备用(避光,于4℃可保存两周)。
肉汤等培养基按G B4789.28进行配制。
1.2.2菌液制备从各种平板上挑选标本中可疑菌落及标准菌株的菌落、地方菌株菌
落均转种到肉汤管中,于36±1℃培养18～24小时备用。
1.2.3
平板接种将各肉汤培养液,以无菌
接种环挑取菌液,每个菌株分别接种沙门氏菌显色平板、定位显色平板,用分区划线法接种,分离出单个菌落,经36±1℃培养24及48小时,分别观察各平板上菌落生长后显色
情况,并作详细记录。
1.3评价依据将标准菌株、地方菌株、考核菌株(未知菌株)分别接种在两种显色培养基平板上(CHROMa g ar 显色培养基)。
在同一条件、同一环境内进行培养,然后以标准菌株为准,对比识别各种菌落在不同培养基上生长后的菌落色彩。
2
结果
按使用说明制作好的显色平板,当天制
作,当天使用,当天接种实验菌株,然后于24及48小时观察各种菌落的颜色,结果如表
1。
3
讨论与小结
3.1
在处理食物中毒标本及实验室盲样检
测时,我们应用了CHROMa g ar 显色培养基对标本中的致病菌进行筛选性的检测,同时用标准菌株加以对比,实验结果表明,应用此培养基分离致病菌操作简单、快速、准确,对提高常见食物中毒菌的检出率具有实际意义。
3.2
目前在实验室所分离到的常见致病菌在SS 、EMB 、麦康凯、中国蓝等平板上所生长的菌落多数是无色透明或半透明菌落,其
广西预防医学2001年2月第7卷第1期45
细小而夹在大肠菌群菌落之间,稍微粗心便不易发现,影响检出率。
但在应用显色培养基过程中发现一些不同色泽的菌落,可使操作者尽快作出初步筛选,如在沙门氏菌显色培养基上,于显蓝色的大肠杆菌菌落中间夹着紫色的沙门氏菌落,给检验者提示寻找致病菌的明确方向,这就有可能提高检出率。
这次从食物中毒盲样标本中检出仙台沙门氏菌,其显出色彩与对照菌株一致,也证实了显色培养基的准确性。
表1几种常见致病菌在显色培养基上的菌落颜色
沙门氏菌显色培养基定位显色培养基
菌种名称
24h48h24h48h
大肠埃希氏菌深蓝色浅蓝色
变形杆菌无色褐色(带晕轮)中心浅蓝变深蓝色
鼠伤寒沙门氏菌紫色中央深蓝,周围浅蓝全呈深蓝色
仙台沙门氏菌紫色同上同上
福氏志贺氏Y变体灰蓝色浅灰白色灰白色
福氏志贺氏6型灰蓝色浅灰色灰白色
福氏志贺氏2a灰蓝色无色
宋内氏志贺氏菌灰蓝色紫色
小肠结肠炎耶尔森氏菌生长不良浅蓝色浅灰色
绿脓杆菌灰紫色奶油色(半透明)草绿色
蜡样芽胞杆菌不生长蜡样粗糙有混浊带72h后菌落中心呈蓝色金黄色葡萄球菌不生长显色比普通平板快金黄色明显
椰毒假单胞菌酵米面亚种生长不良奶油状灰黄色黄色素明显
3.3从表1的结果看,应用13个菌株于沙门氏菌显色培养基上,24小时显色的菌株,多数在48小时变化不大,但其中有些菌株不生长或生长不良,特别是革兰氏阳性菌株明显受到抑制;同时对不同种属的小肠结肠炎耶尔森氏菌、椰毒假单胞菌酵米面亚种也致使其生长不良,而有利于沙门氏菌的生长。
定位显色培养基,在接种13株菌中都能生长,说明此显色培养基比较广谱,不限细菌染色性属都适用,而有些菌株菌落生长随着时间的延长所显示的色彩有所变化或者加深,这对判断菌株的种属有一定的帮助作用,如金黄色葡萄球菌、椰毒假单胞菌酵米面亚种在此培养基上生长良好,色泽明显,易于识别。
我们初步认为这两种显色培养基可应用于突发的食物中毒的致病菌分离。
3.4大肠杆菌在这两种显色培养基中显示深蓝色或浅蓝色(某些大肠埃希氏菌显示红色),其与常见致病菌所显示的颜色有较大的差异,这就使检验人员能集中精力检查较少见的可疑致病菌,从而使真正的中毒菌株能准确地由可疑检品中检测出来。
采用显色培养基筛选卫生微生物是一种较新的技术,虽然我们应用试验菌株及检测例数有限,有些细节尚在探索,但其操作简便、检出时间短、检出率较高、特异性强,能提高微生物细菌鉴定在临床上的地位,是值得推广的一种方法。
(2000-03-16收稿。
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