培养基的制备实验总结
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告本次实验的目的是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
下面将从实验的步骤、注意事项、结果及讨论等方面进行介绍。
一、实验步骤1、准备物质：本次实验需要的物质有蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂、蔗糖、粉红色指示剂等。
2、称量：按照配方称取所需要的物质，放置于烧杯中。
3、加水：将溶液加到烧杯中，使用热水搅拌溶解。
4、调pH值：使用磁力搅拌器搅拌溶液，同时加入酸、碱溶液调整其pH值。
5、加入琼脂：琼脂在液态时将其加入培养基中，在0.5小时后，将烧杯放入水浴中，加热至琼脂溶解。
6、灭菌：将培养基热量至65℃进行灭菌处理。
二、注意事项1、称量精准：由于配方中各种物质的比例不同，所以在称量时应该特别注意精准。
2、调pH值准确：必须要根据实验要求，合理的加入酸、碱溶液，使pH值调整在适宜的范围内。
3、琼脂的加入和热力均匀：琼脂的加入需要在液态状态下进行，加入方法应该温和，慢慢地注入。
在加热的过程中也需要注意热力的均匀分布。
4、灭菌时间和方法：都应该根据实验要求进行相应的调整和安排，保证灭菌的效果。
三、结果及讨论培养基制备完成后，我们使用其进行实验，成功得到了所需的细菌菌落。
同时我们也根据实验结果对制备过程中的一些问题进行了总结和讨论。
1、物质的准确称量对实验结果影响较大。
2、pH值的调整应详细了解各个物质对呈酸、碱性的影响。
3、琼脂的加入要在合适的液态下进行，加热过程要均匀。
4、灭菌的方法和时间应根据实验要求进行相应的调整和安排。
综上所述，本次实验是制备培养基，为细菌的分离、培养和纯化提供良好的条件。
实验过程中我们按照步骤并严格注意了一些细节问题，最终得到了满意的结果，更加深入了我们对实验的了解。
培养基的制备实习报告
实习报告实习内容：培养基的制备实习时间：2023年2月24日实习地点：实验室一、实习目的通过本次实习，了解培养基制备的基本原理和步骤，掌握培养基制备的操作技能，为后续的微生物实验打下基础。
二、实习原理培养基是微生物生长和繁殖的营养物质，根据化学成分和用途可分为天然培养基、合成培养基和鉴别培养基等。
培养基制备的关键在于无菌操作，确保培养基不被杂菌污染。
三、实习步骤1. 准备材料：称量适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、葡萄糖等原料。
2. 溶解原料：将称量好的原料加入适量的蒸馏水，加热搅拌使其充分溶解。
3. 调节pH：用盐酸或氢氧化钠溶液调节培养基的pH值至所需范围。
4. 灭菌：将调好pH的培养基倒入锥形瓶，用纱布封口，放入高压蒸汽灭菌锅中，压力设定为1.05kg/cm²，温度为121℃，灭菌15-20分钟。
5. 倒平板：待培养基冷却至50℃左右时，倒入灭菌后的平板中，注意操作过程中避免污染。
6. 放置凝固：将倒入平板的培养基放置在培养箱中，使其凝固。
四、实习结果与分析通过本次实习，我成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，观察到培养基呈淡黄色，质地均匀，无明显颗粒。
将制备好的培养基放入培养箱中，待其凝固后，可以用于微生物的培养和实验操作。
在实习过程中，我了解到培养基制备的关键是无菌操作，避免杂菌污染。
此外，还需要注意称量、溶解、调节pH等步骤的精确度，以确保培养基的质量。
五、实习收获通过本次实习，我掌握了培养基制备的基本原理和操作技能，为后续的微生物实验奠定了基础。
同时，我也认识到实验操作中的细节问题，如无菌操作、精确称量等，这些技能将在今后的实验中发挥重要作用。
六、实习体会本次实习让我对培养基制备过程有了更深入的了解，也提高了自己的实验操作能力。
在实习过程中，我意识到理论知识与实践操作的密切关系，只有掌握了扎实的理论知识，才能在实际操作中游刃有余。
同时，我也感受到实验工作的严谨性，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。
平板培养基制备实验报告
一、实验目的1. 掌握平板培养基的制备方法及原理。
2. 了解培养基在微生物实验中的应用。
3. 学习并掌握无菌操作技术。
二、实验原理平板培养基是一种用于微生物培养的固体培养基，其主要成分包括琼脂、营养物质、水等。
琼脂是一种从海藻中提取的胶状物质，具有良好的凝胶性，可在高温下溶解，冷却后形成固体。
在制备平板培养基时，需将琼脂溶解于水中，加入营养物质，调节pH值，最后进行灭菌处理。
三、实验材料1. 琼脂：2g2. 营养物质：牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖等（根据实验需要选择）3. 水：100ml4. pH试纸5. 灭菌锅、三角瓶、烧杯、玻璃棒、量筒、天平、无菌操作台、无菌操作工具、无菌培养基平板等四、实验步骤1. 称取琼脂2g，加入100ml水中，用玻璃棒搅拌至琼脂完全溶解。
2. 称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖等营养物质，根据实验需要加入适量的量。
3. 将溶解后的琼脂溶液加热煮沸，同时不断搅拌，防止琼脂沉淀。
4. 使用pH试纸检测琼脂溶液的pH值，根据实验需要调节pH值至适宜范围。
5. 将调节好的琼脂溶液倒入无菌培养基平板中，轻轻摇匀，使琼脂均匀分布。
6. 将培养基平板放入灭菌锅中，进行高压蒸汽灭菌，压力为0.1MPa，时间为20分钟。
7. 灭菌完成后，取出培养基平板，待其冷却至室温。
8. 将冷却至室温的培养基平板放入无菌操作台中，用无菌操作工具进行平板划线接种。
9. 将接种后的平板倒置，放入培养箱中，根据实验需要调整培养温度和时间。
五、实验结果通过平板培养基的制备，成功得到了无菌、均一的固体培养基。
在适宜的培养条件下，平板上会出现不同形态的菌落，可用于微生物的分离、鉴定和培养。
六、实验讨论1. 在制备平板培养基时，应注意无菌操作，防止杂菌污染。
2. 琼脂的质量对平板培养基的质量有很大影响，应选择优质琼脂。
3. 在调节培养基pH值时，应根据实验需要选择合适的pH范围。
4. 平板培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌，压力和时间应根据实验需要调整。
培养基制备工作总结
培养基制备工作总结引言培养基是细胞培养的基础，为细胞提供必要的营养物质和适宜的环境条件，因此制备高质量的培养基对于细胞培养的成功至关重要。
在本文档中，我们将总结培养基制备的关键步骤和注意事项，以及常见的培养基配方和pH调节方法。
制备步骤1. 准备实验室用具和试剂在开始制备培养基之前，需要准备一系列实验室用具和试剂，包括量筒、容量瓶、pH计、均质器、培养基组分（如氨基酸、维生素、无机盐等）等。
确保这些实验室用具和试剂都经过必要的清洁和消毒处理，以避免任何可能对培养基质量产生影响的污染。
2. 计量和混合培养基组分根据所需培养基配方，准确计量各个培养基组分。
将无机盐、氨基酸、维生素等溶解于适量的无菌去离子水中，并搅拌均匀以确保完全溶解。
对于需要加热的组分，应使用加热器或水浴加热至溶解。
3. 调节pH值添加适量的酸或碱来调节培养基的pH值。
首先使用pH计测量溶液的初始pH 值，然后根据所需的pH范围进行调节。
在添加酸或碱之后，再次使用pH计测量pH值，直到达到所需的范围。
注意，pH调节过程中应小心操作，以免对实验室人员和培养基质量产生不良影响。
4. 无菌过滤将制备好的培养基通过无菌过滤器进行过滤，以去除任何潜在的微生物污染。
选择合适的孔径的无菌过滤器，确保其有效去除微生物，并且在过滤过程中保持无菌条件。
5. 瓶装和贮存将过滤后的培养基倒入已经消毒的培养基瓶中，并标记清楚培养基的配方和制备日期。
紧封瓶盖，存放在适宜的温度下，避免阳光直射和高温环境。
注意事项1.严格按照配方和制备步骤操作，避免误加或漏加培养基组分。
2.使用无菌技术和实验室无菌操作规范，以确保培养基的无菌性。
3.注意实验室安全和个人防护，避免对实验人员造成伤害或污染培养基。
4.明确培养基的贮存条件和有效期，并定期检查培养基的质量。
常见培养基配方在细胞培养实验中，常用的培养基有包括DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）、RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute 1640）、MEM （Minimum Essential Medium）等。
制作培养基的心得体会(优秀22篇)
制作培养基的心得体会（优秀22篇）（经典版）编制人：__________________审核人：__________________审批人：__________________编制单位：__________________编制时间：____年____月____日序言下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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培养基的制备实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。
2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。
4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。
根据微生物的种类和实验目的，培养基可以有不同的配方和种类。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基，适用于培养大多数细菌。
三、实验材料与仪器实验材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。
四、实验步骤1. 称量：根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。
2. 溶解：将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
3. 调整pH值：用pH试纸测定溶液的pH值，根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。
4. 灭菌：将溶解好的培养基转移至三角瓶中，加入灭菌棉塞，用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，灭菌时间为15-20分钟。
5. 冷却：灭菌后，待培养基冷却至50-60℃，加入适量的琼脂，充分搅拌使其溶解。
6. 分装：将冷却后的培养基分装至培养皿中，待凝固后备用。
7. 无菌操作：在无菌操作条件下，用移液管吸取适量的菌液，接种至培养基中。
五、实验结果与分析1. 培养基制备：成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，颜色呈淡黄色，透明度高。
2. 灭菌效果：通过高压蒸汽灭菌，确保了培养基的无菌状态，避免了微生物污染。
3. 接种结果：接种后，培养基上出现了菌落生长，表明培养基对细菌具有良好的培养效果。
六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中，称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要，应严格按照实验步骤进行操作。
2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节，应选择合适的灭菌方法，确保灭菌效果。
常用培养基实验报告总结
一、实验目的1. 熟悉培养基的制备方法及原理。
2. 掌握培养基灭菌的基本操作。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基础，其制备方法及质量直接影响微生物的生长和实验结果。
本实验主要制备牛肉膏蛋白胨培养基，该培养基含有微生物生长所需的各种营养物质，适用于多种微生物的培养。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、葡萄糖、蒸馏水、pH试纸、无菌水、高压蒸汽灭菌器、三角瓶、烧杯、玻璃棒、天平等。
2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、三角瓶、烧杯、玻璃棒、天平、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 配制培养基（1）称取牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂等试剂，按比例加入蒸馏水。
（2）将混合液加热溶解，用pH试纸检测pH值，调整至7.0-7.2。
（3）将溶解后的培养基倒入三角瓶中，分装至每瓶100mL。
2. 灭菌（1）将分装好的培养基放入高压蒸汽灭菌器中，设定灭菌参数：121℃，15分钟。
（2）待压力升至所需值后，开始计时，灭菌完成后关闭电源，自然冷却至室温。
3. 冷却与倒平板（1）将灭菌后的培养基取出，待其冷却至50-55℃。
（2）将冷却后的培养基倒入无菌平板中，用玻璃棒搅拌均匀。
（3）待培养基凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
4. 接种与培养（1）将待分离的微生物接种于平板上，采用平板划线法或稀释涂布法。
（2）将接种后的平板放入培养箱中，根据微生物生长特点调整培养温度和时间。
五、实验结果与分析1. 成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，符合实验要求。
2. 培养基灭菌效果良好，未发现污染现象。
3. 在培养过程中，观察到微生物生长旺盛，说明培养基质量合格。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了培养基的制备方法及原理，了解了培养基在微生物培养中的应用。
2. 熟悉了培养基灭菌的基本操作，提高了无菌操作技能。
3. 通过实验，了解了不同微生物对培养基的需求，为今后的实验研究奠定了基础。
2024年微生物实验室培养基制作个人总结范本
2024年微生物实验室培养基制作个人总结范本个人总结：2024年微生物实验室培养基制作在2024年的微生物实验室中，我有幸参与了一项关于培养基制作的实验，通过该实验我对微生物培养和培养基的制作有了更深入的了解。
下面将对我在这次实验中所学到的知识和经验进行总结，并提出一些改进意见。
首先，制作培养基的关键是要准确选择适合培养目标微生物的基本成分，并合理调配含量。
在实验中，我们选择了常用的琼脂糖培养基，并在此基础上添加了适宜的氮源、碳源和矿质盐等物质。
通过合理的配比，我们成功制作出了一种适用于培养多种微生物的培养基。
其次，制作培养基的操作技术也非常重要。
在实验过程中，我们首先进行了杀菌处理，采用高温高压的方法将培养基独立杀菌。
接下来，我们将适量的各种成分溶解于蒸馏水中，并用自动分装器分装到培养基瓶中。
最后，我们使用高温高压灭菌器对培养基进行灭菌处理，确保无菌状态。
这一系列操作的正确性和规范性对于获得高质量的培养基非常关键。
此外，我在实验中还发现了一些可以改进的地方。
首先，在培养基的配制过程中，我们应该严格按照配方比例操作，以免因误操作而影响培养基的质量。
其次，在灭菌处理中，我们可以采用更先进的灭菌技术，如紫外线灭菌等，以提高灭菌效果。
最后，在培养基制作完后，我们还可以进行一些质量检验，如pH值的测定、无菌性测试等，以确保培养基的质量。
通过这次实验，我收获了很多关于微生物实验室培养基制作的知识和经验。
在今后的实验工作中，我将更加注重实验操作的细节，以提高培养基的质量和稳定性。
另外，我还希望能够学习更多与培养基制作相关的知识，如其他类型培养基的制作方法和应用等，以拓宽我的实验技能和应用范围。
综上所述，通过参与2024年微生物实验室中的培养基制作实验，我深刻了解了培养基的基本成分和制作方法，并提出了一些改进意见。
我相信这次实验对我的实验技能和知识水平有了显著的提高，也为今后的实验工作奠定了坚实的基础。
我将会继续保持对微生物实验的兴趣和热情，不断学习和探索，为科学研究做出自己的贡献。
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培养基的制备实验总结一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）N源：包括无机氮和有机氮。
（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。
微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以 __灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
加上棉塞，迅速拔出能发出清脆声响即可，用报纸包住并系好麻绳。
2、包移液管和培养皿（1）包一包培养皿（一包五个）：用手压紧、塞好，折出棱角，包好后摇晃没有培养皿相互碰撞的声音即可。
（2）包2支移液管：用棉花塞好移液管尾部，露出1~2cm即可。
取长条报纸，一端折90°角，紧密严实沿30°角卷好移液管，尾部叠好防止散开。
3、高压蒸汽灭菌（1）灭菌前要先看水位是否合适。
（2）将包好的待灭菌物品放入内层锅，不要装得太挤，棉塞不应染上培养基。
（3）加盖，两两对称旋紧螺栓。
（4）设定条件：0.1MPa、121℃、20min，进行加热。
（5）先打开排气阀，待空气排尽后，关上排气阀。
（6）结束后，自然降温，压力降为0后，打开排气阀取出物品。
4、干热灭菌（1）将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内，关好门箱。
（2）设定条件：160~170℃，恒温2h。
（3）结束后，切断电源，自然降温，降到70℃以下后开箱取物。
六、思考题：1、你配制的是什么培养基？选择培养基。
2、选择培养基与鉴别培养基的区别？这两种培养基的应用情况。
选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。
其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。
如以纤维素作唯一碳源的培养基可分散到分解纤维素的微生物分散酵母菌或霉菌时，可添加适量的青霉素、四环素或链霉素，以抑制细菌和放线菌的生长。
鉴别培养基是在成分中加入有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基，此类培养基一般用于鉴定不同微生物。
如EMB即伊红美乳糖造就基。
大肠杆菌分解乳糖产生大量混合酸，可染上酸性伊红，伊红和美兰结合，菌落被染成深紫色，从菌落外貌的发射光中还可以看到绿色金属发光。
《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基（以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例）的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理，掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中．微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样．雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的，而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时，都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外，由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌．如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀．继续加热，此时由于蒸气不能道出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl 提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂，琼脂在常用浓度下96℃时溶化，实际应用时，一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或稀碱将其PH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 3.0g蛋白胨 10.0 gNaCl 5.0g水1000mlpH7.4—7.6实验仪器与药品1.溶液或试剂：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol／L NaOH、1mol／L HCl。
2.仪器或其他用具：试管、三角瓶、1000ml烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）、量筒、玻棒、培养基分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（pH 5.5-9.0）、普通棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布等。
实验步骤（一）牛肉膏蛋白胨培养基的制备1.称量（假定配制1000ml培养基）按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯（或1000ml刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上，称量后直接放人水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
2.溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
3.调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸．用滴管向培养基中逐滴加入1mol／LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其PH，直至pH达7.4-7.6。
反之，用1mol／LHCl进行调节。
4.过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利某些实验结果的观察。
可以省去(本实验勿需过滤)。
5.分装液体分装分装高度以试管高度的1／4左右为宜。
分装三角瓶的虽则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的一半为宜，如果是用于振荡培养用，则根据通气量的要求酌情减少；有的液体培养基在灭菌后，需要补加一定量的其他无菌成分，如抗生素等，则装量一定要准确。
固体分装分装试管，其装量不超过管高的1／5，灭菌后制成斜面。
分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
半固体分装一般以试管高度的1／3为宜，灭菌后垂直待凝。
6.加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶口上塞上棉塞(或硅胶塞、金属或高温塑料试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内面造成污染，并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎加塞后，将全部试管放入铁丝筐或用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、配制日期。
三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、配制日期。
8.灭菌将上述培养基以0.103MPa，l21℃，20min高压蒸气灭菌。
9.摆斜面将灭菌的试管培养基冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜l0.无菌检查将灭菌培养基放入37℃的恒温箱中培养24-48h．以捡查灭菌是否__。
注意事项1.蛋白胨很容易吸湿，在称取时动作要迅速，另外，称量时严防药品混杂．一把牛角匙用于一种药品．或称取一种药品后，洗净——擦干——再称职另一药品——瓶盖也不要盖错。
2.在琼脂溶化过程中．应控制火力，以免培养基因沸腾而溢出容器。
同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦，制培养基时，不可用铜或铁锅加热溶化，以免离子进入培养基中，影响细菌生长。
3.对于有些要求PH较精确的微生物，其PH的调节可用酸度计进行(使用方法、可参考有关说明书)。
pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。
配制pH低的琼脂培养基时．若预先记好PH并在高压蒸汽下灭菌，则琼脂因水解不能凝固。
因此，应将培养基的成分和琼脂分开灭菌后再混合，或在中性pH条件下灭菌，再调整pH。
4.分装过程中，注意不要使培养基沾在管(瓶)口上，以免沾污面塞而引起污染。
（二）高压蒸汽灭菌法步骤1.加水使用前在锅内加入适量的水，加水不可过少，以防将灭菌锅烧干，引起炸裂事故。
加水过多有可能引起灭菌物积水。
水面与三角架相平为宜2.装料将灭菌物品放在灭菌桶中，不要装得过满。
3.加盖盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺旋，打开排气阀。
4.加热排气加热后水蒸气与空气一起从排气孔排出，待锅内沸腾并有大量蒸汽自排气阀冒出时，排出的气流很强并有嘘声时，维持2—3min以排除冷空气。
如灭菌物品较大或不易透气，应适当延长排气时间，务必使空气充分排除，然后将排气阀关闭。
5.加压将排气阀关闭6.保压当压力升至0.1MPa时，温度达121℃，此时应注意观察，控制热源。