细菌涂片的制备及革兰氏染色实验报告
细菌涂片制备及革兰氏染色
实验内容：
1、 单菌革兰氏染色 2、 三区混合染色
A菌
A、B混合区
B菌
五、实验结果
记录所观察到的三种细菌革兰氏染色结 果
绘出显微镜下三种细菌的形态
六、问题与讨论
要得到正确的革兰氏染色结果必须注意 哪些操作？哪一步是关键？Why?
思考题：
P84：2（1）（2）（4）
本次实验课结束
请确保油镜头擦拭干净！ 请值日同学留下值日 下周再见！
铵结晶紫染液，染1分钟，倾去 染液，流水冲洗至无紫色。
3. 媒染：先用新配的卢戈氏碘液冲 去残水，而后用其覆盖涂面1分 钟，后水洗。
4. 脱色：除去残水后，滴加95%酒 精进行脱色约15－20秒，后立即 用流水冲洗。
5. 复染：滴加番红染色液，染3－5 分钟，水洗后用吸水纸吸干。
6. 镜检：观察染色结果并绘图。
革兰氏染色
丹麦C.Gram创立，用于细菌分类学研究 细菌细胞壁的结构
G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂 质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了 类脂质，增加了细胞的通透性，使初染 的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙 黄复染呈红色。
G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后， 肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细 菌仍保留初染时的紫色。
实验二步掌握细菌的革兰氏染色 法。
了解革兰氏染色法的原理及其在细 菌分类鉴定中的重要性。
二、实验原理
单染色法：只能观察微生物的大小、形状、 和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及 它的特殊构造等。
复染色法：用两种或两种以上染色液进行 染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称 鉴别染色法。常用的有： 革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、 鞭毛染色法等。
三、实验材料
细菌的简单染色和革兰染色实验报告
实验二：细菌的简单染色和革兰染色一、实验目的1.掌握细菌涂片的制备方法。
2.掌握细菌简单染色和革兰染色法的原理及操作步骤，识别细菌的革兰染色结果。
3.巩固显微镜油镜的使用方法。
4.学习无菌操作技术。
二、实验原理1、染色原理：细菌生长于酸性、中性和碱性溶液时常带负电荷，所以通常采用带正电荷的碱性染料（如美蓝、甲紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。
当细菌分解糖类产酸时，细菌所带正电荷增加易被带负电的酸性染料（如伊红、酸性复红或刚果红）着色。
2、革兰染色法原理：革兰染色法可根据细菌细胞壁结构和成分的不同，将其分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰阳性细菌的肽聚糖层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后部份细胞壁可能被溶解并改变其组织状态，细胞壁孔径大，不能阻止溶剂透入，因而将结晶紫与碘的复合物洗去而被脱色。
另外，革兰染色的差异并不能完全认为是化学的差别，也有物理结构不同的结果。
如酵母菌细胞壁的成份完全与细菌不同，但具有革兰染色阳性反应。
三、实验仪器，材料和用具1、仪器及用具：显微镜、酒精灯、火柴、接种环、载玻片、盖玻片、镊子、擦镜纸、镜油、无菌牙签2、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、葡萄球菌、牙垢、未知菌S1和S33、试剂：结晶紫染液、革氏碘液、洗脱液（95%乙醇溶液）、番红染液四、实验步骤（1）简单染色1、载玻片的处理：用纱布将取出的载玻片擦干，把要涂菌的部位在火焰上烤一下，冷却待用。
2、涂片：左手持菌液试管，右手持接种环在火焰上烧灼灭菌，待接种环冷却后在火焰旁从试管中取一环菌液，在洁净无脂的载玻片上涂一直径约2mm的均匀薄膜。
3、干燥：涂片后待其自然干燥。
4、固定：将以干燥好的涂片标本朝上，在酒精灯火焰上通过2~3次，要求载玻片温度不能超过60度，以手背触载片不烫为宜。
5、染色：滴加一滴结晶紫染液，染色1min。
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告实验目的，通过革兰氏染色技术，观察细菌的形态特征，进一步了解细菌的分类和结构。
实验原理，革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，通过革兰氏阳性和阴性细菌在染色过程中的不同反应，来区分细菌的特性。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色，而革兰氏阴性细菌在染色后呈粉红色。
实验步骤：1. 取一架无菌玻片，用无菌针头沾取待检测的细菌样本，涂抹在玻片上形成薄而均匀的细菌涂片。
2. 将玻片在火焰中加热灭菌，使细菌附着在玻片上。
3. 用染色剂革兰氏紫涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
4. 用碘液滴在玻片上，静置1分钟后用水冲洗干净。
5. 用去色剂酒精滴在玻片上，静置数秒后用水冲洗干净。
6. 用染色剂粉红色涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
7. 用纸巾吸干玻片上的水分，然后在玻片上滴一滴甘油作为封片剂。
8. 将盖玻片贴在涂片上，用显微镜观察细菌的染色情况。
实验结果及分析：经过革兰氏染色处理后，观察到样本中细菌的染色情况。
根据染色结果，可以初步判断细菌的分类。
革兰氏阳性细菌呈紫色，而革兰氏阴性细菌呈粉红色。
通过观察细菌的形态特征，可以进一步了解细菌的分类和结构。
实验结论：通过本次实验，我们成功使用了革兰氏染色技术，观察到了细菌的染色情况，并初步判断了细菌的分类。
革兰氏染色技术是一种简单而有效的细菌分类方法，对于细菌学研究具有重要意义。
总结：细菌革兰氏染色实验是细菌学实验中的基础实验，通过本次实验，我们深入了解了革兰氏染色技术的原理和步骤，掌握了正确的实验操作方法。
通过观察细菌的染色情况，我们对细菌的分类和结构有了更深入的认识，为今后的细菌学研究奠定了基础。
在今后的实验中，我们将继续深入学习细菌学知识，不断提高实验技能，为科学研究和实验应用做出更大的贡献。
革兰染色实验报告
革兰染色实验报告革兰染色实验报告引言：革兰染色是一种常用的细菌分类和鉴定方法，由丹麦细菌学家克里斯汀·格拉姆于1884年发明。
该实验通过对细菌细胞壁的染色特性进行观察，将细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类。
本实验旨在通过革兰染色方法，观察不同细菌的染色特性，从而更好地了解细菌的结构和分类。
材料与方法：1. 细菌培养物：本实验使用了两种细菌培养物，分别为革兰阳性细菌A和革兰阴性细菌B。
2. 玻璃片：用于制作细菌涂片。
3. 革兰染色试剂：包括革兰碘液、乙醇、脱色剂和碱性紫。
实验步骤：1. 准备细菌涂片：取少量革兰阳性细菌A和革兰阴性细菌B，分别在两片玻璃片上均匀涂抹。
2. 固定细菌涂片：将涂片在火焰中迅速加热，使细菌固定在玻璃片上。
3. 染色处理：将革兰碘液滴在细菌涂片上，静置1分钟后用纯净水冲洗。
然后滴加乙醇，使其脱色，再用纯净水冲洗。
最后滴加碱性紫染色剂，静置30秒后用纯净水冲洗。
4. 镜检观察：将涂片放在显微镜下，使用100倍和1000倍的放大倍数观察细菌的染色情况。
结果与讨论：观察了多个视野下的细菌涂片后，得出以下结果：1. 革兰阳性细菌A：在革兰染色后，细菌呈现紫色，细胞壁较厚，能够保留革兰染色的紫色染料。
细菌形状多为球形或椭圆形。
2. 革兰阴性细菌B：在革兰染色后，细菌呈现粉红色，细胞壁较薄，无法保留革兰染色的紫色染料。
细菌形状多样，有球形、杆状等。
通过对实验结果的观察和分析，可以得出以下结论：1. 革兰染色方法能够有效地将细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类。
革兰阳性细菌具有较厚的细胞壁，能够保留革兰染色的紫色染料；而革兰阴性细菌则具有较薄的细胞壁，无法保留紫色染料。
2. 革兰染色方法对于细菌的形态和结构有一定的指示意义。
革兰阳性细菌多为球形或椭圆形，而革兰阴性细菌则形态多样，有球形、杆状等。
结论：革兰染色是一种简单而有效的细菌分类和鉴定方法。
通过该方法，可以快速了解细菌的染色特性、形态和结构，为进一步的细菌鉴定和分析提供基础数据。
细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告
细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌的简单染色和革兰氏染色实验报告细菌是微生物中最常见的一类生物，它们广泛存在于自然界的各个角落，包括土壤、水体、空气等。
为了更好地了解细菌的形态和结构，科学家们开展了许多实验，其中包括细菌的简单染色和革兰氏染色。
一、细菌的简单染色实验细菌的简单染色是一种常用的染色方法，通过给细菌染色，可以使其在显微镜下更加清晰可见。
这种染色方法主要使用了一种叫做甲基蓝的染料。
在实验中，首先需要制备好细菌的涂片。
将一根无菌的钢丝棒蘸取一小滴细菌悬液，然后将其均匀地涂抹在玻璃片上。
待涂片干燥后，将其固定在火焰上加热的玻璃柱上，以使细菌附着在玻璃片上。
接下来，将制备好的涂片放入染色盒中，加入适量的甲基蓝染料，浸泡片刻。
然后，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。
最后，用纸巾轻轻吸干涂片上的水分，将其放入显微镜下观察。
在显微镜下观察，我们可以清楚地看到细菌的形态和结构。
不同种类的细菌可能会呈现出不同的形状，例如球状、杆状、螺旋状等。
通过简单染色，我们可以更好地观察和研究细菌的特征。
二、革兰氏染色实验革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。
这种染色方法主要使用了紫晶染料和碘酒。
在实验中，首先需要制备好细菌的涂片，方法与简单染色相同。
然后，将涂片放入染色盒中，加入适量的紫晶染料，浸泡片刻。
接着，用蒸馏水轻轻冲洗涂片，直至水洗液不再有颜色流出。
接下来，将碘酒滴在涂片上，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
随后，滴入乙醇或酒精醛溶液，使其浸润全片，然后用蒸馏水轻轻冲洗涂片。
最后，滴入蓝色染料，浸泡片刻后用蒸馏水冲洗涂片。
在显微镜下观察，我们可以看到细菌的染色效果。
革兰氏阳性菌会呈现紫色或蓝色，而革兰氏阴性菌则呈现红色或粉色。
这是因为革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胆固醇，可以吸附紫晶染料和碘酒，而革兰氏阴性菌的细胞壁则较薄，无法吸附这些染料。
细菌革兰氏染色的实验报告
细菌革兰氏染色的实验报告细菌革兰氏染色的实验报告一、引言细菌革兰氏染色是一种常用的实验方法，用于区分细菌的结构和特性。
通过革兰氏染色，可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，从而在临床诊断和疾病治疗中起到重要的作用。
本次实验旨在探究细菌革兰氏染色的原理和操作方法，并通过观察染色结果，进一步了解细菌的特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 细菌培养物：选择两种细菌菌株，一种为革兰氏阳性细菌，另一种为革兰氏阴性细菌。
- 革兰氏染色试剂：包括紫晶染液、碘液、脱色剂和红色染色液。
- 玻璃片和显微镜片：用于制作细菌涂片和观察染色结果。
2. 实验方法：- 步骤一：取两种不同的细菌培养物，分别在玻璃片上制作细菌涂片。
- 步骤二：将制作好的细菌涂片分别加入紫晶染液，静置5分钟。
- 步骤三：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤四：加入碘液，静置1分钟。
- 步骤五：用脱色剂冲洗玻璃片，直到无色流出。
- 步骤六：加入红色染色液，静置1分钟。
- 步骤七：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤八：将玻璃片放在显微镜片上，用显微镜观察细菌染色结果。
三、实验结果与讨论通过观察细菌染色结果，可以清晰地看到两种细菌的差异。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色或蓝色，而革兰氏阴性细菌则呈红色。
这是因为细菌细胞壁的结构不同导致的。
革兰氏阳性细菌具有较厚的层状细胞壁，由多层的胞外多糖和蛋白质组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的多糖会与紫晶染液结合，形成复合物。
而碘液的加入会使复合物更加稳定，不易被脱色剂去除。
因此，革兰氏阳性细菌在染色后仍保持紫色或蓝色。
相反，革兰氏阴性细菌细胞壁较薄，主要由一个薄层的胞外脂多糖组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的脂多糖无法与紫晶染液结合，因此无法形成复合物。
碘液的加入也无法稳定脂多糖，使其被脱色剂去除。
因此，革兰氏阴性细菌在染色后会被红色染色液覆盖，呈现红色。
细菌革兰氏染色的结果可以帮助我们快速区分细菌的类型，从而指导临床的诊断和治疗。
革兰染色法实验报告图
革兰染色法实验报告图
表及结果分析
实验目的：
通过革兰染色法对细菌进行分类和鉴定。
实验器材和试剂：
细菌培养基、青霉素、高锰酸钾、甲醇、碘酒、干净的平面玻片、显微镜。
实验操作：
1. 用细菌培养基将待测细菌培养至富有营养的生长期。
2. 取一块干净平面玻片，在玻片上均匀涂抹一层待测细菌培养基。
平衡后用酒精火消毒。
3. 取一支革兰染色剂，将细菌涂片中的细菌覆盖上染色剂，停留1分钟。
4. 用清水冲洗干净，接着滴上碘酒。
停留1分钟。
5. 流水冲洗过滤，将甲醇滴到细菌涂片上，待颜色变浅后再次
用流动水冲洗过滤。
6. 晾干细菌涂片，取一支高锰酸钾，滴于细菌涂片上，制成干
片即可。
实验结果：
革兰染色法将细菌分为两类：革兰阳性菌和革兰阴性菌。
革兰
阳性菌细胞壁表层为厚的胞壁，可在染色过程中吸收靛蓝染料溶液，看起来呈现紫色；而革兰阴性菌细胞壁表层薄，无法吸收靛
蓝染料溶液，染色后呈现红色。
实验结论：
通过本次革兰染色法实验，我们成功将细菌分为革兰阳性菌和
革兰阴性菌两类。
这种分类和鉴定方法可以较为准确地对细菌进
行鉴定，可广泛应用于医学和生物学等领域。
注：以上仅为范文，具体实验条件和结果请依据实验情况而定。
细菌的革兰氏染色法实验报告
细菌的革兰氏染色法实验报告摘要：革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法。
通过本实验，我们成功地利用革兰氏染色法对不同类型的细菌进行了染色，并观察到了细菌在显微镜下的形态特征。
实验结果表明，革兰氏染色法能够有效地将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，为细菌的鉴定提供了重要的依据。
引言：细菌是一类微生物，广泛存在于我们周围的环境中。
了解细菌的分类和鉴定对于研究细菌的生理特性、病原性以及药物敏感性具有重要意义。
革兰氏染色法是一种常用的细菌分类和鉴定方法，通过染色后细菌在显微镜下的形态特征，可以将其分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。
材料与方法：1. 细菌培养物：本实验选择了两种细菌培养物，分别是革兰氏阳性菌A和革兰氏阴性菌B。
2. 革兰氏染色试剂：结晶紫、碘液、酒精、脱色剂、苏木精。
3. 显微镜：用于观察染色后的细菌样品。
实验步骤：1. 取两株细菌培养物，分别进行涂片制备。
2. 将制备好的涂片用结晶紫染色液浸泡5分钟，然后用蒸馏水冲洗。
3. 加入碘液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
4. 用酒精滴加在涂片上，使其脱色，然后用蒸馏水冲洗。
5. 加入脱色剂浸泡30秒至1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
6. 将涂片用苏木精染色液浸泡1分钟，然后用蒸馏水冲洗。
7. 涂片晾干后，放入显微镜下观察。
结果与讨论：经过革兰氏染色法染色后，我们观察到了明显的差异。
革兰氏阳性菌A呈紫色，而革兰氏阴性菌B呈红色。
根据革兰氏染色法的原理，我们可以解释这种差异。
革兰氏染色法中，结晶紫染色液首先染色细菌细胞的细胞壁。
革兰氏阳性菌的细胞壁含有较多的胞外多糖和胞外蛋白质，能够吸附结晶紫，形成紫色。
而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，胞外多糖和胞外蛋白质含量较少，无法吸附结晶紫，因此在后续的染色步骤中无法保留紫色，最终呈现红色。
革兰氏染色法的原理是通过染色后细菌在显微镜下的形态特征来进行分类和鉴定。
革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，呈紫色，在显微镜下观察到细胞形态较大、圆润。
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实验三细菌涂片的制备及革兰氏染色
[实验目的]
1、掌握细菌涂片的制备方法及革兰氏染色。
2、学习无菌操作，树立无菌观念。
[实验原理]
细菌细胞微小，无色而半透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须借助染色使菌体着色（由于毛细管、渗透、吸附和吸收等物理作用以及离子交换、酸碱亲和等化学作用，染料能使细菌着色，并且因细菌细胞的结构和化学成分不同而有不同的染色反应）后，使其与背景形成明显的色差，从而能较清楚的观察到细菌的基本形态和结构。
根据不同的染色反应，可作为鉴别细菌的一种依据。
微生物染料是一种带苯环的有机化合物，其分子上具有发色基团和助色基团。
前者给化合物以特有的颜色，但不能与细菌结合；后者使化合物具成盐的性质，能和菌体结合。
分为碱性染料、酸性染料和中性染料三类。
根据细菌个体形态观察的不同要求，可将染色分为三种方法即简单染色、鉴别染色和特殊染色。
革兰氏染色：1884年由丹麦病理学家C.Gram创立。
此法可将所有细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类。
是细菌学上最常用的鉴别染色法，有着重要的理论和实践意义。
其染色过程是先用草酸铵结晶紫进行初染，再加媒染剂-革兰氏碘液，以增加染料和细胞的亲和力，使结晶紫和碘在细胞膜上形成相对分子量较大的复合物，然后用脱色剂-乙醇脱色，最后用沙黄液复染。
凡细菌不被脱色而保留初染剂的颜色（紫色）者即为G+菌，反之，脱色后染上复染剂颜色（红色）者即为G-菌。
其原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同，通过染色加以鉴别。
革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，且类脂质含量少，经乙醇处理发生脱水作用后反而使其孔径缩小，通透性降低，结晶紫-碘形成的复合物保留在细胞内而不被脱色，结果细胞呈现紫色。
而革兰氏阴性菌的的肽聚糖层薄，网状结构交联少，而且类脂质含量较高，经乙醇处理后，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，结果细菌被脱色，再经沙黄复染后呈现红色。
[实验材料]
1、菌种：大肠杆菌、葡萄球菌的斜面培养物和肉汤培养物各一管。
2、材料：载玻片、接种棒、酒精灯、打火机、吸水纸（滤纸本）、无菌水、染色缸、香柏油、二甲苯等。
3、染色液：草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%乙醇、沙黄染色液。
4、仪器：显微镜
[实验内容]
1、细菌涂片的制备
(1) 玻片准备载玻片应清晰透明，洁净而无油渍，滴上水后，能均匀展开，附着性好。
如有残余油渍，可按下列方法处理：滴95％酒精2～3滴，用洁净纱布揩擦，然后在酒精灯外焰上轻轻拖过几次。
也可提前将玻片浸泡在95%的乙醇中预先脱脂备用。
(2) 涂片针对所用材料不同，涂片方法也有差异。
a. 液体材料(如液体培养物、血液、渗出液、乳汁等)可直接用灭菌接种环取一环材料，于玻片的中央均匀地涂布成适当大小的薄层。
b. 非液体材料(如菌落、脓、粪便等)则应先用灭菌接种环取少量生理盐水或蒸馏水，置于玻片中央，再用灭菌接种环取少量材料，在液滴中混合，均匀涂布成适当大小的薄层。
c. 组织脏器材料可先用镊子夹持中部，然后以灭菌或洁净剪刀取一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印(触片)或涂抹成一薄层。
如有多个样品同时需要制成抹片，只要染色方法相同，可在同一张玻片上有秩序地排好，做多点涂抹，或先在玻片上划分成若干小方格，每方格涂抹一种样品并做好记录。
(3)干燥上述涂片应让其室温自然干燥。
(4)固定有两类固定方法：火焰固定（物理固定）：将干燥好的抹片，使涂抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖过数次，略作加热(但不能太热，以不烫手为度)进行固定。
涂片固定的目的有如下几点：(1)除去涂片的水分，涂抹材料能很好地贴附在玻片上，以免水洗时易被冲掉。
(2)使涂片易于着色或更好地着色，因为变性的蛋白质比非变性的蛋白质着色力更强。
(3)可杀死涂片中的部分微生物。
必须注意，在涂片固定过程中，实际上并不能保证杀死全部细菌，也不能完全避免在染色水洗时不将部分涂片冲脱。
因此，在制备烈性病原菌，特别是带芽孢的病原菌的涂片时，应严格慎重处理染色用过的残液和抹片本身，以免引起病原的散播。
2、革兰氏染色
(1)初染：将玻片置于染色架上，加草酸铵结晶紫溶液（量以覆盖满涂抹面为宜），染
1-2min，倒去染液水洗。
(2)媒染：加革兰氏碘液，染1-2min，水洗。
(3)脱色：加95%乙醇，将玻片轻摇几下即倾去乙醇，如此重复几次，直至乙醇液不呈现紫色时停止，约20-60秒，立即水洗。
(4)复染：滴加沙黄染液，染1-2min，水洗。
3、镜检
将染色好的玻片夹入滤纸本中，吸去水分。
滴加香柏油后油镜观察。
4、实验完毕后处理
(1) 清洁显微镜
(2) 玻片处理高压灭菌后用洗衣粉水煮沸、清洗、晾干备用。
[实验结果预测]
（1）金黄色葡萄球菌
图一金黄色葡萄球菌革兰氏染色结果，10×100 如上图所示，金黄色葡萄球菌革兰氏染色结果为紫色，是革兰氏阳性菌（G+）。
注：从图中可以观察到葡萄球状的细菌聚集状态。
（2）大肠杆菌
图二大肠杆菌革兰氏染色结果，10×100
如上图所示，大肠杆菌革兰氏染色结果为红色，是革兰氏阴性菌（G-）。
（2）革兰氏染色观察结果列表
菌种鉴定结果细菌颜色细菌形状（形状和聚集状态）金黄色葡萄球菌G+（阳性）紫色球状菌，葡萄球状聚集大肠杆菌G-（阴性）红色短杆状菌，分散排列
[实验分析]
通过本次实验顺利掌握了细菌涂片的制备方法及革兰氏染色的具体操作。
虽然对于大肠杆菌菌液的装片，最终还是没有在镜下找到细菌，但通过固体平板上的大肠杆菌装片，还是看到了大肠杆菌的染色结果。
[实验改进意见]
实验操作发现，在涂片固定过程中，实际上并不能保证杀死全部细菌，也不能完全避免在染色水洗时不将部分涂片冲脱。
因此，在制备烈性病原菌，特别是带芽孢的病原菌的涂片时，应严格慎重处理染色用过的残液和抹片本身，以免引起病原的散播。
[思考题]
1、为什么必须用培养24h以内的菌体进行染色？
培养24小时以内的菌落处于生长活跃期，各项生理指标都正常。
对于时间较长的菌落，由于细胞老化，胞壁成分发生变化，部分阳性菌会出现假阴性，即染色结果为红色，这样会导致错误。
2、革兰氏染色中最关键的一步是什么？如何控制这一步？
革兰氏染色中脱色最关键，因为乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节：脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌；脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。
因而脱色时间一般控制为20-30s。