挥发油成分的提取和鉴别
干品鱼腥草挥发油成分分析
陕西中医 2005 年第 26 卷第 2 期
口纯苦不回甜, 无清凉感或清凉感较淡, 具有腥臭味者为
伪品或掺假牛黄。三七口嚼后味苦而后甜, 而用莪术加工
3 结果与讨论 3. 1 通过比较水蒸汽蒸馏法、 类、 类石油醚索氏提取法和石油醚 (第 类) 浸泡法的基础 上, 确定石油醚 (第 类) 浸泡提取的效果最好, 进一步采 用正交试验确定了鱼腥草挥发油用石油醚 (第 类) 浸泡 提取的最佳工艺条件为: 形态粉碎粒度 50 目, 浸泡次数 2 次, 浸泡时间 24h 次, 石油醚用量 100m l 次。 以石油醚 ( 第 类) 浸泡提取最佳条件提取鱼腥草挥发油, 提取率 为 3. 145%。
羟丙基2Β2环糊精在中药制剂中的应用概况
王 兰 张芳侠3 薛显周 陕西科技大学 (咸阳 712081)
自 20 世纪 60 年代以来, 人们认识到 Β2环糊精作为潜 在的增溶剂和稳定剂, 在提高药物的生物利用度、增加溶 解度、减少刺激性及掩盖不良气味等方面具有重要的作 用。 目前虽然已有医药级 Β2环糊精, 且价格适中, 但是 Β2 环糊精水溶解度低 (1. 85% , 25℃; 5. 62% , 50℃; 15. 3% , 70℃; 39. 7% , 90℃) , 包合药物增溶幅度有限; 在其分子 结构上氢键的存在, 使其具有一定的肾毒性, 存在溶血作 用等缺点, 由于这些原因的存在, 限制了环糊精进一步在 医药领域的应用, 于是人们开始了 Β2环糊精衍生物的研 究。 通过对 Β2环糊精羟丙基化, 破坏了分子内氢键, 使水 溶性显著提高, 毒性减小, 同时羟丙基2Β2环糊精包合物对 于药物释放、增加生物利用度和提高药物稳定性等方面 都有显著提高。
萜类和挥发油
CH 2 O H
CH 2 O H
CH 2 O H
香叶醇
橙花醇
香茅醇
采用硝酸银柱色谱或硝酸银TLC进行分 离。（萜烯类 ）
原理：根据挥发油成分中双键的多少和位置 不同，与硝酸银形成π络合物难易程度和稳定 性的差别，而得到色谱分离。 一般硝酸银浓度2~2.5%较为适宜。 适用范围： 1、双键异构体的分离；
CO2 的 压 力 与 温 度 、 密 度 关 系
绿:气态
橙:固态
蓝:液态
黄:超临界流体
(三) 冷压法
方法：机械压榨的方法。多用于含油量较高的新鲜原料 中挥发油的提取。将含挥发油较丰富的原料（如柑、
桔等）经撕裂粉碎压榨。
鲜果皮
压力
油与水
离心
分层
除杂：再进行水蒸气蒸馏，除去非挥发性成分。
优点：此法所得挥发油可保持原有的新鲜香味。 缺点：可能溶出原料中的不挥发性物质，所得的产品不 纯，且很难将挥发油全部压榨出来 。例如柠檬油常溶 出原料中的叶绿素，而使柠檬油呈绿色。
۩ 比旋度
۩ 折光率
۩ 凝固点
（二）化学常数的测定
挥发油的化学常数是指示挥发油质量的重要手 段，故化学常数的测定十分必要。
1．酸值： 酸值是代表挥发油中游离羧酸和酚类 成分的含量。
2．酯值： 代表挥发油中酯类成分含量。 3．皂化值：是代表挥发油中所含游离羧酸、酚 类成分和结合态酯总量的指标。事实上，皂化 值等于酸值和酯值之和。
(三) 功能团的鉴定
1、酸碱性：测定挥发油的pH值。 2、酚类：三氯化铁反应产生蓝色，蓝紫或绿色。
3、羰基化合物：
1）与硝酸银的氨溶液发生银镜反应，表示有醛类等还原 性物质存在； 2）挥发油的乙醇溶液加2.4-二硝基苯脲，氨基脲，羟胺 等试剂，如产生结晶形衍生物沉淀，表明有醛或酮类化
中药鉴定学知识点归纳整理
中药鉴定学知识点归纳整理一、药材性状鉴定1.外观特征：包括颜色、形态、大小等方面的特点。
2.质地鉴定：根据药材的质地，如脆性、韧性、酥性等，进行鉴别。
3.气味鉴定：根据气味的强弱、特点及气味的性质，如芳香、腥臭等，进行鉴别。
4.味道鉴定：根据药材的味道，如甘、苦、辛等，进行鉴别。
5.触感鉴定：将药材用手触摸，感受其表面光滑、粗糙、湿润等特征进行鉴别。
二、组织结构鉴定1.细胞形态学：通过显微镜观察药材细胞的形态、大小、排列等特征进行鉴别。
2.细胞壁鉴定：根据细胞壁的厚度、层数等特征，进行鉴别。
3.组织构造：包括细胞组织的排列方式、细胞间的距离等特点。
三、化学成分鉴定1.色素成分：通过色谱等方法进行分析，确定草药中的色素成分。
2.酸碱度鉴定：通过浸泡药材，观察其对酸碱指示剂的影响，判断药材的酸碱性。
3.挥发油成分：通过蒸馏、萃取等方法，分离提取挥发油，然后进行成分分析，鉴定药材中的挥发油成分。
4.醇酚成分：通过色谱、红外光谱等方法，进行分析鉴定。
5.生物碱成分：通过色谱等方法，确定药材中的生物碱成分。
四、药理作用鉴定1.体内药效学：通过动物实验、离体器官实验等方法，观察药材对动物体内的药效作用，评价其药理作用。
2.细胞实验：通过体外的细胞实验，观察药材对细胞的作用，评价其药理作用。
3.受体结合实验：通过受体结合实验，验证药材对受体的结合作用，评价其药理作用。
4.酶活性实验：通过测定酶活性的方法，评价药材对酶的活性影响。
以上是中药鉴定学知识点的主要内容，通过对药材的性状、组织结构、化学成分、药理作用等方面的鉴定与研究，我们能够更好地了解药材的质量、药效及其合理应用。
这对于中药的制药和临床应用具有重要意义。
微波辅助提取花椒挥发油的动力学及成分分析
收稿 日期 ：２ １．１ ８ ０００． ：修 订 日期 ：２ １－６２ 。 ０ ０ ００ －４ 基金 项 目：科技 部 国际合 作项 １（０６ Ａ４５ ０；园家 自然 科学基 金（ ￣２０ ＤＦ ３２ ） 批准 号 ｔ２ ７５９ ） ０７０ ６。
（ ｃ ｗａｅ ｓｉ ｅ ｙ ｒ．ｉ ｉａｉ ， ＨＤ 的含有更 多的含氧化合物 【】 Ｍｉ ｏ ｖ ｓ ｔ Ｈ ｄｏｄｓ ｌｔ ｎ ＭＡ ） ｒ Ａ ｓｄ ｔｌ ｏ ４ 。研究 表明是 由于无溶剂微 波
辅助提取法的提取体系 含水 量较少 ，挥 发油较 易与氧接触 而增大成 分氧 化的机 率［７ ６１ ，。然而 ，对 于二者提 取机理是否会引起挥发油成 分的差异 尚未详细的报道 。本文采用 Ｓ ＭＥ和 ＭＡ Ｄ 法提取花椒挥 发油 ，采 Ｆ Ｈ
第２ ５卷第 ４ 期 ２１ 年 ８月 ０１
高 校
化
学
工 程
学
报 Βιβλιοθήκη Ｎｏ ４ 、０ ． ５ ． ，Ｉ ２
Ｊ ｕｎａ ｆ ｅ ｉａ ｇｎ ｅ ｉｇｏ ｎ ｓ ｖｅｓｔｅ ｏ ｒ ｌｏ ｍ ｃ ｌＥｎ ｉｅ ｒｎ ｆＣｈｉｅ ｅＵｎｉ ｒｉ ｓ Ｃｈ ｉ
Ａｕ ． ｇ
２ １ Ｏｌ
作者简介：邹小兵（ ６ － １ ４） ９ ，女，重庆云阳人．重庆大学讲师．博士。通讯联系人：邹小兵，Ｅｍ ｒ ｘ ｙｌ ａｏ ． ｍｃ － ａ ：ｚ ｂｇａ ｈｏｃ ｌ ＠ｙ ｏ ｎ
高 校
化
学
工 程
学 报
２ｌ年 ８ ０１ 月
１ 前
言
挥发油的成分直接 影响其药理功能 ，准确地提取植物挥 发油是提取 植物有效成分 的关键 问题之一。 微波辅助提取 以其提取 时间短及提取效率高而广泛 应用于植物挥发油有效成分的提取研 究【 。 ｌ 据文献报 道， 无溶剂微波辅 助提 取法（ｏ ｅ ｔ ｒｅ ｃｏ ａ ｅ ｘｒｃｉ ， Ｆ ）提取 的挥发 油 比微波水蒸气蒸馏 法 Ｓ ｌ ｎ ｅ ｒｗ ｖ ｔ ｔ ｎ Ｓ ＭＥ ｖ Ｆ Ｍｉ Ｅ ａ ｏ
挥发油分析
萜类
单萜,倍半萜及它们的含氧衍生物 是组成挥发油的主要成分,其中含 氧的衍生物大多生物活性较强,并 具有芳香气味.
2.性质
2.1 颜色 大多数挥发油为无色或淡黄色油 状透明液体.少数挥发油中含有奥类化合 物或溶有色素的具有颜色,如桂皮油呈棕 色或黄棕色,麝香油呈红色,洋甘菊油呈 蓝色,苦艾油呈蓝绿色,佛手油呈绿色.
2. 2 气味
挥发油具特殊的香气或其它气味, 多具刺激性的灼热或辛辣味.挥发 油的气味是其品质重要标志之一.
2.3 挥发性 挥发油在常温下 可挥发,并不留下持久性的油 斑,这可与脂肪油相区别.
2.4 比重 大多数挥发油比水 轻,仅少数比水重(如丁香油, 桂皮油等),比重为0.850～ 0.850 1.070.
2.9 凝固点
挥发油在常温下大多为液体,少数为固体,如八 角茴香油.多数挥发油无确定的凝固点.有些挥发油 在低温条件下,可析出固体成分,称为"脑".如薄 荷油中的薄荷脑,樟油中的樟脑等.滤去"脑"的油 称为"脱脑油",如薄荷的脱脑油习称"薄荷素油", 其中含50%的薄荷脑.药典规定八角茴香油的凝固点 不低于15℃,这是因为挥发油中有效成分的含量常与 其凝固点的高低成正比的关系,八角茴香油中茴香醚 的含量与凝固点成正比.
�
中国药典
水蒸汽蒸馏法..\挥发油
甲法,乙法
GC
薄荷及薄荷油的质量分析
薄 荷 的 鉴 别
薄荷中总挥发油测定
薄 荷 油 的 含 量 测 定
萜类分析
萜类(terpenes)是一类天然的烃类 化合物,其分子中具有异戊二烯 (isoprene)的基本单位.通式为 (C5H8)N.在挥发油中主要有单萜与倍 半萜类化合物,少数为二萜类化合物.
白术挥发油的提取.
白术挥发油的提取、包合及质量检查摘要目的：研究β-环糊精超声法包合白术挥发油物制备工艺。
方法：以β-环糊精与白术挥发油的比例、包合温度、包合时间为变量，以挥发油的包合率及包合物收得率作为判断指标，采用正交设计优化包合工艺的条件，并采用薄层色谱鉴定方法对该包合物进行鉴定。
结果：包合的最佳条件为挥发油与β-环糊精投料比为8:1，超声温度为40℃，超声时间为40min。
结论：采用β-环糊精超声法包合白术挥发油包合物工艺可行，包合效果良好、制成品质量保证，工艺简单、设备要求不高，适用于工业化生产。
关键词白术；β-环糊精；挥发油；正交实验；超声法The volatile oil of atractylodes extraction, inclusion andquality inspectionAbstractObjective: study the β-Cyclodextrin inclusion compound of volatile oil of rhizoma atractylodis macrocephalae ultrasonic method of preparation. Methods: β-Cyclodextrin inclusion temperature and proportion of volatile oil of rhizoma atractylodis macrocephalae, packing time as a variable, inclusion rate and the inclusion of essential oil yield as the outcome by using orthogonal design optimization process conditions, and by means of thin-layer chromategraphic identification of the inclusion complexes were identified. Inclusion of results of best conditions as follows: volatile oil and ratio 8:1 β-cyclodextrins, ultrasonic trasonic temperature 40℃, time to 40min.Conclusion: Ultrasound method using β-cyclodextrin inclusion compound of volatile oil of rhizome atractylodis macrocephalae clathrate is feasible, good packing effect, quality assurance of manufactured goods, simple technology, equipment demand is not high, suitable for industrial production.KeywordsAtractylodes; beta – cyclodextrin; naphtha; orthogonal experiment; Ultrasonic method1 前言白术的拉丁学名Atractylodes macrocephala。
中药分析(挥发油)
3.薄层扫描法 3.薄层扫描法
主要用于定性分析，定量较少。 主要用于定性分析，定量较少。 因为挥发油成分复杂，薄层分离困难， 因为挥发油成分复杂，薄层分离困难，往往很 难达到定量要求， 难达到定量要求，仅用于主要成分含量高的挥 发油的制剂分析； 发油的制剂分析；再者大多挥发油成分都需显 色后才可测定，操作复杂， 色后才可测定，操作复杂，引入误差机会较多
红联用（ 相同， 气-红联用（GC-FTIR）原理与 红联用 ）原理与GC-MS相同， 相同 傅里叶变换红外分光光度法作为气相色谱的检 测器，同样具有分离分析的双重能力， 测器，同样具有分离分析的双重能力，提高了 鉴别的准确性。 鉴别的准确性。
含量测定
许多常用中药中都含有挥发油， 许多常用中药中都含有挥发油，中草药中的挥 发油一般在1%以下，亦有少数达10%以上， 1%以下 10%以上 发油一般在1%以下，亦有少数达10%以上，如 丁香中含挥发油可高达14 21%。 14～ 丁香中含挥发油可高达14～21%。 挥发油中所含成分相当复杂， 挥发油中所含成分相当复杂，一种挥发油常含 有几十种到一、二百种成分， 有几十种到一、二百种成分，但其中往往以某 种或数种成分占较大的量。 种或数种成分占较大的量。
4.GC-FTIR和GC-MS联用技术 4.GC-FTIR和GC-MS联用技术
气相-红外（GC-FTIR）和气相-质谱（GC-MS） 气相-红外（GC-FTIR）和气相-质谱（GC-MS） 联用技术不但可用于挥发性成分的鉴别， 联用技术不但可用于挥发性成分的鉴别，而且 也可以对其中成分进行定量，具有方法简便、 也可以对其中成分进行定量，具有方法简便、 快速等优点. 快速等优点. 特别是在没有标准品而需要定性未知物时， 特别是在没有标准品而需要定性未知物时，可 从谱库检索中得到特征官能团有价值的信息对 化合物进行定性， 化合物进行定性，用归一化法进行百分含量计 算。
闪式提取法辅助肉豆蔻挥发油提取工艺研究及GC－MS_成分分析
㊀基金项目:辽宁省教育厅２０２２年度科学研究经费研究项目(Ｎｏ.ＬＪＫＭＺ２０２２１３２０)ꎻ辽宁省自然科学基金资助项目(Ｎｏ.２０１９－ＺＤ－０４４０)作者简介:张艳丽ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:中药药剂新剂型ꎬＥ－ｍａｉｌ:３６２７６２５５７０＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:袁子民ꎬ男ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向:药物制剂新技究与新剂型ꎬＴｅｌ:０４１１－８５８９０１４５ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｙｕａｎｚｍｉｎ＠１６３.ｃｏｍꎻ王静ꎬ女ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向:中药代谢组学及药物分析ꎬＴｅｌ:０４１１－８５８９０１３８ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｗｊｙｕａｎｍｅｎｇ＠１６３.ｃｏｍ闪式提取法辅助肉豆蔻挥发油提取工艺研究及ＧＣ－ＭＳ成分分析张艳丽ꎬ袁子民ꎬ王静(辽宁中医药大学ꎬ辽宁大连１１６６００)摘要:目的㊀建立闪式提取法提取肉豆蔻挥发油的工艺ꎬ并与水蒸气蒸馏法提取的挥发油进行化学成分的对比ꎮ方法㊀通过正交试验确定闪式提取法提取挥发油的最佳工艺ꎬ并通过肉豆蔻挥发油提取率和气相色谱－质谱联用(ＧＣ－ＭＳ)分析ꎬ来确定闪式提取法的可行性ꎮ结果㊀闪式提取法最佳提取工艺为闪式电压１０５Ｖꎬ闪式预处理６０ｓꎬ液料比１０ʒ１ꎬ蒸馏４ｈꎬ挥发油提取率为６.２３％ꎻ闪式提取法和水蒸气蒸馏法均能分离出５２个峰ꎬ水蒸气蒸馏法可鉴别出４２种成分ꎬ闪式提取法可鉴别出４１种成分ꎬ闪式提取法比水蒸气蒸馏法提取增加６种成分ꎬ未检测出７种成分ꎬ二者共有成分３５种ꎮ结论㊀闪式提取法操作简单ꎬ工艺可行ꎬ重复性好ꎬ可以作为提取肉豆蔻挥发油的一种方法ꎮ关键词:闪式提取法ꎻ肉豆蔻挥发油ꎻ气相色谱－质谱联用中图分类号:Ｒ２８４㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２４)０４－０３４２－０４ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２４.０４.００６ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓａｎｄＧＣ－ＭＳａｎａｌｙｓｉｓｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｆｒｏｍＮｕｔｍｅｇａｓｓｉｓｔｅｄｂｙｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎＺＨＡＮＧＹａｎｌｉꎬＹＵＡＮＺｉｍｉｎꎬＷＡＮＧＪｉｎｇ(ＬｉａｏｎｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＤａｌｉａｎ１１６６００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＮｕｔｍｅｇｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌꎬａｎｄｃｏｍｐａｒｅｗｉｔｈｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀ＴｈｅｏｐｔｉｍｕｍｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔꎬａｎｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅＮｕｔｍｅｇｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄＧＣ－ＭＳａｎａｌｙｓｉｓꎬｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｔｈｅｂｅｓｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｆｌａｓｈｖｏｌｔａｇｅ１０５Ｖꎬｆｌａｓｈｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ６０ｓꎬｌｉｑｕｉｄｍａｔｅｒｉａｌｒａｔｉｏ１０ʒ１ꎬｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ４ｈꎬｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌｗａｓ６.２３％ꎻＢｏｔｈｔｈｅｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｎｄｔｈｅｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎｃａｎｓｅｐａｒａｔｅ５２ｐｅａｋｓꎬｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎｃａｎｉｄｅｎｔｉｆｙ４２ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓꎬａｎｄｔｈｅｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｃａｎｉｄｅｎｔｉｆｙ４１ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓꎬｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌ￣ｌａｔｉｏｎꎬｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄａｄｄｅｄ６ｋｉｎｄｓｏｆｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓꎬａｎｄ７ｋｉｎｄｓｏｆｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｗｅｒｅｎｏｔｄｅｔｅｃｔｅｄꎬａｎｄｔｈｅｒｅｗｅｒｅ３５ｋｉｎｄｓｏｆｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｉｎｂｏｔｈ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＴｈｅｆｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅｔｏｏｐｅｒａｔｅꎬｆｅａｓｉｂｌｅａｎｄｒｅｐｅａｔａｂｌｅꎬａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄａｓａｍｅｔｈｏｄｔｏｅｘｔｒａｃｔＮｕｔｍｅｇｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＦｌａｓｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄꎻＮｕｔｍｅｇｖｏｌａｔｉｌｅｏｉｌꎻＧＣ－ＭＳ㊀㊀挥发油是肉豆蔻的主要生物活性成分之一ꎬ其含量在８％~１５％[１－２]ꎬ«中国药典»２０２０年版(一部)规定含挥发油不得少于６.０％[３]ꎮ肉豆蔻挥发油具有芳香独特的气味ꎬ常用于调料制品㊁精油㊁香水㊁化妆品等方面[４－５]ꎬ具有抗炎镇痛㊁抗菌㊁抗氧化等多种药理学活性[６－８]ꎮ肉豆蔻挥发油的提取主要采用水蒸气蒸馏提取法[９]ꎬ存在提取时间长ꎬ提取效率低等问题ꎮ有文献报道提取挥发油可以使用闪式提取法辅助进行提取[１０]ꎬ闪式提取器基于组织破碎原理ꎬ将物料快速破碎至适当粒度ꎬ同时伴有高速搅拌㊁振动㊁负压渗滤等作用实现提取ꎬ可以最大限度保留植物有效成分而不会受热破坏ꎬ有溶剂用量小ꎬ提取时间短ꎬ效率高等优点ꎬ对肉豆蔻挥发油使用闪式提取法提取尚未见文献报道ꎮ因此ꎬ本研究通过正交试验ꎬ以肉豆蔻挥发油得率为评价指标ꎬ确定闪式提取法最佳工艺条件ꎬ并采用气相色谱－质谱联用(ＧＣ－ＭＳ)技术分析不同提取方式化学成分差异ꎬ以确定闪式提取法辅助提取的可行性ꎬ为肉豆蔻挥发油提取方法的研究及其深入开发提供科学依据ꎮ１㊀材料１.１㊀仪器㊀７８９０Ｂ－５９７７Ｂ气相色谱－质联用仪(美国安捷伦公司)ꎻＨＰ－５ＭＳ气相毛细管色谱柱(美国安捷伦公司)ꎻＪＨＢＥ－５０Ｓ闪式提取器(北京金鼠科技发展有限公司)ꎻ挥发油提取器(规格:１０００ｍＬ/５ｍＬꎬ玻璃活塞ꎬ上海玻璃仪器厂)ꎮ１.２㊀试药㊀肉豆蔻购于河北汉草堂药业有限公司ꎬ经辽宁中医药大学鉴定教研室李峰教授鉴定为肉豆蔻科植物肉豆蔻(ＭｙｒｉｓｔｉｃａｆｒａｇｒａｎｓＨｏｕｔｔ.)的成熟种仁ꎻ水为娃哈哈纯净水ꎮ２㊀方法与结果２.１㊀挥发油的提取２.１.１㊀水蒸气蒸馏法㊀照«中国药典»２０２０年版挥发油测定法(通则２２０４)ꎬ取肉豆蔻粗粉约３０.０ｇꎬ精密称定ꎬ置圆底烧瓶中ꎬ加水３６０ｍＬꎬ连接挥发油提取器与回流冷凝管ꎬ浸泡１.５ｈ后开始加热ꎬ并保持微沸ꎬ提取５ｈꎬ收集挥发油[３ꎬ９]ꎮ２.１.２㊀闪式提取法辅助蒸馏㊀分别精密称取肉豆蔻最粗粉(打碎成颗粒过１０目筛)３０.０ｇꎬ分别按照不同的料液比加入水ꎬ使用闪式提取器的不同电压ꎬ预处理不同时间后ꎬ转移至圆底烧瓶中ꎬ连接挥发油提取器与回流冷凝管ꎬ开始加热ꎬ并保持微沸ꎬ加热不同时间后停止加热ꎬ收集挥发油ꎮ２.２㊀正交试验２.２.１㊀试验设计㊀根据相关文献资料和预试验结果ꎬ综合分析影响闪式提取法的主要因素ꎬ本试验选取闪式提取电压㊁闪式预处理时间㊁液料比和水蒸气蒸馏时间４个主要影响因素[１０－１１]作为考察因素ꎬ分别设置３个水平ꎬ并以肉豆蔻挥发油提取率为评价指标ꎬ采用Ｌ９(３４)正交试验表ꎬ进行工艺优化研究ꎬ因素水平表见表１ꎮ表１㊀因素水平表水平ＡＢＣＤ电压/Ｖ闪式预处理时间/ｓ液料比(Ｖ/ｍ)水蒸气蒸馏时间/ｈ１９５３０８ʒ１２２１００６０１０ʒ１３３１０５９０１２ʒ１４２.２.２㊀正交试验及方差分析结果㊀根据正交试验表安排分别进行试验ꎬ分别测定挥发油提取率ꎬ并进行方差分析ꎮ正交试验表与结果见表２ꎬ方差分析见表３ꎮ由表３方差分析表明ꎬ各影响因素对试验结果均有影响ꎬ由极差大小可得ꎬ在所选因素水平范围内影响因素主次顺序为:水蒸气蒸馏时间(Ｄ)>电压(Ａ)>闪式预处理时间(Ｂ)>液料比(Ｃ)ꎮ由表２正交试验结果可知ꎬ优选出的最佳纯化工艺条件为:Ａ３Ｂ２Ｃ２Ｄ３ꎬ即闪式电压１０５Ｖꎬ闪式预处理６０ｓꎬ料液比１０ʒ１ꎬ蒸馏４ｈꎮ其中蒸馏时间对挥发油提取率有显著影响ꎬ其次是电压和闪式预处理时间对得率有一定影响但都不显著ꎬ料液比对得率影响最小ꎬ方差分析时将预处理时间作为误差项ꎮ表２㊀正交试验安排与结果试验号因素ＡＢＣＤ提取率(％)１１１１１４.６８２１２２２５.８８３１３３３６.０８４２１２３６.２０５２２３１４.８９６２３１２５.９１７３１３２５.９３８３２１３６.２３９３３２１４.９２ｋ１５.５４７５.６０３５.６０７４.８３ｋ２５.６６７５.６６７５.６６７５.９１ｋ３５.６９３５.６３７５.６３３６.１７Ｒ０.１４６０.０６４０.０６０１.３４表３㊀正交试验方差分析因素偏差平方和自由度Ｆ值Ａ０.０３７２７.４Ｂ０.００６２１.２Ｄ３.０２４２６０４.８∗误差０.０１２㊀注:∗表示Ｐ<０.０５２.２.３㊀验证试验㊀考虑到试验的误差ꎬ最佳条件工艺条件下的闪式提取法和水蒸气蒸馏法分别进行３次重复性试验进行对比ꎬ如表４所示ꎮ闪式提取法辅助蒸馏提取比水蒸气蒸馏法挥发油提取率提高了３.８３％ꎬ提取时间由５ｈ减少到４ｈꎬ与水蒸气蒸馏法相比较省去了浸泡的步骤ꎬ节省了时间ꎬ水蒸气蒸馏法使用的药物粉末需要在２号筛至３号筛ꎬ而闪式提取法只需将肉豆蔻打碎过１０目筛ꎬ不用粉碎机粉碎ꎬ省时省力ꎮ表４㊀验证结果及对比方法序号提取时间/ｈ外观性状提取率(％)均值(％)１５.９０水蒸气蒸馏法２５无色透明６.００６.００３６.１０１６.２６闪式提取法２４无色透明６.１５６.２３３６.２９２.３㊀肉豆蔻挥发油的ＧＣ－ＭＳ分析２.３.１㊀ＧＣ－ＭＳ条件㊀ＧＣ条件:ＨＰ－５ＭＳ毛细管柱(３０ｍˑ０.２５ｍｍꎬ０.２５μｍ)ꎻ程序升温条件初始温度为５０ħꎬ保持２ｍｉｎꎬ以１５ħ ｍｉｎ－１升至２８０ħ并持续０.５ｍｉｎꎬ再以１０ħ ｍｉｎ－１升至３００ħ并持续２ｍｉｎꎻ进样口温度为２８０ħꎻ载气为高纯氦气ꎻ分流比为５０ʒ１ꎻ流量为１ｍＬ ｍｉｎ－１ꎻ进样体积为１μＬꎮＭＳ条件:电离方式为ＥＩꎻ离子源温度为２３０ħꎻ接口温度为２６０ħꎻ四极杆温度为１５０ħꎻ质量扫描范围ｍ/ｚ为１８~５５０ꎮ２.３.２㊀数据分析㊀对不同提取方法的肉豆蔻挥发油进行ＧＣ－ＭＳ分析ꎬ所得质谱图经计算机处理和Ｎｉｓｔ标准质谱图库检索并确认化合物ꎬ并采用峰面积归一化法计算挥发油各组分的相对百分含量ꎮ２.３.３㊀肉豆蔻挥发油成分分析与比较㊀不同提取方式提取的肉豆蔻挥发油总离子流图如图１所示ꎬ两种提取方法所得肉豆蔻挥发油的主要成分分析鉴定结果如表５所示ꎮＡ.水蒸气蒸馏法ꎻＢ.闪式提取法图１㊀不同提取方法肉豆蔻挥发油的总离子流图表５㊀不同提取方法肉豆蔻挥发油的主要成分比较(ｎ＝３)序号保留时间/ｍｉｎ化学名分子式相对百分含量(％)水蒸气蒸馏法闪式提取法１５.０６３β－侧柏烯Ｃ１０Ｈ１６ ２.７７２５.０７０α－侧柏烯Ｃ１０Ｈ１６２.８１ ３５.１６６α－蒎烯Ｃ１０Ｈ１６８.１０７.８０４５.３５５莰烯Ｃ１０Ｈ１６０.２４０.２３５５.６７６桧烯Ｃ１０Ｈ１６１９.９０１３.０６６５.７２８β－蒎烯Ｃ１０Ｈ１６ ６.１０７５.８４２β－香叶烯Ｃ１０Ｈ１６１.３９１.３２８６.０３０α－水芹烯Ｃ１０Ｈ１６０.３１０.２９９６.１０４(＋)－３－蒈烯Ｃ１０Ｈ１６０.５５０.５２１０６.１７８α－松油烯Ｃ１０Ｈ１６２.０２１.９４１１６.２７８对伞花烃Ｃ１０Ｈ１４ ３.４５１２６.２８０伞花烃Ｃ１０Ｈ１４３.６１ １３６.６７１γ－松油烯Ｃ１０Ｈ１６２.６６２.５６１４６.７８２４－侧柏醇Ｃ１０Ｈ１８Ｏ１.４８１.５０１５７.０１１异松油烯Ｃ１０Ｈ１６０.８８０.８４１６７.３９４顺式－４－(异丙基)－１－甲基环己－２－烯－１－醇Ｃ１０Ｈ１８Ｏ０.９５０.８９１７７.７９５５－异丙基双环[３.１.０]己烷－２－酮Ｃ９Ｈ１４Ｏ０.０７０.０６１８８.０１５４－松油醇Ｃ１０Ｈ１８Ｏ７.４１６.９２１９８.１３４(－)－α－松油醇Ｃ１０Ｈ１８Ｏ０.８６０.８１２０８.３０６反式辣薄荷醇Ｃ１０Ｈ１８Ｏ０.３６０.３５２１８.６３９枯茗醛Ｃ１０Ｈ１２Ｏ０.０５ ２２８.７８１胡椒酮Ｃ１０Ｈ１６Ｏ０.０６ ２３８.９９７水芹醛Ｃ１０Ｈ１６Ｏ０.０９０.０８２４９.１０９黄樟醚Ｃ１０Ｈ１０Ｏ２２.１９２.１１２５９.６７３α－荜橙茄苦素Ｃ１５Ｈ２４０.６３０.５７２６９.７３２丁香酚Ｃ１０Ｈ１２Ｏ２０.２７０.２８２７９.８８２乙酸香叶酯Ｃ１２Ｈ２０Ｏ２０.３００.２９２８９.９４２古巴烯Ｃ１５Ｈ２４１.１３０.８９２９１０.１２６甲基丁香酚Ｃ１１Ｈ１４Ｏ２１２.１９１２.４２３０１０.３６２葎草烯Ｃ１５Ｈ２４０.２６０.２３３１１０.４２８反式－α－佛手柑油烯Ｃ１５Ｈ２４０.１７０.１４３２１０.５５１异丁香酚Ｃ１０Ｈ１２Ｏ２０.３３０.３１３３１０.６５８蛇麻烯Ｃ１５Ｈ２４０.０６０.０５３４１０.８１２γ－依兰油烯Ｃ１５Ｈ２４０.０６０.０５３５１０.９１９甲基异丁香酚Ｃ１１Ｈ１４Ｏ２２.４６２.７１３６１１.０２６β－没药烯Ｃ１５Ｈ２４０.２４０.２１３７１１.１９３肉豆蔻醚Ｃ１１Ｈ１２Ｏ３１２.９１１３.７７３８１１.３８４榄香脂素Ｃ１２Ｈ１６Ｏ３４.７９５.３２３９１１.７０８桉油烯醇Ｃ１５Ｈ２４Ｏ ０.０９４０１１.８２５愈创木醇Ｃ１５Ｈ２６Ｏ０.３００.２４４１１２.１３２异榄香脂素Ｃ１２Ｈ１６Ｏ３０.１００.１２４２１２.２９１α－桉叶醇Ｃ１５Ｈ２６Ｏ０.０６０.０７４３１２.３７５异愈创木醇Ｃ１５Ｈ２６Ｏ０.０５ ４４１２.３８０(＋)－佛术烯Ｃ１５Ｈ２４ ０.０６４５１２.９３６十四烷酸Ｃ１４Ｈ２８Ｏ２１.５４２.７０４６１４.２８４樟脑烯Ｃ２０Ｈ３２０.０４ ４７１４.２８５棕榈酸Ｃ１６Ｈ３２Ｏ２ ０.０６４８１９.１０９芥酸酰胺Ｃ２２Ｈ４３ＮＯ０.０５ 总计９３.９３９４.１８㊀注: 表示未检出㊀㊀根据ＧＣ－ＭＳ结果ꎬ水蒸气蒸馏法和闪式提取法提取的挥发油中初步检测均有５２个峰ꎬ水蒸气蒸馏法鉴定出４２个成分ꎬ闪式提取法鉴定出４１个成分ꎮ闪式提取法增加了６种成分ꎬ分别为β－侧柏烯㊁β－蒎烯㊁对伞花烃㊁桉油烯醇㊁(＋)－佛术烯㊁棕榈酸ꎻ但有７种成分未检出ꎬ分别为α－侧柏烯㊁伞花烃㊁枯茗醛㊁胡椒酮㊁异愈创木醇㊁樟脑烯㊁芥酸酰胺ꎮ二者共有成分３５种ꎬ分别为α－蒎烯㊁莰烯㊁桧烯㊁β－香叶烯㊁α－水芹烯㊁(＋)－３－蒈烯㊁α－松油烯㊁γ－松油烯㊁４－侧柏醇㊁异松油烯㊁顺式－４－(异丙基)－１－甲基环己－２－烯－１－醇㊁５－异丙基双环[３.１.０]己烷－２－酮㊁４－松油醇㊁(－)－α－松油醇㊁反式辣薄荷醇㊁水芹醛㊁黄樟醚㊁α－荜橙茄苦素㊁丁香酚㊁乙酸香叶酯㊁古巴烯㊁甲基丁香酚㊁葎草烯㊁反式－α－佛手柑油烯㊁异丁香酚㊁蛇麻烯㊁γ－依兰油烯㊁甲基异丁香酚㊁β－没药烯㊁肉豆蔻醚㊁榄香脂素㊁愈创木醇㊁异榄香脂素㊁α－桉叶醇㊁十四烷酸ꎬ其中含量升高的有９种ꎬ分别为肉豆蔻醚㊁榄香脂素㊁甲基丁香酚㊁异丁香酚甲醚㊁丁香酚ꎬ４－侧柏醇㊁异榄香脂素㊁α－桉叶醇㊁十四烷酸ꎬ含量降低２６种ꎬ包括(＋)－α－蒎烯㊁桧烯等ꎮ水蒸气蒸馏法提取出的成分烷烯烃类化合物有１９种占４５.０６％ꎬ醇类化合物有８种占１１.４７％ꎬ酚类化合物有４种占１５.２５％ꎬ醚类化合物有２种占１５.１％㊁其他类有９种占７.０５％ꎻ闪式提取法提取出的成分烷烯烃类化合物有２０种占４３.０８％ꎬ醇类化合物有８种占１０.８７％ꎬ酚类化合物有４种占１５.７２％ꎬ醚类化合物有２种占１５.８８％ꎬ其他类有７种占８.６３％ꎮ２种方法提取出来的化学成分差异不大ꎮ３㊀讨论及结论本文将闪式提取技术用于肉豆蔻挥发油的提取研究ꎬ利用高速机械剪切力和搅拌力ꎬ迅速破坏植物细胞组织ꎬ使组织细胞内部的有效成分与溶剂能够充分接触ꎬ并快速溶解[１２]ꎮ结果表明闪式提取法辅助蒸馏与水蒸气蒸馏法相比较省去了浸泡的步骤ꎬ节省了时间ꎬ水蒸气蒸馏法使用的肉豆蔻粉末在２号筛至３号筛ꎬ而闪式提取法只需将肉豆蔻打碎过１０目筛子ꎬ节省了粉碎药物的时间ꎬ也更加省力ꎮ试验中曾对闪式提取法中蒸馏时间进行了考察ꎬ分别考察了１㊁２㊁３㊁４㊁５㊁６ｈ对其挥发油提取率的影响ꎬ结果提取４ｈ后挥发油含量基本不增加ꎬ因此正交试验中蒸馏时间因素水平采用了２㊁３㊁４ｈꎮ通过对不同提取法的肉豆蔻挥发油成分的分析和比较ꎬ发现闪式提取比水蒸气蒸馏法提取的增加６种成分ꎬ未检测出７种成分ꎬ其中５种所占含量小于０.１％ꎬ另外水蒸气蒸馏法中含有α－侧柏烯和伞花烃ꎬ但闪式提取法中含有其同分异构体β－侧柏烯和对伞花烃ꎬ二者共有成分３５种ꎬ二者烷烯烃类化合物占比均在４０％以上ꎬ酚类和醚类化合物均在１５％以上ꎬ醇类化合物在１０％均以上ꎬ两种方法所得挥发油的主要成分基本相同ꎬ闪式提取法提取率方面有增加ꎬ操作更加省时省力ꎬ但还有些成分差异ꎬ后续研究尚需通过药效学的深入研究来评价二者的差异性ꎮ或采用酶辅助提取[１３]㊁溶剂提取等方法来进一步考察替代水蒸气蒸馏法的可行性ꎮ本文采用正交试验确定闪式提取法的最佳工艺ꎬ通过ＧＣ－ＭＳ分析说明两种不同方法所得挥发油的主要成分基本相同ꎮ闪式提取法操作简单ꎬ工艺可行ꎬ重复性好ꎬ能够为肉豆蔻挥发油提取方法的研究提供参考ꎮ参考文献:[１]㊀方爱娟ꎬ徐凯节.肉豆蔻的化学成分及生物活性研究进展[Ｊ].中国药业ꎬ２０１３ꎬ２２(１５):１１３－１１５.[２]张根荣ꎬ胡静ꎬ丁斐ꎬ等.肉豆蔻挥发性成分的气相色谱/质谱分析[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１６ꎬ２７(１１):２５９６－２５９８.[３]国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(一部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０２０:１４１. [４]杨进军.香料植物肉豆蔻[Ｊ].植物杂志ꎬ２００１(６):１１. [５]赵秀玲.肉豆蔻生理活性成分研究进展[Ｊ].中国调味品ꎬ２０１３ꎬ３８(１０):１－６.[６]权美平.肉豆蔻挥发油的化学成分分析及药理活性研究进展[Ｊ].中国调味品ꎬ２０１３ꎬ３８(９):１０－１３. [７]黄赛金ꎬ尹爱武ꎬ龚灯.肉豆蔻挥发油抑菌及抗花生油氧化作用研究[Ｊ].中国粮油学报ꎬ２０１５ꎬ３０(５):５８－６１. [８]袁子民ꎬ贾天柱ꎬ王静.肉豆蔻挥发油的研究进展[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００５ꎬ１６(１２):１２０１－１２０２.[９]袁子民ꎬ王静ꎬ吕佳ꎬ等.正交法优选肉豆蔻挥发油提取工艺[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００５ꎬ１６(１１):１０６３－１０６４. [１０]谢捷ꎬ施力瑕ꎬ朱兴一ꎬ等.闪式辅助水蒸气蒸馏法提取生姜挥发油的研究[Ｊ].中成药ꎬ２０１０ꎬ３２(１１):１８８２－１８８５.[１１]吕大树ꎬ孟祥东ꎬ张学杰.金银花挥发油闪式提取工艺优化及在卷烟中的应用研究[Ｊ].中国农学通报ꎬ２０１１ꎬ２７(５):４８３－４８８.[１２]邓引梅ꎬ宋发军ꎬ崔永明ꎬ等.甘草叶总黄酮提取工艺[Ｊ].中南民族大学学报(自然科学版)ꎬ２００８ꎬ２７(１):４１－４３.[１３]秦宇仙ꎬ徐琳ꎬ余冯萍ꎬ等.纤维素酶辅助水蒸气蒸馏提取肉豆蔻挥发油的品质及其活性评价[Ｊ].食品与发酵工业ꎬ２０２２ꎬ４８(１０):１１２－１１８.(收稿日期:２０２３－０６－１６)。
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挥发油成分的提取和鉴别
一、实验目的
1．掌握水蒸汽蒸馏法从中药材中提取挥发油的原理和操作技术；
2．熟悉陈皮、丁香药材中挥发油的化学组成和一般鉴别方法；
3．熟悉挥发油的单向二次薄层层析方法。
二、仪器与试药
（一）仪器
挥发油提取器电热套玻璃仪器气流烘干器
电热恒温干燥箱圆底烧瓶（500mL）移液管（10mL、5mL）
（二）试药
陈皮丁香三氯化铁氨性硝酸银 2,4-二硝基苯肼
碱性高锰酸钾陈皮油和丁香油对照品茴香醛浓硫酸
石油醚（60-90℃）乙酸乙酯硅胶 CMC-Na
三、主要成分的结构与性质
1．陈皮：为芸香科植物橘Citrus reticulata Bianco的果皮。
性温，味苦、辛。
能理气健脾，燥湿化痰。
用于胸脘胀满、食少吐泻、咳嗽多痰。
橘的栽培变种的果皮亦作陈皮入药；其未成熟果实的外层果皮亦入药，药材称为青皮，能疏肝破气、消积化滞。
化学成分含橙皮苷（hesperidin）、川陈皮素（nobiletin）、柠檬烯、a-蒎烯、B-蒎烯、B-水芹烯（B-phellandrene）等。
含挥发油2%以上，油中主成分为柠檬烯，含少量邻氨基苯甲酸甲酯、芳樟醇和川陈皮素
陈皮油外观：淡黄色液体，气味独特的陈皮香气，比重0.8381-0.8431。
2．丁香：为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophllata Thunb.的干燥花蕾，又名丁子香，支解香、雄丁香。
辛，温。
入胃、脾、肾经。
能温中，暖肾，降逆。
治呃逆，呕吐，反胃，泻痢，心腹冷痛，痃癖，疝气，癣疾。
花蕾含挥发油即丁香油。
《中国药典》规定含挥发油不得少于16%，油中主要为丁香油酚(Eugenol)、乙酰丁香油酚(Acetyleugenol)及少量α-与β-丁香烯(Caryo- phyllene)；其次为葎草烯(Humulene)、胡椒酚(Chavicol)、α-衣兰烯(α-Ylangene)，其中丁香油酚约占总挥发油的64-85%。
花蕾中尚含有4种黄酮衍生物，皆为黄酮甙元，其中两种为鼠李素(Rhamnetin)及山萘酚(Kaempferol)；另有齐墩果酸(Oleanolic acid)、番樱桃素、番樱桃素亭(Eugenitin)、异番樱桃素亭(Isoeugenitin)等。
丁香油外观：淡黄或澄明油状物，有丁香的特殊香气，置空气中或贮存日久，则渐浓厚而色变棕黄，不溶于水，易溶于醇、醚，比重为1.038-1.060。
柠檬烯 丁香油酚 橙皮苷
四、实验原理：
1．提取：利用挥发油具有挥发性，可随水蒸汽同时蒸出来的性质，进行提取。
油水易分层者，可直接分出油层；油水不易分层者，可用盐析或用低沸点有机溶剂进行萃取得到挥发油；
2．鉴别：挥发油所含成分复杂，为一混合物。
利用挥发油中各种成分具有的特征官能团，用各种特性反应试剂进行化学检识和层析薄层鉴别；
3．单项二次层析：不含氧烃、萜、烯类极性小于含氧的烃、萜、烯类，单用石油醚（60-90℃）进行层析，则极性大的成分不易展开，再用石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂进行层析，则极性小的成分与极性大的成分则能较好的展开。
五、实验内容： （一）提取
1．丁香的提取：取丁香三份，每份20g ，分别放入挥发油提取装置的圆底烧瓶中，分别加入下表2中的水量，浸泡30分钟，直火加热共水蒸馏1.5小时，记录挥发油提出量及挥发油颜色，小心分出油层，将油装在小烧瓶中，备用。
2．陈皮的提取：取陈皮三份，每份100g ，分别放入挥发油提取装置的圆底烧瓶中，分别加入下表3中的水量，浸泡30分钟，直火加热共水蒸馏1.5小时，记录挥发油提出量及挥发油颜色，小心分出油层，将油装在小烧瓶中，备用。
注：（1）正确操作挥发油提取装置；
（2）油水不易分离时，可采用盐析或低沸点有机溶剂（乙醚、石油醚等）萃取等方法分离挥发油；
OH
O
O
OH
OH
O
rha-glu
（3）挥发油提取过程中，加水量和温度对实验结果的影响较大。
（二）鉴别
1．薄层点滴检识：
取适量挥发油样品加5-10倍量无水乙醇溶解，分别加入下述（1）-（5）项试剂，观察并记录实验结果于表4。
（1）三氯化铁：检查酚性成分；
（2）氨性硝酸银：检查醛基；
（3）2,4-二硝基苯肼：检查醛基、酮基；
（4）碱性高锰酸钾：检查不饱和化合物；
（5）香草醛-浓硫酸：105℃烘烤10分钟，挥发油中各成分显不同的颜色。
2．薄层鉴定——单向二次层析
吸附剂：青岛硅胶G以0.4%CMC-Na水液制板，105℃活化1小时。
展开剂：（1）石油醚（60-90℃）
（2）石油醚-醋酸乙酯(85:15)
样品：自制丁香油醇液，自制陈皮油醇液
对照品：丁香油酚对照品醇液，柠檬烯对照品醇液
显色剂：喷香草醛-浓硫酸溶液
结果：与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
六、实验结果
1．比较不同加水量对药材中挥发油提取量的影响，通过实验确定最佳溶媒用量。
2．详细记录丁香油和陈皮油薄层点滴检识结果。
3．绘制丁香油和陈皮油色谱图，并计算R f值。
4．总结实验过程中遇到的问题和解决方法。
七、思考题
1．挥发油提取过程中应注意哪些影响因素？。