全自动化学发光免疫分析仪运行原理
化学发光的原理

化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。
化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
化学发光免疫分析仪器中核心探测器件为光电倍增管(PMT),由单光子检测并传输至放大器,并加高压电流放大,放大器将模拟电流转化为数字电流,数字电流将发光信号由R232数据线传输给电脑并加以计算,得出临床结果。
化学发光标记免疫分析法化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。
常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。
吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。
全自动化学发光免疫分析仪运行原理

全自动化学发光免疫分析仪运行原理该仪器包括三个主要部分:试剂仓、反应室和检测部分。
试剂仓储存了各种用于分析的试剂和抗体等物质,反应室则是进行样本与试剂的反应,而检测部分用于测量反应产生的发光信号。
在使用全自动化学发光免疫分析仪时,首先将待检测的样品注入反应室中,并加入相应的试剂。
反应室内的样品与试剂发生特异性的免疫反应,这时存在的物质会结合试剂内的抗体或发光分子,从而形成抗原-抗体复合物或产生发光信号。
这些复合物或发光信号的特性可用于定量分析目标物质的浓度。
然后,样品与试剂反应完毕后,反应产物被送入检测部分进行测量。
检测部分通常使用光电倍增管或光电二极管等光学传感器来测量发光信号的强度。
这些传感器会将检测到的光信号转换为电信号,经过放大和处理后,最终得到样品中目标物质浓度的计算结果。
全自动化学发光免疫分析仪具有高度自动化的特点,整个检测过程只需少量人工干预。
仪器上配备了专用的控制软件,可以实现样品参数设定、反应过程控制和测量数据处理等功能。
用户只需在操作界面上输入相应的操作指令,仪器就会根据设定的参数自动完成所有的实验操作,并生成相应的分析结果。
此外,全自动化学发光免疫分析仪还具备多重检测通道的特点,可以同时进行多个样品的检测。
这大大提高了分析效率,节约了分析时间。
此外,仪器具备高灵敏度和较大的动态范围,在低浓度样品检测和高浓度样品检测方面都有较好的表现。
综上所述,全自动化学发光免疫分析仪的运行原理是基于化学发光和免疫学技术的结合,通过测量样品与试剂反应产生的发光信号,实现对目标物质浓度的定量分析。
该仪器具备高度自动化、高灵敏度和多通道检测等特点,广泛应用于生物医学检测领域。
全自动荧光免疫分析仪工作原理

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一、基本结构
(一)按照反应装置的结构,自动生化分析仪主要分为流动式(FLOW SYSTEM)、分立式(DISCRETE SYSTEM)两大类。
1.流动式 指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。
2.分立式 指各待测样品与试剂混合后的化学反应都是在各自的反应杯中完成。其中有几类分支。
(1)典型分立式自动生化分析仪。此型仪器应用最广。
(2)离心式自动生化分析仪,每个待测样品都是在离心力的作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,完成化学反应并测定。由于混合,反应和检测几乎同时完成,它的分析效率较高。
3.袋式自动生化分析仪是以试剂袋来代替反应杯和比色杯,每个待测样品在各自的试剂袋内反应并测定。
4.固相试剂自定生化分析仪(亦称干化学式自动分析仪) 是将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上,每个待测样品滴加在相应试纸条上进行反应及测定。操作快捷、便于携带是它的优点。
(二)典型分立式自动生化分析仪基本结构
1.样品(SAMPLE)系统
(3)试剂瓶(BOTTLE)。有不同的形状及大小规格。如 COBAS MIRA PLUS仪有4、10、15、35ML等规格,瓶底呈凹形,OLYMPUS AU600仪有30和60ML两种;日立7060仪有20、50、100ML三种等规格。应根据工作量和试剂规格.考虑试剂瓶残留死体积和更换频率,合理选用。独特设计的卡式试剂盒,体积小,防蒸发,方便储存。
(4)配套试剂常有条形码,仪器设有条形码检查系统,可对试剂的种类、批号、存量、有效期和校准曲线等货剌,进行核对校验,如BECKMANCX7等。
全自动化学发光免疫分析仪运行原理

2 更快的分析速度
优化反应步骤和数据处理算法,缩短分析时间,提高工作效率。
3 多参数检测
实现同时检测多个指标,解决多因素综合分析的需求。
应用和优势介绍
1
临床诊断
广泛应用于肿瘤标志物、心肌酶谱等多个临床检测领域,提供可靠的诊断依据。
2
血清学研究
在血清学研究中,分析免疫相关的蛋白质、抗体等,为科研工作者提供宝贵的数 据。
3
药物研发
在药物研发中,快速检测和定量分析药物代谢产物和药物相互作用,加快研发进 程。
未来发展趋势展望
1 更高的灵敏度
洗涤
通过特定的洗涤步骤,去除未结合的物质,减少误差。
2
显色反应
添加显色剂,使标记物形成明显的信号,方便后续的检测及信号分析。
3
反应停止
通过添加特定的反应停止剂或改变反应环境,终止反应过程,保证信号稳定性。
荧光信号检测
高灵敏度检测器
使用高灵敏度的光学检测器采集荧光信号,确增强技术,提升信号强度和稳定性,提高检测的灵敏度。
实时监测
直接在样本和试剂反应过程中进行信号监测,实时分析结果,节省时间和资源。
数据分析和结果输出
数据分析
使用先进的算法对荧光信号进行定量和质量分析, 得出可靠的结果。
结果输出
通过电子屏幕或打印机等方式将结果直观地显示出 来,方便医务人员查阅和分析。
全自动化学发光免疫分析 仪运行原理
全自动化学发光免疫分析仪是一种先进的医学检测设备,它通过独特的运行 原理实现了高效、精确的检测结果。
运行原理概述
1 光源激发
利用特定波长的光激活标记物,发射特定光 谱信号。
全自动化学发光免疫分析仪运行原理

美国雅培i2000化学发光免疫 分析仪
吉林市中心医院 滕彦玲
化学发光基本原理
反应体系中的某种物质的分子(反应物、 产物、中间体或荧光物质) 吸收了反应所释放 的能量而由基态跃迁至激发态,然后再从激 发态返回基态,同时将能量以光辐射的形式 释放出来,产生化学发光. 将化学发光反应应用于分析化学,根据某一 时刻的发光强度或反应的发光总量来确定体 系的相应组分含量的分析方法叫化学发光分 析法.
化学发光的分类
化学发光反应参与的免疫测定分为二种类型。 第一种是以发光剂作为酶免疫测定的底物,通过发 光反应增强测定的敏感性。
如:化学发光酶免疫测定(CLEIA,与酶标ELISA法类
似,即最后一步酶反应所用底物为发光剂 )
第二种是以发光剂作为抗体或抗原的标记物,直接 通过发光反应检测标本中抗原或抗体的含量。
1. Rear processing center cover 2. Rear processing center access panel 3. Power supply panel 4. Pump bay panel
1. Sample hardware components: Provide sample aspiration and dispense. 2. Reagent hardware components: Provide reagent aspiration and dispense. 3. Process path hardware components: Position the RVs for sample and reagent aspiration, mixing, washing, and CMIA processing
免疫化学发光法原理

免疫化学发光法原理
免疫化学发光法是一种用于检测抗原或抗体的分析方法,其原理基于免疫学和化学发光技术的结合。
在免疫化学发光法中,首先需要将样品中的目标抗原(或抗体)与特定的抗体(或抗原)结合。
这可以通过直接结合、间接结合或竞争结合的方式实现。
一旦目标分子与特定的抗体结合形成免疫复合物,免疫复合物将被固定在固相材料上。
接下来,引入化学发光底物。
这种底物通常是一个具有化学结构特性的物质,可以被酶或标记物选择性地催化分解。
在催化分解过程中,底物会释放出化学能量。
这种化学能量在光化学反应中转化为可见光或荧光信号。
通过在底物中引入适当的检测酶或荧光标记物,可以产生光信号或荧光信号。
最后,使用光学检测设备,如光电倍增管或荧光光度计,测量样品中的光信号或荧光信号的强度。
这些信号的强度与样品中目标物质的浓度呈正相关关系,因此可以通过测量信号的强度来确定目标物质的浓度。
免疫化学发光法具有高灵敏度、快速、准确和广泛的应用范围等特点,被广泛应用于临床诊断、药物研发和生物学研究等领域。
胡腊英 全自动化学发光免疫分析仪运行原理

二步法 (i System) 5
• • 在位置94加入预激发液(Pre-trigger), 然后振动混合. • • 在位置98 CMIA光学系统读空白值, 然后加入激发液(Trigger), 再测CMIA 光学系统速率读数. • • 在位置100液体从RV杯中废液吸走. • • 在位置109退出RV杯装置(UL)推出RV杯道废物盒.
化学发光分析法的特点
• 由于化学发光分析不使用任何光源,避免了背景光和杂散光 的干扰,降低了噪声,大大提高了信噪比,因而,化学发光 分析法一般都有很高的灵敏度,通常可测定纳克级或皮克级 的化学成分。——高灵敏度 • 测量化学发光强度,多采用光电转换装置,用函数记录仪或 数显装置,记录化学发光的相对强度。以最大发光强度(曲 线的峰高)定量被测组分的浓度。——光电转换 • 配备微机系统,自动进样,储存记录,打印结果,使化学发 光分析的速度更快。——全自动
快速反应一步法 (i System) 1
• • • •
• 在位置47快速反应针加样品到RV杯中. • 在位置48试剂R2针加微粒子和吖啶酯标记的连接物试剂. • 在位置49振动混合样品和试剂. • 在位置50-86孵育11分钟.
快速反应一步法 (i System)2
• • 在位置87 - 90清洗站2#清洗RV杯混合物吸走没结合物质.
• • 在位置64 - 67清洗站1#清洗RV杯混合物吸走没结合物质.
二步法 (i System) 3
• • 在位置71试剂针R2吖啶酯标记的连接物试剂. • • 在位置72振动混合样品和试剂. • • 在位置73 – 86 孵育4分钟.
二步法 (i System)4
• • 在位置87 - 90清洗站2#清洗RV杯混合物吸走没结合物质.
全自动化学发光免疫分析仪运行原理

? 1. Rear processing center cover
? 2. Rear processing center access panel
? 3. Power supply panel
? 4. Pump bay panel
1. Sample and STAT pipettors (S and ST):
? 测量化学发光强度,多采用光电转换装置,用函数记录仪或 数显装置,记录化学发光的相对强度. 以最大发光强度(曲线 的峰高)定量被测组分的浓度.
? 由于流动注射分析(FIA)技术的发展,流动注射化学发光仪 也广泛使用.
? 配备微机系统,自动进样,储存记录,打印结果,使化学发 光分析的速度更快.
化学发光的分类
ABBOTT i 2000SR 结构
? 1. Front processing center cover
? 2. Processing module keypad
? 3. Supply and waste center door
? 4. Card cage door
ABBOTT i 2000SR 结构
化学发光的反应必须具备两个条件
? 一、是该反应能释放出一定的能量,且释放出的 能量可以被某种反应产物或中间体所吸收,使之 处于激发态;
? 二、是这种激发态产物应具有一定的化学发光量 子产率,或者可以将其能量有效地转移给某种荧 光物质,产生光辐射.
? 基于此,并不是任何化学反应都能产生化学发光 反应,因此,如果测量条件适当,化学发光分析 会有足够的选择性.
? 如:化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定 (CLIA )、电化学发光免疫测定(ECLI)
ABBOTT i 2000SR 结构
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Assay processing for One step 25 (i System)
1. At position 1 the sample pipettor dispenses the sample into the RV (reaction vessel). 2. At position 2 the R1 pipettor dispenses the microparticles and acridinium-labeled conjugate. NOTE: For a delayed one-step assay the R2 pipettor adds the acridinium-labeled conjugate at position 71 and the vortexer mixes the reaction mixture at position 72. 3. At position 3 the vortexer mixes the sample, microparticles, and conjugate. 4. At positions 4 - 86 the reaction mixture incubates for 25 minutes.
化学发光现象的发现
最早发现的化学发光现象发生在生物体内,即荧火虫,现在 称之为生物发光(Bioluminescence). 到了十九世纪后期人们发现简单的非生物有机化合物也能产 生化学发光. 1877年,发现洛汾碱(2,4,5-三苯基咪唑)在碱性介质中被 过氧化氢等试剂氧化时发出绿色的光. 1928年,观察到鲁米诺(3-氨基苯二甲酰肼)在碱性介质中的 化学发光行为. 1935年,第一个报告了光泽精(N,N-二甲基二吖啶硝酸盐)与 过氧化氢反应产生化学发光. 到现在的吖啶酯、三联吡啶钌等发光标记物应用技术的成熟。
Assay processing for One step 25 (i System)
如:化学发光标记免疫测定亦称化学发光免疫测定
(CLIA)、电化学发光免疫测定(ECLI)
ABBOTT i 2000SR 结构
1. i 2000SR™ processing module 2. RSH (retest sample handler) 3. SCC (system control center)
1. Rear processing center cover 2. Rear processing center access panel 3. Power supply panel 4. Pump bay panel
1. Sample hardware components: Provide sample aspiration and dispense. 2. Reagent hardware components: Provide reagent aspiration and dispense. 3. Process path hardware components: Position the RVs for sample and reagent aspiration, mixing, washing, and CMIA processing
1.双抗原(抗体)夹心一步法 2.双抗原(抗体)夹心两步法
Assay processing for One step 25 Assay processing for Two step 18-4 STAT assay processing for One step 11 STAT assay processing for Two step 4-4
ABBOTT i 2000SR试剂组成
试剂组成 中圈(RI):包被 有抗体的顺磁性微 粒子 内圈(R2):吖啶 酯包被的抗体 外圈:样本稀释液 预激发液:1.32%的 过氧化氢 激发液:0.35mol./L 的氢氧化钠 清洗缓冲液:磷酸 盐缓冲液
R1试剂
R2试剂
ABBOTT i 2000SR反应类型
化学发光的反应必须具备两个条件
一、是该反应能释放出一定的能量,且释放出的 能量可以被某种反应产物或中间体所吸收,使之 处于激发态; 二、是这种激发态产物应具有一定的化学发光量 子产率,或者可以将其能量有效地转移给某种荧 光物质,产生光辐射. 基于此,并不是任何化学反应都能产生化学发光 反应,因此,如果测量条件适当,化学发光分析 会有足够的选择性.
Assay processing for Two step 18-4 (i System)
5. At positions 64 - 67 the wash zone 1 manifold washes the reaction mixture in the RV, and then removes unbound materials
Assay processing for Two step 18-4 (i System)
10. At position 94 the pre-trigger nozzle dispenses Pre-Trigger Solution to the reaction mixture, and then mixes using the vortexer. 11. At position 98 the CMIA optical system takes a background read, the trigger nozzle dispenses Trigger Solution to the reaction mixture, and then the CMIA optical system takes an activated read. 12. At position 100 the liquid waste arm aspirates the liquid waste from the RV. 13. At position 109 the RV unloader removes the RV
美国雅培i2000化学发光免疫 分析仪
吉林市中心医院 滕彦玲
化学发光基本原理
反应体系中的某种物质的分子(反应物、 产物、中间体或荧光物质) 吸收了反应所释放 的能量而由基态跃迁至激发态,然后再从激 发态返回基态,同时将能量以光辐射的形式 释放出来,产生化学发光. 将化学发光反应应用于分析化学,根据某一 时刻的发光强度或反应的发光总量来确定体 系的相应组分含量的分析方法叫化学发光分 析法.
Assay processing for Two step 18-4 (i System)
9. At positions 87 - 90 the wash zone 2 manifold washes the reaction mixture in the RV, and then removes unbound materials.
ABBOTT i 2000SR 结构
Байду номын сангаас
1. Front processing center cover 2. Processing module keypad 3. Supply and waste center door 4. Card cage door
ABBOTT i 2000SR 结构
化学发光分析法的特点
由于化学发光分析不使用任何光源,避免了背景光和杂散光 的干扰,降低了噪声,大大提高了信噪比,因而,化学发光 分析法一般都有很高的灵敏度,通常可测定纳克级或皮克级 的化学成分. 测量化学发光强度,多采用光电转换装置,用函数记录仪或 数显装置,记录化学发光的相对强度. 以最大发光强度(曲线 的峰高)定量被测组分的浓度. 由于流动注射分析(FIA)技术的发展,流动注射化学发光仪 也广泛使用. 配备微机系统,自动进样,储存记录,打印结果,使化学发 光分析的速度更快.
1. Sample pipettor
STAT pipettor
1. Sample and STAT pipettors (S and ST): 2. Sample and STAT syringes (SS and STS): 3. Sample and STAT wash stations (SW and STW):
Assay processing for Two step 18-4 (i System)
共112个RV杯空位,每18秒 转一个空位,200T/h。常规 28Min/TEST
1. At position 1 the sample pipettor dispenses the sample into the RV (reaction vessel). 2. At position 2 the R1 pipettor dispenses the microparticles. 3. At position 3 the vortexer mixes the sample and microparticles. 4. At positions 4 - 63 the reaction mixture incubates for 18 minutes.
1. Reagent carousel 2. Reagent bar code reader 3. Reagent pipettors 4. Reagent syringes 5. Reagent wash stations
1. Load diverter 2. RV access door 3. RV loader and hopper assembly 4. STAT diverter5. Vortexers (Mix)6. Wash zone diverter 7. Wash zone manifolds (WZ1, WZ2):8. Process path drive motor 9. Pre-trigger/trigger manifold 10. CMIA reader (CMIA)11. Liquid waste arm 12. RV unloader