新型肝癌肿瘤标志物的研发
探讨肿瘤标志物CEA
探讨肿瘤标志物CEA、AFP、CA199在肝癌诊断中的应用价值【摘要】目的：通过对27例原发性肝癌及58例转移性肝癌的肿瘤标志物水平CEA（癌胚抗原）、AFP（甲胎蛋白）、CA199（糖类抗原CA199）的回顾性分析，探讨这三种肿瘤标志物在肝癌辅助诊断中的应用价值和意义。
方法：用罗氏全自动电化学发光（2010）分析仪测定肝癌患者的CEA、AFP、CA199三项血清肿瘤标志物水平，并进行分析比较。
结果：原发性肝癌血清CEA、AFP和CA199的阳性率分别为48.2%、75.9%和41.3%，联合检查阳性率为82.8%。
而转移性肝癌三种水平测定的阳性率分别为79.3%、50%和44.8%，联合检查阳性率为84.5%。
结论：三项肿瘤标志物的联合检查可提高诊断的阳性率，并对区别原发性肝癌及转移性肝癌有一定的应用价值。
【关键词】原发性肝癌；转移性肝癌；CEA；AFP；CA199原发性肝癌目前居于我国癌症第二位，并呈逐年增高趋势。
其诊断依据主要依据超声、CT 及病理检查等。
AFP用于原发性肝癌人群筛查也已广泛开展，但其特异性及灵敏度仍然不够理想［1］。
因此，本文采用电化学发光免疫分析技术联合检测CEA、AFP及CA199以期为临床早期诊断原发性肝癌及转移性肝癌提供更为合理的检测方案。
1 资料与方法1.1 一般资料：本院自2005年以来肝癌住院患者共计87例，其中原发性肝癌患者29例（男21例，女8例），临床诊断标准符合中国抗癌协会肝癌专业委员会2001年修订的原发性肝癌诊断标准［2］。
转移性肝癌患者58例（男39例，女19例），其中来自肠道30例，胃部8例，肺部7例，乳腺3例，卵巢2例，胰腺1例，其他组织来源7例。
诊断依据病理学、影像学、肿瘤标志物联合检查，并结合病史和临床表现。
1.2 血清肿瘤标志物检测：取空腹静脉血，离心分离血清，2h内检测。
采用罗氏Elescsys2010型电化学发光免疫分析仪，所用试剂为Elescsys2010专用试剂盒，并严格按本科室制定的标准SOP文件执行。
肝癌诊断的肿瘤标志物研究进展
癌 发病 率位 于第 ５位 ， 死亡率 位 于第 ３位 ， 并有逐 年
上 升 的趋势 。肝 癌 的发 病 主 要 和病 毒 性 肝 炎 、 肝 硬
白聚 糖 一 ３ （ Ｇ Ｐ Ｃ ３ ） 、 微小Ｒ ＮＡ（ ｍｉ Ｒ ＮＡ） 等作一 综述 。
关键词： 肝癌； 肿 瘤标 志物 ； 诊 断
ＤＯＩ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ ～ ５ ３ ４ Ｘ． ２ ０ １ ３ ． ０ １ ． ０ ０ ９
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第３ ３ 卷 第１ 期
Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｄ ｉ ｇ Ｄ ｉ ｓ ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｙ ２ ５ ， ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ．３ ３ ， Ｎ ０ ．ｉ
・ ２ ９ ・
・
综述 ・
肝 癌 诊 断 的肿瘤 标 志 物研 究进 展
赵 睿 王启 之
ＡＦ Ｐ — Ｌ ３对 于 诊 断 肝 癌 的 敏 感 性 和 特 异 性 分 别 为 ６ ０ 和 ９ ０ ． ３ ｌ ３ ］ ， 并且 文献 报道 肝 癌 患者 肝 脏切 除 后 ＡＦ Ｐ — Ｌ ３ ＜１ ５ ％ 的 １年 、 ３年 和 ５年 的 生 存 率 为 １ ０ ０ 、 １ ０ ０ 和９ １ ． ７ ， 而 ＡＦ Ｐ － Ｌ ３ ＞１ ５ Ａ 患者 的生 ０
１ ０ ～ １ ５ ， ＡＦ Ｐ — Ｌ ３＞ １ ５ 即 可 诊 断 肝 癌＿ ２ ］ 。
的治疗效 果 。因此 ， 早期 诊 断 对 改 善肝 癌 患 者 的 预
肝癌tace治疗预后标志物研究进展
作者简介 ：莫钦钦（1993-），女，初级检验师，研究生在读，研究方向 ： 肿瘤标志物 ; 通讯作者 * ：谷秀娟（1973-），女，主任检验师，硕士生导师。
转氨酶增量、放射学肿瘤反应和 Child-Pugh 评分增加量。Terzi[8] 和 Tseng CL 等 [9] 分 别 对 意 大 利 和 台 湾 人 群 进 行 评 估 发 现 该 模 型不能有效筛选对后续 TACE 治疗受益的人群，需要进一步结合 临 床 实 际 进 行 完 善。ABCR 评 分 由 血 清 AFP 水 平、BCLC 分 期、 Child-Pugh 评分增加量和放射肿瘤反应组成。Kloeckner 等 [10] 认 为与 ART 评分相比，ABCR 评分表现更佳。但 Facciorusso 等 [11] 指 出 仅 有 6% 的 患 者 Child-Pugh 评 分 增 加 ≥ 2 分，22% 的 患 者 AFP 大 于 200ng/mL，这 可 能 限 制 了 这 项 评 分 在 临 床 上 的 个 人 应 用。
1 肝癌 TACE 治疗的现状
临床上大多数肝癌患者进展为中晚期才被明确诊断，错过了 手术治疗的最佳时机，仅能采用姑息治疗。TACE 作为中晚期患 者的重要治疗方法，主要是通过动脉注入化疗药物随后进行栓塞 诱导肿瘤缺血坏死，有效抑制肿瘤进展从而延长患者生存期。一 项荟萃分析 [1] 对 6 项试验共计 545 名肝癌患者，评估了 TACE 治 疗的生存获益情况，治疗组的 2 年生存率为 41%，对照组为 27%， 优势比 =0.53，治疗诱导的客观缓解率为 35%，证实化疗栓塞可提 高不可切除肝癌患者的生存率。Lencioni R 等 [2] 近年来进一步 对 10108 名用碘油 TACE 治疗的患者进行荟萃分析发现，客观缓 解率为 52.5%，1 年、2 年、3 年、5 年的总生存率（Overall survival， OS）分 别 为 70.3%，51.8%，40.4%，32.4%，中 位 OS 为 19.4 个 月。 接受碘油 TACE 治疗的 HCC 患者的生存数据似乎与先前报道相 符，证实 HCC 患者可受益于 TACE 治疗。然而，Oliveri 等 [3] 对包 括 6 个试验荟萃分析发现，TACE 对于对照组没有生存益处，尚需 更充分的试验进一步验证。疗效不同可能是因为其治疗人群异 质性 [4]，可见即使 BCLC B 期患者为 TACE 治疗的适用人群，但同 期肝癌人群具有肿瘤负荷、肝功能和病因等差异，导致患者间治疗 总生存率有所差异，因此，进一步建立 TACE 预后标志物指导临床 决策具有重大价值。
糖类抗原19-9甲胎蛋白及癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的价值研究
糖类抗原19-9甲胎蛋白及癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的价值研究【摘要】研究探讨了糖类抗原19-9、甲胎蛋白及癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的应用价值。
通过实验方法，发现糖类抗原19-9在早期诊断中具有较高的敏感性和特异性，可提高原发性肝癌的早期诊断率。
甲胎蛋白作为常用的肿瘤标志物，在原发性肝癌诊断中具有重要作用，但其特异性较差。
而癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的应用还需进一步研究。
研究结果表明，结合不同肿瘤标志物可以提高原发性肝癌的诊断准确性。
结论指出多种肿瘤标志物的结合应用有助于提高原发性肝癌的诊断精准度，但仍存在一些不足之处，需要进一步改进和完善。
展望未来，多学科合作将深化研究，提高肿瘤标志物在原发性肝癌诊断中的应用价值。
【关键词】原发性肝癌诊断，糖类抗原19-9，甲胎蛋白，癌胚抗原，研究方法，实验结果，研究结论，临床应用，改进措施。
1. 引言1.1 背景介绍原发性肝癌是全球范围内常见的肿瘤之一，其发病率逐年增加，给患者的生存和生活质量带来了巨大挑战。
目前，原发性肝癌的诊断主要依靠影像学检查和肿瘤标志物检测。
糖类抗原19-9、甲胎蛋白和癌胚抗原是常用的肿瘤标志物，它们在原发性肝癌的诊断和预后评估中起着重要作用。
糖类抗原19-9是一种糖类瘤标志物，在原发性肝癌的诊断中具有一定的敏感性和特异性。
甲胎蛋白是原发性肝癌的常见标志物，其水平与肿瘤的大小和恶性程度相关。
癌胚抗原是一种广泛存在于多种恶性肿瘤中的抗原，在原发性肝癌的诊断中也具有一定的参考价值。
本研究旨在探讨糖类抗原19-9、甲胎蛋白和癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的应用，为临床医生提供更加准确、快速的诊断手段，提高患者的治疗效果和生存率。
通过对这些肿瘤标志物的研究和探讨，有望为原发性肝癌的早期筛查和诊断提供新的可能性，为患者提供更好的医疗服务。
1.2 研究目的研究目的的目标是探讨糖类抗原19-9、甲胎蛋白和癌胚抗原在原发性肝癌诊断中的潜在价值，并比较它们在诊断准确性、灵敏性和特异性上的差异。
原发性肝癌新型血清标志物研究进展与应用
原发性肝癌新型血清标志物研究进展与应用原发性肝癌是目前我国第4位常见恶性肿瘤及第2位肿瘤致死病因，严重威胁我国人民的生命和健康。
原发性肝癌主要包括肝细胞癌、肝内胆管癌和混合型肝细胞癌-胆管癌三种不同病理学类型，三者在发病机制、生物学行为、病理组织学、治疗方法以及预后等方面差异较大，其中HCC 占75%～85%、ICC 占10%～15%。
本文中的“肝癌”一般指HCC。
原发性肝癌诊断传统的血清标志物血清AFP是当前诊断肝癌和疗效监测常用且重要的指标。
血清AFP≥400μg/L，在排除妊娠、慢性或活动性肝病、生殖腺胚胎源性肿瘤以及消化道肿瘤后，高度提示肝癌；而血清AFP 轻度升高者，应结合影像学检查或进行动态观察，并与肝功能变化对比分析，有助于诊断。
异常凝血酶原（PIVKAⅡ；DCP）、血浆游离微RNA（microRNA，miRNA）和血清甲胎蛋白异质体（AFP-L3）也可以作为肝癌早期诊断标志物，特别是对于血清AFP 阴性人群（证据等级1，推荐A）。
基于性别、年龄、AFP、PIVKAⅡ和AFP-L3 构建的GALAD 模型在诊断早期肝癌的敏感性和特异性分别为85.6%和93.3%，有助于AFP 阴性肝癌的早期诊断（证据等级2，推荐A）。
目前已有基于中国人群大样本数据的优化的类GALAD 模型用于肝癌的早期诊断。
原发性肝癌新型血清标志物miRNA近年来，“液体活检”（Liquid biopsy）包括循环游离微RNA（Circulating cell-free microRNA）、循环肿瘤细胞（ CTC ）、循环肿瘤DNA（ctDNA）等，在肿瘤早期诊断和疗效评价等方面展现出重要价值。
肝癌“液体活检”也取得较多进展，相比于血清AFP 等临床常用血清学分子标志物可能具有更高的灵敏度和特异性。
CTC 检测可以成为一种肝癌预后预测和疗效评价的临床新工具。
有报道，外周血EpCAM+ CTC 具有干细胞样特性，是肝癌切除术后早期复发的独立预测指标；检测CTC对经导管动脉化疗栓塞术治疗后及放射治疗后肝癌复发和进展具有预测作用；不同部位的CTC 能预测不同转移类型；动态检测CTC 可以用于监控肝癌肝移植术后肿瘤复发。
高尔基体蛋白73与甲胎蛋白对肝癌诊断价值的研究
高尔基体蛋白73与甲胎蛋白对肝癌诊断价值的研究邹同会;汪永强;邹军【摘要】Objective To explore the value of alpha-fetoprotein (AFP) and Golgi protein 73 (GP73) in the early diagnosis of hepatocellular carcinoma. Methods AFP and GP73 were detected with enzyme-linked immunosor-bent assay (enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) in 80 patientswith hepatocellular carcinoma and 30 patients with hepatocirrhosis. 30 healthy subjects were selected as controls. Results ①The mean concentrations of AFP in hepatocellular carcinoma group, hepatocirrhosis group and control group was 64.5, 50.1, and 21.9 respectively, among which there were significantly differences (P<0.01). The concentrations of GP73 in hepatocellular carcinoma group, hepatocirrhosis group and control group was 268.4, 192.3 and 49.8 respectively, among which there were significantly differences (P<0.01).②The areas under ROC curves of AFP and GP73 were 0.729 and 0.892 respectively in diagno-sis of hepatocellular carcinoma. The area under ROC curve of AFP combinedGP73 was 0.902 for diagnosis of hepato-cellular carcinoma. Conclusion Compared with AFP, GP73 is more sensitive and accurate in diagnosis of liver can-cer, and it is not necessary to test GP73 combined with AFP.%目的：探讨甲胎蛋白(AFP)与高尔基体蛋白73(GP73)对肝癌早期诊断的价值。
AFP、AFP-L3、GGT-2联合检测肝癌的临床价值
AFP、AFP-L3、GGT-2联合检测肝癌的临床价值【摘要】目的：研究目前医院肝癌现阶段肿瘤标志物的检测现状，探讨AFP、AFP异质体（AFP-L3）、GGT-2单独检测、联合检测原发性肝癌（PHC）和转移性肝癌（MHC）时的诊断价值。
方法：采集来自丹阳市中医院2014年11月～2016年4月住院或门诊病人的血清标本，分为肝癌标本组、良性肝病组、以及健康对照组，然后对这些标本进行AFP、AFP异质体、GGT-2的检测，并对这些数据进行处理分析。
结果：1.诊断肝癌尤其是原发性肝癌时，AFP的灵敏度更好。
2.诊断肝癌时，AFP-L3的特异性更好。
3.联合检测三项时，肝癌和原发性肝癌灵敏度为58%、72.2%。
肝癌的特异性为72.9%、准确度为66.8%。
结论：1.诊断PHC时三项指标灵敏度比诊断MHC的肝癌效果更优。
2.单独诊断肝癌时，AFP灵敏度最高，AFP-L3特异性最高，联合检测对肝癌诊断确实有一定的互补作用但不大，主要只是体现在排除阳性和鉴别肝癌类型上。
3.良性肝病时，肝硬化引起的肝癌假阳性率较大，慢性肝炎三项肿瘤指标都会引起假阳性，其他良性肝炎时假阳性率小。
【关键词】AFP、AFP-L3比率、GGT-2、肝癌、联合检测普遍存在于大多数发展中国家的肝癌（约83%）在中国就占了百分之五十[１]。
根据病因、病理发生情况将肝癌可分为原发性肝癌和转移性肝癌（也称继发性肝癌）。
目前尚未有一个标志物能够诊断出所有类型的肝癌[2]，所以说合理地运用我们常用的肿瘤标志物的组合对诊断肝癌或是排除肝癌十分重要。
血清甲胎蛋白（AFP）是临床上常用的诊断肝癌的标志物，现实中仍然存在肝癌患者AFP阴性[3]或是非肝癌患者阳性，也就是说单单用AFP来进行肝癌的筛查不是很理想，需要运用其他肿瘤标志物来辅助诊断。
GGT-2是现在争议性比较大的标志物，它是一种质膜结合的糖蛋白，血清酶活性大部分来源于肝胆系统，它在胎儿肝脏的活动性很高，出生后迅速下降到一个低水平，一旦发生肝癌（肝细胞癌）是再次大量的表达，将出现在一个特定的区域，也导致肝内梗阻导致胆汁淤积，这使得肝脏中GGT明显升高，但它的特异性不高，在良性肝病中（酒精性肝炎和药物性肝炎）经常出现假阳性[4]，所以即使它已经被官方组织承认了，临床上也很少将它作为确诊肝癌的指标，甚至在它浓度很高时也不敢作出肝癌诊断。
AFP-L3核酸适配体的筛选及特异性结合蛋白的初步研究
AFP-L3核酸适配体的筛选及特异性结合蛋白的初步研究摘要：肝癌是最常见且发病率较高的恶性肿瘤之一，发现往往已属中晚期。
肝癌患者的 5 年生存率小于 20%，实现早期诊断是降低肝癌死亡率最有效的途径；传统的甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）检测和超声成像分析敏感性、特异性不足，难以实现早期诊断。
甲胎蛋白异质体-3（alpha-fetoproteinvariant-3）仅来源于癌变干细胞，可作为肝癌早期筛查肿瘤标记物。
核酸适配体是能够通过分子内折叠形成特定的三维结构从而与靶分子高特异性、高亲和力结合的单链 DNA 或 RNA。
核酸适配体与靶分子结合的灵敏度高、特异性强，在生物医学、新药研发、靶向治疗和疾病检测等方面具有巨大潜能和优越性。
关键词：甲胎蛋白异质体；核酸适配体；肝癌引言2020年全球肝癌新发病例905677例，死亡病例830180例，分别占癌症发病和死亡总数的 4.7%和8.3%[1]。
其标化发病率和死亡率分别为9.5/10万和8.7/10万，0～74岁累积发病和死亡风险分别为1.11%和1.01%[1]。
肝癌死亡率位居全国癌症第二，因肝本身并无痛觉神经，早期症状不明显，发现往往已经是晚期，此为肝癌死亡率居高不下的重要原因，早筛查是早诊断、早治疗的关键。
目前，我国各体检机构中所应用的甲胎蛋白（AFP）检测特异性低，在早期筛查具有局限性，因AFP在其他疾病中也可升高，使得检测AFP的敏感度仅为65%左右，单以AFP单个血清肿瘤标志物为标准进行筛查，已不足以作为原发性肝癌早期筛查的依据。
目前肝癌血清的肿瘤标志物有甲胎蛋白（AFP）、高尔基体糖蛋白73（golgi protein 73，GP73）、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、肿瘤特异性生长因子（tumorspecific growth factor，TSGF）、肿瘤相关抗原（TAA）及对应的自身抗体（抗-TAAs）、岩藻化甲胎蛋白（AFP-L3，又称甲胎蛋白异质体）等，AFP-L3仅来源于发生癌变的干细胞，对肝癌检测的特异性高达95%以上，因此通过新型手段去筛选以AFP-L3为靶标的核酸适配体是研究的热点所在。
新型肿瘤标志物(PIVKAII)临床应用进展及评价
healthy liver
Chronic hepatitis
Cirrhosis
慢性炎症以及逐渐加深的肝脏损伤
Cancer (HCC)
Viral marker
Fibrosis marker
Tumor marker
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现有肝癌相关肿瘤标志物
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后又随之增加。血清甲胎蛋白的含量与异常凝血酶原水平基本不具相关性。
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Research design:
Song et al. (2002)
Tsai et al. (1997)
Tsai et al. (2003)
Hsia et al. (2007)
Hsia et al. (2007)
Cui et al. (2003)
Yoon et al. (2004)
Cutoff value 2.0 ng/ml
Sensitivity 51%
• Tumor-Derived Autoantibody (TAA)
Etc.
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Markers GPC3 GP73
TGF-β1
IGF-II IL-6 IL-10 GGT HCCR
References
Hippo et al. (2004)
Marrero et al. (2005)
新型肝癌诊断标志物miRNA7
DOI：10.19368/ki.2096-1782.2023.08.157新型肝癌诊断标志物miRNA7™和传统肝癌诊断标志物AFP的诊断效能对比张琛，王欣大连市第六人民医院，辽宁大连116031[摘要]目的比较新型肝癌诊断标志物7种微小核糖核酸（miRNA7™）和传统肝癌诊断标志物甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）对原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）的临床诊断效能差异，从而为肝癌诊断策略的完善提供重要补充和指导。
方法选取2022年2—6月大连市第六人民医院收治的经病理或影像学确诊的9例HCC患者和41例非HCC患者作为研究对象，然后分别用miRNA7™和AFP进行平行检测，对比miRNA7™和AFP对HCC的诊断效能。
结果 miRNA7™检测HCC的敏感性（77.78%）高于AFP（33.33%），差异有统计学意义（χ2=5.143，P=0.023）。
两者联合检测的敏感性和阴性预测值高达100.00%，相对于单独miRNA7™或单独AFP都有明显提升。
结论 miRNA7™对HCC的检测敏感性显著高于AFP，从而可以避免造成漏诊。
如两者联合使用，相对于单独miRNA7™或单独AFP检测敏感性都有明显提升，这也表明采用多组学联合型液体活检技术可以弥补单一维度肝癌诊断标志物检测的不足，为提高肝癌诊断效能开辟新路径。
[关键词]原发性肝细胞癌；miRNA7™；AFP；敏感性；特异性[中图分类号]R59 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782（2023）04(b)-0157-05Comparison of the Diagnostic Efficacy of the Novel Liver Cancer Diagnos⁃tic Marker miRNA7™and the Traditional Liver Cancer Diagnostic Marker AFPZHANG Chen, WANG XinDalian Sixth People's Hospital, Dalian, Liaoning Province, 116031 China[Abstract] Objective To compare the clinical diagnostic efficacy of the new liver cancer diagnostic marker 7 mi‐croRNA7™ (miRNA7™) and the traditional liver cancer diagnostic marker alpha-fetoprotein (AFP) in primary hepato‐cellular carcinoma (hepatocellular carcinoma, HCC), so as to provide an important supplement and guidance for the improvement of the diagnosis strategy of liver cancer. Methods Selected 9 HCC patients and 41 non HCC patients confirmed by pathology or imaging admitted to Dalian Sixth People's Hospital from February to June 2022 as the re‐search subjects. Then parallel detection was carried out with miRNA7™ and AFP, and the diagnostic efficacy of miRNA7™ and AFP for HCC were compared. Results The sensitivity of miRNA7™ in detecting HCC (77.78%) was higher than that of AFP (33.33%), the difference was statistically significant (χ2=5.143, P=0.023). The sensitivity and negative predictive value of the combined detection of the two were as high as 100%, which was significantly improved compared to miRNA7™ alone or AFP alone. Conclusion The detection sensitivity of miRNA7™ for HCC is signifi‐cantly higher than that of AFP, thus avoiding missed diagnosis. If the two are used in combination, the detection sensi‐tivity of miRNA7™ or AFP alone will be significantly improved. The results indicated that the combination of multi-omics liquid biopsy technology can make up for the lack of single-dimensional detection of liver cancer diagnostic markers, and open up a new path for improving the diagnostic efficiency of liver cancer.[基金项目]2020年大连市医学科学研究计划项目（2011014）。
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展望——开展临床多中心联合实验
研究思路 研究人群 统计学分析 预期研究成果
展望——开展临床多中心联合实验
研究思路
展望——开展临床多中心联合实验
研究人群 大量原发性肝细胞癌、慢性乙型肝炎、肝
硬化等高危患者与一定数量的健康人群 对照，并进行分组，即测试组以及与其 年龄、性别等相匹配的验证组
肝癌中特异高表达的一种肿瘤血清蛋白标志 物，优势明显。
在肝癌的早期诊断、与其他消化道肿瘤、高危肝 病的鉴别诊断、肝癌术前术后的预后评价等方 面，有望给临床工作提供更广阔的应用前景
结论
MCAM具有高灵敏度、高特异性，是新 型HCC诊断相关肿瘤标志物
感谢聆听！
肝癌肿瘤标志物-MCAM
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
关于YAP：
Yes相关蛋白（Yes-associated protein，YAP）是与肿瘤 密切相关的信号转导通路——Hippo通路的转录共激活因子。 目前YAP被人们认定为候选癌基因，通过增强转录因子的活性 以促进相关基因表达，其过表达可促进细胞的恶性转化，因此 迄今为止被认为是肝癌诊断以及预后的独立性指标。
沉默YAP基因筛选出细胞膜表面蛋白
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
YAP和MCAM在正常肝细胞、不同肝癌细胞系中的表达水平一 致；尤其在肝癌细胞SMMC-7721、Bel-7402中表达量最高
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
免疫荧光分析显示MCAM在不同肝癌细胞系中 均定位于细胞膜上
新型肝癌肿瘤标志物的研发
上海市第十人民医院检验科 孙奋勇
主要内容
回顾——HCC相关肿瘤标志物研究现 状
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤标 志物
展望——开展临床多中心联合实验
回顾——HCC相关肿瘤标志物研究现状
HCC研究背景 死亡率：我国20.37/10万，占癌症死因的第2位
早期肝癌：检出率极低，首选手术切除
晚期肝癌：手术切除率仅10%~30%，首选肝动
v
脉化疗栓塞术（TACE）
回顾——HCC相关肿瘤标志物研究现状
已发现的有可能用于HCC诊断的肿瘤标志物 甲胎蛋白AFP 血浆循环游离线粒体DNA（CCF mtDNA） 高尔基体蛋白73（GP73） 甲胎蛋白异质体3（AFPL3） microRNA:miR-122、miR-221、miR-21 ……
展望——开展临床多中心联合实验
统计学分析 配对t检验，曼-惠特尼秩和检验（Mann-
Whitney U test），ROC曲线分析敏感性 和特异性，Pearson’s χ² test 或确切概率 法，相关性回归性分析
展望——开展临床多中心联合实验
预期研究成果 MCAM蛋白作为本实验室新发现并证明在人类
回顾——HCC相关肿瘤标志物研究现状
这些肿瘤标志物的不足之处： 敏感度、特异性不尽如人意（如AFP）, 不能满足早期诊断的需求 病人样本采样不方便、实际操作复杂 （ CCF mtDNA ） 虽然能一定程度反映恶性程度，但是诊 断阳性率不理想（GP73、AFPL3）
肝癌肿瘤标志物
AFP可以在60~80%的肝癌患者血清中升高 大量的临床却发现，部分肝硬化病人会长期
出现AFP达到上千，但多年都没有肝癌的迹 象；同时发现约20%的晚期肝癌病人，直至 病故前，AFP仍不超过10 期待新型的肿瘤标志物
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
MCAM的发现 MCAM在肝癌组织中高表达 YAP在转录水平调控MCAM MCAM是新型肿瘤标志物
肝癌肿瘤标志物
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
TMA（Tissue Microarray）：MCAM在肝癌组织的表达明 显高于正常肝组织
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
TMA证实MCAM蛋白表达量与YAP表达呈 明显正相关
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
沉默YAP基因后MCAM的mRNA水平明显下调，表明 YAP在转录水平调节MCAM的表达
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
收集健康对照组和不同癌症组患者血清，ELISA分析显示 HCC组的MCAM的表达量明显高于其他组
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
收集HCC患者术前术后血清检测MCAM，进行配对t 检验
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
ELISA同时测得肝癌患者血清MCAM和AFP表达，进行相关性 分析显示二者呈明显正相关
但是作为细胞核内转录共激活因子，YAP属于侵入性的肿瘤 标记，因此难以在病人血清中检测到，对于肝癌早期血清学诊 断有其局限性。经研究发现，Hippo/YAP信号通路与一些细 胞表面蛋白密切相关，于是试图找到类似于血清甲胎蛋白AFP 类似的肿瘤标志物，提高肝癌诊断的特异性以及灵敏度。
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
ROC曲线分析显示相对于经典肿瘤标志物AFP,MCAM 对HCC诊断的特异性、灵敏度明显增高
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
MCAM——新型HCC诊断相关肿瘤 标志物
MCAM作为HCC肿瘤标志物的优势： 在HCC患者血清中高表达 与传统HCC早期筛查指标AFP相比， 特异性、灵敏度均较高 血清样本采样方便、用量少、实际操作 简单 与自动化检测仪结合，检测效率高、重 复性好、费用低、患者易于接受