死亡猪黄白痢息猪病原菌的分离鉴定
猪常见细菌性病原菌的分离鉴定及药敏实验研究
猪常见细菌性病原菌的分离鉴定及药敏实验研究作者：方勤来源：《农业开发与装备》 2018年第2期摘要：课题试图通过对重庆涪陵区两规模化猪场送检的病死猪病料进行细菌分离鉴定，掌握川渝地区猪场常见的致病性细菌种类，主要有大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌。
通过对分离的纯化菌进行生化试验和药敏试验，查出耐药，减少治疗错误，并了解其敏感抗生素种类，便于猪场选择治疗方案、节省费用。
利用耐药检测结果控制抗菌药物的应用，减少耐药菌株的出现，选择高效合理的抗菌药物，对于指导临床用药具有重要作用。
在更有效的防治细菌性疾病的同时，能够最大化提高养殖业的经济效益。
关键词：耐药性；抗生素；分离；鉴定1材料与方法1.1材料1.1.1试剂。
普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板、营养肉汤培养基、SS琼脂平板和各种微量生化鉴定管。
1.1.2仪器。
LDZX-40B1高压灭菌锅（中国.上海）、电子天平、锥形瓶、灭菌培养皿、生化培养箱、超净工作台。
1.1.3培养基的制备。
营养肉汤：称取12.5g溶于500mL蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，经121℃高压蒸汽灭菌20min，置于4℃保存备用；营养琼脂：称取33g于1000mL蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，经121℃高压蒸汽灭菌20min，置于4℃保存备用；麦康凯琼脂：称取55g溶于1000mL蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，经121℃高压蒸汽灭菌20min，置于4℃保存备用。
1.1.4病料。
无菌采取A、B两猪场病死猪心、肺、淋巴等脏器，置于4℃冰箱待检验。
1.1.5抗菌药物。
药敏实验采用的抗生素类药物有TET（四环素）、NT（呋喃妥因）、KAN （卡纳霉素）、GEN（庆大霉素）、VAN（万古霉素）、CIP（环丙沙星）、SXT（复方新诺明）、EM（红霉素）、OFX（氧氟沙星）、CEP（头孢噻吩）。
1.2方法1.2.1分离培养及纯化。
将病料无菌划线接种于普通营养琼脂平板，置于37℃恒温培养箱中培养18～24h，然后用接种环无菌挑取单个完整的菌落，接种于普通琼脂培养基，进行纯化培养得到纯培养物。
仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验
２ 试 验 方 法
２ ． １ 细菌分 离 取 每窝 腹 泻严 重仔 猪 ３头 ， 灭 菌棉
签采 集肛 门拭 子 ， 病 料 分别 接 种 于 麦 康 凯琼 脂 平 板
用庆 大霉 素 、 硫酸 卡那 霉素 和氧 氟沙 星等 药物 治疗 。
第４ １ 卷
第 １ 期
仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验
陈 颖 ，徐 雨 ，韦登雄 ， 王 海 ，黄向岚 ，徐孝会 ，雷棉 雨
（ 贵州省关 岭县动物疫病预防控制 中心 ， 贵州 关 岭 ５ ６ １ ３ ０ ０ ）
摘要 ： 对贵州省某养猪场发 生仔 猪黄痢的病例进行病原分离鉴定 ， 病仔 猪直肠拭 子接种至普 通营养琼脂 平板 、 麦康 凯琼 脂平 板 ， 经革兰 氏染色镜检 和生化试验 ， 鉴定为大肠埃希 氏菌 ； 药敏试验表 明 ， 该菌对 头孢 哌酮 、 头孢 曲松高度敏 感 ， 对 环丙沙 星、 庆大霉素和卡那霉素等药物不敏感 。根据药敏试 验指导用药后 ， 仔猪恢 复健康 。
关键词 ： 仔猪黄痢 ； 大肠埃希 氏菌 ； 分离； 药敏试验
中图分类号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ ８ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文章 编号 ： １ ０ ０ ７ —１ ４ ７ ４ （ ２ ０ １ ７ ） ０ １ — ０ ０ １ ０ — ０ ３
仔 猪 黄痢是 由一定血 清 型 的大 肠埃 希 氏菌 引起 的常见猪 病 之一 ， 在 世 界 各 地 均 有 流行 ， 有 季 节性 ， 多 发于 １ — ３日龄仔 猪 。 主要 以排 出黄 色 稀粪 和 急 性
然而， 随着广谱抗菌药物的广泛使用与大量滥用 ， 产 生耐药细菌 ， 耐药性增强＿ ２ ］ 。大肠大肠埃希氏菌病
规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定
规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定仔猪黄白痢又称新生仔猪腹泻，是仔猪黄痢和白痢的总称，很大一部分是由致病性大肠杆菌引起的一种高致病性的传染病，以排出白色或黄色稀粪和迅速死亡为特征。
由于大肠杆菌血清型众多，且不同年龄的猪感染大肠埃希菌的主要血清型不同，因而疫苗的使用保护性差，且由于耐药性的产生，都给本病的防治造成一定的难度。
本试验对某猪场发生仔猪黄白痢的病原菌进行分离鉴定，旨在为该养猪场制定有效的防制措施提供依据。
1材料与方法1．1病料与试剂来源于镇江地区某规模化猪场11窝30日龄内发生黄白痢的仔猪，用灭菌棉拭子从腹泻仔猪直肠采集粪便55份，进行细菌的分离鉴定。
营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂、SS培养基、三糖铁培养基；生化鉴定培养基购自杭州天和微生物试剂公司；药敏纸片购自杭州天和微生物试剂公司；大肠杆菌O抗原定型血清购自中国兽医药品卫生监察所。
1．2试验动物体重20-25 g健康小白鼠90只，雌雄各半，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。
1．3细菌分离中国猪网网友建议用棉拭子采集发生黄白痢的仔猪的肛门粪便，混悬于装有灭菌生理盐水的灭菌离心管中，摇动离心管彻底洗涤拭子粪便于管中，并靠壁旋动拭子，挤出液体。
用接种环取上述大便悬液1—3环，接种于麦康凯琼脂培养基平板，置37℃培养24 h后观察培养特性。
将以上麦康凯培养基中的红色菌落，再接种于SS培养基、麦康凯培养基中，置37℃培养24 h后进行纯化培养，观察菌落的生长情况，并取麦康凯培养基上的单个菌落进行涂片，革兰氏染色、镜检。
1．4生化特性试验按文献方法进行。
取纯培养细菌接种于营养肉汤中，37℃培养24 h后，接种到各微量发酵管及种生化培养基中，置37℃培养24 h后，观察记录结果。
1．5致病性试验将接种细菌后的营养肉汤37℃培养24 h后，分别腹腔接种体重20 g左右的小白鼠，每株接种10只，每只0．2 mL(含菌量约为8．0×108CFU／mL)，同时用10只小白鼠接种无菌肉汤作对照。
仔猪黄白痢大肠杆菌病原的分离鉴定及其药效试验
Ｋ ｙｗｏｄ ：ｐ ｋ ｅ ｏ — ｈｅ ｄｓｎｅ ；Ｅｅｉｓｐｒｔ ｇ ｄｕ ｅｓｉｉ ｅ ｒｓ ｉ ０ ｙｌ ｗ ｗ ｉ ｙｅ ｔ ｙ ． ｅ ａ ｉ ； ｒｇｄ ａｉｖ ｙ ｇ ｌ ｔ ｒ ｄ ａｎ ｔｔ
１ 材 料 和 方 法
１１ 材 料 ．
１ 致病性试 验 ．３ ２ ２ ０ 年 ８月￣ ０月 间 ， ０１ １ 四川 自贡 市 太 安 区三
Ｅ．ｏ ｌ ｏ ｇ ｅ ｅ ａ ａ ｉ ｇ Ａｐ ｒ ｉａ ｎ ｕ ｎ ｉｉ ｉ ｒ ｍ ｇ ｔ Ｓ ｃ ｉ ｆ Ｐｉ ｌ ｔ Ｓ ｐ ｒ ｔｎ ｐ ａ ｓ ｌ ａ ｄ Ｄｒ ｇ Ｄｅ ｓｔｖ ｔ ｆ ｏ ｙ Ｐｉ ｕ ’ Ｙｅ ｌｗ— ｈ ｃ ｓ ｎ ｅ ｙ ｌ ｏ Ｗ ｉ ｅ Ｄｙ ｅ ｔ ｒ
摘要： 本文从 自贡市大安 区仔猪黄 白痢疾病例 中分 离到 ３椿细菌， 经培养、 态、 形 生化试验、 动枷试验确定 为致病 性 大脑 杆茸 ． 药敏试验蛄果表喁其均对甲砜 霉素、 氨苄青霉素 、 阿米卡 星高度敏感 ， 对其它抗 茵药枷的敏感性各 异， 担
提 示 自贡 市大 安 区 ；起 仔 猪 黄 白痢 疾 的 大 脑杆 茸不 同椿 『对 药 特 的敏 感 性存 在 差异 ， ｆ ］ 日 临床 用 药时 应 ｊ起足 够 重视 。 ｌ 关键词 ： 猪 ； 白痢； 仔 黄 大腑 杆 茵 ； 药敏 试 验
将 小 白 鼠 随 机 分 成 ４组 ， 组 ５只 ， 菌 每 即
株 １组 、 ２组 、 及 对 照组 。将 分离 到 的 ３株 灭 菌 用 灭 菌 生 理 ３组 盐 水分 别 配戚 ８ ９ ｌ 个／ Ｌ菌 液 ， 只 小 鼠腹 腔 接 种 ０３ ， ￣ ｘ ｍ 每 ｍＬ 只 ， 照 组 注 射 生 理 盐水 ０ ｍ ／ ． 察 接 种 菌 液后 ７ ｈ内 小 对 ． Ｌ只 观 ３ ２ 白 鼠死 亡 情 况 ，井 将 死 亡 小 白 鼠心 血 接 种 于 ｓ ｓ琼 脂 平 扳 上 ． ３ ℃培 养 ２ ｈ后 ， 片 、 色 、 检 ， 察 是 否 为接 种 菌 株 。 ７ ４ 抹 染 镜 观
四川某猪场仔猪黄、白痢大肠杆菌的分离鉴定
Ｉ ｏａ ｉｎ ｎｄ ｄｅ ｔｆｃ ｔｏ ｏ Ｅ．ｏ ｉｐ ｔ ｇ ｎ ｆ Ｙｅｌｗ－ｗｈｉｅ ｄ ｓ ｎ ｅ ｙ ｉ ｉｈｕ ｎ ｓ ｌ ｔｏ ａ ｉ ｎ ｉ ａ ｉｎ ｆ ｉ ｃ ｌ ａ ｈｏ ｅ ｓ ｏ ｌ ｏ ｔ ｙｅ ｔｒ ｎ Ｓｃ ａ
ｍｅ ｉｍ ｆｏ ｄｕ ｒｍ ５ ａ ａ ｓ ｂ ｏ ｉｌｔ ｃ ｕ ｒｎ Ｙｅｌｗ－ｗｈｔ ｙ ｅ ｔｒ ｉ ｔｒ ｅ ｉ ａｍｓ ｔ Ｓ ｃ ｔｕ ０ ｎ ｌ ｗａ ｓ ｆ ｐｇｅｓ ｃ ｒｉｇ ｏ ｌ ｏ ｉ ｄ ｓｎ ｅ ｅ ｙ ｎ ｈ ｅ ｐ ｇ ｆｒ ａ ｉｈ 一 １
由于 大肠 杆 菌 的 血 清 型复 杂 ， 今 已确 定 的大 肠杆 菌 迄 菌 毛和 菌 体表 面 Ｏ抗 原 有 Ｉ １种 ， ７ Ｋ抗 原 有 １３种 ， ０ Ｈ 抗原有 ６ ０种 ， 且 不 同地 区 、 同猪 场 的血 清 型 差 异 并 不
收 稿 日期 ：０１ － —１ ２ １ ０１ ４
四川 某猪 场 仔 猪 黄 白痢 大 肠 杆 菌 的分 离 鉴 定
陈元 坤 ， 红 萍 ， 春 林 杨 海 涵 欧 房 ， （ ． 川 省 新 兽 药 工 程 技 术 研 究 中 心 ， 川 温 江 ６ １３ ； １四 四 １ １０
２成都 农业 科技职业 技术 学院 。 ． 四川 温 江 ６ １ ３ ； Ａｎｍａ Ｍｅ ｉｉｅ Ｃ ．Ｌｄ，Ｓｃ ｕ ｎ Ｊａ ｙ ｎ ４ ４ ０， ｈｎ ． ｈ ｎ ｄ ａ ｘｎ ｉ ｌ ｄｃｎ ｏ， ｔ． ｉｈ ａ ｉｎ ａｇ ６ ０ Ｃ ｉａ） １
Ａｂ ｔａ ｔ Ｔ ｅｖ ｔ ｉｓｏ Ｅｃｌ ｐｔｏ ｅ ｓｗ ｒ ｓｌｔｄ ｗｔ ｏｉ ｔｙｅ ｅ ｂｕ ｇｒ （ ＭＢ） ｓｒ ｃ ： ｗ ｌｅ ｓ ａｎ ｆ ． ｉ ａｈ ｇ ｎ ｅｅ ｉ ａｅ ｉ ｅｓ ｍｅｈ ｌｎ ｌｅ ａａ Ｅ ｒ ｏ ｏ ｈ ｎ
云南多重耐药猪源大肠杆菌的分离鉴定及其耐药机制初步研究
１ ７ 药 敏 实 验 ．
＊为 通 讯 作者 。
基 金项 目 ：１ 云 南 省 农 业 科 技 创 新 工 程 （ ０ ８ Ａ０ ９ ；２ 云 南 （） ２０Ｌ １ ）（）
省现 代 农 业 生猪 产 业 技 术 体 系建 设 （ 财农 ［ ０ ９ １ １号 】 云 ２Ｏ］７ 。
１ ３ 买 验 动 物 ． 昆 ４ 细 菌 分 离培 养 ．
将 病 料 划 线 接 种 于 营 养 琼 脂 平 板 ， ７Ｃ培 养 过 夜 ， 挑 ３￣ 再 典 型 单 菌 落 接 种 于 营 养 琼 脂 平 板 、 康 凯 琼 脂 平 板 和 三 糖 铁 麦 琼 脂 斜 面 ，７ ３￣ Ｃ培养 过夜 ， 察 本 菌 在 营 养 琼 脂 、 康 凯 琼 脂 观 麦 和 三 糖 铁 琼 脂 斜 面 上 的生 长 情 况 。
ＢＢ 公 司 。 Ｉ
２ 结 果 ２ １ 细 菌 培 养 特 性 ．
７ 分 离 株 的 培养 特 性 相 同 ： 营 养 琼 脂 上 形 成 直 径 中 株 在 等 大 小 乳 白色 菌 落 ， 落 光 滑 、 润 、 缘 整 齐 ； 麦 康 凯 琼 菌 湿 边 在 脂 上 呈 中 等 大 小 紫 红 色 菌 落 ； 糖 铁 琼 脂 斜 面 的 深 部 和 斜 面 三 呈均一黄色 ， 脂深部被气泡冲成两段 。 琼
【 要 】从 云 南省 ３个规 模 化猪 场仔 猪 黄 白 痢病 猪 病例 分 离到 ７ 革 兰 氏 阴性 小杆 菌 ， 生理 生 化鉴 定 、 摘 株 用 药敏 试 验
和 致 病性 试 验 对 分 离菌 株进 行 鉴 定 ， 并提 取 细 菌的 质 粒 ， 析 质 粒 与 细 菌耐 药性 之 间 的相 关性 。结 果 表 明 ： 分 ７株 分 离株 经 生 理 生化 试 验鉴 定为 仔猪 黄 白痢 大肠 杆 菌 ， 小 白 鼠有 强 致病 性 ， 离株 对 １ 种 抗 生 素表 现 为 多重 耐 药 ， 中 １ 对 分 ５ 其 ４耐 １ 、 ３ ２株 、 １耐 ２株 、 和 ８耐 以 下 ２株 ， 株 ｌ耐 １ ８ 头孢 类抗 生 素是 治疗 仔猪 黄 白痢 的 首选 药物 ， 明 云 南猪 大 肠 杆 茵 已经 表 呈 现 出十分 严 重 的耐 药 性 。质 粒 图谱 分 析 表 明 ， 分 离株 均携 带分 子 量 约 为 ５０ ０ｂ ４株 ０ ｐ的 一 个 质 粒 ， 另 外 ３ 不 携 而 株 带 任 何质 粒 。质粒 转 化 实验 表 明 ， 离株 所 携 带 的质 粒 为 非 耐 药性 质 粒 ， 细 菌耐 药 性无 直 接 相 关性 。 分 与
死亡仔猪脏器中致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
死亡仔猪脏器中致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验奎军;简莹娜;张学勇;李秀萍;王戈平;李海基;马利青【期刊名称】《青海畜牧兽医杂志》【年(卷),期】2017(047)005【摘要】从送检的死亡猪组织病料中分离到1株病原菌,经病原菌的分离、生化试验、动物致死试验、药物敏感性试验和PCR扩增及测序,对该菌株进行了鉴定.结果表明:该病原菌为致病性大肠杆菌;药敏试验表明在检测的17种抗生素中该菌株仅对阿奇霉素和克林霉素药物敏感;对强力霉素、多粘菌素B药物中敏;对杆菌肽、氯霉素和多粘附素E等耐药.说明该猪死亡前感染了耐药性较强的致病性大肠杆菌.【总页数】4页(P23-26)【作者】奎军;简莹娜;张学勇;李秀萍;王戈平;李海基;马利青【作者单位】青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016;青海省湟中县畜牧兽医站,西宁,811600;青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016;青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016;青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016;青海省畜牧兽医科学院,西宁,810016;青海省湟中县畜牧兽医站,西宁,811600【正文语种】中文【中图分类】S852.61+2【相关文献】1.仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验 [J], 赵美盈2.死亡牦牛脏器中病原菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 李稳欣;简莹娜;张学勇;才山;阿日雅;徐龙;马利青3.仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 杨莉;杨胜坤;刘运平;袁廷明;贾惠珺;余波;杨茂生;徐景峨;李刚;陈远晟;唐远江;龙玲;史开志4.一例仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验 [J], 祖立闯;谢金文;姚春阳;孟霞;齐继红;赵家磊;李峰;沈志强5.仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验 [J], 景波; 吕程因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
仔猪黄白痢致病大肠杆菌的分离鉴定
多 ． 发 病 率 ９ ％以 上 ，病 死 率 也 非 常 ０
高 。 目前 ，虽 然 国 内外 已 经 研 发 预 防 大 肠 杆 菌 病 的 各 种 疫 苗 ，如 基 因 丁 程
化反应特性。
２３ 分 离茵 血 清型 鉴 定结 果 － 取全部 １ ２株 菌 纯 培 养 物 。分 别 用 少量 ０ ５ ． ｍＬ石 炭 酸 生 理 盐 水 洗 下 后 置 ０
２２ 分 离茵 生化 试 验 结 果 ．
１ 材料 与方 法
１１ 试 验 材料 ．
将 纯化所得的 １ ２株 菌 进 行 糖 类 发 酵 、吲 哚 、ＨＳ等 试 验 ，结 合 大 肠 杆 菌 ２ 的生化 特 征 （ ２ 表 ）进 行 判 断 ， 得 知
ｌ ２株 分 离 菌 中 有 ９株 符 合 大 肠 杆 菌 生
生 于 生 后 １周 以 内 ， 以 １ ３ 日龄 者 居 ～
猪 场 所 采 的病 料 能 培 养 出 典 型 菌 落 ，
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
共 得 １ 菌 ，分 别 挑 取 单 个 典 型 菌 落 ２株
接 种 于 普 通 琼 脂 培 养 基 进 行 纯 培 养 和
涂 片 染 色镜 检 ，其 结 果 如 表 １ 示 。 所
型 菌 落 进 行 生 化 试 验 、细 菌 血 清 型 鉴 定及致病性试验。
２ 结 果 与分 析 ２１ 细 茵分 离结 果 ． 用 两 猪 场 剖 检 所 采 集 到 的 病 料
型 包括 有 ｏ ｏ 、０， ０ 及 Ｋ 等 ５个 型 ，其 中 有 ４株 属 ｏ 占 总 数 的 ，
离 茵 在 分 离培 养 基 上 的 生 长 特 性 、 茵
落 染 色镜 检 、 生 化 试 验 、致 病 性 试 验
猪病的病理剖检诊断
猪病的病理剖检诊断一．尸体剖检的概念★是适用病理解剖学的知识，通过检查尸体的病理变化，获得诊断疾病的依据。
1．特点：（1）方便快速，直接客观。
有的疾病通过病理剖检可一目了然予以确诊。
（2）可验证病死猪生前的临床诊断与治疗的正确性。
2．要求（1）具备病理生理，病理解剖，传染病及微生物等学科的知识。
（2）剖检时应做到全面客观地观察、描述并详细记录。
（3）防止病原的扩散和人为的传播，做好环境的消毒和尸体的无害化处理。
3．相关概念（1）尸冷：猪死后由于体内产热过程停止，尸体温度逐渐降至外界环境温度水平。
（2）尸僵：猪死后几个小时（3-6小时），从头部开始各部位的肌肉因痉挛性收缩而变得僵硬，各关节不能屈伸，尸体固定成一定的姿态。
该过程在10-24小时内完成，24-48小时尸僵按原来顺序开始消失，肌肉变质。
（3）尸斑：猪死亡后由于心脏和大动脉管的临终收缩及尸僵的发生将血液排挤到静脉内，并由于重力作用，血液流向尸体的底下部，组织呈暗红色，死后1-1.5小时出现，24小时左右发生溶血，组织染成污红色。
（4）血液凝固：猪死后不久，在心脏和大血管内的血液即凝固成血凝块。
（5）尸体自溶：指体内组织受到酶的作用而引起自体消化的过程。
如：胃肠道粘膜脱落。
（6）尸体腐败：指尸体组织蛋白由于细菌的作用而发生腐败分解现象，表现为腹围膨大、尸绿、尸臭。
二．尸体剖检的注意事项1．选择的场地应便于消毒和防止病原体扩散，最好在专设的解剖室内进行。
2．剖检人员应配备工作服、胶鞋、工作帽、一次性塑料手套和相应的器械。
3．病猪死亡后若需剖检应尽快进行以防尸体腐败。
4．为防病原扩散，可将尸体装入塑料袋内，也可用浸透消毒液的棉花球堵塞尸体的天然孔，并用消毒药液喷尸体表面各部。
5．剖检完毕，把尸体、垫料和被污染的土层一起放入坑内，撒上生石灰或喷洒消毒液后用土掩埋，有条件的也可焚烧。
6．运送尸体的车辆和绳索等用后要严格消毒。
三．尸体剖检的顺序及检查方法1．尸体剖检顺序为了全面而系统地检查尸体内外所呈现的病理变化，避免遗漏，尸体剖检应按照一定的顺序进行。
仔猪黄痢病原分离鉴定及防治试验
研 究 报 告
２ ３
潦 布于普 通 营养 琼 脂平 板 上 ， 上 头孢 噻 呋 贴 钠、 卡那 霉素 、 酸 四环素 、 盐 庆大霉 素 、 酸新 硫 霉素 、 丙沙 星 、 环 氧氟 沙星 、 恩诺沙 星 、 酸林 盐 可霉 ９种药 敏纸 片 ，７ 培养 １ 。 ３℃ ８ ｈ
１ ４ 疲 苗 研 制 ．
（ ｍｇ ｍ ） ｌ ， 生 素 Ｃ（ ５ ｍｇ ｍ ） ５ ／ Ｌ １ 个 优势 血清型 Ｏ ０ ∞、 啪菌株分 别接种 于改 良的血 清 一 葡 萄 一肉汤 培 养 基 中 ， ３ ℃ 培 养 １ 置 ７ ８ ｈ计
，
使 菌液 的含 菌 量为 １ ０×１ Ｌ～， 上述 ０ｍ 将
监察所 。
１２ 病原 分 离鉴 定 ．
水培养基 、 橼 酸盐 培养 基、 素培 养基 ， 枸 尿 ３ 反应 ２ ， 接 观 察 结 果 或加 入 有 关 试 ７ ４ｈ 直 剂观 察结果 。 １２３ 致病 性试 验 ： ．． 取分离 菌株接 种普通 琼 脂平板 ， 用无菌生理盐水洗下 ， 麦氏比浊测得 其 浓度 为 １ ￣／ ， 生 理 盐水 稀 释 为 １ ０亿 ＂ｍＬ 用 亿 ｔ／ ， 攻 毒 用 。试 验 组 小 白 鼠 ｌ ￣ ｍＬ 供 ＇ － Ｏ只 ， 每只腹腔注射 ０２ Ｌ菌液 ， ．ｍ 对照组 １ ， ０只 每 只腹 腔 注 射 ０ ２ Ｌ生 理 盐 水 ， 种 后 观 察 ． ｍ 接 ７ ， 录 小 白 鼠变 化 情 况 。如 小 白 鼠发 生 ２ｈ 记 死亡， 从其 心 、 、 等脏 器取样 ， 菌接种 于 肝 脾 无 麦康凯培养基分离细菌 ， 挑取可疑菌落镜检、 生 化鉴定 ， 定是 否为 大肠杆 菌 。 确
年我们 对 怀疑 发生 仔 猪 黄 痢 的 病 猪 ， 采集 病 料， 进行病 原分离 鉴定 和 防治试 验 ， 现将结果 报告 如下 。
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用。
检测Ｋ ８ 菌株用记号笔将两块玻璃片分别划分为１个小方 ８一 ５
Ｄ： 定 方 法 鉴
块， 用移液器在每个方块中分别加入 Ｉ 滴生理盐水 、 １ ８ 阳性 滴Ｋ ８
要做阴性对照确保 ， 自凝现象。 无 １ ％Ｄ 甘露糖的Ｐ Ｓ 一 Ｂ液￣ １１ 列） ＝ １ 行５ ， ０亍 ３ 前３彳 每孔加入５ Ｉ 前 ， ０ 扁
要
＾ ＾ １ Ｌ ’ｂ ＾ ＇ 僻 ．
然后施 ℃黼
垢 观察结 果。
放 微 量４
基 本
… 一 … …
嚣
’ … … … …
到。菌养眭 了 细，特 。 培 株
。
… ～ … … … 、 …
窆 苎１灯 封 ７Ｉ － 酒 ： ｌ ４ 精ｉ－ Ｉ上 善 蔷 Ｈｔ ｆ ｌ ： １ 幂 毳 方） 液 而不溢 出为准 ， ７Ｃ温箱７ ｈ要保持一定 。菜 向 菌 以满 加 工 ～ ， … 一… 放３ ２（ 一 ’
得 到了迅速发展 ， 规模化养殖不断扩大 ， 困扰养猪业发展 的源 而
头 问题（ 猪黄 白 就尤为突出。仔猪黄 白痢发病率高 、 ｆ 子 痢） 死亡率
高， 严重威 胁养殖业的发展 ，对其研究 已成为世界性 的重要课 题 。加之 ， 近年来由于滥用 、 乱用抗生素， 使得 细菌产生耐药性 ， 并且在规模 化养殖 的情况下药物治疗也是 十分麻烦 ， 因此 ， 研究 开发新型疫苗就迫在眉睫。并且要始终坚持“ 防重于治 ， 防治结
第３ Ｏ卷 第 ５期
总 １ ６捆 ２ １ ７ ０ １年 ９月 ２ ５日出赢
４４药敏 试 验 的 结果 分 析 ．
４ ． 玻板 凝 集试 验 的 结 果 ．４ ５
菌株 ３ 菌 株７ 菌株 ９ 菌株 １ 、 株 ２ 、 株 ２ 、 、 、 、 ７菌 ０菌 ４ 菌株 ２ 、 ６
７菌株２ 均出现凝集现象。 ８ （ 塔城市 的菌株除了对庆大霉素 、 １ ） 头孢 曲松敏感 ， 对痢特灵 菌株２ 、 中度敏感外 ， 对其他药物全部耐药 ； 建议塔城市县市的猪 场治疗
结果分析： 玻板凝集试验 的结果与血凝试验的结果 ， 除菌杉 ５ 长
以外完全相 同。导致菌株５ 出现两种结果 的原 因最可能是在 ， 血
被污染。也有可能是其他因素引起的凝集。 （） ２ 额敏县的菌株除 了对庆大霉素、 头孢 曲松敏感 ， 氟哌酸 凝试验过程 中菌株５ 对
５ 总结
随着 肉食品价格 的不断升高、 国家鼓励政策的实施 ， 养猪业
结果分析 ： 其生化特性均符合大肠杆菌 的标准 ， 判定为大肠
４３动 物 实验 的 结 果（ ） ＿ 表２ 凡是５ 种红细胞都不凝集 的， 我们这里视为９ ７ － ８ｐ ｏ
不过 ， 也有可能没有提取到菌毛 ， 但这种可能性极小 ， 因为这３株 Ｏ
，
－
．
备 板 慧 好
，
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专
，
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ｆ ￣
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注 ：糖发 酵试 验 中 ：０ 表示 产酸 产气 ： ＋ 表示产 酸 ； 一 表示 不发 酵 ：０／ 一表 示延 缓发 酵
３ 蝴
杆菌 。
菌的生化培养实验质反应相同， 但有量的差异， １ 见表 。
表３ Ｋ抗原鉴定结果
先做血凝预试验 ，以能明显凝集红细胞供试液 的最高稀释 血清、滴待检抗原 ，再分别用不同的牙签将生理盐水 、 ８ Ｐ性 １ Ｋ ８Ｈ
倍数作为该黏附素抗原 的血凝效价 。 ６ Ｌ 取９ 孑板每孔加入５ Ｌ ０ 含 血清 、 待检抗原混匀 ， 置于３ ℃恒温培养３ ｉ ７ ｎ ｍ 观察结果。在此之
合” 注重环境卫生 ， 定期 消毒 ， 防止疫源传播扩散 的原则 ， 将疾病 消灭在摇篮里。
专业户交叉用药 ， 防止耐药菌 的产生。
４５ 鉴 定 结 果 及 结果 分 析 ．
４． ．１细茵鉴定仪鉴 定结果， ５ 三株均为大肠杆菌。
４ ． 血 凝 试验 鉴定 结 果见 袁 ３ ．２ ５ 。
细菌在提取菌毛和做 血 凝试验时， 所有的操作是完全相同的。
４ ． 琼扩 试验 鉴 定 结 果 ．３ ５
没有 出现沉淀线 ， 试验失败。 结果分析 ：这个试验我们做 的多次 ，具体失败原因没有找
也许是达不到相应的湿度 。 结果分析 ： 塔城市 、 额敏县 、 沙湾县所分离到 的细菌均有致 到。也许是琼脂有问题 ， 病 陛， 毒力强弱顺序为额敏县＞ 沙湾县＞ 塔城市 。
用药时选用庆大霉素 、 头孢曲松 。 中度敏感外对其他药物全部耐药 ；建议额敏县的猪场治疗用药 时选用庆大霉素 、 头孢 曲松。 （） ３ 沙湾县的菌株除 了对庆大霉素、 痢特灵敏感 ， 对氟哌酸 中 度敏感 外对其他药物全部 耐药 ；建议沙湾县 的猪场治疗用药时 选用庆大霉素、 痢特灵 。 总之 ， 三个县市分离到的菌株均对庆大霉素敏感 。 建议养猪