猪链球菌的分离与鉴定
猪链球菌的分离鉴定及药敏试验
２ ０ １ ７ 年
３ ３ 卷
第４ 期
基 础 科 学
猪链球 菌 的分 离鉴定及药 敏试验
李 娟
（ 蓬莱市动物卫 生监督所 ，山东蓬莱 ２ ６ ５ ６ ０ ０ ）
—３ ｄ 之 后 先 后 死 亡 ，而 另 外 的 三 只 猪 链 球 菌病 对 生 猪养 殖 危 害严 重 ， 虽 然 致 死率 并 不 高 ，但 是 状 变 化 ，其 中有 两 只在 接 种 ２ 则 表 现 出 了食 欲 的减 退 ，精 神 萎靡 不 振 ，在 下颌 部 位有 淋 巴结肿 对生 猪 的生 长发 育 尤为 不利 。
结 合 临床 的诊 断情 况 ， 以及 实 验 的具 体 情 况 ，可 以 确 诊 为 当地某 生 猪 养殖 场 的患 病 猪 的确 是感 染 了猪链 球 病 ，而 致 病 的病 原 就 是 链 球 菌 。这 种 菌 的显 著特 点就 是很 容 易 产 生 抗 药 性 ， 因 此 在治 疗 之前 一 定要 首 先 进行 药 敏试 验 ，等到 筛选 出敏 感 的药 物 们 的 生长 状 况 。 之 后 ，再 开始 进 行 治疗 ，才有 可 能 达到 预 期 的治疗 效 果 。 另外 ， １ ． ４ 生 化 试 验 需要 注意 的是 ，通过 药 敏试 验 发 现 ，这 种 菌对 头孢 菌 素 以及 青 霉 将 已经 分 离 的菌 血 清 肉汤 培 养物 分 别 进行 接 种 ，接 种 的生 化 素 和卡 那 霉 素及 其敏 感 ，而对 于 环丙 沙 星 和 阿莫西 林 等 则有 抗 药 培 养 基 是葡 萄 糖 、甘 露 醇 、蔗 糖 以及 麦 芽 糖 ，在 ３ ７ ℃ 的条 件下 进 性 。 行２ ４ ｈ 的培 养后 ，观察 它们 的 生化 反应 特性 。 目前 ，对 于链 球 菌 的分 离 方法 主 要有 两 种 ，分 别 是血 清 学试 １ ． ５ 药 敏 试 验 验 和生 化试 验 ，其 中第 一种 检 测 方法 比较简 单 ，但 是 不太 容 易 获 用 无 菌 的棉 签 蘸 取分 离 菌 的 肉汤 培养 物 后 ，将 其 涂 布 到琼 脂 取标 准 的 阳性 血 清 ；而第 二 种 方 法 目前 只能 对 菌群 进 行鉴 定 ，无 平 板 。 稍微 干 一些 后 ，用 不 带 菌 的镊 子 分别 夹 取各 种 药 敏 纸片 ， 法实 现 定 型鉴 定 。此 外 ，患 病 生猪 和 带 菌生 猪 是重 要 的传 染 源 。 将 其平 贴 到培 养基 的表 面 ，培 养２ ４ ｈ 以后 ，就抑 菌环 的大小 进行 观 为此 ，猪场 一 定要 有 严格 的防 疫制 度 和 消毒 制 度 ，一 旦发 现 ，就 察 和测 定 。具 体 的标 准就 是 如果 抑菌 环 的直径 超 过 了 １ ５ ｍｍ，就 是 要 果 断 采取 隔 离 ；对 于那 些 患 病致 死 的生 猪 一 定要 进 行无 害 化 的 高 度 敏感 ；如果 是 在 ｌ Ｏ ｍ ｍ￣ Ｕ １ ５ ａ ｒ ｍ的 话 ，则 是 中度 敏 感 ；如果 低 处理 ，有效 防止病 原 的扩 散 ，同 时对 被污 染 的 圈舍 以及用 具 等进 于１ ０ ｍ ｍ的话 ，则是 低度 敏感 ；如果 没有 抑 菌环 出现 的话 ，就是 不 行 严 格 的 消 毒 。 总 而 言 之 ，依 托 分 离 的菌 株 ，进 行 自家 苗 的制 敏感 。 备 ，可 以说 是 对猪 链 球菌 的预 防能 够 起 到积 极 的效 用 ，而 且 成本 １ ． ６ 动物实验将 低 ，值 得 广泛 推广 。 试 验用 的 １ ０ 只 健康 的小 白鼠 ，随机 分成 ２ 组 ，在 试验 组 小 白 鼠 猪 链 球 菌病 对 生猪 的生 长发 育 有着 至 关重 要 的 影 响 ，因此 ， 的腹 腔 上进 行 上述 肉汤 培养 物 的注 射 ，注 射 的剂 量为 每 只０ ． ５ ｍ ｌ ； 在 日常 的饲 养过 程 中 ，一 定 要 注意 观 察 ，一旦 发 现 ，果 断 采取 有 而对 照 组则 是注 射 无菌 的生 理盐 水 ，观 察发 病和 死亡 情 况 。 效 措 施 ，将 不 良影 响 降低 到 最低 。 目前 ，疫 苗接 种 可 以说 对 于这 种 疫 病 的预 防具 有 积极 的效 果 ，因此笔 者 建议 ，一 定要 在 技术 人 ２ 结果 ２ ． １ 涂 片 镜 检 员 的 指导 下 ，及 时 进行 接 种 ，切 实保 证 防 疫 的效 果 ，全 面 实现 生 将 病料 涂 片 ，经 革 兰 氏染 色 后镜 检 能 够看 到 呈 现 成对 排列 或 猪 养殖 的预 期 良好 经济 收益 。 者 短 链状 排 列 的革 兰 氏阳性 细菌 。 参考文献 ［ １ ］ 赵恒章 ，刘保 国 ，姜金庆 ，等 ． 致病性猪链 球菌 的分离鉴定及药 ２ ． ２ 分 离 培 养 在３ ７ ０ Ｃ 条 件 下进 行 ２ ４ ｈ 的培 养 之后 ，在 鲜 血 琼 脂 平板 上 有 小 敏试验［ Ｊ ］ ． 湖南农业 科学 ，２ ｏ ｏ ７ ，（ ４）：１ ７ ３ — １ ７ ５ ． 菌 落 形 成 ，呈 现 半透 明状 ，另外 ，需 要 注 意 的是 ，在外 层 有溶 血 ［ ２ 】 杨霞 ，卢 中华 ，张 红英 ，等 ． 猪 链球菌病病 原的生化分 群鉴定 和 环 的出 现 ，而 且 生长 状 况 良好 ；在普 通 的 琼脂 板 上 ，菌 落 则相 对 药敏试验【 Ｊ Ｊ ． 中国畜牧兽 医 ，２ ０ ０ ４ ，３ １（ ４ ）：３ ２ — ３ ３ ． 贫 瘠 ；而在 血 清 肉汤 中先是 均 匀 ，而后 是 浑浊 ，最后 有 沉 淀物 形 ［ ３ ］ 尹争艳 ． 猪链 球菌病病原流行病学研究 及防治措施［ Ｄ 】 ． 华 中农业 大 学 ．２ ０ ０ ７ ． 成 ，但 是并 没 有菌 膜 的形 成 。 ２ ． ３ 动 物 试 验 试 验 组 的５ 只兔 子 在 接种 ２—３ ｄ 的时 间后 ，呈 现 出 了不 同 的症
(完整版)猪链球菌的检测和鉴定技术
ATCC43765
+ + + + + + + + + + 4641427 （92%）
HA9801
+ + + + + + + + + + + 4651427 (80%)
ATCC35246
+ + + + + + + + + 0461607 (99.9%)
32210 化脓链球菌
0161415 (99.9%)
读数仪
比浊仪 电子加样枪
计算机 打印机
19
试条组成
试条种类：
24h常规鉴定试条
Ref.32400，ID32 E Ref.32100，ID32 GN Ref.32500，ID32 Staph Ref.32200，ID32 C
4h快速鉴定试条
Ref.32700，rapid ID32 E Ref.32300，rapid ID32 A Ref.32600，rapid ID32 Strep
粪肠球菌
7143711 （98.7%）
猪链球菌的API鉴定结果
TRE（海藻糖）、RAF（棉子糖）等几个的试验与API 菌种库有些不符，但 都属于SS2型或1型，数值分类
相对于双歧分类的优点
ATCC43765
HA9801
ATCC35246
32210 化脓链球菌
粪肠球菌
编码 4641427（92%） 4651427(80%) 0461607(99.9%)0161415(99.9%)7143711（98.7%）
一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究
一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究猪链球菌（Streptococcus suis）是一种致病菌，可以引起猪类及人类的疾病。
为了研究猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性，我们进行了以下的研究。
我们从猪体表或组织样本中分离出猪链球菌。
具体的分离方法可以是通过在富含葡萄糖、肉肠葡萄糖（Todd-Hewitt Broth）或大豆消化酶蛋白胨培养基中将样本接种，然后进行培养。
接种后，我们将培养物进行血液琼脂平板上进行培养。
猪链球菌在血液琼脂平板上形成典型的小而圆形的菌落，菌落周围有血红蛋白的降解，形成一个透明的溶血环。
通过观察菌落形态及溶血现象，我们可以初步判断是否分离到了猪链球菌。
我们通过生化试验对分离到的猪链球菌进行进一步的鉴定。
猪链球菌通常对溶血血球敏感，能够在溶血血液琼脂平板上形成溶血环。
猪链球菌在亮氨酸琼脂平板上能够形成胆固醇酰化沉淀，呈现黑色斑点。
猪链球菌还可以产生沉淀酸，对甘露糖进行发酵。
通过这些生化试验，我们可以更加准确地鉴定出猪链球菌。
我们对猪链球菌进行了生物学特性的研究。
猪链球菌是一种革兰氏阳性球菌，可以形成成对或链状排列。
它是一种革兰氏阳性球菌，不产生芽胞。
猪链球菌在37℃下能够生长，并且可以在富含葡萄糖的寒冷环境中长期存活。
猪链球菌通常具有多重药物耐药性，对常用的抗生素如青霉素和四环素等有抗药性。
猪链球菌还可以产生多种毒素，如纤毛毒素和溶血素等，这可以解释其对猪类及人类的致病性。
猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性的研究对于了解猪链球菌的致病机制、寻找有效的防治方法具有重要意义。
通过分离鉴定可以准确判断出猪链球菌的存在，进一步的生化试验则可以更加详细地鉴定出猪链球菌。
猪链球菌的生物学特性研究可以为寻找抗菌药物或疫苗的开发提供重要参考。
一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究
一株猪链球菌的分离鉴定及其生物学特性研究猪链球菌是一种常见的猪源性病原菌，对猪群的健康和猪肉品质有重要影响。
本文将介绍一株猪链球菌的分离鉴定和其生物学特性研究。
1. 分离鉴定从猪群中分离出猪链球菌需要以下步骤：1.1 细菌分离取病猪的淋巴结、脑脊髓液或其他疑似感染部位，进行细菌分离。
将样品切碎悬浮于生理盐水中，进行稀释，然后接种在选择性富养基上。
在血寒情况下，猪链球菌会产生特征性的红色菌落。
1.2 分离纯化从富养基中挑选红色菌落进行分离纯化。
将菌落接种在琼脂平板上，培养后选择几个单独的菌落进行继续培养，直至获得纯净菌株。
1.3 鉴定进行相关鉴定测试，确认所分离的菌株是猪链球菌。
2. 生物学特性研究对分离到的猪链球菌进行生物学特性研究有助于了解其病原性和抗生素耐药性等方面的特点。
2.1 形态学特征猪链球菌是革兰氏阳性菌，呈圆形或椭圆形。
在显微镜下观察，猪链球菌呈串珠状排列，类似珠链。
菌落呈灰白色，质地松软，有明显的凹陷。
2.2 生理生化特性猪链球菌是厌氧菌，对氧气敏感。
它能进行无氧发酵代谢，产生乳酸和醒酸。
在细菌培养基中加入卡伯醇阳性试验可以测定猪链球菌的β-溶血素产生情况。
2.3 病原性猪链球菌是一种重要的猪源性病原菌，可以引起猪群的链球菌病。
具体症状包括发热、呼吸困难、食欲减退等。
猪链球菌可以通过呼吸道、皮肤和消化道等途径传播，尤其在密集饲养条件下传播更为广泛。
2.4 抗生素耐药性猪链球菌在抗生素治疗中的耐药性是研究重点。
通过药敏试验可以观察猪链球菌对不同抗生素的敏感性。
目前，一些猪链球菌菌株出现了对青霉素、大环内酯类、林可霉素和四环素等抗生素的耐药现象。
本文简要介绍了一株猪链球菌的分离鉴定和生物学特性研究。
通过对猪链球菌的了解，可以更好地预防和控制链球菌病的传播，并提供针对该细菌的有效治疗方法。
猪链球菌的实验室分离与鉴定
将预处理的样品接种到选择的培养基上，在适宜的温度和环境下进行培养。观察 菌落的形态、颜色等特征进行初步鉴定，并进行生化试验、血清学试验等进一步 鉴定。
03
猪链球菌的鉴定
形态学鉴定
革兰氏染色
猪链球菌为革兰氏阳性菌，呈球形或 卵圆形，常呈链状排列。
培养特性
在血液琼脂平板上培养，形成圆形、 隆起、光滑、湿润的菌落，周围有完 全透明的溶血环。
生化鉴定
01
02
03
触酶试验
猪链球菌为阳性，可与其 他链球菌相鉴别。
氧化酶试验
猪链球菌为阴性，可与其 他链球菌相鉴别。
糖发酵试验
猪链球菌能发酵多种糖类 ，如葡萄糖、果糖、乳糖 等，可与其他链球菌相鉴 别。
分子生物学鉴定
01
16S rRNA基因ຫໍສະໝຸດ 列分析通过对猪链球菌的16S rRNA基因进行扩增和测序，可以确定其属、种
及亚种水平上的分类地位。
02
多位点序列分析（MLSA）
通过对多个基因位点的序列进行分析，可以更准确地鉴定猪链球菌的种
和亚种。
03
分子分型技术
如脉冲场凝胶电泳（PFGE）、多位点酶电泳（MLEE）等，可以用于研
究猪链球菌的分子流行病学特征，追踪其传播途径和溯源。
04
猪链球菌的致病性研究
致病机制研究
入侵机制
猪链球菌通过何种方式侵入机体，如通过呼吸道、消 化道等途径。
毒素作用
猪链球菌产生的毒素如何引起疾病，如溶血素、细胞 外酶等的作用。
免疫逃逸
猪链球菌如何逃避机体的免疫系统，如通过荚膜、鞭 毛等机制。
临床症状与病理变化
临床症状
猪链球菌感染后，猪可能出现的临床症状，如发热、咳嗽、 呼吸困难等。
猪链球菌的分离与鉴定
２ ． １ ． ６ 试验动 物
２ ． ２ 方法
健康 小 白鼠
（ ３ ０ ３ ５ ｇ ）５ ０只 ， 购
自青 岛农 业大学 动物科技 学院 ２ ． ２ ． １ 病原 分 离 将所 采病 料分 别 涂 片 ．革 兰 氏染
１ 猪 场 发 病 情 况
２ ０ １ ２年 ４ 月 ，山东省 临朐 县某 生 猪繁 育 场仔 猪 流行 关 节 炎 及败 血 症 ．发病 猪 多 为 ２ － ６周 龄 仔 猪 。无 菌采取 病猪 的关节液 、 肝、 脾、 肺 及肠 系膜淋 巴 结， 经 实验 室分离鉴 定 ， 证 实为 Ｉ Ｉ型猪链球 菌 。
第 ３ ４卷第 ８ 期
２ ０ １ ３年 ０ ８ 月
湖 北 畜 牧 兽 医
Ｈｕ ｂ ｅ ｉ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ａｎ ｉ ｍａ ｌ ａ ｎ ｄ Ｖｅ ｔ ｅ ｉ ｆ ｎ ａ ￣ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
Ｖｏ １ ． ３ ４ Ｎｏ ．０ ８
Ａｕｇ ｕｓ ｔ ２ ０ １ ３
（ ２ ） １ １ １ １ 清学鉴定 。 将 ３ ＃ 、 ８ ＃ 、 １ ３ ＃ 、 １ ５ ＃菌经血 清 肉 汤培养 ８ ｈ ，通 过 ３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ０ ｍｉ ｎ ． Ｐ Ｂ Ｓ洗
涤 ２次 ． 用ｐ Ｈ ７ ． ２的 ０ ． ０ １ ｍｏ １ ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ制 成 ｈ１ ０ １ ：
剂二厂 ， 批号为 ２ ０ １ ０ ２ ０ １ ２年不等
种疾 病 的病原 菌之 一 ．该病 原 菌在养 猪 业发 达 国家
２ ． １ ． ３ 培养基 绵羊鲜血平板 、匹克氏增菌液 、 １ Ｏ 如 美 、英 、荷 兰及 爱 尔 兰 等 国常 有 发 生 。我 国 于 ｍ ｌ ／ Ｌ猪血清 肉汤及各 种糖培养 基按常规 方法制备 １ ９ ５ ８年 就 有 猪 链 球 菌 病 的报 道 ． １ ９ ７ ６ 年 我 国南 方 ２ ． １ ． ４ 试验抗 原 猪链球 菌诊 断血清 与平板凝 集抗
猪链球菌病的实验室鉴定及防治措施
猪链球菌病的实验室鉴定及防治措施猪链球菌病是一种由猪链球菌（Streptococcus suis）引起的猪类常见疾病，属于致病性较强的细菌性感染。
本文将介绍猪链球菌病的实验室鉴定方法以及预防和治疗的措施。
实验室鉴定方法：1. 细菌分离：从病猪体内采集疑似感染的组织样本，如腹膜、淋巴结等，通过无菌操作将样本划取到含有适宜培养基的培养物中，进行培养。
在37℃恒温培养箱中，培养24小时至48小时，观察培养物中是否有菌落形成。
2. 形态鉴定：提取培养物中的菌落，通过显微镜观察菌落形态特征。
猪链球菌为革兰氏阳性球菌，单个菌落呈圆形或椭圆形，表面光滑，边缘整齐。
3. 生理生化特性鉴定：通过一系列生理生化测试，如需氧性/厌氧性、氧需求量、产气等，来判断菌株的生理特性。
猪链球菌在氧气存在的情况下生长较好，能产生酸和气体，同时产生亚硝酸盐。
4. 血清学鉴定：通过血清学方法，如凝集试验或血清诊断试纸片，鉴定猪链球菌的血清学特性。
猪链球菌有多个血清型，主要是血清型2和血清型9。
预防和治疗措施：1. 疫苗接种：猪链球菌病的预防首选疫苗接种，有效提高猪对该病的免疫力。
有条件的养殖场可选择聚合糖疫苗或高效价灭活疫苗，定期进行疫苗接种。
2. 环境卫生管理：保持养殖环境的卫生与清洁，定期清理猪圈和养殖设备，消毒器具和场地，降低猪链球菌的滋生和传播。
3. 强化饲养管理：提高猪场饲养管理水平，保证猪只的营养、健康与免疫状态。
合理配制饲料，增加猪只的抗病能力，提高免疫功能。
4. 临床治疗：一旦发生猪链球菌病，要及时进行诊断和治疗。
在兽医指导下，使用抗生素进行治疗，以控制和消除感染。
总结：猪链球菌病是一种致病性较强的细菌感染疾病，造成了很大的经济损失。
通过实验室的鉴定方法可以准确诊断该病，采取相应的预防和治疗措施能有效控制猪链球菌病的传播，并保障猪场的养殖效益和健康发展。
猪链球菌病的实验室鉴定及防治措施
猪链球菌病的实验室鉴定及防治措施猪链球菌病是由猪链球菌（Streptococcus suis）引起的一种主要感染猪的细菌性疾病。
猪链球菌可以引起多种疾病，如败血症、脑膜炎、关节炎和呼吸道感染等。
病猪会出现发热、抖颤、呼吸困难等症状，严重时甚至导致死亡。
为了及时发现和防治猪链球菌病，需要进行实验室鉴定和采取相应的防治措施。
一、实验室鉴定：1. 细菌分离：从病猪的鼻腔、扁桃体、肺部等采集样本，用无菌方法接种于适当的培养基上，如血琼脂、巴氏琼脂等，进行细菌分离。
2. 生化试验：鉴定分离到的菌株是否为猪链球菌。
常用生化试验包括氧化代谢、糖发酵、羟苄青霉素敏感试验等。
3. 血清学检测：通过血清学检测可以鉴定猪链球菌的血清型。
常用的方法有凝集反应、凝集抑制试验、间接补体结合试验等。
二、防治措施：1. 动物管理：加强猪场的卫生管理，保持猪舍的清洁。
隔离病猪，避免与健康猪接触。
注意猪场的通风、消毒等措施，防止感染传播。
2. 疫苗接种：可使用猪链球菌疫苗进行预防接种，提高猪的免疫力，减少疾病发生。
疫苗的接种程序和剂量需按照疫苗使用说明书进行操作。
3. 抗菌药物治疗：对于已感染的病猪，可使用合适的抗菌药物进行治疗。
常用的治疗药物包括青霉素、链霉素、氯霉素等。
但要注意合理使用抗菌药物，避免滥用和产生耐药菌株。
4. 淘汰病猪：对于病情严重、难以治疗的猪，应及时淘汰，以防止疾病的继续传播和扩散。
猪链球菌病的实验室鉴定和防治措施对于疾病的控制和预防起着重要作用。
通过及时鉴定和采取适当的防治措施，可以有效控制和减少猪链球菌病的发生和传播，保障猪群的健康和养殖业的可持续发展。
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猪链球菌的分离与鉴定
猪链球菌（Streptococcus suis）是引起猪链球菌病的病原菌，能感染猪只，特别是幼猪。
下面是猪链球菌的分离和鉴定方法：
1. 分离：
- 从疑似患有猪链球菌病的猪只或组织样品中采集样品。
- 将样品接种到适宜的富营养培养基上，如含有血液的琼脂平板或在琼脂深培养基上。
- 在适当的条件下培养，如在37°C下孵育一夜。
- 观察培养基上的生长情况，猪链球菌通常呈灰白色圆形菌落。
2. 纯化：
- 选取疑似猪链球菌的单个菌落，用无菌线形勺或钝尖的无菌环划取。
- 将菌落转移到含有猪链球菌病人血清的琼脂平板上，进行纯化。
- 用琼脂深培养基进行进一步的纯化。
3. 形态和生理鉴定：
- 使用显微镜观察猪链球菌的形态特征，如形状、大小和排列方式。
- 进行革兰染色，猪链球菌显示革兰阳性，表现为圆形或椭圆形细胞。
- 进行氧需要实验，猪链球菌为厌氧菌，不需要氧气进行生长。
- 进行糖发酵试验，猪链球菌通常能产生酸和气体。
4. 生化鉴定：
- 进行羟吲哚试验，猪链球菌通常产生羟吲哚。
- 进行尿素酶试验，猪链球菌通常不产生尿素酶。
- 进行乳糖巴氏杆菌液功效和TM产品试验，猪链球菌通常不能生长。
5. 分子鉴定：
- 使用PCR技术进行特异性扩增，引物可以选择猪链球菌特异性基因，如16S rRNA基因等。
- 进行凝胶电泳分析，观察PCR产物的大小和特异性。
通过以上步骤的分离和鉴定，可以确认是否存在猪链球菌，并确保纯化的菌株为猪链球菌，以便进一步研究和处理。