ELISA、MAIA、CLIA和TRFIA试剂盒质量标准探讨
ELISA技术的质量控制
ELISA技术的质量控制标签：ELISA 分类：临床工作2007-07—25 15：15ELISA简介：酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）于1971年分别由瑞典学者和荷兰学者报道，开创了运用酶标记免疫技术进行液体标本中微量物质测定的实验方法.基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面，测定时，将受检样品（含待测抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物,经洗涤去除反应液中其他物质，加入酶反应底物后，在酶的催化下变为有色物质，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中被测物质量。
此方法具有高度的敏感性和特异性，酶标试剂比较稳定,且易于自动化，因此应用非常广泛,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可使用，我室开展的肝炎病原学检测、HIV抗体检测、梅毒抗体检测等都使用ELISA方法。
ELISA质量保证是一个复杂的过程,许多重要的环节都影响到检测的质量。
一、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法(HBeAb，HBcAb 等采用）因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响,结果重复性较差，质量较难控制。
二、试剂因素不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量完全一致,即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。
严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程，并且能够保证结果的稳定性；对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，避免反复冻融造成试剂的失效。
试剂使用前必须平衡至室温，否则会影响检测下限。
未用完的室内质控品及本次不需使用的试剂应密封并及时放回冰箱保存。
三、样本因素标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等,后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等.其中外源性干扰因素是我们在检测过程中可以避免也是必须避免的因素，而避免内源性因素的干扰则主要通过选择合适的试剂盒。
不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果评价论文
不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价分析【中图分类号】r446【文献标识码】a【文章编号】1672－3783(2011)06－0275－01【摘要】目的：探讨酶联免疫吸附试验（elisa）、时间分辨免疫荧光法(trfia)、化学发光法(clia)三种乙型肝炎血清标志物检测方法的精密度和检测灵敏度。
方法：用酶联免疫吸附试验、时间分辨免疫荧光法、化学发光法分别测定经乙型肝炎病毒dna定量检测阳性患者的hbsag水平，分析三种方法的检测灵敏度和和精密度。
结果：化学发光法测定灵敏度较酶联免疫吸附试验法和时间分辨免疫荧光法测定灵敏度高，三种方法用于低浓度hbsag检测时，化学发光法的阳性检出率较酶联免疫吸附试验和时间分辨免疫荧光法均高，差异明显，p＜0.05，差异具有统计学意义。
结论：化学发光法法具有检测灵敏度高、对hbsag阳性检出率高的特点，其优势尤其在检测低浓度hbsag时体现更充分，值得临床作为低浓度hbsag 检测时推广应用。
【关键词】乙型肝炎血清标志物；酶联免疫吸附试验（elisa）；时间分辨免疫荧光法(trfia)；化学发光法(clia)临床上常用乙肝血清标志物作为诊断乙肝病毒感染与否的诊断标准，本资料采用elisa（酶联免疫吸附试验）、 (trfia)、 (clia)三种方法对经乙型肝炎病毒(hbv)dna定量检测的阳性患者的hbsag 水平进行检测，分析三种方法的检测灵敏度和精密度。
1 对象和方法1.1对象临床样本先经乙肝病毒 dna定量聚合酶链反应方法进行检测呈阳性，然后采用电化学光反应检测方法遴选下列模式: 1~50hbsag coi临床样本30例, 小于1hbsag coi的临床样本30例,其中男26例,女34例，患者年龄从18岁至55岁不等。
1.2检验方法按照试剂盒说明书进行酶联免疫吸附试验测定，按照elecsys2010全自动电化学发光仪和配套试、酶标仪等仪器设备使用说明书及检验科相关准操作程序进行样品检测。
乙型肝炎病毒血清学检验中CLIA与ELISA的应用及准确性分析
乙型肝炎病毒血清学检验中 CLIA与ELISA的应用及准确性分析摘要：目的：分析乙型肝炎病毒（HBV）血清学检验中化学发光免疫分析技术（CLIA）与酶联免疫吸附试验（ELISA）的应用及准确性。
方法：研究对象时本院患者，选取时间为2020年2月~2021年2月，研究中所选患者均接受HBV血清学检验，患者例数50。
本组患者分别进行CLIA与ELISA，分析两种方法的应用价值和准确性。
结果：CLIA法HBsAg、HBeAb、HBeAg检出率高于ELISA法；CLIA法0.06~0.10、0.11~0.50IU/ml水平检出率高于ELISA法（P＜0.05）；CLIA法敏感性、准确性高于ELISA法。
结论：对于感染HBV患者，病毒血清检验工作属于首选诊断方式，CLIA法相比于ELISA法准确性更高，应用价值明显。
关键词：乙型肝炎病毒；血清学检验；CLIA；ELISA乙型肝炎属于临床常见传染疾病，病因通常是感染乙型肝炎病毒（HBV），当患者机体携带过多的相关病毒，其中隐藏的HBV病毒就会被激活，产生明显破坏效果，患者因此也会发生乙肝疾病[1]。
乙肝疾病需要积极规范治疗，伴随疾病进展，疾病会逐渐演变成肝硬化，肝癌以及肝脏衰竭，严重影响患者身心健康和生存质量，病死率较高。
当出现病毒感染后，人体中免疫系统会对此产生特异性免疫反应，进行血清学检验能够了解患者机体中病毒含量，从而诊断疾病，指导治疗方案，评估预后等。
1资料与方法1.1临床资料研究对象时本院患者，选取时间为2020年2月~2021年2月，研究中所选患者均接受HBV血清学检验，患者例数50。
本组患者中，男性29例，占比58%，女性21例，占比42%。
年龄范围在25~74岁之间，年龄均值为（52.34±6.38）岁。
本研究所选患者均在了解检查内容后自愿参与研究，同时签署医学研究协议，研究中各操作符合伦理会标准。
1.2方法1.2.1仪器与试剂全自动化学发光免疫分析仪（罗氏cobas e 801）；酶联免疫检测仪（赛默飞Thermo Scientific MK3）；CLIA试剂盒（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；ELISA试剂盒（上海玉博生物科技有限公司）。
CLIA和ELISA检测血清HBsAg及HBsAb的结果比较
CLIA和ELISA检测血清HBsAg及HBsAb的结果比较许文;邝琳;张振林【摘要】目的：比较化学发光免疫分析(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg及HBsAb的结果。
方法采用CLIA法和ELISA法测定定值血清中的HBsAg和HBsAb，并对两种结果进行比较和分析。
结果测定HBsAg时，ELISA法的批内CV：1IU/ml为9.6%，2IU/ml为7.3%，批间CV：1IU /ml为17.8%，2IU/ml为15.1%，灵敏度为0.25IU/ml，CLIA法的批内CV：1IU/ml为2.33%，2IU /ml为1.07%，批间CV：1IU /ml为6.57%，2IU/ml为3.78%，灵敏度为0.063IU/ml。
HBsAb测定时，ELISA法的批内CV：10mIU/ml为11.8%，20mIU/ml为8.7%，批间CV：10mIU/ml为18.6%，20mIU/ml为15.9%，灵敏度为10mIU/ml，CLIA法的批内CV：10mIU/ml为4.79%，20mIU/ml为3.52%，批间CV：10mIU/ml为7.58%，20mIU/ml为6.13%，灵敏度为2.5mIU/ml。
结论 ELISA法敏感度相对低，精密度差；CLIA法灵敏度高，精密度好，且自动化程度高，检测更快速，更适合于临床。
【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】2页(P1467-1468)【关键词】乙肝表面抗原;乙肝表面抗体;酶联免疫吸附试验;化学发光免疫分析【作者】许文;邝琳;张振林【作者单位】珠海市人民医院检验科，广东珠海519000;珠海市人民医院检验科，广东珠海 519000;珠海市人民医院检验科，广东珠海 519000【正文语种】中文【中图分类】R446.1目前，我国大多数医院采用ELISA法检测血清HBsAb和HBsAg，该法虽简便，但ELISA法重复性差，灵敏度低，且当标本中的HBsAg浓度太低时，因灵敏度低而出现假阴性，容易造成漏检，当浓度过高时会因钩状效应(Hook effect)出现假阴性，因此正有逐步被新方法所取代的趋势。
几种不同方法学检测胃蛋白酶原_临床应用探讨_闫敏
Clinical application of three different methods to the detection of
Pepsinogen I and Pepsinogen II
YAN Min1 ，YAN Hualin2 ，LI Ming2 （ 1． Department of Clinical Laboratory，105 Hospital of PLA，Hefei，Anhui 230031，China；
成非胃癌组。 1． 3 方法 采集受试者空腹静脉血 5 mL，离心分 离血清后置 － 20℃ 保存待测。检测过程中严格按 照三个不同方法学试剂说明书及仪器说明书要求 进行 操 作，在 测 试 过 程 均 进 行 质 控，上 海 透 景 试 剂 采用上海透景提供的质控品，芬兰 Biohit 试剂使用 试剂盒内配套质控品，Abbott 试剂盒 Abbott 公司提 供的 PGI，PGII 质控品，要求质控品测值均应在其提 供的参考范围内。 1． 4 统计学方法 用 Microsoft Excel2010 与 IBM SPSS 22 进行图形处理与数据统计分析。使用对于 正态分布计量数据两组间比较用独立样本 t 检验； 多组间比较用方差分析； 两两比较采用 SNK-q 检验 方法。对偏态分布计量数据，两组间比较用 MannWhitney U 检验； 多组间比较采用 Kruskal-Wallis H 检验。通过方法学比对比较三种方法测值的一致 性，对不同方法学间进行相关分析。使用 SPSS 分 析 PGI、PGII 以及 PGＲ 对胃癌诊断的 ＲOC 曲线，分 析 ＲOC 曲线面积，并通过 ＲOC 曲线确定各个指标 最佳临界值，通过确定的临界值分析三种方法各自 灵敏度，特 异 度，阳 性 预 测 值 以 及 阴 性 预 测 值。 所 有检验均以 P ＜ 0． 05 为差异有统计学意义。 2 结果 2． 1 三种方法检测不同组别样本结果分析 经三 种不同方法对 PGI、PGII 以及 PGＲ 检测结果统计见 表 1。 2． 2 三种方法学检测结果分析 对三种方法测试 得到的 PGI、PGII 及 PGＲ 结 果 进 行 两 两 方 法 学 比 对，绘制散 点 图，并 拟 合 两 方 法 学 之 间 的 直 线 方 程 （ 图 1） ，分析方法学间相关性（ 表 1） 。
ELISA检测试剂的评价方法共3篇
ELISA检测试剂的评价方法共3篇ELISA检测试剂的评价方法1ELISA检测是一种常见的生化实验技术，在医药、生物科技、食品安全等领域具有广泛的应用。
为了确保检测结果的准确性和可重复性，评价ELISA检测试剂的质量至关重要。
本文将介绍ELISA检测试剂的评价方法。
ELISA检测技术是一种通过特异性结合测定物质的抗体来检测一种特定分子的技术。
ELISA检测用于蛋白质检测的技术最为常见，该技术可用于定量和定性检测，同时还可用于特定抗体的筛选。
ELISA检测中使用的试剂通常包括抗体、标记物、溶液、底物等，这些试剂的质量直接影响ELISA检测的准确性和可重复性。
以下是ELISA检测试剂的评价方法：一、抗体质量评价ELISA检测中使用的抗体质量直接影响试剂的稳定性、灵敏度、准确性和特异性。
评价抗体质量的方法包括：1. 抗体中和试验：将阴性样本加入含有一定浓度规格的抗体试剂中，观察是否能够完全中和抗体活性，以确定抗体的含量和活性。
2. 交叉反应检测：检测抗体与其他物质的交叉反应，以确保其特异性。
3. 敏感度评价：使用正样本连续稀释，评价抗体的灵敏度。
二、标记物质质量评价ELISA检测中的标记物质通常为酶、放射性同位素、荧光染料等。
标记物质的质量评价包括：1. 活性评价：采用试剂盒相同的操作步骤，使用标准浓度的标记物测试，观察标记物质的活性。
2. 稳定性检测：测定标记物的稳定性和保存期限，以确定其适宜使用的时间。
三、溶液质量评价ELISA检测中使用的溶液包括缓冲液、洗涤液、稀释液等。
溶液质量评价包括：1. pH值测定：测定缓冲液的pH值，以确保其适当的pH值范围。
2. 无菌性检测：对洗涤液和其他溶液进行无菌性检测，以确保检测结果的准确性。
3. 稳定性检测：测定溶液的稳定性和保存期限，以确定其适宜使用的时间。
四、保存和运输质量评价保存和运输过程中的温度和湿度等环境因素会影响试剂盒的质量。
评价保存和运输质量的方法包括：1. 温度和湿度的监测：检测温度和湿度等环境因素，以保证试剂盒在保存和运输过程中的质量。
ELISA实验的质量控制
ELISA实验的质量控制酶联免疫吸附试验（ELISA）是目前应用最广泛、最基础的实验项目之一，可用于甲肝、乙肝、丙肝、甲状腺功能、肿瘤标志物等多种项目的检测。
随着医疗体制改革的不断深入和“举证责任倒置”的实施，患者对医疗质量的关注不断加大，检验报告作为“证据”，无论是对患者、对医院、还是对检验人员自身，都起着至关重要的作用。
因此，检验结果的质量保证就显得尤为重要。
质量保证的核心是质量控制，它不仅包括分析中严格遵守操作规程，严格质量控制，而且包括分析前质量控制和分析后质量控制。
1 分析前质量控制1.1申请单的书写名字清楚、项目齐全，临床诊断最重要，这也是分析后质控所需要的。
1.2病人的准备为避免一些生理因素如年龄、性别、妊娠、月经期等因素对实验结果的错误解释，应要求病人如实反映实际情况，积极配合；采集标本前要求病人处于休息状态，剧烈运动后可使标本中某些成分升高；要求病人空腹采血，以避免饮食对实验结果的影响；尽量在治疗前或停药2天后采集标本，以避免药物的干扰。
1.3标本的采集和处理分析前质量控制的核心是标本的质量。
首先要严格执行标本查对制度，避免标本的采集错误；采血时避免溶血，采血后注明时间，2~8℃保存2天，－20℃保存1个月；轻度溶血、中度脂血的标本不影响检测，而含有纤维蛋白的标本，重度溶血、脂血、黄疸的标本可影响结果；血清标本一定要离心充分，避免纤维蛋白对实验结果的影响，血清标本还要避免反复冻融。
2 分析中质量控制2.1加样要求使用正确的加样技术，使移液器的吸头稍高于孔的平面，不能触及微孔板或孔中的液体，以避免从一孔带至另一孔。
加完标本再加酶试剂时避免溅出孔外。
2.2孵育孵育时要贴封片或放入含水湿孵育盒内，避免液体蒸发及样本和试剂干附于孔壁，难于彻底清洗。
孵育时间要准确，时间过短，特异性结合不够，得值偏低；时间过长，非特异性结合物紧附于反应孔，难以清洗干净，得值偏高。
2.3洗板聚苯乙烯微孔板的彻底清洗是ELISA实验的关键。
不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价探讨
不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价探讨目的探讨不同方法学及试剂检测乙型肝炎血清标志物的一致性。
方法选取笔者所在医院经罗氏ECLIA检测证实的100例乙型肝炎病毒（HBV）感染者以及50例健康体检者的血清，选用ELISA、TRFIA和ECLIA三种方法对乙型肝炎血清标志物进行检测。
结果在检测乙型肝炎血清标志物方面三种方法的结果具有高度以上的一致性，且ECLIA法在检测中敏感性最高。
结论当前实验室使用的乙型肝炎血清标志物检测方法均具有较高的一致性，有利于实验室之间进行结果互认。
标签：乙型肝炎；血清标志物；检测；评价当前我国乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的携带率约为10%左右，临床上用于乙型肝炎病毒血清免疫学标志物（HBV-M）检测的方法很多，国内传统检测手段主要使用酶联免疫吸附法（ELISA），近年来诸如时间分辨荧光分析法（TRFIA）、微粒子酶免疫分析法（MEIA）以及电化学发光法（ECLIA）等新式检测手段也逐渐应用于实验室检测中。
本次试验选用ELISA、TRFIA和ECLIA 三种方法对乙型肝炎血清标志物进行检测，旨在对不同方法学检测结果之间的一致性进行评价。
1 资料与方法1.1 研究对象选取笔者所在医院经罗氏ECLIA检测证实的100例乙型肝炎病毒（HBV）感染者的血清，患者均符合慢性乙型肝炎诊断标准［1］，其中男65例，女35例；年龄16～50岁；另选取50例健康体检者的血清。
1.2 方法1.2.1 仪器试剂ELISA检测选用ALISEI全自动酶标仪（意大利）以及科华生物试剂盒（上海）；TRFIA检测选用WALLAC DELFIA-1235时间分辨免疫荧光分析仪（芬兰）和新波生物试剂盒（上海）；ECLIA检测选用罗氏E601电化学发光免疫分析仪（德国）及其标准配置试剂。
1.2.2 检测方法检测操作均按照仪器操作说明书以及试剂盒说明书进行。
本组待检血清样本均用3种方法进行检测，每次检测时均带阴、阳性质控（质控来源为上海市临床检验中心以及罗氏公司）。
四种ELISA试剂盒质量验证分析
单 ，每盒均有防伪标签 ，均在有效期内。进 口移 液器、Ｔ Ｃ Ｎ洗板机 、上海 雷勃 Ｍ ３酶标 仪、 ＥＡ Ｋ 上海路达 Ｈ Ａ一 Ｈ ４型恒温孵育箱 等。仪器都经 过 计量 部 门检定 。 １２ 方法 标准参考品为中国药品生物制品检 ． 定 所提 供 的标准 血清 盘 （ ａｅ） ＢＡ参考 品 ， Ｐｎ１ ：Ｈ ｓ 抗一 Ｃ Ｈ Ｖ试剂 国家标准 品，ＨＶ抗 体 国家参考 Ｉ 品 ，梅 毒螺 旋体 抗体诊 断试 剂参 考 品。严格 按各
合则报告符合 ；复查结果仍不 符合则报告不符 合 ；有 ｌ 项不符合即报告不符合 。
２ 结果
２ １ ２０ ２０ ． ０６～ ０ ８年 Ｅ ＩＡ试剂 盒 进 货质 量 验证 ＬＳ ９ 次 ，符 合 ９ ８批 ２批 次 ，总 体 符 合 率 为 ９ ．％ 。 ３９ 低于 国家 批 准 合 格 率 （０ ％ ） １０ ，差 异 有 统 计 学
ＥＩ Ｌ Ａ是指 以酶作为标记物、以抗原和抗体 Ｓ
之间免 疫结 合反 应 为基 础 的 固相 吸 附测 定 方 法 ，
１１ 材料和仪器 ．
黔南州 中心血站 ２０ ２０ ０６— ０ ８
年 所购 进 的 ＨＢＡ 、抗 一Ｈ Ｖ、抗 一ＨＶ和梅 毒 ｓｇ Ｃ Ｉ
由于其试剂制备容易掌握 、实验操作简便、结果 判 断较 客观 ，易记 录 ，试 剂对 环境 污染 小 ，无 需
意义 （ ４ ３ ，Ｐ＜ ． ５ 。 Ｘ ＝ ．０ ０ ０ ）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
旋体抗体 Ｅ Ｉ ＬＳ Ａ试 剂盒进货 质量验证情况分析
如下 。
１ 材料 和方 法
表 １ ２０ ２ ０ ０ ６～ ０８年黔南州中心血 站 Ｅ ＩＡ试剂盒进货质量验证情况统计 ＬＳ
elisa 评估 标准
elisa 评估标准
ELISA试剂盒评估标准如下：
1.稳定性：指在规定条件下经过一段时间的保存，仍能达到相应的性能指标。
2.反应灵敏度：指单位浓度的测定物反应所产生的反应度，反应度越高，灵敏度越大。
3.精密度：指结果间相互符合的一致程度。
4.准确度：指与参考测度程序结果的一致性。
5.线性范围：指在规定的重复性和线性偏差下，测得浓度或活性值之间比例的关系。
6.基质效应：指样品中被分析物以外的组分，常常对分析物的测定过程有显著干扰，还会影响分析结果的
准确性。
1。