总膳食纤维国标测定方法 符合 AC等
膳食纤维测定方法
膳食纤维的测定方法【摘要】膳食纤维被称为人体的第七营养素，对维持人体健康具有重要作用。
膳食纤维通过发酵产物短链脂肪酸和对肠道菌群的调节作用从而影响肠道健康，本文对膳食纤维的测定方法进行了综述。
【关键词】膳食纤维；定义；测定膳食纤维已被确认为与传统的六大营养素并列的“第七营养素”，对维持人体健康具有重要的生理作用。
膳食纤维的理化特性概括起来是膨胀作用、持水能力、胶体形成、离子交换、改善胃肠微生物菌落和产生低热量等。
这些特性产生的生理作用如下：使人产生饱腹感并抑制进食，从而预防肥胖；润肠通便，防治肠道疾病和便秘；调控血清胆固醇，降血压，防治冠状动脉硬化，胆石症和预防心脑血管疾病；降血糖，防治糖尿病等。
目前，结肠癌、炎症性肠炎和其他结肠紊乱疾病已经严重影响身体健康。
膳食纤维为肠道微生物生长提供均衡的能量和营养，这是维持结肠生态系统平衡所必需的，另外，膳食纤维的发酵，特别是丁酸发酵，有利于结肠健康。
目前国内外业已研究开发的膳食纤维共有6大类约30余种，其中实际生产和应用的不超过10种。
一、膳食纤维膳食纤维（dietary fiber，df）被认为是食物中不被人体胃肠道消化酶水解，但能被肠道微生物消化的物质，特别是植物成分。
膳食纤维包括非淀粉多糖，如纤维素、半纤维素、树胶、果胶，以及木质素、抗性糊精和抗性淀粉。
二、膳食纤维的测定世界卫生组织建议的总膳食纤维摄入量下限为每人每天27.0克，上限为每人每天40.0克。
由此可见：膳食纤维检测结果的表示及产品标签标示等方面的问题应该作为膳食纤维研究中的又一个重要方面，而检测结果是由膳食纤维的检测方法和检测标准决定的，因此有必要建立统一的检测方法和标准。
df的不同测定方法因其测定原理不同结果差异较大。
自20世纪60年代初以来，分析化学家们建立起大量的检测方法，具有代表性的几种方法为非酶重量法、酶-重量和酶-化学法。
（1）非酶重量法。
非酶重量法又称粗纤维测定法，由einhof于1801-1809年建立。
膳食纤维含量测定方法
酶-重量法1.原理：样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。
总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。
不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。
SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。
TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。
2.适用范围AOAC991.43本方法适用于各类植物性食物和保健食品。
3.仪器3.1烧杯：400或600ml高脚型。
3.2过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex60ml （Corning No.36060buchner，或同等的）。
如下处理：（1）在灰化炉525℃灰化过夜。
炉温降至130℃以下取出坩埚。
（2）用真空装置移出硅藻土和灰质。
（3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。
（4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。
（5）在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。
（6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至0.1mg。
3.3真空装置：（1）真空泵或抽气机作为控制装置。
（2）1L的厚壁抽滤瓶。
（3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。
3.4振荡水浴箱：（1）自动控温使温度能保持在98±2℃。
（2）恒温控制在60℃。
3.5天平：分析级，精确至±0.1mg。
3.6马福炉：温度控制在525±5℃。
3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。
3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。
干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。
3.9PH计：注意温控，用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。
3.10移液管及套头：容量100μl和5ml。
3.11分配器或量筒：（1）15±0.5ml，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。
国标中膳食纤维的含量要求
国标中膳食纤维的含量要求
一、总膳食纤维
根据我国国标规定，食品中总膳食纤维的含量最小值应为其质量分数的1.5倍，最大值为5g/100g食品。
二、可溶性膳食纤维和不可溶性膳食纤维
根据我国国标规定，每100g食品中，膳食纤维含量大于1.5g/100g食品的，可认定为含膳食纤维食品。
其中，可溶性膳食纤维应占膳食纤维总质量的50%以上。
三、粗纤维
粗纤维是指植物细胞壁中的木质素、纤维素、半纤维素、果胶、树胶等物质。
在我国国标中，粗纤维的含量被视为食品中膳食纤维的一部分。
四、木质素、纤维素、半纤维素
木质素、纤维素和半纤维素是植物细胞壁中的主要成分，也是膳食纤维的主要组成部分。
在我国国标中，这些物质的含量被视为食品中膳食纤维的一部分。
五、果胶、树胶
果胶和树胶是植物细胞壁中的一种多糖类物质，也是膳食纤维的一种。
在我国国标中，这些物质的含量也被视为食品中膳食纤维的一部分。
六、黏胶、藻类多糖和其他多糖
黏胶、藻类多糖和其他多糖也是膳食纤维的一种。
在我国国标中，这些物质的含量也被视为食品中膳食纤维的一部分。
总结：在我国国标中，对膳食纤维的含量有明确的要求。
其中，总膳食纤维的含量应在其质量分数的1.5倍以上，可溶性膳食纤维应占膳食纤维总质量的50%以上。
此外，粗纤维、木质素、纤维素、半纤维素、果胶、树胶、黏胶、藻类多糖和其他多糖等物质都被视为食品中膳食纤维的一部分。
食品中总膳食纤维的测定方法及改进措施研究
I FOOD INDUSTRY I 121食品中总膳食纤维的测定方法及改进措施研究文 罗丹广东产品质量监督检验研究院食物成分会被水解。
最后，通过测量未被分解的膳食纤维残留量，可以计算出样品中的总膳食纤维含量。
3.2高性能液相色谱法（HPLC）高性能液相色谱法（HPLC ）基于化学物质在液相中的分离和检测。
在HPLC 中，食品样品通常会经过前处理，以去除干扰物质，然后将其溶解在适当的溶剂中。
样品溶液随后被注入高性能液相色谱仪器中，经过色谱柱，其中包含固定相，如凝胶或其他材料。
由于样品中的化合物与固定相之间的亲和性不同，导致其在色谱柱中的流动速度也不尽相同，进而实现化合物的有效分离。
在分离后，化合物会通过检测器，通常是紫外光或荧光检测器，进行检测和定量。
通过测量峰面积或峰高度，可以确定样品中的膳食纤维含量。
4.现有测定方法存在的不足4.1精确性和准确性的挑战首先，对于酶解法来说，其中的一个主要问题是酶的活性和效率可能会受到多种因素的影响，如温度、pH 值和酶源的质量。
这些因素的变化可能导致不同实验条件下膳食纤维的酶解率有所不同，从而影响分析结果的准确性。
其次，样品的前处理步骤，如提取和洗涤，也可能影响膳食纤维的分离和测定，进一步增加了分析的误差。
最后，对于不同类型的膳食纤维，酶解法的适用性可能不同。
例如，对于某些水溶性纤维，酶解法可能不太适用，因为这些纤维在酶解过程中可能会被溶解或部分损失，导致低估其含量，这使得酶解法在区分不同类型纤维时存在局限性。
食品中总膳食纤维的测定方法是健康和营养研究以及食品工业中至关重要的一部分，其测量精度具有十分重要的影响。
本文对膳食纤维进行了论述，在此基础上探讨了膳食纤维的测定方法，即酶解法和高性能液相色谱法（HPLC ），同时对现有测定方法存在的不足进行了分析，并结合食品中总膳食纤维的测定特点，提出了针对性的改进措施，旨在促进食品中总膳食纤维测定水平的不断提高，为食品中膳食纤维的研究提供技术支持。
膳食纤维 标准方法
膳食纤维标准方法
膳食纤维是指人体无法消化吸收的碳水化合物类物质。
膳食纤维对人体健康具有重要的作用，包括促进消化系统健康、调节血糖和胆固醇水平、预防便秘以及控制体重等。
为了准确测量食物中的膳食纤维含量，需要进行标准方法的测定。
目前，国际通用的膳食纤维含量测定方法有两种：AOAC （Association of Official Analytical Chemists）方法和ISO （International Organization for Standardization）方法。
1. AOAC方法：AOAC方法是美国官方方法，也是国际上最常用的方法。
根据AOAC 991.43或AOAC 985.29方法，首先将食物样品经过一系列处理，如酶解、水解等，获得可溶性和不可溶性纤维。
然后，借助酶解、滴定、重量等技术手段，可以得到总纤维、不可溶性纤维和可溶性纤维的含量。
2. ISO方法：ISO方法是由国际标准化组织制定的方法，与AOAC方法相似。
ISO 13904和ISO 15954方法是常用的ISO 方法。
这些方法主要利用酶解、水解、甲弹法等技术，将膳食纤维分为不可溶性纤维和可溶性纤维，并使用滴定、重量等手段进行测定。
无论使用AOAC方法还是ISO方法，都需要进行样品的预处理、酶解、滴定等步骤，以获得准确的膳食纤维含量。
这些方法在实验室条件下进行，需要仪器设备和专业操作人员进行操作。
需要注意的是，虽然AOAC和ISO方法都是国际通用的标准方法，但在具体的实验操作过程中，可能会存在一些差异，因此在测定过程中应当依据相应的方法详细操作，并遵循实验室的操作规程。
总膳食纤维国标测定方法-符合AOAC等
总膳食纤维测定的介绍1、在α-淀粉酶的作用下，PH为6的磷酸盐缓冲溶液，95—100度下加热15分钟。
2、用蛋白酶在PH为7.5时60度培养30分钟。
3、用淀粉葡(萄)糖苷酶在PH为4.0---4.6下60度培养30分钟。
4、4体积的95%的乙醇沉淀。
5、过滤。
6、用78%和95%的乙醇和丙酮清洗沉淀物。
7、烘干称重。
8、干样可以拿去做凯氏定氮，也可以在525度的马弗炉里灰份5个小时，然后去称重。
不溶的膳食纤维的定义为进行烘干前用乙醇进行清洗并用温水洗涤后残留物。
总膳食纤维（TDF）—不溶膳食纤维= 可溶膳食纤维（SDF）标准酶法测定食品和饲料中的总膳食纤维量1、研磨分级样品2、在105度的烘箱烘干并恒重，在干燥箱中冷却到室温。
3、如果样品脂肪含量高于10%，需要用石油醚进行脱脂，在最终结果中再进行校正。
4、称出0.5—1克的样品，并转移到400毫升的烧杯中。
5、用α-淀粉酶在50毫升的PH为6的磷酸盐缓冲溶液中培养15分钟，培养温度为95—100度，温度可以用温度计控制。
6、冷却到室温，并用0.275 N 浓度的氢氧化钠溶液调节PH到7.5。
7、将烧杯和样品一起转移到磁力搅拌培养器中（GDE）。
8、在搅拌的情况下，加入蛋白酶在60度的情况下培养30分钟。
9、冷却到室温，用0.325的盐酸调节PH值为4.0—4.6。
10、在搅拌的情况下，加淀粉葡(萄)糖苷酶，在60度时培养30分钟。
11、通过加4体积的95%的乙醇沉淀可溶性膳食纤维，并且在室温下沉淀大约1个小时。
12、称量已经添加了0.5克的硅藻土(作为助滤剂)玻璃坩埚.13、将坩埚放在CSF6 (或者FIWE6)上,倒入上述操作的沉淀物,并用V ACUUM进行吸液排空,用78%的乙醇溶液进行洗涤转移沉淀物。
14、用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤玻璃坩埚中的沉淀物两次，再用10毫升95%的乙醇溶液洗涤两次，10毫升的丙酮溶液洗涤两次并排除废液。
膳食纤维的测定方法
膳食纤维的测定方法作者：赵升鹏周超进来源：《都市家教·上半月》2013年第05期【摘要】膳食纤维被称为人体的第七营养素，对维持人体健康具有重要作用。
膳食纤维通过发酵产物短链脂肪酸和对肠道菌群的调节作用从而影响肠道健康，本文对膳食纤维的测定方法进行了综述。
【关键词】膳食纤维；定义；测定膳食纤维已被确认为与传统的六大营养素并列的“第七营养素”，对维持人体健康具有重要的生理作用。
膳食纤维的理化特性概括起来是膨胀作用、持水能力、胶体形成、离子交换、改善胃肠微生物菌落和产生低热量等。
这些特性产生的生理作用如下：使人产生饱腹感并抑制进食，从而预防肥胖；润肠通便，防治肠道疾病和便秘；调控血清胆固醇，降血压，防治冠状动脉硬化，胆石症和预防心脑血管疾病；降血糖，防治糖尿病等。
目前，结肠癌、炎症性肠炎和其他结肠紊乱疾病已经严重影响身体健康。
膳食纤维为肠道微生物生长提供均衡的能量和营养，这是维持结肠生态系统平衡所必需的，另外，膳食纤维的发酵，特别是丁酸发酵，有利于结肠健康。
目前国内外业已研究开发的膳食纤维共有6大类约30余种，其中实际生产和应用的不超过10种。
一、膳食纤维膳食纤维（Dietary Fiber，DF）被认为是食物中不被人体胃肠道消化酶水解，但能被肠道微生物消化的物质，特别是植物成分。
膳食纤维包括非淀粉多糖，如纤维素、半纤维素、树胶、果胶，以及木质素、抗性糊精和抗性淀粉。
二、膳食纤维的测定世界卫生组织建议的总膳食纤维摄入量下限为每人每天27.0克，上限为每人每天40.0克。
由此可见：膳食纤维检测结果的表示及产品标签标示等方面的问题应该作为膳食纤维研究中的又一个重要方面，而检测结果是由膳食纤维的检测方法和检测标准决定的，因此有必要建立统一的检测方法和标准。
DF的不同测定方法因其测定原理不同结果差异较大。
自20世纪60年代初以来，分析化学家们建立起大量的检测方法，具有代表性的几种方法为非酶重量法、酶-重量和酶-化学法。
膳食纤维的测定方法
膳食纤维的测定方法
膳食纤维是指无法被人体消化吸收的植物性碳水化合物，主要包括可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维。
目前常用的膳食纤维测定方法包括总膳食纤维测定和可溶性膳食纤维测定。
总膳食纤维测定方法：
1. 预处理：将样品中的可溶性膳食纤维去除，可以通过酶解、水解或碱解等方法进行。
2. 不溶性纤维测定：将预处理后的样品干燥并称重，然后在酸条件下水解，去除可溶性纤维，得到不溶性纤维的含量。
3. 可溶性纤维测定：将预处理后的样品加入酶解液中，在适当温度和时间下进行酶解，得到可溶性纤维的含量。
4. 计算总膳食纤维含量：将不溶性纤维和可溶性纤维的含量相加，得到总膳食纤维含量。
可溶性膳食纤维测定方法：
1. 预处理：将样品中的不溶性膳食纤维去除，可以通过酶解或机械破碎等方法进行。
2. 可溶性纤维测定：将预处理后的样品加入酶解液中，在适当温度和时间下进行酶解，得到可溶性纤维的含量。
这些方法可以使用不同的化学试剂和设备进行测定，常见的试剂有酸、酶和碱等。
测定方法的选择和优化需要考虑样品的性质、测定目的和仪器设备的可用性等因素。
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总膳食纤维测定的介绍
1、在α-淀粉酶的作用下，PH为6的磷酸盐缓冲溶液，95—100度下加热15分
钟。
2、用蛋白酶在PH为7.5时60度培养30分钟。
3、用淀粉葡(萄)糖苷酶在PH为4.0---4.6下60度培养30分钟。
4、4体积的95%的乙醇沉淀。
5、过滤。
6、用78%和95%的乙醇和丙酮清洗沉淀物。
7、烘干称重。
8、干样可以拿去做凯氏定氮，也可以在525度的马弗炉里灰份5个小时，然后
去称重。
不溶的膳食纤维的定义为进行烘干前用乙醇进行清洗并用温水洗涤后残留物。
总膳食纤维（TDF）—不溶膳食纤维= 可溶膳食纤维（SDF）
标准酶法测定食品和饲料中的总膳食纤维量
1、研磨分级样品
2、在105度的烘箱烘干并恒重，在干燥箱中冷却到室温。
3、如果样品脂肪含量高于10%，需要用石油醚进行脱脂，在最终结果中再进行
校正。
4、称出0.5—1克的样品，并转移到400毫升的烧杯中。
5、用α-淀粉酶在50毫升的PH为6的磷酸盐缓冲溶液中培养15分钟，培养温
度为95—100度，温度可以用温度计控制。
6、冷却到室温，并用0.275 N 浓度的氢氧化钠溶液调节PH到7.5。
7、将烧杯和样品一起转移到磁力搅拌培养器中（GDE）。
8、在搅拌的情况下，加入蛋白酶在60度的情况下培养30分钟。
9、冷却到室温，用0.325的盐酸调节PH值为4.0—4.6。
10、在搅拌的情况下，加淀粉葡(萄)糖苷酶，在60度时培养30分钟。
11、通过加4体积的95%的乙醇沉淀可溶性膳食纤维，并且在室温下沉淀大
约1个小时。
12、称量已经添加了0.5克的硅藻土(作为助滤剂)玻璃坩埚.
13、将坩埚放在CSF6 (或者FIWE6)上,倒入上述操作的沉淀物,并用
V ACUUM进行吸液排空,用78%的乙醇溶液进行洗涤转移沉淀物。
14、用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤玻璃坩埚中的沉淀物两次，再用10毫
升95%的乙醇溶液洗涤两次，10毫升的丙酮溶液洗涤两次并排除废液。
15、在105度的烘箱中烘一夜，在干燥器中冷却。
16、计算结果，要减去坩埚的重量Q和硅藻土的重量。
17、减去不消化的蛋白和灰份含量来矫正结果。
总膳食纤维的测定（TDF）
方法原理：
总膳食纤维的测定方法是结合酶法和重量差量法来测定的。
相同的（四份重复的）脱脂的干燥食品样，用α-淀粉酶在稳定加热的情况下进行胶化，然后用淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）消化，去掉淀粉，用蛋白酶去掉可消化的蛋白。
可溶性的膳食纤维是在乙醇溶液中的沉淀物。
残留物过滤，通过乙醇、丙酮溶液洗涤，再烘干称重。
其中一个样品用来化验不能消化的蛋白，另外的一个进行灰份。
总膳食纤维是消化后的残留物的重量减去不能消化的蛋白和灰份。
试剂
1、石油醚，试剂级的。
2、体积比为95%的乙醇，分析级的。
3、体积比为78%的乙醇。
将207毫升的蒸馏水放入含有1升的95%的乙醇的量
筒中，摇匀混合。
4、丙酮，试剂级的。
5、磷酸盐缓冲液，0.08M,PH为6.0。
6、α-淀粉酶，热稳定，可溶解的。
7、蛋白酶溶液。
溶解50毫克到1毫升的磷酸盐缓冲溶液，会加强活力。
8、淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）溶液。
9、氢氧化钠溶液，1.0 N,试剂级的。
10、氢氧化钠溶液，0.275 N。
11、盐酸溶液, 1.0 N,试剂级的。
12、盐酸溶液,0.325N。
13、硅藻土，酸性洗涤的。
注：A、使用蒸馏水或者去离子水进行溶解。
B、此方法所需酶的量可以从不同的公司来获得。
如NOVO INDUSTRI，SIGMA CHEMICAL CO,. MERCK，等。
C、酶的纯度应该由生产者来确定。
如果不知道酶的活性，必要时可以参考现有的资料。
酶的稳定性也要可以控制，所进行整个过程使用的物质可以列为下表（SIGMA CHEMICAL CO）：
原料实验活性样品重量克希望的重复性胶质果胶酶 0.1 95---100 半乳聚糖半纤维素酶 0.1 95---100 酪蛋白蛋白酶 0.3 0—2
β-葡聚糖葡聚糖酶 0.1 95—100 淀粉(普通的) 淀粉酶 1.0 0—2
淀粉(小麦的) 淀粉酶 1.0 0—1
样品处理
从大量的原料中提取典型的样品，在105度的烘箱（或者70度的真空烘箱中）中干燥一个晚上，在干燥箱中冷却。
干燥状态下研磨到0.3—0.5毫米大小。
如果样品不能够加热，冷冻干燥。
如果样品脂肪含量超过10%，则需要在石油醚中降
脂3次，25毫克/升的样品。
注意脂肪的含量要校正最后的结果。
膳食纤维的测定
空白实验应该在整个实验过程中进行，最后要从结果中扣除以去掉试剂等因素对结果的影响。
将1克样品，称重精度到0.1毫克,在400毫升的烧杯中,混合到50毫升PH为6的磷酸缓冲溶液中,加磁力搅拌子,加100微生的热稳定的α-淀粉酶溶液,彻底混合,盖上铝箔。
放到100度的水浴中，让样品温度保持在95—100度保持15分钟，控制好温度，然后从水浴中移出，冷却到室温。
用10毫升的0.275N 的氢氧化钠溶液调节PH到7.5,向GDE中添加冷水将温度降到60度,加100微升的蛋白酶溶液(50毫克放在1毫升磷酸盐缓冲液中).烧杯盖上滤箔连续搅拌的情况下在60度时培养30分钟。
冷却到室温，用0.325N 的盐酸调节PH到4.0—4.6,用PH计控制PH值。
添加300毫升的淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）溶液，盖上铝箔在连续搅拌的情况下60度水浴培养30分钟。
拿掉搅拌子，280毫升的95%的乙醇预热60度，在室温下沉降60分钟。
完全干净的玻璃坩埚，放在525度的马弗炉烘干1小时，冷却到室温，用水清洗，在空气中晾干。
添加0.5克的硅藻土,玻璃坩埚在130度的烘箱中恒重一个小时,精度0.1毫克。
同硅藻土一起称重并放在CSF6 （FIWE6）的过滤器中，利用真空。
用漏斗转移酶消解完的沉淀物，滤出液用导管进行收集。
用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤沉淀物3次，10毫升的95%的乙醇溶液洗涤2次，10毫升的丙酮溶液洗涤2次。
如果胶状的滤膜使的过滤能力下降，保持液体状态，用细微的空气来吹表面（仪器上操作），整个清洗过程需要半个小时。
在105度的烘箱中（70度的真空箱中）将玻璃坩埚连同沉淀物和硅藻土一起烘干一个晚上，冷却到室温，称重精度为0.1毫克。
沉淀物的重量是最终的重量减掉坩埚的重量和硅藻土的重量（需要的重复样）。
其中一个沉淀物的样用凯氏方法分析不能消化的蛋白含量（N*6.25）,第二个沉淀物的样在525度的马弗炉中烘干5个小时,在干燥箱中冷却称重(精度0.1毫克),灰份的重量是前步的总重量减掉坩埚和硅藻土的重量后剩下的重量。
计算
%空白中的蛋白百分含量（SB）=空白中的蛋白含量/空白的残留量*100
%空白中灰分含量（CB）=空白中的灰分量/空白的残留量*100
空白量=空白中的残留物*[1-（PB+CB）/100]
%样品的蛋白含量（SP）=样品中的蛋白量/样品残留物量*100
%样品灰分含量（SA）=样品中灰分量/样品残留物量*100
%TDF={残留物量-[（PC+CC）*残留物量/100]-空白量}/样品重量*100
简化为：
%TDF=[残留量*（100-PC-CC）-空白量]/样品重量
注：这里的残留量是指重复空白或者样品的所获得的平均残留量这里的样品量是指两个样品的平均重量。