ISBT__检测方法中文版--仅供参考2
免疫检查点的测定方法
免疫检查点的测定方法
免疫检查点的测定方法主要包括以下几种：
1. 应用流式细胞术。
2. 免疫组化。
3. 可溶性蛋白检测。
4. 酶免疫分析(EIA)：尽管酶免疫分析 (EIA) 的主要原理与 RIA 相似，但它使用酶作为标记，而不是放射性同位素。
在该测定中，酶分子通过合适的反应偶联到免疫分析试剂中，随后进行正常的免疫测定程序。
结合和游离部分分离后，通过添加底物测定酶活性。
5. 放射免疫分析（RIA）：这种检测非常灵敏和特异，因此它可以检测到样品中低至几个象形图的抗原。
RIA 的基本原则是竞争性约束。
在该方法中，目标抗原使用放射性同位素标记并与其特异性抗体结合。
放射性抗原与非放射性抗原（来自血清样品）竞争固定数量的受体结合位点或抗体。
抗体的竞争导致一定数量的标记抗原的释放，因此它与标记抗原与未标记抗原的比例成正比。
在增加未标记抗原的浓度时，它们取代结合的标记抗原。
随后，将结合的抗原与未结合的抗原分离，并测量残留在上清液中的游离抗原的放射性。
RIA方法的主要优点是以极高的精度和灵敏度测量分析物。
1。
astm国际比对试验操作流程
astm国际比对试验操作流程ASTM国际比对试验（ASTM）是一种特殊的比对测试，它用于比较一组样本的特性，参数或功能。
比对试验是指在设计新产品时，将某一特性与一组样本进行比较，以进一步决定产品是否符合预期质量水平。
比较测试不仅可以用于新产品开发，还可以用于改进现有产品，特别是在同一系列产品当中。
ASTM国际比对试验操作流程主要包括七个步骤：确定与测试相关的特性（相关因素）、确定统计技术、采集样本数据、检查数据是否符合假设条件，确定检验水平、执行比对检验、计算比对检验的结果和解释检验结果。
第一步，确定与测试相关的特性（相关因素）。
在开展比对测试之前，比较的指标必须首先确定确定，通常有性能参数、能力参数或功能特性。
例如，可以将比较测试应用于确定机械强度、力学应力、温度和湿度等参数。
第二步，确定统计技术。
较好的统计技术是比较测试的基础，例如t检验、卡方检验等，其原理在于比较表示检验结果的统计指标，例如P值、T值等，以确定是否存在显著性差异。
第三步，采集样本数据。
这一步的重点是收集两组样本的数据，即基准样本和实验样本，以便将两组样本的数据进行比较。
第四步，检查数据是否符合假设条件。
在进行比较测试之前，必须要检查收集的样本数据是否符合要求，例如数据是否分布服从正态分布，是否有效等。
这一步骤是关键，只有确定数据质量良好，才能确保使用的检验方法的正确性。
第五步，确定检验水平。
检验水平（α）是比较测试中表示检验的显著性的值，通常以α=0.05、α=0.01、α=0.001等表示。
根据统计学的原理，α值越低，检验的显著性越高。
第六步，执行比较检验。
在确定参数、确定统计技术、采集数据、检查数据并设定检验水平之后，将符合假设条件的样本数据进行比较，计算出检验结果的值，例如P值，T值等，用这一值可以判断收集的样本数据是低于或者高于检验水平。
第七步，计算比对检验的结果和解释检验结果。
这一步是了解比较测试结果，分析比较测试是否有显著差异的最后一步。
I-STAT(多功能血液分析仪) 教学
产品硬件配置及耗材
1. 硬件部分包括： 主机
热敏打印机
电子模拟器
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产品硬件配置及耗材
2.耗材：卡片。 储存及使用方法： a.在恒温（冰箱内冷藏）2-8摄氏 度下保存至有效期，具体参见包装 袋。 b.从冰箱取出后在室温下单片需要 恒温10分钟后方可做测试，整盒 （25片装）需要恒温1个小时后方 可使用。 c.注意事项：卡片从冰箱取出后， 不可在放回冰箱，应该在14天内 用完。
d. 可测试的项目：血气、生化、凝血、心肌标志物，科室可根据不同项 目来选择相应的卡片。
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可检测项目
测量值 血气 电解质 生化 血液学 pH, PCO2, PO2 Na, K, Cl, iCa 计算值 TCO2, HCO3, BEb, BEecf, SO2 Anion Gap
Code 30 37----血样过量
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一般故障（四）：质控代码
Code (质控代码) Code 1
提示
Dead batteries
原因
电池耗尽
后续处理
Replace Batteries 更换电池
Code 2
Temperature Range
out
Check Status Page of 温度超出工作范 将分析仪放置于适宜 围 处 电池已更换 日期设定无效 软件过期或失效 Ready for use 无需处理 Check on Status Page 重新设定日期 See Manual 升级现使用的软件
－－降低用户的使用和维护成本
果的原因
*操作原因：标本采集过程是保证标本质量的关键环节，
BIS监测，你了解吗？
BIS监测，你了解吗？双频指数监测（bispectral index，BIS）是采用双频谱分析法将原始脑电图（electroencephalogram，EEG）信号的时间与振幅关系转换成频率与功率关系，进行标准化和数字化处理，最后转化为一种简单的量化指标。
BIS可以实时反映大脑皮质和皮质下的意识水平，将EEG数量化，可以使医护人员更加客观地评价患者的镇静深度和意识状态。
BIS通常由 3 个头皮 EEG 电极（用于 BIS 系统）或 4 个头皮 EEG 电极（用于 BIS-XP 系统）通过自粘带附着在前额上获得脑电测量数学组合得到一个数值指数，这个数值指标是根据脑电特征和患者警觉状态之间建立的经验相关性得出的。
BIS监测连接步骤1、连接模块、线缆2、皮肤准备，使得电极黏贴部位皮肤清洁干燥3、将电极片黏贴到指定部位（见上图），环压电极片四周，再按压电极片5秒4、连接BIS传感器与病人电缆5、进入传感器检查界面，查看传感器状态，待所有电极变绿后，进行BIS监护BIS监测数值范围BIS数值范围从 0～100，数值越大表明越清醒，数值越小则提示大脑皮质受抑制越严重，详见下表：BIS数值意义100清醒的皮质电活动状态85～100正常状态65～85镇静状态40～65全身麻醉状态<40突发抑制0完全无脑电活动脑电双频指数开始时主要应用于麻醉监测，由于其能量化、连续动态监测脑电信号，具有解读相对简单、无创等优势，得以在重症监护室（ICU）中推广应用。
近年来，BIS 在ICU中的应用进展主要体现在以下几个方面：镇痛原发疾病、医疗护理操作、被动制动，睡眠剥夺等使得ICU患者的疼痛、身体不适和焦虑非常常见。
ICU患者的疼痛评估仍然是临床医生面临的重大挑战。
BIS监测利用客观数值量化疼痛行为，有利于调整危重患者的镇痛水平，有助于患者获得疼痛缓解。
Robin Marie Coleman 等通过在全身诱导麻醉后的 30 名受试者的前臂上进行热探针产生的中度和重度有害刺激的同时监测BIS，结果发现BIS值对于有害程序的反应性增加在ICU患者镇静水平较低时很可能更高。
BIS监测的应用课件
BIS值不受肌松水平或肌电活动的影响,可以准确 反映患者的镇静程度。
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BIS监测在镇痛、镇静过程中的作用
BIS数值范围为0－100，数值越大，表明越清 醒，数值越小则提示大脑皮质受抑制越严重。
BIS值85-100代表正常状态，65-85代表镇静状 态，40-65代表麻醉状态，低于40可能呈现爆 发抑制。100代表完全意识状态，0代表完全无 脑电活动状态（大脑皮层抑制）。
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BIS数值的临床意义
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6、镇静病人的一般护理：
（1）环境护理，减少噪音光线等环境刺激， 减少操作的不良刺激，以免引发患者躁动， 增加药物使用量。
（2）皮肤护理，病人为被动体位，肢体活 动度降低，应定期翻身检查受压部位，清 洁皮肤，预防压疮。
（3）血管护理，最好选择中心静脉持续泵 入镇静药，丙泊酚等药物刺激，注意静脉 炎观察，定期更换穿刺部位，预防血栓。
EEG 是一种信号， BIS 是对它的解释
BIS 是对 EEG信号进行处理的结果
EEG 是在头皮上测得的大脑皮层电活 动的图象。BIS 量化了EEG图象， 量化了麻醉。
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概论
是目前以脑电来判断镇静水平和监测麻醉深度 的较为准确的一种方法 。
BIS不仅包括了更多的原始EEG信息，并且排除 了许多对EEG的干扰因素。
及颞部皮肤 并晾干
B.将传感器的1号探头 贴额部鼻根上方5cm 4号探头贴一侧眉毛上方 3号探头贴在太阳穴处
荧光免疫层析质检规程( 已修改)
荧光免疫层析质检规程一、初测曲线及板内CV。
实验方法：每生产10板随机抽取1板，使用曲线标准品进行单卡曲线检测。
使用重复性校准品，进行板内8平行CV检测。
结果分析：根据《技术参数》，以建立的单卡曲线为标准，分析8平行板内CV的结果，CV 应小于15%。
二、初测曲线合格后，各板贴好样本垫和吸水纸后进行斩切，按各板分装至自封袋中，加干燥剂。
三、划分亚批。
实验方法：1.每板中取出1条，进行板号标记，使用0.5ng/ml和2ng/ml校准品进行CV检测。
2.校准品需一次性稀释至满足检测所有条的液体量，每组实验最多不超过10个试纸卡。
结果分析：1.将所有有效数据进行汇总，按照T/C值从低到高排列，划分波动窗口。
0.5ng/ml的T/C 值波动窗口为0.2，2ng/ml的波动窗口为0.4。
2.按照波动窗口范围划分亚批，并计算每个亚批的板间CV是否小于15%。
3.以两个浓度校准品为依据所划分的亚批，肯定会有差异，会有以下三周情况。
A.同时满足两个依据的板，其亚批的位置肯定准确。
B.两组数据，亚批位置相邻，则观察其TC线信号值，如信号值CV小于10%，则可统一为一个亚批。
C.两组数据，亚批的位置差异很大，则需将相关板重新进行板间CV检测。
四、校准曲线。
实验方法：1.从曲线所对应亚批中取出不同的2板，每板进行单卡曲线检测，统计双平行的T/C值。
2.与初测曲线进行比较，校准对应批次的曲线，烧写ID卡。
实验记录：完成曲线建立后需填写《成品检验记录》。
五、精密度测定。
实验方法：从同一亚批中随机抽取10条，使用重复性校准品进行CV检测，检测结果应小于15%。
实验记录：完成精密度测定后需填写《成品检验记录》。
六、线性区间。
实验方法：检测降钙素原线性参考品，按照说明书将每一个参考品重复2次，计算其平均值，然后与其参考品稀释比例计算出直线方程y=a+bx,以及相关系数r，r应大于0.995。
实验记录：完成精密度测定后需填写《成品检验记录》。
第四种办法国际上的常规检测方法 (1)
第四种办法国际上的常规检测方法。
主要从静脉血、尿液、体内碱贮备和二氧化碳结合率等四个方面进行测第五种办法是酸碱体质自我小测试试在下列小问题中与你情况相符的问题有多少个？□皮肤没有弹性、暗淡无光泽。
□脸上容易长痘或粉刺。
□容易疲劳，嗜睡，稍做运动就觉得累。
□情绪不稳定，容易发怒。
□牙龈经常出血，外伤口愈合慢、容易淤青。
□感冒频繁；胃肠、肝、肾功能不好。
□常出现便秘现象。
□爱吃甜食，口中常有异味。
□汗脚，四肢容易冰冷。
□夏天容易被蚊虫叮咬。
以上10种，如有5种以上与你自身情况相符，那么就可以判定你的体质属于酸性，5种以下则为碱性。
如何变成弱碱性体质呢？我们人类的生命运动是要在一弱碱性的环境中进行的，不因任何理由改变，太酸太碱都不行。
就人体整体来看，酸性就意味着热和快，碱性就意味着冷和慢。
糖尿病的病人，他们的胰脏特别地辛苦，因为他们的体液是酸性的，好象是一个酸性的大电池，胰脏每时每刻别选着比正常人更多的胰岛素，但是还是不够用，血糖还是高，然后他们就开始服药，药是干什么的，是让胰岛细胞制造更多的胰岛素，而且还有很多的副作用，结果胰岛素细胞终有那么一天累死了，岂不知，人体PH值下降0.1，胰岛素的功能就下降30%，这就是为什么生产这么多的胰岛素，血糖还是高呢？酸性体液，使胰岛素的电子能量转换发生的小，有效率不高，不能解决体液酸性的。
怎么能给糖尿病患者一个控制疾病和康复的机会呢？我们在日常饮食中所吃的食物，如海带、菠菜、西瓜、萝卜、香蕉、梨、苹果、胡萝卜、草莓、莴苣、土豆、南瓜、黄瓜、洋葱、藕、红薯、大豆等蔬菜、水果类、茶叶、牛奶等，所含的碱性元素（钾、钠、镁），比酸性元素（氯、磷、硫）的比例大，在体内的最终代谢产物呈碱性，故称之为碱性食品。
葡萄、柑橘类水果食物吃的时候口感是酸味，这种酸是有机酸，但在人体内可完全代谢成二氧化碳和水，对体液酸碱性无大影响，原来与有机酸结合的钾、钠、镁等在人体内最终代谢为带阳离子的氧化物，体液呈碱性，故仍属碱性食品。
食品安全检测技术的使用教程
食品安全检测技术的使用教程食品安全一直是人们关注的焦点，而食品安全检测技术的使用对于确保食品质量和保障消费者的健康至关重要。
本文将介绍食品安全检测技术的使用教程，包括常见的检测方法、检测仪器的使用以及结果的解读。
一、常见的食品安全检测方法1. 快速检测法：快速检测法是一种迅速、简单的检测方法，适用于大批量食品样品的检测。
常见的快速检测法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、PCR法、光散射等。
酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用于检测食品中有害物质和微生物的方法，其原理是利用特定抗体对目标物质进行识别，通过染色剂的反应来判断样品中是否存在目标物质。
PCR法是一种基因分子生物学的方法，通过扩增食品样品中的DNA或RNA来检测其中是否存在特定的微生物或基因序列。
这种方法在食品中检测病原菌或转基因成分非常有用。
光散射是一种通过测量光的散射对食品进行质量监测的方法。
通常使用激光散射仪器来测量食品颗粒的大小、形状和分布情况，从而判断食品中是否存在异常物质或掺假情况。
2. 化学分析法：化学分析法是通过化学试剂对食品样品进行分析，以检测其中的有害物质或添加剂。
常见的化学分析方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等。
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离与分析技术，可以对食品样品中的有害物质、残留农药、添加剂等进行快速准确的检测。
通过设置适当的分离柱和检测器，可以实现对目标物质的高灵敏度检测。
气相色谱法（GC）是一种常用的挥发性物质检测方法，适用于食品中挥发性香料、残留溶剂、挥发有机物等的分析。
通过样品的蒸发和气相分析，可以得到目标物质的含量和种类信息。
二、食品安全检测仪器的使用1. ELISA仪器的使用：ELISA仪器通常包括酶标仪、洗板仪和微孔板。
使用ELISA仪器进行食品安全检测的步骤如下：a. 准备样品和试剂：将需要检测的食品样品制备成适当的稀释液，准备好待用的试剂。
b. 处理样品：将样品加入微孔板中，并根据试剂盒的说明书进行适当的处理步骤，如加入抗体或底物等。
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目录1.营养性甜味剂酸化后的气味 (1)2.果葡糖浆中的磺基聚苯乙烯 (3)3.甜味剂的口味，气味和外观 (6)4.甜味剂的浊度 (8)5.直接镜检 (10)6.酸化甜味剂稀释 (13)7.糖浆稀释方法 (15)8.色值（IU） (17)9.色值（RBU） (20)10.乙醛 (21)11.氯化物 (24)12.电导率 (26)13.PH (28)14.不溶性颗粒物 (方法一) (30)15.不溶性颗粒物（方法二） (32)16.利用折光仪检测固形物含量 (33)17.二氧化硫 (34)18.硫酸灰分 (37)19.絮凝试验 (39)20.糖类 (41)21.羟甲基糠醛 (46)22.糠醛 (49)23.异戊醛 (52)24.2-氨基乙酰苯 (55)25.重金属 (58)26.糖的嗜温好氧性菌的平板计数（倒平板或膜过滤） (60)27.检测糖类中的酵母菌和霉菌（倒平板法或膜过滤法） (63)营养性甜味剂酸化后的气味Nutritive Sweetener Odor After Acidification目的鉴别甜味剂中不良的气味，因为这些气味可能会对饮料造成影响。
仪器1．滴定管（Buret）(25 mL capacity – Class A)2．pH计（pH Meter）3．温度计（Thermometer）4．天平（Top-Loading Balance）5．100mL带刻度的试管（100 mL graduated cylinder – Class A）6．1000mL带刻度的试管（1000 mL graduated cylinder – Class A）7．水浴装置或培养箱（Water bath or Incubator）8．200mL敞口，带旋转帽的瓶（200 mL wide-mouth, screw-capped bottle）试剂1．75 %（ w/v ）磷酸 H3PO42．蒸馏水步骤1. 对于检测的粒状和液体蔗糖，MIS，果葡糖浆-42，果葡糖浆-55的样品，遵循糖浆稀释酸化方法SM-PR-770，对于简单糖浆，用原样品进行检测即可。
2. 取100mL酸化后的糖浆放入敞口瓶（a wide-mouth,screw-top bottle）中。
3. 用以下其中一种方法把溶液加热到30°C，边加热边搅拌：a. 用培养箱（调到30°C）。
b. 用水浴装置（调到30°C ）(水浴装置中的水应没有异味)。
c. 用hot plate：慢慢加热，边加热边轻轻的连续搅拌溶液。
注意事项1．溶液加热的温度不要过高，以免影响检测结果。
2. 在30分钟内，每10分钟闻一次溶液的气味。
3. 记录出现的任何不良气味。
出处：SM-PR-310果葡糖浆中的磺基聚苯乙烯Sulfonated Polystyrene in HFSS目的用这种方法确定果葡糖浆是否可能在饮料中产生絮凝物或neck-ring的问题。
仪器1．Rhodamine B Test（罗丹明B测试）a. 天平b. 10mL刻度试管（10mLgraduated cylinder）c. 100mL刻度试管（100mLgraduated cylinder）d. 20mL试管e. 250mL烧杯f. 玻璃棒g. 滴管（dropper）2．盐酸奎宁试验a. 10mL刻度试管（10mLgraduated cylinder）b. 100mL刻度带塞试管（100mLgraduated cylinder）c. 10mL 吸液管d. 20mL 试管e. 秒表f. 400mL烧杯g. Hot plate or burnerh. 分光光度计及1cm比色皿试剂1．罗丹明B测试a. 1%（w/v ）Rhodamine B solution（罗丹明B溶液）b. 精制蔗糖c. 蒸馏水2．盐酸奎宁试验a. 6%（w/v）盐酸奎宁（Quinine Hydrochloride）b. 蒸馏水步骤1．Rhodamine B Test（罗丹明B测试）a. 准备样品﹡称取5mL果葡糖浆放入20mL试管里，再加入5mL蒸馏水，搅拌混合均匀，并贴好标签。
﹡滴加2滴1%（w/v ）Rhodamine B solution并摇匀。
b. 准备对照﹡称取47g精制蔗糖，加蒸馏水溶解并定容到100mL。
﹡称量5mL上述蔗糖溶液加入到20mL试管里，贴上标签作为对照。
﹡滴加2滴1%（w/v ）Rhodamine B solution并摇匀。
c. 并排拿着装有样品的试管和进行对照实验的试管。
从试管上部垂直往下观测。
d. 分析Rhodamine：当从试管上部观看时，根据以下原则分析溶液。
e. Rhodamine B Test（罗丹明B测试）检测的结果：﹡检测结果为阴性：样品和对照出现相似的红色。
﹡检测结果为阳性：样品溶液出现紫色。
紫色主要集中在气泡上（气泡是由摇晃溶液时引起的），如果在样品的气泡上看到紫色，则继续进行盐酸奎宁试验（the Quinine HydrochLoride Test）。
2．盐酸奎宁试验（the Quinine HydrochLoride Tets）a. 样品配制﹡取50mL果葡糖浆放入100mL带塞试管中，添加50mL蒸馏水，塞紧试管塞，混匀。
﹡移取10mL上述果葡糖浆溶液加入到20mL试管中，添加2mL6%（w/v）盐酸奎宁溶液并混合。
﹡静置30分钟。
﹡把试管放在沸水浴中加热5分钟。
﹡立刻冷却样品。
b. 读取样品﹡把样品加入1cm 比色皿中。
﹡把蒸馏水加入另一个比色皿中。
﹡把分光光度计波长调到720nm，用蒸馏水调零点，测试样品的透光率。
检测结果检测样品的T值不得小于97%，否则产品不被接收。
出处：SM-PR-400甜味剂的口味，气味和外观Nutritive Sweetener Taste，Odor and Appearance 目的评价下列甜味剂的味道、气味和外观：蔗糖、高果糖浆、中间转化糖和葡萄糖。
设备1．天平（Top-loading balance）2．水浴锅或恒温箱3．玻璃烧杯4．刻度试管5．200mL的敞口、带螺帽的瓶6．温度计7．表面皿（Watch glass）8．敞口带盖玻璃瓶试剂蒸馏水步骤1．准备检测样品遵循Sweetener Syrup Dilution，SM-PR-780，准备检测样品。
2．检测味道﹡建议把检测样品在相同条件下跟以前检测的样品作比较。
﹡检测人员必须事先经过感官训练。
If the sampl e is… thenHFSS 在常温下，品尝浓度为50Bx的HFSS样品并记录任何不良味道。
3．检测气味﹡建议把检测样品在相同条件下跟以前检测的样品作比较。
If the sampl e is… thenHFSS取未稀释的HFSS样品放在干净的玻璃烧杯中并检测其味道。
如果有疑问：取部分样品放在检测瓶里（a tastetest glass），盖上盖子，在水浴锅或恒温箱里加热到30-35℃，然后重新检测。
4．检测外观If the sampl e is… thenHFSS 样品外观必须符合BO-SP-262（HFSS-55）中，或BO-SP-263 （HFSS-42）中的规定。
出处：SM-PR-420甜味剂的浊度Nutritive Sweetener Turbidity目的用这种方法检测蔗糖、高果糖浆和中间转化糖的浊度。
摘要甜味剂的混浊度可以直观检测或用Nephelometric Turbidity Units进行定量。
粒状蔗糖、液体蔗糖和果糖混浊度必须小于10NTU。
仪器1．过滤装置2．玻璃杯：250mL，600mL3．1L带盖玻璃容器4．量筒：Class A ，100mL和1000mL5．高强度光源6．pH计7．天平（Top-loading balance）8．浊度计（可选用）9．水浴锅或恒温箱10．Whatman No.54 过滤纸试剂1．蒸馏水2．75%（Ｗ/V）的磷酸步骤1．准备样品遵循酸化后的糖浆稀释方法，SM-PR-770。
2．检测和分析结果If the sampl e is… then…HFSS 把稀释好并经过酸化的HFSS倒入玻璃容器中。
在由高强度光源形成的白色背景下检查样品。
样品必须透明，即不出现阴影或模糊现象（浊度）。
NOTE 为了确定HFSS是否是糖浆或饮料中絮凝物的来源，可以采取如下方法：密封经过稀释并酸化的HFSS样品，静置。
每天用高强度光源检查絮凝物，共检测十天。
用该方法可以确定或排除HFSS是饮料中出现絮凝物的原因。
出处：SM-PR-485直接镜检Direct Microscopic Evaluation目的使用该程序确定果葡糖浆中的总微生物（活性和非活性）。
仪器1．显微镜（目镜10×和物镜40×）2．2mm显微千分尺3．玻璃载玻片4．玻璃盖玻片5．膜过滤设备6．400mL烧杯7．加热板8．组合染色剂9．0.8µm膜过滤装置试剂1．洗液：制备65Brix甜味剂溶液（甜味剂+过滤水），每日制备防止污染。
2．过滤水：用0.8µm膜过滤装置制备。
3．组合染色剂：将65mL石炭酸品红溶液和35mL甲基蓝溶液混合后制备。
4．石炭酸品红溶液：在60mL95%乙醇溶液中溶解0.2g石炭酸品红，用过滤水稀释到200mL。
5．甲基蓝溶液：在60mL95%乙醇溶液中溶解0.2g甲基蓝，加2mL0.2N氢氧化钾，用过滤水稀释到200mL。
步骤1．每毫升样品在显微镜中视野数将2mm显微千分尺放在显微镜的载物台，物镜取40×，测算每个视野的直径并计算面积：1个视野的面积 = （直径 / 2 ）2× 3.142．实际有效过滤面积a. 加1滴组合染色剂于50mL水中，用滤膜过滤，测量染色部分的面积，计算如下：过滤面积 = （直径 / 2 ）2× 3.14b. 计算整个过滤装置的显微视野数：视野数 = 过滤面积 / 1个视野的面积c.在培养皿中用组合染色剂使吸收垫饱和，四周留少量染色液但不溢出，培养皿加盖。
d.将另一干吸收垫放在加热板上，温度设定低温档，防止过热。
e.用200mL的过滤水稀释100mL甜味剂。
f.稀释后样品用0.8µm滤膜进行过滤(在过滤前用过滤水预湿滤膜)。
g.用过滤水从膜上洗去甜味剂（不得使用洗瓶）。
h.将上述滤膜放在加热板上吸附垫低温干燥1分钟。
i.将干燥后的膜放在已饱和染色剂的吸附垫上加盖保持5分钟。
j.滤膜放回过滤装置，加10滴甜味剂洗涤液覆盖1/2英寸面积，真空除去多余染色剂，使膜透明。
k.膜放在载玻片上，用小刀或刀片在膜上切出1/2英寸的透明块。
l.加一滴洗液在透明膜块上，然后盖上盖玻片，不得有任何气泡。