HCMV-pp65
• • • •
（二）阴性结果及细胞判定标准
• 阴性细胞判定标准：良好的细胞形态，细
胞核为圆形、肾形、（分叶状、杆状较少 见）细胞核无着色。 • 荧光显微镜下标本背景为暗红色或无明显 着色。
（三）阳性结果及细胞判定标准
阳性细胞判定标准： • 良好的细胞形态，细胞核为圆形、肾形、 （分叶状、杆状较少见）荧光照射呈暗绿 色或苹果绿色，细胞核周围呈暗红色或无 着色。 • 不典型阳性细胞判断标准 细胞形态欠佳，细胞核形态欠佳着色不清晰。
优势:
1. HCMVPP65抗原血症检测试剂采用快速、定量、简单、 2. 3. 4. 5.
敏感和易于读取结果的方法检测活性CMV感染。 比病毒分离快速培养和血清学方法敏感，对已经出现 临床症状的患者检测敏感度是100％。 疾病发作的几天到1周时间内抗原血症能够被检测出， 比快速培养法早2－25天。 当实验室不能进行细胞培养时可应用抗原血症检测。 采用的PP65单克隆混合抗体能够增加阳性样本细胞的 着色数量并且显示一个更加明亮的荧光场景
五、标本读片时视野较暗无法分辨细胞形态 时应注意以下问题：
• 制片过程最后蒸馏水冲洗不彻底；载玻片、盖玻
• •
片不洁净；封片剂用量过多。 应选择在暗室内读片，室内光线越暗越好。 荧光发生器功率应选择100W为宜，功率为50W的 荧光发生器不宜观察 调整荧光显微镜使其荧光位于视野中央易于观察 读片时应使用40倍物镜观察 调准细胞层面
检测人群：
• 用于诊断和跟踪心脏、肺脏、肝脏、肾脏
和骨髓移植接受者体内的HCMV感染 。
• 艾滋病患者体内的HCMV感染。
检验原理
• 采用混合单克隆抗体（IA6+4A8）标记不同
的抗原决定族结合位点表达在外周血白细 胞和单核细胞内的65－68kd磷酸蛋白（蛋 白激酶PP65） • 当病毒在血液散布期间混合单克隆抗体可 以识别存在于外周血受感染的分叶核白细 胞和单核白细胞的HCMV核蛋白内的2个抗 原决定族。
• 大多数经抗病毒治疗后的病人标本中阳性
细胞的数量不会较治疗前明显减少，而细 胞着色亮度会随治疗显效逐渐变暗变浅直 至消失，反之，如果病人未经抗病毒治疗 时，仍需报告为弱阳性至阳性，可提示临 床病人处于CMV感染早期，应给予抗病毒 治疗。
• 综上所述，人巨细胞病毒（HCMV）的低基
质磷酸化蛋白（pp65）抗原血症检测对巨 细胞病毒感染有较好的诊断价值。但做出 正确诊断时应首先保证操作规范，其次认 真阅读每一标本，密切结合临床。当不能 明确诊断时，应结合患者临床症状及相关 实验室检查，认真分析后判定结果。
试验步骤
一.外周血中白细胞的分离.提取
1. 取10ML试管，加入静脉抗凝血3－4ML，加入 1.5MLPBS 2. 加入5％Dextran0.5ML,轻轻翻转试管混匀 3. 37℃恒温箱，倾斜45°放置18－20分钟 4. 吸取RBS上方的白细胞富集层，置于10ML试管中 5. 离心10分钟，1500转/分 6. 弃上清，加入1×RBS裂解液 7. 室温（15－30 ℃ ）放置10分钟，裂解RBC 8. 继续加入5mlPBS，离心同步骤5 9. 如白细胞沉淀中还有RBC，重复7－9步骤 10. 弃上清，5mlPBS洗涤WBC一次，同步骤5 11. 弃上清，0.5mlPBS悬浮WBC
• • •
六、标本中杂质的区分
标本制片过程中难以避免的掺入一 些杂质，这些物质在荧光显微镜下 会发出绿色荧光，少部分发出红色 荧光，区分这些杂质对诊断尤为关 键。
• 观察杂质形态多数杂质为不规则或呈椭圆行与 • • •
正常细胞较易区分 杂质在荧光照射下发出明亮的绿色荧光 难以明确其是否为杂质时可打开显微镜光源并 上下调整微调，杂质有明显的折光性，细胞折 光性较弱。 个别标本中含有微小的液滴，其形态、大小与 细胞较一致也发出暗绿色荧光不易与阳性细胞 区分时，注意观察其形态为正圆形，着色均匀， 且无法看清细胞核内物质，核周围无暗红色区 域，在标本区域外也可看见相同物质。
七、细胞非特异性着色的鉴别
在标本观察中往往出现一些细胞的非 特异性着色但无法判定其为典型阳性细胞 时，应仔细鉴别防止误诊。现将可能出现 的细胞非特异性着色情况及鉴别方法介绍 如下：Biblioteka • •••
标本周围靠近画圈边缘的细胞着色，但标本中央部分的 细胞阴性时，周边细胞多为非特异性着色，可能与免疫 组化染色边缘效应道理一致。 细胞过厚或细胞成片时部分细胞非特异性着色。可能由 于细胞过厚荧光标记素洗脱不净造成。细胞着色可表现 为核周着色，全细胞着色或细胞部分着色，有时细胞中 央可出现点状不着色区，此时不易于其内是否掺杂特异 性着色细胞区分，应注意观察周围散在分布细胞的着色 情况。 在较大杂质周围的细胞非特异性着色。应注意观察周围 散在分布细胞的着色情况。 部分细胞集落性分布呈非特异性着色，由于操作方法为 细胞悬液滴片，故阳性细胞应散在分布而不应呈集落性 分布，此时细胞着色不应视为典型阳性细胞。应注意观 察周围散在分布细胞的着色情况。
应用免疫荧光技术检测外周血 白细胞内HCMVpp65抗原
临床意义 :
• 人巨细胞病毒感染在人群中极为常见，发达
国家HCMV抗体阳性率40％－80％，而在发 展中国家的HCMV抗体阳性率高达90％－100 ％。 • 应用免疫荧光技术检测外周血白细胞内存在 的低基质65kd磷酸蛋白（PP65），此蛋白是 一种蛋白激酶。 • 检测外周血白细胞内HCMVpp65含量用于检 测HCMV急性期或恢复期感染。
四.结果的判定
（一）分级 结果报告分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性四个等级。 判定结果的前提是实验操作严格，阴阳性对照片染色良 好，未出现假阳性或假阴性着色。一个高倍视野下 （400×）检见白细胞数应大于20个。 阴性：2个染色标本中未检见明确的阳性细胞，或不典 型性阳性细胞少于5个，患者无临床症状，其他相关实 验室检查无阳性表现 弱阳性：2个染色标本中检见散在分布的不典型阳性细 胞少于10个，患者无明显临床症状，其他相关实验室检 查部分阳性表现。 阳性：2个染色标本中检见散在分布典型阳性细胞大于3 个，或散在分布不典型阳性细胞大于10个，患者存在临 床症状，其他相关实验室检查部分阳性表现。 强阳性：2个染色标本中检见散在分布多量典型阳性细 胞，患者存在明显临床症状，其他相关实验室检查阳性 表现。
• 以上各种现象可在同一标本中同时出现。
假阳性着色有时极难与典型阳性细胞区分， 诊断时应结合病人的病史、临床症状、既 往检测结果及其它相关化验检查综合分析， 不要轻易诊断为阳性，给病人造成不必要 的经济负担，及应用各种抗病毒药物后产 生的不良反应。必要时可通知临床再次送 检。
七、抗病毒药物对细胞着色的影响
二.白细胞滴片的制备 • 细胞计数板计数并调整白细胞浓度至 4×106/ml • 取出经多聚赖氨酸处理的载玻片.编号.滴片. 干燥 • 固定液固定WBC，室温10分钟 • PBS洗涤玻片3分钟/次，3次 • 立即染色
三.染色 • 每个WBC滴片滴上一滴1抗，阴阳性对照片同时滴 加。 • 玻片放入湿盒，并将湿盒放入37℃恒温箱30分钟 • 取出玻片在PBS中浸泡洗涤3分钟3次 • 于WBC滴片上滴加一滴荧光素标记的2抗，放入湿 盒，37℃恒温箱，3分钟。 • 取出玻片轻轻洗涤玻片3分钟，3次。 • 蒸馏水洗涤玻片3次；吸干； • 甘油封片； • 在40倍荧光显微镜下观察实验结果。
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CMVpp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化
文章编号(A rticle I D):1009-2137(2008)02-0397-04 论著 C MV pp65基因修饰的树突状细胞刺激自身T细胞活化高广勋,陈协群,张劲翼1,朱华锋,董宝侠,顾宏涛,高瑛,潘耀柱第四军医大学西京医院血液科,陕西西安,710032,1多伦多大学西奈山医院Sa m uel Leunenfe l d研究所,加拿大摘要 巨细胞病毒(CM V)感染易发生于慢性移植物抗宿主病(c GV HD)患者,其特异性免疫依赖于T细胞活性。
本研究探讨CM V pp65基因修饰的树突状细胞(D C)对自身T细胞的活化作用。
采用具有高效转染非分裂细胞的慢病毒系统将CM V全长pp65基因导入鼠源性D C;采用CpG D NA诱导D C细胞成熟;采用流式细胞术及免疫荧光方法测定T淋巴细胞抗原及IFN 表达。
结果表明:慢病毒感染D C的感染复数(m ultipli c ity o f i nfecti on, M O I)为50,最佳感染效率可达30%-40%;表达pp65基因的成熟DC能刺激自身na i ve T细胞表达CD69;表达PP65蛋白的成熟D C能够刺激自身CD4+或CD8+T细胞分泌IFN 。
结论:pp65基因修饰、C p G DNA诱导成熟的D C能体外激活C M V特异性T淋巴细胞。
关键词 巨细胞病毒;PP65蛋白;T淋巴细胞;树突状细胞;C p G DNA中图分类号 Q813;R392文献标识码 AC M V pp65G eneM odified Dendritic C ells Activate Autol ogous T C ells GAO G uang X un,CHE N Xie Q un,ZHANG Jin Y i1,ZHU Hua Feng,DONG Bao X ia,GU H ong T ao,GAO Ying,PAN Yao ZhuD epart m en t o fH e m atology,Xiji n g Ho s p it a l,The Fourth M ili tary M ed ical Un iversity,X i an710032,Shanxi Provi nce,Ch i na;1Th e Sa m uel Lun enfel d Res ea rch Insti tute,M oun t S i na iHo s p it a l,U niversity of Toron to,Toron t o,On t a ri o,CanadaAbstract Cy tom eg a l ov irus(CM V)i nfecti on is a dange rous com pli cati o n i n pa ti ents w it h chro nic g ra ft ve rs us ho std isea se(cGVHD).CM V s pec ific i m m un it y depends on the acti v it y of T ce lls.T his st udy w as a i m ed to i nv estiga te thee ffect of CM V pp65g ene m o dif i ed dendritic ce lls(D C s)on ac tiva ti on of aut o l o gous T ce lls.L en ti v irus sy ste m w as utilized to i ntroduce t he CM V full leng th pp65genei nto m o us e D C s;CpG D NA w as used to i nduce m ature D C s;fl ow cy tom e try and i m m uno fl uo re scence w ere used to de t e r m i ne t he ex pre ssi on o f anti g en and IFN in T l ym pho cy te s.T he re s u lts s how ed tha t t he D C s w ere i nfected w ith lentiv irus at a m ulti p lic ity o f i nfec tion(M O I)o f50w it h o pti m a l i n fectious eff i c i ency o f30%-40%;m ature D C s ex pre ssi ng pp65g ene cou l d sti m ulate auto logo us na ive T ce lls to express CD69specif i ca lly;m ature D C s expressi ng PP65co uld sti m ulate auto logo us CD4+or CD8+T ce lls to pro duce IFN .It is conc l uded tha t CM V pp65 m od ified and CpG D NA induced m ature DC s can acti v ate CM V s pec ific T lym phocy tes i n vitro.K ey w ords cy tom ega lov irus;PP65pro te i n;T l ym pho cy te;dendr itic ce l;l C p G DNAJ Exp H e m a to l2008;16(2):397-400巨细胞病毒(C M V)感染易发生于慢性移植物抗宿主病(c GVHD)等免疫功能低下患者,而C M V 免疫依赖于T细胞活性,因此恢复CMV特异性T 淋巴细胞功能对于防治C M V感染就尤为重要。
HCMV IE1和pp65在人神经胶质瘤U251细胞中的时序表达
形 态 学改 变 ， 以 Ｐ Ｃ Ｒ 方 法 检 测 ＨＣ ＭＶ 核 酸 ， 于不同的时间点分 别用抗蛋 白 Ｉ Ｅ １及 蛋 白 ｐ ｐ ６ ５单 克 隆 抗 体
进 行 免 疫 细胞 化 学 染 色 ， 检测 Ｉ Ｅ １及 ｐ ｐ ６ ５的 表 达 水 平 。结 果 ： 受染的 ｕ 细 胞 出现 了 明 显 的 形 态 学 改 变， 并用 Ｐ Ｃ Ｒ 方 法检 测 到 了 ＨＣ ＭＶ核 酸 。免 疫 细 胞 化 学 染 色 表 明 ， 蛋白Ｉ Ｅｌ在 感 染 后 ３ ０ ｍｉ ｎ～２ ｈ无 表 达， ４ ｈ开 始 表 达 ， ｌ ４ ｈ达 高峰 ， 随后 下 降 ； 蛋白ｐ ｐ ６ ５在 感 染 后 ｌ ｈ为 入 侵 型 ｐ ｐ ６ ５． ４—９ ６ ｈ一 直 呈 低 水 平表 达 ， 至 ｌ ２ ０ ｈ表 达 急 剧 升 高 。 结 论 ： ｕ 细胞是 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ的 容许 细胞 ， Ｈ Ｃ ＭＶ 在 其 中 的 表 达 具 有 时 序 性， 但是 其 时 序表 达较 在 人 成 纤 维 细 胞 中延 迟 。
［ 关键 词 ］ 人 巨细 病 毒 ； 人 神 经胶 质 瘤 ； Ｕ ２ ５ Ｉ 细胞 ； Ｉ Ｅ ｌ ； ｐ ｐ ６ ５； 时序 表 达 ［ 中图分类号］ Ｒ ３ ７ ３ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ ｌ ６ ７ ２ — ７ ３ ４ ７（ ２ ０ ０ ７ ） ０ ４ — ０ ５ ５ ｌ 一 ０ ６
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｗ ｈ ｅ ｔ ｈ ｅ ｒ Ｕ ２ ５ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｒ ｅ ｐ ｅ ｒ ｍ ｉ ｓ ｓ ｉ ｖ ｅ ｆ ｏ ｒ ｈ ｕ ｍ ａ ｎ ｃ ｙ ｔ ｏ ｍｅ ｇ ａ ｌ ｏ — ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ（ Ｈ Ｃ ＭＶ） ，ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｉ ｒ ｓ ｔ ｉ ｃ ｓ ｏ ｆ ｔ ｅ ｍ ｐ ｏ ｒ ａ ｌ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｓ Ｉ Ｅ １ ａ ｎ ｄ
进 行 免 疫 细胞 化 学 染 色 ， 检测 Ｉ Ｅ １及 ｐ ｐ ６ ５的 表 达 水 平 。结 果 ： 受染的 ｕ 细 胞 出现 了 明 显 的 形 态 学 改 变， 并用 Ｐ Ｃ Ｒ 方 法检 测 到 了 ＨＣ ＭＶ核 酸 。免 疫 细 胞 化 学 染 色 表 明 ， 蛋白Ｉ Ｅｌ在 感 染 后 ３ ０ ｍｉ ｎ～２ ｈ无 表 达， ４ ｈ开 始 表 达 ， ｌ ４ ｈ达 高峰 ， 随后 下 降 ； 蛋白ｐ ｐ ６ ５在 感 染 后 ｌ ｈ为 入 侵 型 ｐ ｐ ６ ５． ４—９ ６ ｈ一 直 呈 低 水 平表 达 ， 至 ｌ ２ ０ ｈ表 达 急 剧 升 高 。 结 论 ： ｕ 细胞是 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ的 容许 细胞 ， Ｈ Ｃ ＭＶ 在 其 中 的 表 达 具 有 时 序 性， 但是 其 时 序表 达较 在 人 成 纤 维 细 胞 中延 迟 。
［ 关键 词 ］ 人 巨细 病 毒 ； 人 神 经胶 质 瘤 ； Ｕ ２ ５ Ｉ 细胞 ； Ｉ Ｅ ｌ ； ｐ ｐ ６ ５； 时序 表 达 ［ 中图分类号］ Ｒ ３ ７ ３ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ ｌ ６ ７ ２ — ７ ３ ４ ７（ ２ ０ ０ ７ ） ０ ４ — ０ ５ ５ ｌ 一 ０ ６
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ｅ ｗ ｈ ｅ ｔ ｈ ｅ ｒ Ｕ ２ ５ ｌ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｒ ｅ ｐ ｅ ｒ ｍ ｉ ｓ ｓ ｉ ｖ ｅ ｆ ｏ ｒ ｈ ｕ ｍ ａ ｎ ｃ ｙ ｔ ｏ ｍｅ ｇ ａ ｌ ｏ — ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ（ Ｈ Ｃ ＭＶ） ，ａ ｎ ｄ ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｉ ｒ ｓ ｔ ｉ ｃ ｓ ｏ ｆ ｔ ｅ ｍ ｐ ｏ ｒ ａ ｌ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｓ Ｉ Ｅ １ ａ ｎ ｄ
人巨细胞病毒pp65抗原检测
I gM
症状 1
症状 2
抗原血症 1
抗原血症 2
移植后时间 首 次 pp65 抗 原 血 症 出 现 于 移 植 后 59 天 ， 2 天 后 出 现 喘 憋 、 低 氧 血 症 ，经 更 昔 洛 韦 治 疗 13 天 后 症 状 消 失 ， 抗 原 血 症 转 阴 ， 此 时 I gM才 开 始 出 现 弱 阳 性 ， 此 后 I gM持 续 阳 性 。移 植 后 6 个 月 ，再 次 出 现 喘 憋 、低 氧 血 症 ，查 pp65 抗 原 血 症 转 阳 , 经更昔洛韦治疗 7 天后症状消失、抗原血症转阴。
阳性细胞数多少可以帮助判断和预测CMV症状性感染 CMV特异性IgM的阳性检出率非常低，
人巨细胞病毒pp65抗原检测
CMV感染的危险因素 CMV感染组DRI评分大多>20 合并细菌或感染 病程长、未正规治疗的狼疮
人巨细胞病毒pp65抗原检测
三 PP65检测在监测血液肿瘤化疗后和 再障病人中CMV感染中的应用
A 骨髓数量重建 B 配型完全符合者T细胞功能重建 C 配型不完全符合者T细胞功能重建
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用 2 － 骨髓移植后CMV感染的危险因素
CD34＋细胞分选
GVHD(FK506)
TBI
合并其他病原体感染
人巨细胞病毒pp65抗原检测
PP65检测在监测骨髓移植后CMV感染中的应用3 －－治疗时间
人巨细胞病毒pp65抗原检测
研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床
HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。 了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指
导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
pp65抗原在慢性血小板减少性紫癜CMV感染诊断中的意义
ｐ６ 原 在 慢 性 血 小 减少 性 紫 癜 Ｃ ｐ５抗 板 ＭＶ感 染 诊 断 中的意 义
叶 华 甄宇峰 沈娜君 王 吉文
中山大学 附属第二 医院 ’ 急诊科 ， 儿科（ 州 ５ ０ ２ ） 。 广 １１０
【 摘要 】 目的
结果
探讨 ｐ６ 抗原检 测对慢 性 ｒＰ患儿 巨细胞病毒 感 染的临床 意义 。方 法 ｐ５ ｒ
维普资讯
广东医学
２０ ０７年７ 第 ２ 卷第７期 月 ８
・
１ ０７１ ・
［ ］ Ｇ Ａ ＳＰＳ Ｇ Ｎ ＴＪ Ｈ Ｅ Ｌ Ｓ ｖ ｗ ｏ ｔｅ ｈｒ ａ ｋ— ５ Ｌ Ｓ ， Ａ ， Ｗ Ｌ Ｉ ．Ａｒ ｉ ｈ ａ ｃ ｉ ｅｅ ｆ ｐ ｍ ｏ ｎｔ ｓ ｎ ｈｒ ａｏｙ ａ ｉ ｆ ｍｆ ｔ ｉ Ｊ ．Ａ ｅ ｈ Ａ ａ ， ｅｃ ａｄｐ ａ ｃ ｎｍｃ ｏ ｒ ｉ ｎ ｌ ］ ｎｓ ｎ ｌ ｉ ｍ ｄ ｓ ｅａ ［ ｅ ｎ ｔ ｇ
分 剐应 用免 疫 荧
光法和酶联免 疫法， 对慢性 ｒＰ患儿及 同期普通呼吸道 感染 患儿静 脉血 进行 Ｃ ｐ５抗原及 Ｃ ｒ ＭＶ ｐ ６ ＭＶ—ＩＭ 检 测。 ｇ
观察组 ４ 中 ｐ ６ ０例 ｐ５抗原 阳性者 ２ ， ５例 阳性率 ６ ． ％； ＭＶ—ＩＭ 阳性 者 ７例 ， ２５ Ｃ ｇ 阳性率 １ ．％ ， ７ ５ 二者差异具 ｐ６ ｐ ５抗原检 测 比 Ｃ ＭＶ— ｇ 更有助于发现慢性 ⅡＰ患儿 的 Ｃ ＩＭ ＇ ＭＶ感 染， 对进 一步采取针对性 治 有显著性。结论
验。
２ 结 果
毒感染 ， 引起 免疫 反应 ， 血小 板 和 巨核 细胞 受 到破 使 坏 。巨细胞病毒 （ｙ ｍ ｇｌ ｉ ｓ Ｃ ｃｔ ｅａ ｖ ｕ， ＭＶ） ｏ ｏＦ 感染 是导致慢 性 ＩＰ迁延不愈的一个重要 原 因。我们应用 免疫荧光 Ｔ
人巨细胞病毒pp65蛋白的研究进展
殖而 导 致 严 重感 染 。 ＭＶ 由母 婴 传 播 可 致 新 生 儿 神 经 发 ＨＣ
３ Ｈ ＭＶｐ ６ 蛋 白在治疗上的应用 目前临床药 物治疗 Ｃ ｐ５
能限制 Ｈ ＭＶ 感染 的发展 ， Ｃ 但不能 根治感 染且 有副 作用 ， 人们将希望寄 托于免疫治疗 。有资料表 明［ １特异性 细胞 ５， 免疫 对 Ｈ ＭＶ感 染的控制和疾病 的恢复起决定性作 用 ， Ｃ 尤 其是Ｃ Ｄ８ Ｔ细胞的杀伤作用 。 ｚ ｓ ｉ Ｋｕｕ ｈｍａ等 ］ 在异体骨髓 移植 者的研究 中发现 ， 移植后外周血 中特异性Ｃ Ｄ８ Ｔ细胞 恢复的推迟与 Ｈ ＭＶ 的发病 率呈 正 比， 采用体外抗原激 Ｃ 而 活的 Ｈ ＣＭＶ特异性 Ｃ ＋Ｔ细胞返输 ． Ｄ８ 也能有效地 阻止病 毒血症的 出现和疾病的发作 。 Ｃ Ｈ ＭＶｐ ６ 是最主要 的靶抗 ｐ５
的诊 断 、 防 和 治 疗 是 新 近 众 多研 究 者 关 注 的 热 点 。 预 １ ＨＣ ＭＶｐ ６ ｐ ５蛋 白 的 特 性 Ｈ ＣＭＶｐ ６ ｐ ５是 Ｈ ＭＶ 被 膜 Ｃ
蛋 白 ， 于 病毒 的衣 壳 和其 包 膜 之 间 ． 于 低 基 质 磷 酸 化 蛋 位 属 白 ， 子 量 为 ６ Ｄ． 病 毒 总 蛋 白 的 １ 。 在 ＨＣ Ｖ 分 ５ｋ 占 ５ Ｍ
ＨＣ ＭＶ 属 疱 疹 病 毒 口亚科 ， 群 感 染 率 高 （ ８ ～ 人 达 Ｏ
较。结果提示 ， 前两种方法的结果一 致４一０ ６ ９ ， 巢式 ｒ ． ９ ）而 Ｐ Ｒ法 的特异性较差 ， Ｃ 其阳性 预测值较低４ ７ ） ４ 。
９ ） ０ 初次感染后 ． 由于宿主免疫控制 大多数为隐性 感染 ， 且终身伴 随。当机体免疫 功能受损 ， 伏的病毒被激 活 、 潜 增
３ Ｈ ＭＶｐ ６ 蛋 白在治疗上的应用 目前临床药 物治疗 Ｃ ｐ５
能限制 Ｈ ＭＶ 感染 的发展 ， Ｃ 但不能 根治感 染且 有副 作用 ， 人们将希望寄 托于免疫治疗 。有资料表 明［ １特异性 细胞 ５， 免疫 对 Ｈ ＭＶ感 染的控制和疾病 的恢复起决定性作 用 ， Ｃ 尤 其是Ｃ Ｄ８ Ｔ细胞的杀伤作用 。 ｚ ｓ ｉ Ｋｕｕ ｈｍａ等 ］ 在异体骨髓 移植 者的研究 中发现 ， 移植后外周血 中特异性Ｃ Ｄ８ Ｔ细胞 恢复的推迟与 Ｈ ＭＶ 的发病 率呈 正 比， 采用体外抗原激 Ｃ 而 活的 Ｈ ＣＭＶ特异性 Ｃ ＋Ｔ细胞返输 ． Ｄ８ 也能有效地 阻止病 毒血症的 出现和疾病的发作 。 Ｃ Ｈ ＭＶｐ ６ 是最主要 的靶抗 ｐ５
的诊 断 、 防 和 治 疗 是 新 近 众 多研 究 者 关 注 的 热 点 。 预 １ ＨＣ ＭＶｐ ６ ｐ ５蛋 白 的 特 性 Ｈ ＣＭＶｐ ６ ｐ ５是 Ｈ ＭＶ 被 膜 Ｃ
蛋 白 ， 于 病毒 的衣 壳 和其 包 膜 之 间 ． 于 低 基 质 磷 酸 化 蛋 位 属 白 ， 子 量 为 ６ Ｄ． 病 毒 总 蛋 白 的 １ 。 在 ＨＣ Ｖ 分 ５ｋ 占 ５ Ｍ
ＨＣ ＭＶ 属 疱 疹 病 毒 口亚科 ， 群 感 染 率 高 （ ８ ～ 人 达 Ｏ
较。结果提示 ， 前两种方法的结果一 致４一０ ６ ９ ， 巢式 ｒ ． ９ ）而 Ｐ Ｒ法 的特异性较差 ， Ｃ 其阳性 预测值较低４ ７ ） ４ 。
９ ） ０ 初次感染后 ． 由于宿主免疫控制 大多数为隐性 感染 ， 且终身伴 随。当机体免疫 功能受损 ， 伏的病毒被激 活 、 潜 增
人巨细胞病毒pp65抗原检测-医学资料
* CMV特异性抗体IgM，在严重免疫抑制患者可不出现或延迟 出现。
* 人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症较特异性抗体IgM阳性 早出现30天1。优点是可定量检测，5小时内可出结果。
研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床
HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。
了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指 导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
pp6 5抗 原 阳 性 1 3 3
1 6
pp6 5抗 原 阴 性 4
1 6
2 0
计
1 7
1 9
3 6 P < 0 .0 1
发 生 G V H D 组 的 C M V 感 染 发 病 率 明 显 高 于 未 发 生 组 。
FK506
用药 未用药
pp65抗原阳性 6
10
16
pp65抗原阴性 0
20
20
3周－2月感染 54. 8%
16
14
12
10
8
6
4
2
0
alloPBSCT
allo-BMT
BMT+PBSCT
AUTOPBSCT
»¼ Õß Àý Êý
¸Ð Ⱦ
18 16 14 12 10
8 6 4 2 0
ϸ ¾ú ¸Ð Ⱦ
ÎÞ Ï¸ ¾ú ¸Ð Ⱦ
pp65Ñô ÐÔ pp65Òõ ÐÔ
T B I与 C M V 感 染 的 关 系
白 细 胞 ≤ 3000/mm3； 血 小 板 《 75× 109/L； 单 核 细 胞 增 多 ， 异 淋 > 10%; 视网膜炎； CXR 示 间 质 性 肺 炎 和 低 氧 血 症 ， 无 其 他 原 因 解 释 者 ； 肝炎（肝功异常、肝脾肿大），无其他原因解释者； 移植物功能异常 大 脑 病 变 /神 经 系 统 异 常 /多 神 经 炎
* 人巨细胞病毒pp65白细胞抗原血症较特异性抗体IgM阳性 早出现30天1。优点是可定量检测，5小时内可出结果。
研究目的
了解HCMVpp65抗原检测在免疫功能低下者临床
HCMV疾病预测或早期诊断中的价值。
了解HCMVpp65抗原检测在监测疾病活动性和指 导CMV““亚临床感染抗病毒”治疗中的价值。
pp6 5抗 原 阳 性 1 3 3
1 6
pp6 5抗 原 阴 性 4
1 6
2 0
计
1 7
1 9
3 6 P < 0 .0 1
发 生 G V H D 组 的 C M V 感 染 发 病 率 明 显 高 于 未 发 生 组 。
FK506
用药 未用药
pp65抗原阳性 6
10
16
pp65抗原阴性 0
20
20
3周－2月感染 54. 8%
16
14
12
10
8
6
4
2
0
alloPBSCT
allo-BMT
BMT+PBSCT
AUTOPBSCT
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T B I与 C M V 感 染 的 关 系
白 细 胞 ≤ 3000/mm3； 血 小 板 《 75× 109/L； 单 核 细 胞 增 多 ， 异 淋 > 10%; 视网膜炎； CXR 示 间 质 性 肺 炎 和 低 氧 血 症 ， 无 其 他 原 因 解 释 者 ； 肝炎（肝功异常、肝脾肿大），无其他原因解释者； 移植物功能异常 大 脑 病 变 /神 经 系 统 异 常 /多 神 经 炎
儿童抽动-秽语综合征HCMV pp65抗原检测的临床意义
卢银平 ， 继华 ， 朝 （ 中科 技 大学 同济 医学 院附属 协和 医院病毒 研究 室 ， 董 刘 华 湖北 武汉
摘 要： 目的
４ ０２ ） ３ ０ ２
探 讨 儿 童 巨细 胞 病 毒 （ ｍａ ｙｏ ｇ ｌｖｒｓ，Ｈ ＭＶ） 动 性 感 染 与 抽 动一 语 综 合 征 （ ｏ ｒｔ ’ ｓ ｍ Ｈｕ ｎｃ ｔｍｅ ａ ｉ ｏ ｕ Ｃ 活 秽 Ｔ ｕｅｔ ｓ ｙ — ｅ
ＴＳｃ ｉ ｒ ｎｗｅ ｅｐ ｓｔ ｅｔ ｈ ｌ ｅ ｒ ｏ ｉｉ ＯＨＣＭ Ｖ ｐ ５ａ ｔｇ ｎａ ｄｏ ｌ ． ％ ｎ ｒ ｌ ｈｌｒ ｎｗｅｅｐ ｓｔ ｅ Ｔｈ ｏ ｒｓ ｏ ｄ ｎ ｅｏ ｈ ｄ ｖ ｐ ６ ｎ ｉｅ ｎ ｎｙ ２ ５ ｏ ｍａ ｉ ｅ ｒ ｏ ｉｖ ． ｅｃ ｒｅ ｐ ｎ ｅ ｃ ｆｔｅ ｃ ｄ ｉ ＨＣＭ Ｖ ｐ ５ ｔｓ ｎ ｕ ｎ ｉ ｔｖ Ｒ ｓ ８ ． ％ ． ｎ ｌｓｏ Ｔｈ ａ ｅｏ Ｍ Ｖ ｎ ｅ ｔ ｎ ｉ ｈｌｒ ｎ ｍａ ｋ ｄｙ ｐ ６ ｅ ｔａ ｄ ｑ ａ ｔｔ ｉｅＰＣ ｗａ ９ １ ａ Ｃｏ ｃｕ ｉｎ ｅｒ ｔ ｆＨＣ ｉｆｃｉ ｎ ＴＳ ｃ ｉ ｅ ｒ ｅ ｌ ｏ ｄ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｏｂ ｅ ｔｖ Ｔｏ ｉｖ ｓｉａｅ ｔ ｅｒ ｌｔ ｎ ｂ ｔ ｅ ｕ ｅｔ ’ ｙ ｄ ｏ ｓｒ ｃ ： ｊｃｉｅ ｎ ｅ ｔｇ ｔ ｈ ｅａｉ ｅｗｅ ｎ Ｔｏ ｒ ｔｅ Ｓ ｓ ｎ ｒ ｍｅ （ ｏ ＴＳ）ａ ｄ ａ ｔｖ ｕ ｎ ｃ ｔｍｅ ａｏ ｉｕ ｎ ｃｉｅ ｈ ｍａ ｙ ｏ ｇ ｌｖｒ ｓ
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６ ２
现代检验医学杂志
２０ ０ ６年 ９月第 ２ 卷 第 ５期 １
ＪＭｏ ａ ｄ Ｓ ｐｅ ｅ ０ ６ Ｖｏ． １Ｎｏ ５ ｄＬ ｂＭｅ ．ｅ ｔｍｂ ｒ２ ０ ， １２ ， ．
摘 要： 目的
４ ０２ ） ３ ０ ２
探 讨 儿 童 巨细 胞 病 毒 （ ｍａ ｙｏ ｇ ｌｖｒｓ，Ｈ ＭＶ） 动 性 感 染 与 抽 动一 语 综 合 征 （ ｏ ｒｔ ’ ｓ ｍ Ｈｕ ｎｃ ｔｍｅ ａ ｉ ｏ ｕ Ｃ 活 秽 Ｔ ｕｅｔ ｓ ｙ — ｅ
ＴＳｃ ｉ ｒ ｎｗｅ ｅｐ ｓｔ ｅｔ ｈ ｌ ｅ ｒ ｏ ｉｉ ＯＨＣＭ Ｖ ｐ ５ａ ｔｇ ｎａ ｄｏ ｌ ． ％ ｎ ｒ ｌ ｈｌｒ ｎｗｅｅｐ ｓｔ ｅ Ｔｈ ｏ ｒｓ ｏ ｄ ｎ ｅｏ ｈ ｄ ｖ ｐ ６ ｎ ｉｅ ｎ ｎｙ ２ ５ ｏ ｍａ ｉ ｅ ｒ ｏ ｉｖ ． ｅｃ ｒｅ ｐ ｎ ｅ ｃ ｆｔｅ ｃ ｄ ｉ ＨＣＭ Ｖ ｐ ５ ｔｓ ｎ ｕ ｎ ｉ ｔｖ Ｒ ｓ ８ ． ％ ． ｎ ｌｓｏ Ｔｈ ａ ｅｏ Ｍ Ｖ ｎ ｅ ｔ ｎ ｉ ｈｌｒ ｎ ｍａ ｋ ｄｙ ｐ ６ ｅ ｔａ ｄ ｑ ａ ｔｔ ｉｅＰＣ ｗａ ９ １ ａ Ｃｏ ｃｕ ｉｎ ｅｒ ｔ ｆＨＣ ｉｆｃｉ ｎ ＴＳ ｃ ｉ ｅ ｒ ｅ ｌ ｏ ｄ
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６ ２
现代检验医学杂志
２０ ０ ６年 ９月第 ２ 卷 第 ５期 １
ＪＭｏ ａ ｄ Ｓ ｐｅ ｅ ０ ６ Ｖｏ． １Ｎｏ ５ ｄＬ ｂＭｅ ．ｅ ｔｍｂ ｒ２ ０ ， １２ ， ．
CMV-PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染的临床价值
体检 测术后首次 出现 阳性 的平均 时间为 ８ ． ７± ５ ． ８周 ， 两者比较 有显 著差异性 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。 结论 Ｃ ＭＶ — Ｐ Ｐ ６ ５抗
原 检 测 可 早 期 排 除和 预 防 肾移 植 术 后 Ｃ ＭＶ感 染 ， 值 得 临床 推 广 应 用 。
关键词 ： 肾移植 ； 巨细胞病毒 Ｐ Ｐ ６ ５ ； 巨细胞病毒 Ｉ ｇ Ｍ抗体
５ ７ ０
Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｌ ａ Ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ， Ｎｏ ｖ ． ２ ０ １ ３， Ｖｏ １ ． ４ １， Ｎｏ ． ６
文章编号 ： ２ ０ ９ ５—１ １ １ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６— ０ ５ ７ ０— ０ ２
ａ ｌ ｏ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｒ ｅ ｎ ａ ｌ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｅ Ｃ ＭＶ— Ｐ Ｐ ６ ５ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ａ ｎ ｄ Ｃ ＭＶ— Ｉ ｇ Ｍ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｏ ｆ ５ ２ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｗ ｉ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ａ ｌ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｃ ｉ ｐ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｆ ｉ ｎ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍｅ — ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍｍｕ ｎ ｅ ｃ ａ ｐ ｔ ｕ ｒ ｅ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ Ａ ｍｏ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ５ ２ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｏ ｆ ｋ ｉ ｄ ｎ ｅ ｙ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ， ２ ５ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｔ ｅ ｓ ｔ ｅ ｄ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｗｉ ｔ ｈ ＣＭＶ— Ｐ Ｐ ６ ５ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ， １ ７ ｃ ａ — ｓ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｔ ｅ ｓ ｔ ｅ ｄ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｗｉ ｔ ｈ Ｃ ＭＶ— Ｉ ｇ Ｍ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ． Ａｌ ｌ ｐ ａ ｔ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｆ ｏ ｌ ｌ ｏ ｗｅ ｄ ｕ ｐ ｆ ｏ ｒ ３～６ ｍｏ ｎ ｔ ｈ ｓ ， Ｃ ＭＶ ｏ ｃ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｄ ｉ ｎ １ ５ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ ， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｒ ＣＭＶ— Ｐ Ｐ ６ ５ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ， ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｎｄ ａ ｎ ｅ ｇ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｐ ｒ ｅ ｄ ｉ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ｅ ｏ ｆ Ｃ ＭＶ－ Ｐ Ｐ ６ ５ ａ ｎ － ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗｅ ｒ ｅ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｒ ｔ ｈ ｎ ａ ｔ ｈ ａ ｔ ｏ ｆ Ｃ ＭＶ— Ｉ ｇ Ｍ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｔ ｈ ｅ ａ ｖ ｅ ｒ ａ ｇ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｉ ｆ ｒ ｓ ｔ ｐ ｏ ｓ ｔ ｓ ｕ ｒ ｇ ｉ ｅ ｌ ａ ｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ
监测HCMV活动性感染的一种新方法——HCMV PP65抗原血症检测
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活动性感染 的一种新方 法一 Ｈ Ｍ Ｐ ５ 原血症检测 ｃ ｖＰ６ 抗
第６
监 测 ＨＣＭＶ 活 动 性 感 染 的 一 种 新 方 法 一 ＨＣ Ｖ Ｐ ６ Ｍ Ｐ ５抗 原 血 症 检 测
李 敏 综述 季育华 审校 （ 上海第二医科大学附属瑞金 医院检验科 ， 上海 ２０２ ） ００５
据 检 出 阳染 细胞 数 来 判 断 Ｈ ＭＶ激 活 程 度 ， 为 疾 Ｃ 作
病 的诊 断 以及 疗 效 的观 察 指标 Ｈ 。
整 个 检 测 包 括 ３部 分 ： 用 一 定 分 子 大 小 的 ① Ｄ ｘａ ｓ ｍ ｅｔｎ（ｉ ａ公 司 ） ｒ ｇ 分离 出 Ｐ Ｌ 并 调 整 细 胞 浓 度 ＭＮ ｓ
但 以 后 的 大 量 研 究 结 果 证 实 该 抗 原 是 分 子 量 为 ６１） ５ １ 的一 种 低 基 质 磷 酸 化 蛋 白即 Ｐ ６ 。尽 管 能检 ＜ Ｐ５
出 ＨＣ Ｖ Ｐ ６ Ｍ Ｐ ５抗 原 的 外 周 血 细 胞 群 比较 多 ， 单 如
Ｈ ＭＶ的激活 ， 时 以予 抗病 毒 药 物 治疗 ， 免疫 功 Ｃ 适 对
立 的 种种 方 法均 需 与此 结果 作对 照 。 １３ Ｈ Ｍ Ｐ ５抗 原 血症 检 测 方 法 ． Ｃ Ｖ Ｐ ６ Ｈ ＭＶ Ｐ ６ Ｃ Ｐ５
抗原 血症 检 测 法 即用 针 对 Ｈ ＭＶＰ ６ Ｃ Ｐ５的单 克 隆 抗 体， 通过 免疫 酶染 技 术 或免 疫 荧 光 技 术 检 测 外 周 血
应， 即病 毒 本 身导 致 的细 胞 损 伤 和 病 毒 诱 导 的免 疫 病 理损 伤外 ， 还极 易 激发 宿 主 受 损 于 细 菌 、 菌 、 真 原 虫 以及其 他 病毒 的双 重感 染 。
糖尿病患者血清HCMVpp65特异性IgM表达水平
显著性差异 （ ＞ ．５ ， Ｐ ００ ） 且不受 Ｒ Ｆ因子 的影 响。Ｈ ＭＶｐ ６ 一ｇ Ｃ ｐ ５ ＩＭ与 ＨＣ ｐ ５蛋 白表达呈 现 良好的相关性 。 ＭＶｐ ６
结论 酶联捕获 Ｈ ＭＶ ｐ ６ Ｃ ｐ ５特异性 ＩＭ法 具有简便 、快速 、特异和敏感 等特点 ，可诊断 Ｈ ＭＶ活动 性感 ｇ Ｃ
Ｍ ｅ ｈ ｄ Ａｎ ｉｈ ｍａ ｇ ｗｉ ｃ ａｎ ｓ ｅ ｉ ｃｔ ｓ ｃ ａｅ ｎ ｍｉｒ ｐ ａ ｅ ｓ ｃ ｐ ｒｎ ｎ ｉ ｏ ｙ ｆ ｒａ ｓ ｒ ｉ ｇ ｔｏ ｔ ｕ ｎ Ｉ Ｍ ｔ — ｈ ｈ ｉ ｐ ｃｆ ｉ ｗａ ｏ ｔｄ ｏ ｃ ｏ ｌｔ ｓａ ａ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｄ ｏ ｂ ｏ ｂ ｎ ｉ ｙ ｕ ｂ ＩＭ ｅｓ ｅ ｉ ｎ ． ｇ ｉ ｔ ｐ ｃｍｅ ｓ ＨＣ Ｖ ｐ ５ ａ ｔ ｅ ｒＭ ｃ ｓｌｂ ｌ ｄ ｗｉ ｎ ｈ Ｍ ｐ ６ ｉ ｎ ｏ Ａｂ ｗａ ｅ ｅ ｔ ＨＲＰ ｂ Ｉ ｔ ｏ ． ｇ ａ ｔ ｒ ＬＩ Ａ ｎ ｇ ａ ｈ ｙ Ｎａ Ｏ４ ｍｅｈ ｄ Ｉ Ｍ ｃ ｐ ｕ ｅＥ Ｓ ｗａ ｅ ｅｏ ｅ ｎ ｓ ｄ ｔ ｅ ｅ ｔＨＣＭＶ ｆ ｃｉ ｎ ｉ ２ ａ ｉｎ ｓｗｉ ｉｂ ｔ ｓｍｅｌ ｓ ａ ｄ ２ ０ ｈ ａｔ ｙ ｃ ｎ ｏ ｓ ｓ ｄ ｖ ｌ ｐ ｄ ａ ｄ ｕ ｅ ｏ ｄ ｔｃ ｉ ｅ ｔ ｎ ７ ７ ｐ ｔ ｔ ｔ ｄ ａ ｅ ｅ ｌ ｔ ｎ ｏ ｅ ｈ ｉ ｎ ３ ｅ ｌ ｏ ｓ ｌ． ｕ ｈ
方法 利用抗人 ＩＭ （ 链特异性 ）抗体包被 固相载体 ，采用 辣根过氧化物 酶 （ Ｒ ｇ Ｈ Ｐ）标 记 Ｈ Ｍ ｐ ５单 Ｃ Ｖ ｐ６ 糖尿病 患者血 克隆抗体或 Ｈ ＭＶｐ ６ 抗原 ， Ｃ ｐ ５ 建立抗 体捕获 Ｈ ＭＶｐ ６ Ｃ ｐ ５特异性 ＩＭ酶联免疫技术 。用该法检测 ７ ７例糖尿 ｇ ２ 病患 者及 ２ ０例健康献血 员血清样本 ，并与 Ｈ ＭＶ ｐ ６ ３ Ｃ — ｐ ５抗原表 达水平进行 了比较 。 结果
结论 酶联捕获 Ｈ ＭＶ ｐ ６ Ｃ ｐ ５特异性 ＩＭ法 具有简便 、快速 、特异和敏感 等特点 ，可诊断 Ｈ ＭＶ活动 性感 ｇ Ｃ
Ｍ ｅ ｈ ｄ Ａｎ ｉｈ ｍａ ｇ ｗｉ ｃ ａｎ ｓ ｅ ｉ ｃｔ ｓ ｃ ａｅ ｎ ｍｉｒ ｐ ａ ｅ ｓ ｃ ｐ ｒｎ ｎ ｉ ｏ ｙ ｆ ｒａ ｓ ｒ ｉ ｇ ｔｏ ｔ ｕ ｎ Ｉ Ｍ ｔ — ｈ ｈ ｉ ｐ ｃｆ ｉ ｗａ ｏ ｔｄ ｏ ｃ ｏ ｌｔ ｓａ ａ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｄ ｏ ｂ ｏ ｂ ｎ ｉ ｙ ｕ ｂ ＩＭ ｅｓ ｅ ｉ ｎ ． ｇ ｉ ｔ ｐ ｃｍｅ ｓ ＨＣ Ｖ ｐ ５ ａ ｔ ｅ ｒＭ ｃ ｓｌｂ ｌ ｄ ｗｉ ｎ ｈ Ｍ ｐ ６ ｉ ｎ ｏ Ａｂ ｗａ ｅ ｅ ｔ ＨＲＰ ｂ Ｉ ｔ ｏ ． ｇ ａ ｔ ｒ ＬＩ Ａ ｎ ｇ ａ ｈ ｙ Ｎａ Ｏ４ ｍｅｈ ｄ Ｉ Ｍ ｃ ｐ ｕ ｅＥ Ｓ ｗａ ｅ ｅｏ ｅ ｎ ｓ ｄ ｔ ｅ ｅ ｔＨＣＭＶ ｆ ｃｉ ｎ ｉ ２ ａ ｉｎ ｓｗｉ ｉｂ ｔ ｓｍｅｌ ｓ ａ ｄ ２ ０ ｈ ａｔ ｙ ｃ ｎ ｏ ｓ ｓ ｄ ｖ ｌ ｐ ｄ ａ ｄ ｕ ｅ ｏ ｄ ｔｃ ｉ ｅ ｔ ｎ ７ ７ ｐ ｔ ｔ ｔ ｄ ａ ｅ ｅ ｌ ｔ ｎ ｏ ｅ ｈ ｉ ｎ ３ ｅ ｌ ｏ ｓ ｌ． ｕ ｈ
方法 利用抗人 ＩＭ （ 链特异性 ）抗体包被 固相载体 ，采用 辣根过氧化物 酶 （ Ｒ ｇ Ｈ Ｐ）标 记 Ｈ Ｍ ｐ ５单 Ｃ Ｖ ｐ６ 糖尿病 患者血 克隆抗体或 Ｈ ＭＶｐ ６ 抗原 ， Ｃ ｐ ５ 建立抗 体捕获 Ｈ ＭＶｐ ６ Ｃ ｐ ５特异性 ＩＭ酶联免疫技术 。用该法检测 ７ ７例糖尿 ｇ ２ 病患 者及 ２ ０例健康献血 员血清样本 ，并与 Ｈ ＭＶ ｐ ６ ３ Ｃ — ｐ ５抗原表 达水平进行 了比较 。 结果