973标书 黄芪对腹膜透析效能及腹膜间皮细胞与腹腔免

登记序号：计划类别：分类代码：项目编号：科技项目计划设计任务书项目名称：黄芪对腹膜透析效能及腹膜间皮细胞与腹腔免疫功能的影响承担单位：单位地址：邮编：项目负责人：电话：职务职称：主管部门：南京市卫生局填报日期：2002年04月26日江苏省科学技术厅二OO一年制一、立项依据：1、国内外研究现状、发展趋势及理论实践依据：随着腹膜透析（Peritoneal Dialysis，PD）技术的不断提高和透析理论的日趋完善，尤其是1976年Popovich提出的连续非卧床腹膜透析（Continuous Ambulatory Peritoneal Dialysis，CAPD）治疗方法带来了腹膜透析的空前繁荣。

近年来的流行病学资料表明接受腹膜透析治疗的终末期肾功能不全（End-Stage Renal Disease，ESRD）患者正以每年7.5%的比例迅速增长，目前全球已有超过120000的患者在接受腹膜透析治疗。

腹膜透析因其相对于血液透析更高的生活质量、显著的残余肾功能保护、优于或等于血液透析的生存率以及较少的资金花费，故有作者提出，腹膜透析应该是肾脏替代疗法的首选[1,2]。

然而，随着腹膜透析患者寿命的延长，腹膜透析的远期并发症腹膜功能衰竭已成为ESRD患者透析技术性失败的最重要的原因[3]，并成为制约腹膜透析发展的“瓶颈”。

资料显示约1/3的腹膜透析患者6年后因腹膜功能衰竭而退出透析治疗。

腹膜功能衰竭与长期腹膜透析后腹膜结构和功能破坏进而导致腹膜超滤失败以及溶质转运功能障碍密切相关[4]。

腹膜透析液的生物不相容性是导致腹膜功能衰竭的首要原因，腹膜间皮细胞作为腹膜组成部分在这一过程中扮演着重要角色。

近年来随着人腹膜间皮细胞标准培养方法和腹膜透析动物模型的确立，腹膜功能衰竭的机理得以初步阐明。

腹膜间皮细胞在长期非生理性透析液刺激下，转移生长因子β（TGF-β）mRNA过度表达，TGF-β作为细胞增殖与细胞外基质合成的重要调节因子，导致细胞外基质合成增加和腹膜纤维化[5]，最终导致腹膜超滤失败和溶质转运功能障碍。

同时TGF-β也是调节细胞凋亡的重要细胞因子，组织病理学证实腹膜功能衰竭的重要特征表现为腹膜间皮细胞的丧失，过多的TGF-β表达将增加间皮细胞的凋亡，导致间皮细胞的完整性受到破坏，研究表明完整的间皮细胞层可以显著延缓腹膜纤维化的进程。

其次，腹膜透析的主要并发症腹膜感染也是导致腹膜功能衰竭的重要原因,反复的炎症刺激使腹膜局部高水平TGF-β持续存在致使腹膜发生纤维化和硬化[6]。

目前公认长期腹膜透析时腹腔细胞免疫功能抑制是导致腹膜反复感染的主要原因,尤其是被认为是腹腔细胞免疫功能最重要组成部分和腹膜抵抗细菌感染第一道屏障的巨噬细胞功能的明显抑制。

研究表明，腹膜在长期非生理性透析液的刺激下，巨噬细胞功能受到抑制，当腹膜发生感染时透析患者腹腔巨噬细胞功能指标包括吞噬指数、白细胞介素1（IL-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平显著降低，如果改用更符合生理条件的透析液则可以使腹腔巨噬细胞功能得到明显增强，从而增强腹膜对感染的抵抗能力，减少腹膜炎的发生[7]。

最近，腹膜血管在腹膜功能衰竭中的作用也得到重视，充足的血流除了能有效增强腹膜的抵抗力减少腹膜炎的发生外[8]，也是维持长期腹膜透析患者腹膜转运功能的重要因素。

腹膜血管血流量减少时腹膜溶质转运和腹膜超滤率均显著下降[9]，研究显示长期腹膜透析患者腹膜血管内皮细胞依赖的血管舒张因子显著减少，从而影响腹膜透析的效能，而如在腹膜透析液中添加扩血管物质硝普纳则能有效提高腹膜透析患者的透析效果。

基于上述研究结果，近年来临床医师一直致力于两方面的研究。

一是研究更符合生理条件以及不影响腹膜免疫功能的全新的腹膜透析液。

虽然已有诸如含多聚糖、含氨基酸、含碳酸氢根等多种透析液的体外实验的报道，但事实上所有这些透析液并不能完全替代葡萄糖作为渗透性物质的作用，其临床应用前景尚不明确。

另一方面，肾脏病医师通过在现有的透析液中添加一些物质来达到保护和改善腹膜功能的目的。

有研究表明在透析液中加入双嘧莫达能显著降低小鼠腹透液中TGF-β的含量，而加入透明质酸可以在保护腹膜间皮细胞方面起到一定的效果。

中药黄芪是一种含有多糖、甙、黄酮和微量元素等多种成分的物质，其具有多重药理作用[10]。

黄芪能显著抑制炎症因子TGF-β的表达，从而延缓肝脏、肾脏等多种脏器疾病时发生纤维化的进程；能明显减缓人胚二倍体细胞自然衰老过程延长细胞寿命约1/3左右[11]；能有效地调节细胞免疫功能，通过向小鼠腹腔注射黄芪可以发现腹腔巨噬细胞吞噬功能得到增强，从而增强腹膜抗菌能力；黄芪还具有扩血管的作用，研究显示其能显著抑制血管收缩物质内皮素的释放，从而可能起到扩张血管增加血流量的作用[12]。

根据黄芪的上述作用，可以推测，在腹膜透析液中加入黄芪可以起到延长腹膜间皮细胞的寿命、抑制间皮细胞TGF-β的分泌、提高腹腔巨噬细胞功能、改善局部微循环，从而阻止/延缓腹膜纤维化和防止腹膜感染的发生，达到阻止/延缓腹膜功能衰竭的目的。

然而关于黄芪在腹膜透析中的应用尚无相关报道。

主要参考文献：1. Thodis E, Passadakis P, Vargemezis V, Oreopoulos DG.Peritoneal dialysis: better than, equal to, or worse than hemodialysis? Data worth knowing before choosing a dialysis modality. Perit Dial Int ,2001; 21:25-35.2. Van Biesen W, Vanholder R, Lameire N.The Role of Peritoneal Dialysis as the First-Line Renal Replacement Modality.Perit Dial Int , 2000;20: 375 - 3833. An S. De Vriese, Siska Mortier, Norbert H,et al.What happens to the peritoneal membrane in long-term peritoneal dialysis? Perit Dial Int, 2001;Vol. 21 ;:S9-28 4．Devuyst O,Topley N,Williams JD.Morphological and functional changes in the dialysed peritoneal cavity:impact of more biocompatible solutions.Nephrol Dial Transplant,2002;17(3):12-55.Blobe GC,Schiemann WP,Lodish HF.The role of transforeing growth factor beta in human disease.N ENGL J Med ,2000;342:1350-86．Lin CY,Chen WP,Yang LY,et al.Persistent transforming growth factor-betal 1 expression may ptedict peritoneal fibrosis in CAPD patients with frequent peritonitis ocurrence.Am J Nephrol,1998;18:513-97.Jones S,Holmes CJ,Mackenzie RK,etal.Continuous dialysis with bicarbonate/lactate-buffered peritoneal dialysis fluids in a long-term improvement in ex vivo peritoneal macrophage function.J A Soc Nephrol,2002;13:S97-103 8．Park MS.Factors increasing severnity of peritonitis in long-term peritonealdialysis patients.Adv Ren Replace Ther，1998；5：185-939.Ronco C,Brendolan A,Crepaldi C,et al.Ultrafiltration and clearence studies in human isolated pertoneal vascular loops.Blood Purif,1994;12:233-4210.耿长山。

黄芪的免疫药理研究进展。

中西医结合杂志，1986；6：62-6411．孟庆云。

中国中医药发展50年。

P28012．伍敦裕，林海玲。

黄芪注射液治疗慢性肾功能不全患者血浆内皮素变化及其意义。

实用医学杂志，1998；14：6112、研究目的与意义：研究目的：通过体外人腹膜间皮细胞培养观察中药黄芪在抑制由高糖引起的TGF-β过度表达中的作用，通过动物实验从组织病理学角度观察黄芪对腹膜间皮细胞完整性的维护和腹膜纤维化的抑制以及巨噬细胞功能调节等方面的作用，通过临床观察了解黄芪对腹膜转运功能和免疫功能的影响，从不同层面了解黄芪在阻止/延缓腹膜功能衰竭中的作用及其机制，为临床上改善长期腹膜透析患者透析疗效提供一种新的治疗方法。

研究意义：随着临床腹膜透析的广泛应用以及腹膜透析患者寿命的延长，临床上因长期腹膜透析导致腹膜功能衰竭进而透析失败的患者越来越多。

中药黄芪在我国分布广泛且有2000多年的应用历史。

目前临床上已有黄芪注射液制剂，并且由于黄芪可以直接注入腹腔，因此通过从不同层面了解黄芪在阻止/延缓腹膜功能衰竭中的作用及其机制的研究，在临床上推广使用黄芪来阻止/延缓腹膜功能衰竭从而延长ESRD患者腹膜透析时间、提高透析质量、减少透析失败率，提高腹膜透析远期疗效具有广泛的应用前景。

3、技术查新：参见附页。

二、研究内容：研究内容：本课题采用体外细胞培养、动物实验、组织病理学与临床相结合的系统研究方法，从多个方面研究中药黄芪在防止/延缓腹膜功能衰竭中的作用，并从不同层面和角度解释其作用机理。

通过体外人腹膜间皮细胞培养了解黄芪在抑制间皮细胞TGF-β表达方面的作用；通过动物实验从组织病理学的角度直观了解黄芪在间皮细胞保护以及在阻止/延缓腹膜纤维化中的作用；通过临床应用，了解黄芪对腹膜转运功能以及免疫功能方面的影响。