微生物棉签擦拭取样方法验证记录1
清洁验证微生物检查记录
编号：SMP-09-00702-g
清洁对象名称
供样单位
取样点
检验日期
年 月 日
编号
报告日期
年 月 日
温度
℃
相对湿度
％
检验依据
《中国药典》2015年版四部《非无菌产品微生物限度检查》
标准规定
需氧菌≤100cfu/100cm²；霉菌酵母菌≤100cfu/100cm²
供试液的制备：用棉签擦拭取样点100cm²，将棉签放入无菌具塞玻璃试管中，加入10ml生理盐水中，振摇混匀，作为1:10的供试液。按《非无菌产品微生物限度检查》进行检验。
检查结果
需氧菌
培养箱型号：
培养箱编号：RHBC-ZK-
设定温度：
霉菌、酵母菌
培养箱型号：
培养箱编号：RHBC-ZK-
设定温度：
1
2
阴性
对照
1
2
阴性
Hale Waihona Puke 对照1天1天2天
2天
3天
3天
4天
4天
5天
5天
6天
7天
平均
平均
结果
结果
结论
检验人
复核人
表面微生物检验记录车间)
文件号：FQ-255
表面微生物检验记录
受检部门
受检人员
测试方法
接触平皿法
检验日期
年月日
完成日期
年月日
测试步骤：
取一次性无菌接触碟，碟子直径为50～55mm，取样面积一般为25cm2。取样时，打开
荡，再用薄膜过滤法计数，置33℃±1℃培养箱中培养。
菌落总数测定(30～35℃)：
菌落数
取样部位
培养时间
报告数
阴性对照
备注
1d
2d
3d
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
cfu/25cm2
菌落数
取样部位
培养时间
（24℃±1）
培养时间
（33℃±1）
报告数
阴性
对照
备注
1d
2d
3d
1d
2d
额头
cfu/碟
口罩
cfu/碟
左肩
cfห้องสมุดไป่ตู้/碟
右肩
cfu/碟
左肘
cfu/碟
右肘
cfu/碟
左腕
cfu/碟
右腕
cfu/碟
左手指
cfu/碟
右手指
cfu/碟
左手掌
cfu/碟
右手掌
cfu/碟
左膝
cfu/碟
微生物表面取样方法
微生物表面取样方法引言：微生物是一类极其微小的生物体，存在于各种环境中，包括土壤、水体、空气中以及生物体的表面等。
研究微生物对于了解生物界的多样性、生态系统的功能以及人类健康等具有重要意义。
然而，微生物的研究面临着一个重要的问题，即如何有效地采集微生物样品。
本文将介绍几种常用的微生物表面取样方法。
一、刷拭法刷拭法是最常用的微生物表面取样方法之一。
该方法适用于采集微生物富集在固体表面的样品，如建筑物、设备表面等。
操作步骤如下：1. 选择一把消毒过的刷子，并将其浸入含有适当缓冲液的容器中。
缓冲液的选择应根据研究的目的而定，常见的有PBS缓冲液、生理盐水等。
2. 将刷子沿着被采样表面来回刷拭，以保证样品的均匀采集。
3. 将刷子放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，以使微生物从刷子上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
二、擦拭法擦拭法是一种适用于平滑表面的微生物采样方法。
常见的应用场景包括医院、实验室等地的台面、玻璃器皿等。
操作步骤如下：1. 选择一块消毒过的无纺布或棉签，并将其浸入含有缓冲液的容器中。
2. 将布或棉签沿着被采样表面来回擦拭，以保证样品的均匀采集。
3. 将布或棉签放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，使微生物从布或棉签上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
三、粘贴法粘贴法适用于采集微生物富集在不规则表面或微小孔隙中的样品，如土壤、植物叶片等。
操作步骤如下：1. 准备一块消毒过的胶片或胶带，并将其贴在采样区域上。
2. 将胶片或胶带撕下，并放入含有缓冲液的试管中。
3. 进行震荡或振荡，使微生物从胶片或胶带上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
四、切割法切割法适用于采集微生物富集在固体样品表面的样品，如食品、植物组织等。
操作步骤如下：1. 准备一把消毒过的刀具，并将其切割在需要采样的区域。
2. 将切割下来的样品放入含有缓冲液的试管中。
清洁验证取样方法及检验方法验证方案
清洁验证取样方法及检验方法验证方案文件编码：EL-YZ54010-01文件审定部门签名日期起草人审核人审核人审核人审核人审核人批准人四川诺迪康威光制药有限公司目录1.概述 (3)2.目的 (3)3.适用范围 (3)4.职责 (4)5.验证条件 (4)6.验证时间计划 (4)7.验证要求及标准 (2)8.验证实施 (7)9. 验证结果评定与结论 (7)10. 拟定再验证周期 (7)11. 附件 (7)1.概述：生产过程中所用的生产设备均可能有残留物遗留，为了最大程度的避免由于上一批次生产产品的残留影响下一批次或其他品种，故必须对生产所用的设备进行清洁。
清洁后要对该清洗方法进行取样检测残留量。
一般通常的取样方法为棉签擦拭法和淋洗法。
由于我公司产品均为中成药，成分复杂，无法对每一成分进行测定，所以检测方2.目的：考察清洗验证涉及取样过程和所用检测方法的过程，是对人员取样操作、残留物转移、测试过程的考察，考察项目最低定量限、线性、综合回收率等。
3.适用范围：清洁验证取样方法及检验方法。
姓名部门小组职务职责方延刚质量管理部组长负责验证的组织协调工作，以保证本方案规定的验证项目顺利实施；负责验证数据及结果的审核；负责验证报告的起草；负责验证周期的确认乐元保工程部组员负责组织试验所需器具的校验。
张慧质量管理部组员负责验证现场监管并协调验证工作；负责偏差、变更的审核，杨燕质量管理部组员负责起草验证方案；负责验证方案的实施；负责协助调查和处理验证过程中的偏差；参与检验方法验证方案的实施；制备阴性样品。
李新质量管理部组员负责验证方案的实施。
负责协助调查和处理验证过程中的偏差。
陶瑶质量管理部组员负责验证方案的实施。
负责协助调查和处理验证过程中的偏差。
5.条件5.1.检验操作规程齐全（记录见附件1）5.2.设备相关标准操作规程齐全、用具齐全（记录见附件2）5.3.检验、检测仪器均已校验（记录见附件3）5.4.风险识别项目风险源风险发生的失败模式风险可能导致的后果1 文件与人员培训无操作指导文件，操作人员未经培训仪器操作失当，出现操作事故2 环境环境温湿度不符合要求影响仪器正常运行3 仪器状态仪器运行不正常；功能障碍、电源不符合要求损坏仪器4 试剂、试液、样品、工具不符合要求导致验证失败或结果不准确。
配液系统及灌装系统清洁验证1
配液系统及灌装系统清洁验证方案起草人/日期审核人/日期批准人/日期1.概述血液透析浓缩液是由多种化学原料药组成，在生产过程中用透析用水溶解这些化学原料药，灌装完毕后总会有一小部分药液残留于设备里。
按照工艺操作程序文件和作业指导书之规定，每一个批次产品生产完成后，要对现场进行清场。
清场的目的就是为了彻底清楚残留于设备中的残留物质，防止交叉污染，为下一个批次生产做好准备。
组成血液透析浓缩液的化学成分为：氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、冰醋酸。
这些成分和水的亲和力是不同的，其中氯化钠亲和力最弱。
在该项验证中，我们选择最后检测的物质就是氯化钠，亲和力最差（最难清洗掉）的物质被清洗掉了，亲和力强（容易清洗掉）的物质一定最早被清洗没有了。
2.目的通过验证证明清洁方法的有效性3.验证范围配液系统以及灌装系统4.验证实施时间本方案计划于年月日至年月日实施6.清洁剂的选择透析用水7.验证内容7.1 取样方法7.1.1化学成分残留取样（1）最终淋洗水取样用洁净500ml取样瓶收集灭菌结束后注入小于最小生产量的透析用水循环5分钟后的水样。
（2）棉签擦拭取样将洁净药签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。
在向前移动的同时将其从一边移到另一边。
擦拭过程应覆盖整个表面。
翻转药签，让药签的另一面也进行擦拭。
但与前次擦拭移动方向垂直，见下图：7.1.2 微生物污染取样（1）最终淋洗水取样用无菌500ml取样瓶收集注入小于最小生产量的透析用水循环5分钟后的水样。
（2）棉签擦拭取样将无菌棉签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面。
在向前移动的同时将其从一边移到另一边。
擦拭过程应覆盖整个表面。
翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭。
但与前次擦拭移动方向垂直，见下图：7.2 取样工具洁净取样瓶500ml、无菌取样瓶500ml、洁净棉签、无菌棉签、带螺旋盖洁净试管、带螺旋盖无菌试管7.3 取样溶剂透析用水7.4 取样位置7.4.1 最终淋洗水取样：过滤器末端、灌装机出液口最末端7.4.2 棉签擦拭取样：罐顶及罐内壁8.取样计划在生产透析A液一个批次后按清洁规程实施清洁。
微生物室清洁验证方案
微生物室清洁验证方案（TSD-YZ-20014-0）起草审核批准目录1、目的2、依据3、适用范围4、概述5、职责6、验证计划7、验证步骤8、可接受标准9、验证次数10、清洁验证检测记录11、结果分析及报告1、目的：对微生物室清洁进行验证，检查并确认清洁SOP规程的清洁效果的重现性。
2、依据：药品生产质量管理规范及设备说明书。
3、适用范围：本方案适用于质管部微生物室清洁验证。
4、概述微生物室是化验室进行微生物限度检查的场所，室内净化区设计为万级、局部百级。
微生物室净化空气经初、中效过滤后再经高效过滤后进入微生物限度检查室和生物检定室及其缓冲间、更衣室。
微生物限度检查室和生物检定室室内空气压差＞5Pa，洁净室与室外空气压差＞10Pa，洁净区与一般区之间装有传递窗，并装有紫外线灯进行消毒。
7、验证步聚7.1清洁方法：按照微生物室清洁规程进行操作。
7.2取样工具：普通药棉签、无菌药棉签、培养皿、7.3取样溶剂：0.9%无菌氯化钠溶液、纯化水7.4取样及检测方法7.4.1 取样部位、取样点数参见附表1、附表2规定。
7.4.2 取样点数为一个时,由取样人员选择最差状况点为取样点;取样点多个时其布局按要求确定取样点数。
7.4.3 每点用棉签擦拭方法手持棉签尾部,稍施压力使棉签略弯曲。
擦拭面积内不得漏擦，且使棉签不断翻转，以保证取样的代表性。
7.4.4 微生物检查取样检测:用浸有0.9%无菌氯化钠溶液的无菌棉签,擦拭所选点表面,每点25cm2,将棉签与手接触部分用无菌剪刀剪去,采样部分置于事先备妥的10ml0.9%的无菌氯化钠溶液试管中,密闭。
将采集到的样品试管在微生物实验室内，振摇1min，作为供试液。
取1ml供试液，点于Φ90mm培养皿中，随后倾注备妥的45℃左右的营养琼脂培养基约15ml，随即转动培养皿，待凝固后，移出实验室。
同时作阴性对照。
置30-35℃恒温培养箱中培养48小时，用肉眼观察点计菌落数。
7.4.5 普通棉签擦拭取样:取一干净的普通棉签,以纯化水湿润,按要求擦拭取样即可。
关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验
关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验发布时间：2021-12-30T08:36:42.297Z 来源：《中国科技人才》2021年第25期作者：董小燕[导读] 微生物在适当温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而增加残留物复杂性和危害程度，进而对下批产品造成不良影响。
因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。
此外，擦拭取样能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性最难清洁部位的残留物水平评价整套生产设备的清洁状况。
哈药集团三精制药有限公司黑龙江省哈尔滨市 150069摘要：为降低药物交叉污染及微生物污染风险，保证用药安全，延长系统或设备使用寿命，提高企业经济效益设备。
药品生产的每道工序完成后，需对药品生产设备进行清洁，并对清洁方法进行验证，在以前清洁验证中要求对化学残留取样方法进行验证，却未要求对微生物取样方法进行确认，而《药品生产质量管理规范》新增了对表面微生物取样和检验方法验证的要求。
关键词：制药设备；清洁验证；表面微生物微生物在适当温湿度下以残留物中的有机物为营养可大量繁殖，产生各种代谢物，从而增加残留物复杂性和危害程度，进而对下批产品造成不良影响。
因此必须对药品生产设备的微生物进行严格控制。
此外，擦拭取样能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性最难清洁部位的残留物水平评价整套生产设备的清洁状况。
一、清洁验证目的清洁验证是对清洁程序进行的验证方法，一般经过对数据的收集等工作，来证明清洁程度是否能达到清洁设备的标准要求。
此外，若在进行多种药品的生产时，使用同一种设备进行生产，这样会导致问题的出现，因一旦生产完一种产品未及时进行设备的清洗，会直接导致下一批药物生产受到污染，从而影响药品质量。
但在实际生产时，许多药品需一个设备进行生产，并且清洁设备的方法也都无太大差别，这时制药公司就可根据药品所需原料及其溶解性质、稳定因素、需要清洁的剂量等进行有效分析，之后将其安全指数根据数据统一计算。
表面微生物检验记录
cfu/碟
右膝
cfu/碟
标准规定
≤5cfu/碟
结 论
□符合规定 □不符合规定
检验者：录
受检部门
测试方法
棉签擦拭法
检验日期
年 月 日
完成日期
年 月 日
测试步骤：
取样前，棉签头先湿润（无菌生理盐水）。取样时，握住棉签柄，以约300角与取样表
面接触，缓慢并充分擦拭，取样面积25cm2，然后将取样头折断放入上述溶液内，充分振
菌落总数测定(30～35℃)：
菌落数
取样部位
培养时间
（24℃±1）
培养时间
（33℃±1）
报告数
阴性
对照
备注
1d
2d
3d
1d
2d
额头
cfu/碟
口罩
cfu/碟
左肩
cfu/碟
右肩
cfu/碟
左肘
cfu/碟
右肘
cfu/碟
左腕
cfu/碟
右腕
cfu/碟
左手指
cfu/碟
右手指
cfu/碟
左手掌
cfu/碟
右手掌
cfu/碟
文件号：FQ-255
表面微生物检验记录
受检部门
受检人员
测试方法
接触平皿法
检验日期
年 月 日
完成日期
年 月 日
测试步骤：
取一次性无菌接触碟，碟子直径为50～55mm，取样面积一般为25cm2。取样时，打开
碟盖，无菌培养基表面与取样面直接接触，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取
样点表面均匀充分接触，再盖上碟盖，先于24℃±1培养3天，再转至33℃±1培养2天。（取样后，需要立即用75%酒精消毒剂擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。）培养结束时，对每个平皿的菌落数进行计数并报告最终结果。
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1 附录一文件检查
备注: □无(如没有,打勾) 填写额外的信息
2 附录二培训
备注: □无(如没有,打勾) 填写额外的信息
3 附录三验证用物品3.1 器具及设备
3.2 菌种
3.3 培养基及稀释液
备注: □无(如没有,打勾)
填写额外的信息
4 附录四验证试验
4.1 菌液的制备
取经℃培养h的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每0.1ml含菌数50～100CFU的工作菌液，做活菌计数备用。
取经℃培养h的白色念珠菌改良马丁培养基培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每
0.1ml含菌数50～100CFU的工作菌液，做活菌计数备用。
4.2 活菌计数：
分别取以上已稀释制备好的各种菌液0.1ml，置直径90mm的无菌平皿，注入20ml温度不超过45 ℃的融化培养基，按规定条件培养后计数。
活菌计数结果见下表：
表一活菌计数（CFU/0.1ml）
4.3 擦拭取样计数结果
4.3.1 阴性对照菌落结果见表二
表二阴性对照菌落结果（CFU/25cm2）
4.3.2 菌落回收结果见表三、表四
表三不锈钢载片菌落回收结果
表四玻璃载片（培养皿）菌落回收结果
备注: □无(如没有,打勾)
填写额外的信息
5 验证偏差和变更5.1 偏差
5.2 变更。