细胞种类
免疫细胞的种类和功能
免疫细胞的种类和功能
免疫细胞是指参与免疫应答或与免疫应答相关的细胞。
包括淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞等。
以下是部分免疫细胞的种类和功能：
1. 淋巴细胞：包括T细胞、B细胞等，它们识别并攻击体内的病原体和异常细胞，如细菌、病毒、真菌等，以及癌细胞。
2. 树突状细胞：主要功能是摄取、加工、转运抗原，为专职抗原提呈细胞，是人体免疫应答中功能最强的抗原提呈细胞。
3. 单核/巨噬细胞：主要功能是吞噬病原体和死亡的细胞，并释放化学物质来刺激其他免疫细胞的活动。
4. 粒细胞：主要功能是吞噬和消化病原体，释放化学物质来帮助其他免疫细胞的活动。
此外，自然杀伤细胞（NK细胞）、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞等也属于免疫细胞的种类。
这些免疫细胞通过相互配合和协同作用，保护身体免受外来病原体的侵袭，维护身体的健康。
在肿瘤的治疗中，免疫细胞也起着重要作用。
例如，T细胞可以通过识别和杀死肿瘤细胞来降低肿瘤的大小和数量。
此外，免疫细胞还可以识别和杀死转移性肿瘤细胞，防止癌症扩散。
总结细胞分类
总结细胞分类引言细胞是生命的基本单位，它们在构成生物体组织和发挥生物功能中起着重要作用。
根据形态、功能、结构和组织等特征，细胞可以被分类为多种类型。
本文将总结常见的细胞分类方法，并对每个分类进行简要介绍。
细胞分类方法细胞可以根据不同的标准进行分类，常见的细胞分类方法包括：1.形态分类2.功能分类3.结构分类4.组织分类下文将对这些分类方法进行详细介绍。
形态分类形态分类是根据细胞形态特征进行分类的方法。
细胞形态包括细胞形状、大小、颜色等方面的特征。
根据形态分类，细胞可以分为以下几类：•球形细胞•柱状细胞•扁平细胞•不规则形细胞形态分类主要用于描述细胞的外观特征，常用于形态学研究和细胞观察。
功能分类功能分类是根据细胞所具有的功能特点进行分类的方法。
细胞功能种类繁多，不同细胞具有不同的功能。
常见的细胞功能分类包括：•红细胞：主要负责携带氧气和二氧化碳。
•白细胞：参与免疫反应和抵抗病原体。
•神经细胞：传递神经信号。
•肌肉细胞：产生肌肉收缩力。
•脂肪细胞：负责脂肪储存。
功能分类关注细胞所具有的特殊功能，有助于揭示细胞在整个生物体中的作用。
结构分类结构分类是根据细胞内部的结构特征进行分类的方法。
细胞内部包含多种不同的细胞器，细胞器之间的组合和特征不同，导致细胞的结构差异。
根据结构分类，细胞可以分为以下几类：•原核细胞：没有细胞核和细胞器。
•真核细胞：有细胞核和细胞器。
结构分类主要用于描述细胞内部结构的差异，有助于研究细胞功能和进化。
组织分类组织分类是根据细胞在生物体中的组织分布特点进行分类的方法。
细胞可以构成多种不同类型的组织，根据细胞组织的类型和分布，细胞可以分为以下几类：•上皮细胞：构成皮肤和器官的表面层。
•结缔组织细胞：构成结缔组织，如骨骼和软组织等。
•神经组织细胞：构成神经系统的各个组织。
•肌肉细胞：构成肌肉组织。
•血细胞：构成血液。
组织分类用于描述细胞在生物体中的特定分布和组织结构。
结论细胞是生物学研究的重要对象，对细胞进行分类有助于深入了解细胞的形态、功能、结构和组织等特征。
免疫细胞常见种类
免疫细胞是指在机体免疫应答中起关键作用的细胞，包括以下常见种类：
1. B淋巴细胞（B cells）：B淋巴细胞主要负责体液免疫，可以分泌抗体来中和病原体或促进其他免疫细胞的活化。
2. T淋巴细胞（T cells）：T淋巴细胞主要负责细胞免疫，可以直接杀伤感染的细胞或调节其他免疫细胞的活化。
3. 自然杀伤细胞（Natural Killer cells，NK细胞）：NK细胞是一类具有杀伤性活性的淋巴细胞，可以识别并杀伤病原体感染的细胞。
4. 嗜中性粒细胞（Neutrophils）：嗜中性粒细胞是一类多形核白细胞，主要负责吞噬和消化病原体。
5. 单核细胞（Monocytes）：单核细胞是一类单核形态的白细胞，可以分化为巨噬细胞或树突状细胞，参与吞噬病原体、呈递抗原等免疫功能。
6. 树突状细胞（Dendritic cells）：树突状细胞是一类具有高度突起的细胞，主要负责呈递抗原并激活T淋巴细胞。
7. 嗜酸性粒细胞（Eosinophils）：嗜酸性粒细胞是一类多形核白细胞，主要参与过敏反应和寄生虫感染的免疫应答。
8. 嗜碱性粒细胞（Basophils）：嗜碱性粒细胞是一类多形核白细胞，主要参与过敏反应和炎症反应。
这些免疫细胞在机体免疫应答中相互协作，形成免疫系统，保护机体免受病原体的侵害。
什么是细胞？
什么是细胞？随着科学技术的不断进步和发展，我们对于“细胞”这个概念也越来越熟悉。
细胞是构成人类生命的基本单位，是所有生物体中最小的有机单位。
那么，什么是细胞？它又具有哪些特征和功能呢？一、细胞的定义和结构1.1 什么是细胞？细胞是最小的生物学单位和所有生命存在的基本组成部分。
它在生命活动的过程中具有重要的功能和作用。
1.2 细胞的结构细胞的结构相当复杂，主要包括细胞质、细胞核和细胞器等。
其中，细胞质是细胞的主体部分，细胞核是控制细胞代谢和生长的中心。
细胞器则是细胞质内的各种微小结构，如线粒体、内质网、高尔基体和溶酶体等。
这些细胞器具有不同的形状和功能，在细胞代谢和生长中都发挥着重要的作用。
二、细胞的特征和功能2.1 细胞的特征细胞具有许多特殊的特征，如生长、分裂、代谢、运动和适应环境的能力等。
它们能够通过吸收营养、代谢废物和合成物质来保持正常的生命活动。
2.2 细胞的功能细胞在生命活动中发挥着各种各样的功能，如合成、分解、储存和运输。
这些功能可以通过细胞器的协同作用来进行，同时也受到各种内外环境的影响。
三、细胞的种类和分类3.1 细胞的种类细胞的种类非常繁多，可以分为动物细胞和植物细胞等。
动物细胞主要包含有线粒体、内质网和高尔基体等器官，而植物细胞则包含有叶绿体、细胞壁和中央液泡等组成部分。
3.2 细胞的分类根据生物学的分类学原理，细胞可以进一步分为原核细胞和真核细胞。
原核细胞没有明显的细胞核和其他形态结构，而真核细胞则有明显的细胞核和其他细胞器等结构。
四、细胞在医学和科技应用中的作用4.1 医学作用细胞在医学中具有重要的作用。
研究细胞能够帮助人们更好地了解人体的机理和生理功能，并且可以为人类的疾病治疗和预防提供基础和方法。
4.2 科技应用随着科技的不断进步和发展，细胞在科技应用中也发挥着重要的作用。
通过细胞培养和分化，可以制造多种细胞生物制品，如病菌抗原、趋化因子和蛋白质等。
同时，基于细胞的功能和特征，科学家们也开发了很多新的技术和方法，如基因编辑和细胞测序等。
常见细胞种类及培养基
常见细胞种类及培养基在生物学中，细胞是构成生物体的基本单位。
根据形态、功能等特征，细胞可分为许多不同的种类。
同时，为了研究和培养这些细胞，科学家们开发了各种不同的培养基。
下面将介绍一些常见的细胞种类以及它们的培养基。
1.哺乳动物细胞：哺乳动物细胞是大多数哺乳动物体内的细胞，在医学和生物学研究中具有广泛的应用。
常见的哺乳动物细胞类型包括人类胚胎肾细胞（HEK293）、人类肺细胞（A549）、小鼠乳腺癌细胞（MCF-7）等。
哺乳动物细胞的培养基包括DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）、RPMI 1640（Roswell Park Memorial Institute 1640）等。
这些培养基通常添加有适当比例的胎牛血清、抗生素等，以提供细胞生长和繁殖所需的养分。
2.昆虫细胞：昆虫细胞广泛存在于昆虫体内，常用于基因工程、生物农药和药物开发等领域的研究。
常见的昆虫细胞类型包括鳞翅目幼虫细胞（Sf9）、鳞翅目卵巢细胞（S2）等。
昆虫细胞的培养基包括TC-100、Graces培养基等。
与哺乳动物细胞相比，昆虫细胞更适合在低温下培养，因此常常将昆虫细胞培养在28°C以下的温度下。
3.鸟细胞：鸟细胞是鸟类体内的细胞，具有重要的医学和生物学价值。
常见的鸟细胞类型包括鸭子胚胎细胞（DEF）、鹅肝细胞（HEEC）等。
鸟细胞的培养基与哺乳动物细胞的培养基类似，如DMEM/F-12、MEM（Minimum Essential Medium）等。
4.真菌细胞：真菌细胞是真菌体内的细胞，也是生物技术和生物药物研发的重要对象。
常见的真菌细胞类型包括酿酒酵母细胞（Saccharomyces cerevisiae）、毛霉细胞（Aspergillus niger）等。
真菌细胞的培养基包括YPD培养基、PDA培养基等，其中YPD培养基主要由葡萄糖、酵母营养素、酵母氨基酸等组成，可提供真菌细胞所需的营养物质。
高中生物-细胞知识点总结
高中生物细胞知识点总结细胞细胞是生物体结构和功能的基本单位。
除病毒外，所有的生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
单细胞生物一个细胞组成的生物如细菌原生动物单细胞生物细菌真细菌原生生物常见的有：酵母菌草履虫眼虫衣藻变形虫变形虫鞭毛虫如眼虫，是单细胞生物单细胞生物虽然只由一个细胞构成，但也能完成营养、呼吸、排泄、运动、生殖和调节等生命活动。
单细胞生物主要分有核和无核的单细胞。
有核的如草履虫有核单细胞生物主要有细胞核、细胞质、还有细胞器。
动物型单细胞，线粒体、高尔基体、核糖体、细胞膜植物型单细胞比如红藻，组成就是细胞壁、细胞核、细胞质，它的细胞器就包括线粒体、高尔基体、核糖体、叶绿体、细胞膜。
原生动物的每个个体就是一个细胞，其结构可以分为细胞膜(表膜)、细胞质和细胞核三大部分。
细胞核原生动物细胞核由核膜、核仁、核基质和染色质组成。
一般原生动物只有一个核，也有多个核的种类，有些原生动物细胞内还同时具有两种细胞核：一种是大核，与细胞代谢有关；一种是小核，与生殖有关。
呼吸原生动物的呼吸作用是通过气体的扩散，依靠体表从周围的水中获得氧气。
线粒体是原生动物的呼吸细胞器，其中含有三羧酸循环的酶系统，它能把有机物完全氧化分解成二氧化碳和水，并能释放出各种代谢活动所需要的能量，所产生的二氧化碳还可通过扩散作用排到水中。
少数腐生性或寄生的种类，它们生活在低氧或完全缺氧的环境下，有机物不能完全氧化分解，而是利用大量的糖的发酵作用产生很少的能量来完成代谢活动。
原生动物的生命周期包括生殖期和孢囊。
生殖期可分为无性生殖和有性生殖。
原生动物无性生殖用二分裂法。
鞭毛虫是纵分裂，纤毛虫是横分裂。
缘毛类纤毛虫外表看来如纵分裂，但是细胞内各成分（如核、口围纤毛带）仍是横分裂。
疟原虫、球虫则行裂体生殖。
吸管虫在体内或体外生出许多芽体（出芽）。
有些多核的原生动物如胶丝虫、多核变形虫偶尔会分裂成2至数个小的、仍是多核的个体（原生质团分割）。
细胞名词解释
细胞名词解释细胞是构成生物体最基本的结构和功能单位。
它们通过各种生物化学反应和代谢活动维持生命的正常运转。
细胞可以分为原核细胞和真核细胞。
原核细胞指的是没有细胞核的细胞，其遗传物质位于胞质中的核糖体和核区。
原核细胞的典型代表是细菌，其大小一般在1-5微米之间。
细菌的细胞壁由多糖构成，可以提供细胞形状，保护细胞内部结构。
真核细胞是带有真正的细胞核的细胞，其中包含线粒体、高尔基体和内质网等器官。
细胞核中含有染色体，染色体上携带了生物体的遗传信息。
真核细胞的大小和形状因生物体的不同而有所差异。
细胞膜是细胞最外围的薄膜结构，由脂质和蛋白质组成。
它的功能包括维持细胞内外环境的平衡、传递物质和信息，以及识别其他细胞和分子等。
胞质是细胞内除了细胞核之外的所有结构和液体的总称。
其中含有细胞器、蛋白质、核酸、离子等物质，是细胞内最主要的部分。
细胞器是细胞中负责特定功能的亚细胞结构。
常见的细胞器包括线粒体、叶绿体、高尔基体、内质网、核糖体等。
每种细胞器都有独特的功能，协同工作维持细胞内环境的稳定。
细胞分裂是细胞生长和繁殖的过程，包括有丝分裂和缢死；有丝分裂是真核细胞的细胞分裂过程，包括前期、中期、后期和贞期；缢死是原核细胞进行的一种分裂方式。
细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式，通过一系列细胞信号通路来实现。
细胞凋亡主要涉及半胱氨酸代谢、线粒体通路和信号转导等模块，保证细胞数量和功能的稳定。
细胞信号传导是指细胞之间通过分子信号来进行相互通信和调控的过程。
细胞信号可以通过细胞膜受体、第二信使等途径传递，调节细胞生长、分化和凋亡等生命活动。
总的来说，细胞是构成生物体的基本单位，其结构和功能相互关联，维持生命活动的正常进行。
通过细胞的分裂、凋亡和信号传导等过程，保持生物体的生长、发育和平衡。
常见细胞种类及培养基
常见细胞种类及培养基在细胞生物学研究中，细胞培养是一个重要的实验技术，能够使细胞在人工环境中生长并繁殖。
在进行细胞培养实验时，选择适合的细胞种类和培养基非常重要。
以下是一些常见的细胞种类及其对应的适宜培养基的介绍。
1.人类胚胎肾细胞（HEK293）HEK293细胞是最常用的哺乳动物细胞系之一，广泛应用于分子生物学和生物医学研究。
这些细胞具有良好的转染效率和细胞生长能力，适用于蛋白质表达、病毒复制和分泌蛋白的研究等领域。
常见的HEK293培养基包括DMEM（Dulbecco修改的最小培养基）和Opti-MEM。
2.黑色素瘤细胞（A375）A375细胞是人类的恶性黑色素瘤细胞系，广泛用于研究黑色素瘤的发生机制、治疗方法和抗肿瘤药物的筛选。
这些细胞对细胞外基质的附着能力较强，在培养基中会形成有丝分裂的细胞凸起。
常用的A375细胞培养基包括RPMI 1640（罗斯威尔 Park Memorial Institute）和DMEM。
3.人类胚胎肺纤维母细胞（MRC-5）MRC-5细胞是一种常用的人类胚胎肺纤维母细胞系，通常用于研究呼吸系统疾病、病毒感染和疫苗培养等。
这些细胞具有良好的生长性能，易于进行转染实验和病毒感染模型的建立。
常见的MRC-5细胞培养基包括MEM（最小必需培养基）和DMEM。
4.小鼠肌肉细胞（C2C12）C2C12细胞是小鼠肌肉细胞的一个常用细胞系，广泛应用于肌肉发育和再生研究。
这些细胞可以在培养基中分化成多核肌肉纤维，并模拟肌肉形成和运动等生理过程。
常见的C2C12细胞培养基包括DMEM和FBS（胎牛血清）。
5.原代细胞原代细胞是从组织或器官中直接分离并进行培养的细胞，与细胞系相比，原代细胞具有更接近体内环境的特点，常用于药物筛选、代谢研究和组织工程等领域。
原代细胞的适宜培养基因品类繁多，如原代肝细胞可培养在Williams E培养基中，原代小鼠皮肤纤维母细胞可在MEM中进行培养。
除了上述所提到的细胞种类和培养基，还有许多其他常见的细胞种类和适宜的培养基，如人类乳腺癌细胞（MCF-7，常用的培养基为DMEM/F12）、小鼠胚胎成纤维细胞（MEF，常用的培养基为DMEM）、人类肝细胞（HepG2，常用的培养基为DMEM）等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验室常用细胞株简介说明：以上数据来源于ATCC，建议使用以上推荐的培养基。
如果不使用相应的培养基会产生几方面的后果：1.细胞营养不良影响细胞生长；2.细胞分化导致的基因表达变化；3.细胞休克、死亡；无菌操作基本技术1、实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70%ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2、无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。
实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
3、小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4、工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。
操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。
5、定期检测下列项目：5.1 CO2 钢瓶之CO2 压力5.2 CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。
5.3 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。
6、水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水工作浓度的胰酶是不是应保存在－20度？如果放在4度冰箱可以保存多久呢？是不是几个小时就会失去活性？平时放在-20度，分装在50毫升螺口管，用时拿一管放4度用。
1、认真按照操作规程进行实验，一般不大会导致污染，很多情况下是由于所用的试剂或培养基有污染而使实验失败，2、粉末培养基配制好后(加了血清)，一般在4度尽量不要超过1个月，如在-20度存放时间可长一些，但最好也不要超过3-4个月，可能对于永生化细胞株来说要求不是太高，但我在过去的4年里一直是作原代细胞培养的，细胞娇弱，经验表明放置时间不宜过长。
3、关于实验用品的清洗与消毒，我的经验是：用过的玻璃器皿先在清水中浸泡30min以上，然后加少许清洗剂，以超声波洗涤30min左右，(如无超声波洗涤器可用软毛刷轻轻刷洗干净)，捞出晾干，再在铬酸洗液中浸泡6-18h(或过夜)后，自来水清洗10-15遍，双蒸水清洗3-4遍，晾干，高压消毒后即可使用。
许多塑料制品也可以高压消毒，例如培养瓶盖，胶塞，吸头等。
不能用于高压的一般均已制成一次性作用的商品了，当然如果money有限，如进口的培养板、皿等，也可以重复使用1-2次，我当时使用方法是将其完全清洁后，使用前在紫外灯下敞开照射1-1.5h即可，我做过多次，没有出现问题。
塑料培养瓶由于清洗消毒不便，最好不要重复使用，如一定要重复用，可用环氧乙烷等消毒，(消毒后一定要放置半年以上方可使用)在光镜下，上皮细胞通常呈“铺路石”样排布，细胞之间有拉丝现象（即距离较远的细胞可以通过细长的触手相连），细胞有成片生长的特性。
而间质细胞通常呈梭形，没有有成片生长的特性，细胞之间的联系不紧密。
但是细胞的形态特征会因为生长条件的改变而改变，如HeLa细胞是上皮细胞，但是在酸性培养条件下会变为梭形。
上皮细胞之间都有特征性的紧密连接（桥粒）结构，因此可以通过观察培养细胞的超微结构来判断细胞的类型，如果有紧密连接，就必然是上皮细胞。
这是一锤定音的证据。
注意不要把细胞消化下来做电镜，要用细胞刮刮下来后做电镜。
此外每一种上皮细胞都有其特征的细胞角蛋白的表达（cytokertin, CK）,可以查一下子宫内膜腺上皮细胞表达的CK分子，然后进行免疫细胞化学的鉴定。
细胞在偏碱的情况下培养，耐受能力会逐渐下降，可能是产生脱壁现象的原因，后来我重新测了一下培养基，为7.5左右，我用灭菌的HCL调了一下，培养基颜色变成淡红透亮，再次培养，发现细胞贴壁比较好了，搏动效果也不错，因此，我以后每次培养前都要重新调好PH值，我觉得很多因素是能影响PH值的血清质量不好，影响了细胞生长。
所以，我认为以后养细胞，用的血清浓度最好是每批次血清都摸一下，不一定要以参考文献为准，毕竟国产的血清质量差异比较大啊。
细胞无菌操作是关键，对于配制培养液时，有些人为了让培养粉充分溶解，搅拌4小时或更长时间。
其实这完全没有必要，一般培养基的固体组分还是易溶于水的，搅拌的时间长了会增加污染机会，虽然后来滤过除菌了，但细菌的代谢产物比如脂多糖谁能够把它滤掉？细菌的代谢是很快的，甚至在常温下20min就可以繁殖一代，太可怕了。
我的经验就是搅拌30min-60min就把它过滤。
另外关于培养基的pH问题，一般按照说明书操作，加入所说的NaHCO3量，与预计的pH 不会有什么距离，也就是说基本上不用调pH，如果相差大，要考虑三蒸水的质量是否有所下降，当然这时调pH也是不得已而为之。
我配培养基时基本上不调pH，只是用试纸检测一下pH，观察一下培养基的颜色。
（1）东西一定要用自己的。
既不要借别人的，也不要借给别人。
可能大家觉得比较自私。
实际上还是很有好处的。
并不是每个人的操作都规范，因此相互之间串着用，很容易造成交叉污染。
（2）我习惯口对口倒液体，在倒前倒后都要在酒精灯上过一下。
自己认为比起用吸管吸更能很好的防止污染。
步骤越简单，越能防止污染。
而且还能节省很多吸管。
（3）一次将所有的所需要试剂、工具放入工作台。
不要做到半路，又出工作间拿东西，这样增加了污染的机会。
（4）整个操作要快、动作要轻、而且不要干其他的事情。
比如手机响了，最好不要接。
我一般操作的时候将手机关了，手机声音响起，好烦躁。
（5）我一般开紫外线照射台的时候，就将培养基、酶、DHANKS液那到室外让它自然升温。
这样40分钟后，温度也升上来了。
有很多人将他放到37度水浴锅里加热。
一定要注意水浴锅的卫生，有的常年不清洗，里面很脏，容易在外面瓶身上吸附大量细菌。
因此用它的也一定要勤换水。
从水域锅那出后，最好找个毛巾插干上面的水。
（6）操作前要洗手，用75%酒精搽手。
用完操作台，要打扫卫生。
细胞要经常冻存，我一般只要细胞状态好就将细胞冻存起来。
细胞状态差了，扔掉，重新复苏。
这是一个必须养成的习惯。
毕竟很多情况下，细胞并不是因为污染了，才让你感到头痛。
这样你不会担心没有种子了。
我一般是不加双抗的，只要注意，不会污染。
过滤时不要用枪吹细胞!! 如果用力吹,筛网就像刀片一样,把你的细胞全部切碎!!刷玻璃器皿的过程：初洗、泡酸（一天）、自来水冲洗（10遍）、纯化水冲洗（3遍）、注射用水冲洗（3遍）。
感觉过于苛刻，自来水只冲洗3遍。
被老师发现后，一阵痛批，才知道这是极其关键的一步，残留的酸可能会抑制细胞生长，甚至导致细胞死亡，痛失辛苦得来的细胞，心血付之东流。
无知不能无畏，一定不能大意。
做好准备工作。
不要急于投身到细胞培养中去，要先设定计划：步骤，工具，试剂。
特别是将细胞用于大规模生产时，尤其如此。
eg.经过干热灭菌的容器一般认为可以在一周内保持无菌状态，如果准备多了，用不完的就得重新灭菌，耗费能源、占用灭菌空间，不值得；干热灭菌需要一天的时间，当器皿准备不足时，只能干着急，错过了最佳操作时间，也许得很久才能将细胞状态再调整好。
对于骄气的细胞，我一般都是第一天处理完后，加少量培基（够盖住瓶底部），第二天换液，以免死细胞和碎片对活的产生不良影响。
新配的培养基直接用很清亮，但是在－20度保存一段时间后再溶解就要出现很多杂质，用37度水孵育没有效果，握在手里不停摇动非常有效。
其实对于操作熟练的人来说，污染并不是我们想像那样容易出现，园子里很多人都问否污问题，而培养基的PH值往往被忽略，而且大多数人都习惯于一次配制1升培养基，分装成10X100ml，用1瓶，另外9瓶放在－20度保存，很容易出现结晶，镜下看就是一些杆状的物资，有时候晃动培养基，肉眼就可以看到很多沉淀，这就需要我们在用之前好好摇匀了。
操作中的安全：a.我犯的一个巨经典的错误至今难忘，刚做时酒精擦手，擦镊子，湿淋淋的就拿镊子过火，结果。
火顺着镊子着到手上，虽然不怎么热，可是我手上的汗毛啊，555，都被烧了。
这个错误以后再也没犯。
b.过完火的试管口一定不能摸，时刻记着只拿试管的下1/2。
c.给酒精灯加酒精永远记住不要拿酒精灯口那个灯心管，否则终身难忘。
d.当酒精灯出现什么意外时一定要镇静，先让他着一会可能没事，不要慌乱中打坏别的东东。
e.离心机尤其高转速时，配平当然要牢记，可是一定要检查一下离心机里还有没有其他东东（有一次我离东西，着急，放进去刚离一会我就觉得声音不对，打开一看里面竟然有一根别人没有拿出来的小管子）。
还有一次配完平就打开离心机盖准备离心，结果吓个半死，原来别人正在离心，幸好管子没飞出来细胞冻存：当细胞状态好，或者代数比较早，一定要大量冻存，不要吝惜暂时的大批使用血清，当细胞状态不好，长不起来的时候，马上取出来复苏，省时省力，不要去尝试努力恢复状态不好的细胞，费时间也费血清，会令你痛苦不堪。
另外冻存的细胞不要放到一个地方，－80度，液氮（甚至不同的液氮罐）都放一点，谁也不敢保证不出意外，冰箱也可能有化的时候（我们－20度冰箱就化过），都放在一块容易全军覆没。
按照试剂的保存标准保存，象血清、胰酶等没开封的-20℃，开封后-4℃保存一般不超过7天（用完它吧，不然浪费了）一定要弄清楚每个组分的作用，特点，比如NaHCO3容易分解，因此培养基在过滤除菌时pH会上升，一般是0.1-0.3，所以在过滤之前，要把培养基的pH调低0.1-0.3。
如果你不了解NaHCO3容易分解的特点，就不会做相应的处理，那么培养基不符和要求，细胞就长不好台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况，用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟，在显微镜下观察即可，活细胞不被染色。
方便易用，因此在实验室中比较常用，尤其在心肌细胞原代培养中。
细胞培养基础知识细胞培养基本条件1、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一，培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质，而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。