犊牛运输应激综合征的实验诊断
肉牛运输应激综合征的预防和诊治体会
福建畜牧兽医第44卷第2期2022年息息相关[6],圆环病毒病可通过临床和解剖病理变化做出诊断,同时要结合实验室的血清抗体检测和荧光定量PCR检测结果进行确诊。
对于猪圆环病毒病的防控,应做好疫苗免疫、药物保健、强化饲养管理、改善环境等多方面入手,坚持“管重于养,养重于防,防重于治,综合防治”的健康养殖理念。
参考文献:[1]万青山.四川部分地区猪圆环病毒2型流行病学调查研究[D].四川雅安:四川农业大学,2014.[2]徐妮.山东省猪圆环病毒病的血清学调查及PC V2分离株的遗传变异分析[D].山东泰安:山东农业大学,2014. [3]黎先伟.简述猪圆环病毒病及其疫苗免疫的重要性[J].兽医导刊,2016(1):50-53.[4]陈全中.规模猪场猪圆环病毒病的诊断与临床控制[J].上海畜牧兽医通讯,2013(1):43-45.[5]曾昭猛,匡贤珠,李伟.某规模化猪场抗体检测分析及防控对策[J].江西畜牧兽医杂志,2015(1):39-41.[6]马华魁.福建省部分规模猪场猪圆环病毒疫苗免疫效果评价与分析[D].福州:福建农林大学,2019.肉牛运输应激综合征的预防和诊治体会黄彦周龙岩市农业学校福建龙岩364000摘要笔者结合肉牛运输应激综合征的诊治经历,介绍运输应激综合征的临床症状及诊断方法,阐述分析预防与治疗措施。
关键词肉牛养殖长途运输应激综合征防治文献标识码:B文章编号:1003-4331(2022)02-0082-02位于闽粤赣三省交界的龙岩市,所处地理位置相对偏远,但养殖业发展迅速,除生猪养殖外,面对越来越大的牛肉市场需求,龙岩市的肉牛养殖逐渐兴盛。
但由于当地肉牛数量少,难以满足市场供应需求,因而养殖户需从外地分批次引进犊牛或架子牛进行育肥。
然而长途运输过程中易因饲料、饮水、气候改变、车辆颠簸或惊吓等多种因素诱发应激综合征,会导致肉牛大量发病或出现死亡,给养殖户带来经济损失。
因此,肉牛养殖中也要注意做好运输过程中应激综合征的防治[1-2]。
肉牛运输应激综合征的发生原因、临床症状及防治
肉牛运输应激综合征的发生原因、临床症状及防治刘志勇1，陈彦丽1，董长兴2*（1.河北省唐山市动物疫病预防控制中心，河北 唐山 063000；2.河北省唐山市丰南区动物疫病预防控制中心，河北 唐山 063300）摘要:肉牛运输应激综合征是指在运输中，由于采食和饮水等生活习惯的改变，以及气候等环境因素的改变而引起的系列不良反应。
该文阐述了肉牛运输应激综合征的临床症状，分析了发生原因，提出加强运输管理、合理装车、运输途中管理、运输后饲养管理、隔离观察等防治要点，给养殖户提供参考。
关健词:肉牛；运输应激综合征；临床症状；发生原因；防治措施刘志勇，陈彦丽，董长兴，等. 肉牛运输应激综合征的发生原因、临床症状及防治[J]. 农业工程技术，2023，43(22):83+85.唐山市是肉牛养殖大市，截至2020年底，全市肉牛存栏30.31万头，年出栏肉牛32.17万头，年产牛肉6.21万吨。
随着肉牛养殖业不断发展，唐山市肉牛养殖数量和养殖质量均有较大幅度提升。
唐山市80%以上架子牛靠外地引进，肉牛异地运输频繁，由于养殖户防控意识淡薄，加之饲养管理不合理，极易诱发肉牛长途运输应激综合征，给养殖户带来较大经济损失，阻碍本市畜牧业发展[1]。
一、肉牛运输应激综合征临床症状病牛精神萎靡，体温攀升至41.2～41.5℃，表现出稽留热、被毛粗乱、消瘦明显、行走无力、频繁起卧、双眼流泪、呼吸加速等症状。
部分病牛腹式呼吸，伴随流出脓性鼻液，肺部听诊时发现肺泡音微弱，同时伴有支气管呼吸啰音。
随着病情不断发展，病牛呼吸困难，颈部向外伸展，发出痛苦的呻吟声，体温逐渐下降，眼球凹陷，最终窒息死亡[2]。
二、肉牛运输应激综合征的发生原因1、拥挤运输中，肉牛由于拥挤而发生应激综合征的概率很高。
随着车船移动，牛群拥挤程度越来越高，拥挤状态下牛的体温会升高，呼吸频率和心率加快，代谢水平增高，肌肉中的肌红蛋白含量升高，对氧的通透性增强，最终导致机体缺氧。
肉牛运输应激综合症的发病因素临床表现及其防治
肉牛运输应激综合症的发病因素临床表现及其防治【摘要】肉牛运输应激综合症是一种由于运输过程中的压力和环境变化引起的疾病。
本文探讨了该症状的发病因素、临床表现和防治方法。
在发病因素方面，主要包括运输时间过长、运输工具不合适、环境温度过高或过低等因素。
临床表现主要表现为食欲下降、体温失调、行为异常等症状。
针对肉牛运输应激综合症的防治方法包括在运输前准备充分、控制运输过程中的环境因素、提供适当的饲料和水等措施。
结论强调了对肉牛运输应激综合症进行预防和治疗的重要性，以更好地保障肉牛的健康和生产。
【关键词】肉牛运输应激综合症、发病因素、临床表现、防治方法、重要性1. 引言1.1 肉牛运输应激综合症简介肉牛运输应激综合症是指在肉牛运输过程中，由于各种因素对牛只造成的心理和生理压力过大而引起的一种疾病。
这种症状在肉牛养殖业中并不罕见，尤其在大规模运输和长途运输时更容易发生。
肉牛运输应激综合症对肉牛的生长发育和产出性能造成严重影响，甚至有时会导致牛只的死亡。
造成肉牛运输应激综合症的因素有很多，主要包括运输条件不佳、装载密度过大、运输时间过长、运输过程中的振动和颠簸以及气温变化等。
这些因素会导致牛只处于持续的紧张状态，从而引发应激反应。
在临床表现方面，患有肉牛运输应激综合症的牛只常常表现出厌食、躁动不安、呼吸急促、体温升高、粪便干结等症状。
有些牛只还可能出现贫血、免疫力下降等严重后果。
为了有效防治肉牛运输应激综合症，我们需要从改善运输条件、减少运输时间、合理控制装载密度等方面入手。
在运输前后要给牛只提供充足的水和饲料，并保持良好的通风和卫生条件，以减轻牛只的压力。
只有全面做好预防工作，才能有效避免肉牛运输应激综合症的发生，保障牛只的健康和生产效益。
2. 正文2.1 发病因素肉牛运输应激综合症的发病因素是多方面的，主要包括以下几个方面：1. 运输过程中的恶劣环境：运输车辆密闭不通风、高温高湿等环境条件会让肉牛处于极度的不适应状态，引发应激反应。
肉牛运输应激反应及其防控措施研究
肉牛运输应激反应及其防控措施研究1. 引言1.1 研究背景肉牛是重要的畜牧业生产动物，其运输过程中可能会受到应激因素的影响，导致产生一系列应激反应。
肉牛运输应激反应的研究对于提高肉牛运输的安全性和效率具有重要意义。
肉牛在运输过程中可能受到各种应激因素的影响，包括长途运输、高温、拥挤、噪音、震动等。
这些因素可能导致肉牛出现焦虑、恐惧、厌食、过度出汗、腹泻等应激反应。
这不仅会影响肉牛的生长发育和健康状况，还可能降低肉牛的肉质品质，从而影响肉牛的经济效益。
对肉牛运输应激反应进行深入研究，探讨其影响因素及防控措施，是保障肉牛福利和生产效益的必要举措。
通过了解肉牛在运输过程中可能出现的应激反应及其机制，可以有效地采取相应的防控措施，减少肉牛的应激反应，提高肉牛的抗逆能力和生产效益。
本文旨在对肉牛运输应激反应进行系统研究，为肉牛运输过程中的改进提供理论依据和实践指导。
1.2 研究目的肉牛在运输过程中可能会受到应激的影响，导致出现一系列的不良反应。
为了探究肉牛运输应激反应的机制及可能的影响因素，本研究旨在通过对肉牛在运输过程中的应激反应进行分析和研究，为有效防控肉牛在运输中的应激反应提供理论依据。
通过深入了解肉牛的应激反应特点及影响因素，可以为改善肉牛的运输条件提供科学依据，减少应激带来的负面影响，提高肉牛的生产效能和生产质量。
本研究的目的在于深入探究肉牛在运输过程中可能出现的应激反应现象及其机制，为有效防控肉牛运输应激反应提供参考和建议，保障肉牛福利和生产安全。
2. 正文2.1 肉牛运输应激反应分析肉牛在运输过程中会面临各种应激因素，导致产生各种不良反应。
其中最为常见的包括焦虑、恐惧、压力、饥渴、疲劳等，这些应激反应会严重影响肉牛的健康和运输效果。
应激反应一般可分为生理应激和心理应激两种类型，生理应激主要表现为心率加快、呼吸急促、消化系统紊乱等，而心理应激则主要表现为行为异常、群体压迫等。
肉牛在运输过程中容易感受到各种应激因素，如环境变化、交通噪音、震动等，这些因素会影响肉牛的生理和心理状态。
肉牛运输应激的影响因素 肉牛运输应激的防治措施 - 养牛技术
肉牛运输应激的影响因素肉牛运输应激的防治措施-养牛技术在肉牛养殖生产过程中,往往要进行引种、肥育、出售、屠宰等操作,需要进行长途运输,很容易在此过程中发生应激综合征,导致肉牛食欲不振,抵抗力降低,体重减少,甚至出血发病或者死亡,给肉牛养殖户带来巨大的经济损失.下面我们就一起来看一下：肉牛运输应激的影响因素肉牛运输应激的防治措施。
1、影响因素运输工具。
目前，运输肉牛的基本方式是火车运输和汽车运输。
如果肉牛采取火车运输，往往需要经过多次装卸才能够到达指定地点，从而对机体造成较大应激，并且容易在出现特殊情况时无法及时采取相应的措施；如果肉牛采取汽车运输，只需要进行一次装卸就能够到达目的地，相对来说会对机体造成较小的应激刺激，且在运输过程中能够随时对牛的身体状况进行检查，如果发现异常就能够及时采取相应的处理措施，即肉牛采取货车运输会对机体产生较小的刺激。
但要注意的是，由于货车地面光滑而使肉牛在拐弯、刹车时发生摔伤，同时产生较大的噪音，增强机体的应激强度。
运输密度。
肉牛在运输过程中，运输密度也会对机体产生不良影响。
如果运输密度过小，既会导致牛间存在相互争斗的现象，从而消耗较多的糖原，且在运输工具突然出现异常情况时容易使其摔倒，从而形成挫伤，引起较大的应激反应；如果运输密度过大，就会导致机体在运输过程中长时间呈站立姿势，导致机体过于疲劳，即运输密度过小或者过大都会影响肉牛的福利。
运输时间和运输距离。
一般运输距离决定运输时间。
当肉牛进行长时间运输，会使其感觉到疲惫，再加上可能缺少饮水和饲料，并存在较多的尿液、排泄物及发生脱水等，都会导致牛活重明显下降，无形中造成巨大的经济损失。
2、临床症状病牛表现出精神萎靡，体温明显升高，达到41- 41.5℃，食欲不振，且有黏性或者脓性鼻液流出，并伴有气喘等，症状严重时会排出混杂肠黏膜的血便，并出现了关节脓肿、跛行，有些犊牛甚至出现卧地不起的现象。
随着症状的加重，听诊肺部有哨音或者湿音，机体严重消瘦，发出呻吟声，双眼无神，眼球明显下陷·且心跳加快，脉搏细且快，呼吸非常困难，往往呈现腹式呼吸，甚至由于严重窒息而发生死亡。
肉牛运输途中应激综合征的预防和诊治分析
肉牛运输途中应激综合征的预防和诊治分析作者：刘志勇，李春芳，陈彦丽，董长兴来源：《中国动物保健》2021年第12期摘要：运输应激综合征是国内肉牛产业中危害性较高的病症之一，导致肉牛病死率显著增高，影响肉牛产业经济效益。
本文分析了导致肉牛运输途中应激综合征的主要影响因素，重点探讨预防、诊治运输应激综合征的可行性策略。
关键词：肉牛运输;应激综合征;牲畜疾病预防;治疗方法在贩运肉牛时通常运输路线较长，路途中因为道路颠簸、车辆中牛群拥挤和路途中外部温湿度环境刺激、疾病和饲喂因素等影响，肉牛较易出现应激反应。
应激反应发生后，肉牛免疫机能降低，较易受到病原菌感染，出现生理或病理性变化，轻则生病消瘦，重则病死，造成经济损失。
有效预防、诊治此类应激综合征具有必要性。
1 主要影响因素1.1 工具选择当前肉牛运输以公路运输（即汽车运输）和铁路运输（即火车运输）为主。
公路运输的优点是途中无需多次装卸肉牛，直接抵达目的地，并且在运输过程中可灵活选择检查时间。
铁路运输的优点是运载路况相对平稳，途中噪声刺激较少，但是通常途中需要进行多次装卸，可选择的检查时间相对固定。
对比两种运输方法，总体而言公路运输对肉牛的应激刺激相对较小，然而在公路运输中应注意在经过弯道时平稳减速，合理控制车速，减少急刹车情况，以防肉牛摔伤。
1.2 肉牛密度肉牛在运输途中生存空间相对狭小，挤压会加重对肉牛的应激刺激，影响肉牛情绪稳定性。
活动空间过大会导致肉牛发生抢占空间等争斗情况，此种情况不仅容易造成肉牛损伤，而且会导致糖原的非必要消耗，影响肉牛健康。
不仅如此，当肉牛之间的间隙较大时，一旦发生意外情况必须紧急停车，较易发生摔倒情况，造成肉牛机体挫伤。
但是肉牛装载密度过大、活动空间过小时，会造成肉牛在运输时无法俯卧休息，不得不长期站立，体力消耗更大。
因此，在装载肉牛时应科学控制装载密度。
1.3 路程、时间在运输过程中，路途距离与运输时间通常正相关，长期运输极易引起肉牛疲惫或饲料、饮水不足，也会导致肉牛在车厢中大量排泄代谢物，以及脱水等。
肉牛运输应激综合症的发病因素临床表现及其防治
肉牛运输应激综合症的发病因素临床表现及其防治1. 引言1.1 肉牛运输应激综合症的定义肉牛运输应激综合症是指由于长途运输、环境变化、饲养条件改变等原因导致的肉牛身体和心理受到不良影响而出现的一系列症状的综合症候群。
运输应激对肉牛的生长发育、生理功能和免疫机能均会产生负面影响，严重影响肉牛的生产性能和健康状况。
随着养殖业的快速发展，肉牛运输应激综合症也逐渐成为一个备受关注的问题。
肉牛运输应激综合症的发病机制尚未完全明确，但主要原因包括长途运输中的营养不足、水分丢失、运输车辆和环境条件的不适宜等因素。
在运输过程中，肉牛可能遭受挤压、混战、惊吓等压力，导致体内应激激素水平的升高，从而引发一系列不良反应。
针对肉牛运输应激综合症，应通过改善运输条件、提供适宜的饲养环境、合理安排运输计划等措施来预防和减轻症状。
在发现肉牛出现运输应激症状时，应及时采取适当的治疗措施，包括营养支持、药物治疗等方式，以恢复肉牛的身体和心理功能，减轻其痛苦和压力。
通过科学合理的防治措施，可以有效减少肉牛运输应激综合症的发生率，保障肉牛的健康和生产性能。
1.2 研究背景肉牛运输应激综合症是一种常见的疾病，主要发生在肉牛进行长途运输过程中。
在现代社会，随着肉牛生产和运输规模的不断扩大，肉牛运输应激综合症已经成为了一个备受关注的问题。
研究背景部分将重点探讨肉牛运输应激综合症的研究现状和问题所在。
当前对于肉牛运输应激综合症的研究还存在一些局限性，比如对于发病机制和干预措施的认识还不够深入。
针对这些问题，需要更多的科学研究来揭示肉牛运输应激综合症的发病机制和影响因素，以便采取相应的措施来预防和治疗这一疾病。
只有通过深入的研究，才能更好地保障肉牛的运输安全，减少运输过程中可能发生的意外和损失。
对肉牛运输应激综合症的研究具有重要的意义。
2. 正文2.1 发病因素肉牛运输应激综合症是一种常见的慢性应激反应性疾病，其发病因素主要包括以下几个方面：1. 运输条件不佳：肉牛在运输过程中可能遭受恶劣的环境条件，如高温、高湿、拥挤等，这些因素都会导致肉牛产生应激反应。
肉牛长途运输应激综合症的诊治
养殖与饲料2020年第08期肉牛运输期间发生应激性综合病症，指的是肉牛在长途异地运输期间产生多种应激源，造成肉牛本身抵抗力不足，给予病原微生物可乘之机，引发肉牛多发性疾病，如呼吸系统病、消化系统病、甚至全身。
据报道，肉牛在长途运输期间，在运输完成后15h 内引发肉牛疾病，发病率高达100%，造成严重的经济损失。
1临床表现当肉牛体温为40益，且伴随诸多不良问题，如精神不振、反应迟缓；食欲减弱、背毛混乱；呼吸不畅，以腹式呼气为主；鼻液呈现出流黏、脓状态；前胸下部发生水肿；便秘、腹泻。
肉牛病症若持续恶化，极易发生呼吸困难、呻吟俯卧、体温骤降、眼球深陷，直至室息死亡。
将病牛解剖，大多数病牛在其肺部发生坏死现象，胸腔内堆积较多的纤维性渗出液，个别病牛发生肺、胸腔二者粘连问题。
河北省唐山市的人们俗称此病为烂肺症，学名为肉牛运输应激综合征。
2发病原因2.1防病意识和知识不足部分肉牛养殖户借助热情和人力投资方面的多重优势，成功进入农村养牛业，个别养牛户仅有过1年养殖1~2头长毛牛的小经验；个别养牛户是与1头牛有过1次长时间的亲密接触[1]。
大型的专业肉牛养殖经营企业，大多为技术转向的新兴小型企业，较多小型企业个体经营者对小型肉牛肉类养殖业经营中的相关技术及其管理要求并不清楚，对各种肉牛养殖疾病的诊断防治等工作缺乏专业技术的装备、实际行动准备，缺乏相关专业技术人员指导，将小型养殖场肉牛养殖工作看作是以低经济技术为主的新兴行业，饲养场的管理模式较为粗放。
不具备科学养牛的相关专业知识，缺乏经验无法组织养牛生产，所以导致了更高的发病率。
2.2运输应激较大运输过程应激系数较大，造成肉牛机体抵抗力明显下降，为肉牛发病提供发生条件。
长途与异地交通运输活动所造成的肉牛生理应激性病症有多种，如暑热、冷空气、狂风暴雨、惊吓、体力大量消耗、不适应环境等，均可直接造成肉牛机体抵抗力骤然下降，让病原体、微生物有机可乘，引起肉牛呼吸道、消化道甚至全身病理性反应。
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犊牛运输应激综合征的实验诊断国家肉牛牦牛产业技术体系岗位专家邓立新摘要：郏县某红牛养殖场在犊牛经长期运输到牛场后，大量犊牛出现流鼻涕，精神不振，食欲较差，偶有发烧腹泻等症状的出现。
为研究引起犊牛应激反应的病原菌，试验起初从郏县某红牛场刚经长途运输的犊牛的新鲜牛鼻涕里进行了细菌的提取，培养，分离和鉴定。
实验结果表明混合菌对头孢西丁，链霉素，比较敏感。
分离的细菌在形态特征，生化特性，等方面与葡萄球菌基本相同，药敏试验结果表明该菌对头孢呋辛，米诺环素比较敏感。
对青霉素，氨苄西林等耐药。
试验结果为临床用药及预防提供了理论依据。
关键词：犊牛应激；鼻涕; 细菌的培养和分离鉴定；药敏试验；攻毒实验；关键词：犊牛应激；鼻涕; 细菌的培养和分离鉴定；药敏试验。
犊牛的应激反应一般是机体受到外界非特异的有害因子的刺激下所表现出来的病理现象。
运输应激综合征是长途贩运所致的多种应激原造成的机体免疫力下降，各种病原体趁机侵袭造成的以呼吸道，消化道，乃至全身的病理性反应。
运输过程的应激原主要包括摩擦，碰撞，饥渴，环境，气候等身体反应和运输过程的心理应激反应。
主要表现为食欲差，精神萎靡，气喘，流鼻涕，咳嗽伴有发烧腹泻等症状。
犊牛的运输应激综合征使犊牛的饲喂地有了很大程度上的限制性。
该病的产生使犊牛的生长发育受到的极大的限制甚至影响成年后的生产性能，并且影响犊牛的市场流通，给养牛业造成极大的损失。
随着社会的发展，养牛业的拓展，犊牛的长途运输是难免的，科学研究的进步能够对细菌进行快速准确的鉴定，能够极大的改善运输过程中犊牛的应激反应。
该实验把从河南省郏县红牛养殖场无菌采集运输应激犊牛的鼻涕病料进行病原菌的提取，培养，分离，镜检，生化试验，及药敏试验。
以期为犊牛应激反应的预防和防治提供科学依据。
1 材料与方法1.1材料普通肉汤培养基，普通琼脂培养基，药敏片（头孢西丁30ug/片；链霉素10ug/片；20片/瓶），游标卡尺，棉签。
1.1.1试验地点,时间河南农业大学分子生物学325实验室2018年3月到5月间进行。
1.1.2病料棉拭子无菌采集养殖场犊牛鼻涕1.1.3主要试剂普通肉汤培养基，血浆，药敏片，革兰氏染液，双氧水，香柏油，三脚架，石棉网，1.1.4主要仪器设备无菌操作台，恒温培养箱，高压灭菌锅，冰箱，显微镜，试剂盒，酒精灯，载玻片，钓菌环，香柏油，试管，平皿，等1.2方法1.2.1普通肉汤培养基的制备称取普通肉汤培养基18g，加入蒸馏水1升，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，封口，高压灭菌15min，待至常温放冰箱备用。
1.2.2病料处理将普通肉汤培养基分装于小试管中，用棉签取少许病料，将带有病料的棉签接种于试管中，放置于摇床上，促进细菌的生长，对混合菌做药敏试验。
1.2.3细菌的分离培养将病料接种于普通琼脂培养基上，划线分离培养单个菌落挑取颜色，形态不同的单个菌落接种于普通肉汤培养基37°培养12~24小时。
1.2.4显微镜的观察将分离出细菌涂抹在滴有生理盐水的无菌玻片上，使用油镜增加显微镜的分辨率，调节粗细焦螺旋，观察待检测菌体，菌体呈球形，直径0.8um左右，排列成葡萄串状，无芽孢，鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
1.2.5细菌的鉴定用接种环钓取一环菌液，在玻片上进行固定和革兰氏染色，进行镜检，根据菌落的颜色形态做出初步判断，各类细菌按相应生化特性做进一步鉴定，细菌革兰氏染色结果为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列，无芽孢，菌膜。
1.2.6细菌的进一步鉴定1触酶试验（catalytic experiment）：又称过氧化氢试验，具有过氧化氢酶的细菌能催化过氧化氢成为水和原子态氧继而出现氧分子，出现气泡，大多数需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌属阴性，以此区分葡萄球菌和链球菌，挑取固体培养基上的待检菌落，置于洁净玻片上，滴加百分之三过氧化氢溶液数滴，观察结果，如图所示QQ 2葡萄糖发酵试验（glucose fermentation experiment）：细菌有不同的酶系，根据其具有不同利用碳源的能力，进行比较，把接种细菌的培养液用移液管接种在葡萄糖发酵管中，试验结果如图所示，酚紫的颜色由紫色变为黄色。
产酸的过程不产气。
3玻片凝固酶试验（coagulase test of glass slide method ）：凝固酶是鉴定金黄色葡萄球菌的重要试验，葡萄球菌可产生凝固酶，它能使凝血酶原变成凝血酶类产物，使纤维蛋白原变为纤维蛋白，从而使血浆凝固，在一张洁净玻片中央加一滴生理盐水，用接种环取待检菌液与其混合，制成悬菌液，观察结果如图QQQ1.2.6药敏片试验1测试菌液的制备：选取郏县红牛养殖场鼻涕中已经鉴定出的金黄色葡萄球菌，从保存培养基的菌落中提取2~3环，接种于营养肉汤试管中，放在恒温培养箱中培养24小时，留置备用。
2药敏片的试验：把混合菌用无菌涂抹棒均匀涂在培养基上，待菌液被完全吸收后，用无菌镊子把药敏片贴在培养基上。
观察混合菌在培养基上的抑菌环。
用20ul的移液枪把菌液在涂布棒的涂抹下均匀使20ul的菌液涂抹在培养基上，待菌液被培养基吸收完全后用无菌镊子把药敏片贴在培养基上每个平板上贴3~4个药敏片，用记号笔做好相应的药敏片名字，纸片的间距不少于24mm，纸片外围距培养基边缘不少于15mm。
将做好的平板放入37°恒温无菌培养箱中12小时后取出用游标卡尺测量出抑菌环的直径，依据抑菌环的大小来评断该菌对药物的敏感性，抑菌环越小，则敏感度越低，抑菌环越大，则敏感度越高。
抑菌环和敏感度呈正比例关系。
试验如图1-23结果的判断标准：抑菌效果依据《药理学》中的标准判定，抑菌直径大于20mm为极敏感，15~19mm为高度敏感，10~14mm为中度敏感，10mm以下为低敏{6-9}1.3结果与分析1.3.1分离菌的培养特性1 普通琼脂培养基：分离菌在培养24小时后呈圆形，凸起，边缘整齐，不透明表面光滑的菌落，直径2mm左右，生长良好。
2血液琼脂培养基：形成的菌落比普通琼脂稍大，部分可产生溶血毒素，在菌落周围形成B溶血环3Baird-Parker氏培养基：菌落呈圆形，凸起，圆形，边缘为一浑浊带。
1.3.2生化特性1该细菌不产生吲哚，MR阳性，V-P试验不定，具有还原性。
多数能分解葡萄糖，麦芽糖，产酸不产气。
分离菌的生化实验结果Table of the biochemical test results of isolated bacterial1.4药敏试验（drug sensitive test）通过药敏片试验对细菌进行药敏试验，药敏片通过抑菌环的大小来判断该细菌对药物的敏感性和耐药性，数据如图所示Table 2 the test results of drug sensitive test paper method注：数字表示抑菌圈直径，单位（mm），D:表示犊牛Note:figures show that the antibacterial circle diameter ,unit(mm).D:said calf;figures show that the separat ion of strains.结果与分析:药敏试验结果表明，金黄色葡萄球菌对头孢类药物比较敏感，对四环素类药物不敏感。
1.4小鼠的攻毒试验通过金黄色葡萄球菌对小鼠的致病性，感染率和毒力的研究。
造成小鼠金黄色葡萄球菌感染模型，确定细菌的敏感药物，为金黄色葡萄球菌的预防和治疗提供良好的动物模型。
1饲养健康小鼠10只，4只做为对照组，6只作为实验组，饲喂小鼠饲料和无菌水。
2将小鼠分组，做上标记，给6只实验小鼠腹腔注射剂量1毫升的菌液，对照组用无菌注射液腹腔注射同等的生理盐水，感染后每隔四小时观察一次，连续观察半月，做出统计；3临诊症状，病鼠初期大多表现精神不振，采食，饮水减少，被毛耸立，肛周红肿，后期病鼠极度衰弱，重症病鼠衰竭死亡。
腹腔注射生理盐水的对照组无明显变化，接种金黄色葡萄球菌的小鼠精神萎靡，陆续死亡，为临床提供实验基础模型。
1.5讨论犊牛在长途运输后，细菌会在犊牛免疫力低下的情况下侵袭入体内，使犊牛产生一系列的病理变化，该实验对郏县红牛养殖场应激反应的犊牛中进行了细菌的分离，培养和鉴定，其中葡萄球菌为优势菌株，引起犊牛的一系列身体和心理上的应激反应，给畜牧业造成了巨大的损失，也给养牛业带来了极大的限制。
为了解决这一问题，设计此实验，期望能给养牛业转移形成的应激反应的损失降到最低。
兽医临床用药抗菌药的大量使用，使得临床畜牧动物耐药性的产生，导致良畜的不良反应增多，虽然抗菌药的大量使用，解决了临床上寄生虫，细菌，病毒的入侵，带来了巨大的经济效益。
但是由于大量不规范的滥用药物，导致现在好多细菌和病毒耐药性的产生。
不同的药物对不同细菌的作用明显，此实验研究此细菌最为敏感的药物使得良畜的耐药性降低，所以在研究过程中必须切实合理使用抗菌药，并掌握适应症药物动力学，药物代谢动力学，制定合理的方案，减少药物在良畜体内的残存。
对防治人畜共患病有重大的意义，有利于提高全民身体素质。
本次试验的主要目的是为了确定犊牛长途运输应激反应的主要病原菌及其敏感的药物。
为了预防和防治犊牛的应激反应以及后期犊牛健康的成长，不至于影响犊牛的生长发育以及繁殖，为了合理并且达到预期的用药效果，第一，要严格掌握该反应的适应症，第二，要根据药物在体内的代谢和残存量，适量控制用药量，第三，要防治用药的不良反应，第四，要选择最适合，最敏感的药物，以防治抗菌药的滥用。
合理的遵循临床用药原则，是药物和畜群的经济利益发挥到最大。