培养基构成与选择
什么是选择培养基？常用的选择培养基有哪些。
什么是选择培养基？常⽤的选择培养基有哪些。
选择培养基是根据某⼀种或某⼀类微⽣物的特殊营养要求或对⼀些物理、化学抗性⽽设计的培养基。
利⽤这种培养基可以将所需要的微⽣物从混杂的微⽣物中分离出来⼀、⽜⾁膏蛋⽩胨培养基(培养细菌⽤)⽜⾁膏 3g；蛋⽩胨 10g；NaCl 5g；琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH 7．0—7．2；1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。
⼆、淀粉琼脂培养基(⾼⽒1号培养基，培养放线菌⽤)可溶性淀粉 20g；KNO3 1g；NaCl 0．5g；K2HPO4 0．5g；MgSO4 0.5g；FeSO4 0．01g琼脂 20g;⽔ 1000ml;pH 7．2—7．4配制时，先⽤少量冷⽔，将淀粉调成糊状，在⽕上加热，边搅拌边加⽔及其他成分，溶化后，补⾜⽔分⾄1000ml。
1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。
三、查⽒培养基(培养霉菌⽤)NaNO3 2g；K2 HPO4 1g；KCl 0．5g；MgSO4 0．5g；FeSO4 0．01g；蔗糖 30g琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH ⾃然；1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。
四、马丁⽒(Martin)琼脂培养基(分离真菌⽤)葡萄糖 10g；蛋⽩胨 5g；KH2PO4 1g； MgSO4·7H2O 0．5g；1/3000孟加拉红溶液 100ml；琼脂 15—20g；pH ⾃然;蒸馏⽔ 800ml;0．56kg/cm2 (8磅/英⼨2 )，112．6℃灭菌30分钟。
临⽤前加⼊0．03%链霉素稀释液100ml，使每毫升培养基中含链霉素30µg。
五、马铃薯培养基 (实验16)马铃薯 200g；蔗糖(或葡萄糖) 20g；琼脂 15—20g；⽔ 1000ml；pH ⾃然马铃薯去⽪，切成块煮沸半⼩时，然后⽤纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补⾜⽔⾄1000ml。
1．05kg/cm2 ，121．3℃灭菌20分钟。
培养基配置和灭菌的注意事项
培养基配置和灭菌的注意事项一、培养基配置1.选用适当的培养基组成：根据实验的需要选择适当的培养基成分，包括碳源、氮源、矿质盐、维生素等。
根据不同微生物的要求，可以选择不同的培养基，如富集培养基、选择性培养基等。
2.正确计量和混合培养基成分：根据实验需要和比例，精确地称取和混合培养基成分。
注意避免污染和交叉污染，使用干燥器、称重纸和清洁器具等进行操作。
3.正确调节培养基的pH值：根据不同微生物的偏好，调节培养基的pH值。
使用pH计和相应的酸碱溶液进行调节，确保培养基的pH值符合微生物的需求。
4.加热溶解和固化培养基：将培养基成分加入适量的蒸馏水中，加热搅拌溶解，然后分装到培养皿或试管中。
对于固化培养基，需要加入适量的琼脂或琼脂糖，在混合均匀后加热至溶解，然后分装到培养皿或试管中。
二、培养基灭菌1.选择合适的灭菌方法：有常见的三种灭菌方法，包括热处理（如蒸汽灭菌、热风灭菌）、化学灭菌和滤器灭菌。
根据实验需求和培养基的性质选择合适的灭菌方法。
2.准备合适的灭菌器具：根据实验需求和培养基的量，选择合适的灭菌器具，如蒸馏锅、高压灭菌器、紫外线灭菌箱等。
3.正确操作灭菌设备：根据灭菌设备的说明和操作指南，正确操作和调节灭菌设备。
4.合理选择灭菌时间和温度：根据不同培养基的特性和实验需求，合理选择灭菌时间和温度。
通常情况下，蒸汽灭菌的时间为15-30分钟，温度为121摄氏度；热风灭菌的时间为1-2小时，温度为160摄氏度。
5.注意灭菌后的处理：在灭菌后，及时关闭灭菌设备，避免灭菌后的污染。
将培养基冷却后，进行温度验证，然后保存在合适的温度和条件下。
培养基类型
培养基类型引言在生物科学研究中，培养基是一种重要的工具，它提供了一种人工的环境，使得生物样本可以在实验室中继续生长和繁殖。
培养基类型广泛，各种生物样本都需要适合其生长特性和需求的培养基。
本文将介绍常见的培养基类型，包括液体培养基和固体培养基。
一、液体培养基液体培养基是最常见的一种培养基类型。
它由水、营养物以及其他添加物组成，可以提供生物样本所需的养分和环境条件。
液体培养基通常用于细菌和酵母等微生物的培养。
在制备液体培养基时，我们需要注意以下几个关键因素：1. 成分选择：液体培养基的成分选择应根据生物样本的特性和需求进行。
常见的成分包括碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
根据不同的微生物要求，可以选择合适的成分组合。
2. pH值调节：液体培养基的pH值对生物样本的生长和繁殖起着重要作用。
不同的生物样本对pH值有不同的要求，一般范围在6.5-7.5之间。
可以使用缓冲溶液来调节液体培养基的pH值。
3. 混合均匀：在制备液体培养基时，需要将各种组分充分混合，以确保培养基中各种养分分布均匀。
可以使用搅拌器或摇床等设备进行混合。
液体培养基的优点是易于制备和操作，可以提供大量的生物样本供科研人员使用。
然而，它也存在一些缺点，如难以分离和纯化生物样本等。
为了解决这些问题，人们采用了固体培养基。
二、固体培养基固体培养基是一种将液体培养基添加凝胶剂（通常是琼脂）后制成的固体状培养基。
它可以提供更稳定的平台，使得生物样本能够在其表面上生长和繁殖。
固体培养基通常用于培养细菌、真菌和植物等生物样本。
制备固体培养基与液体培养基有一些不同之处：1. 凝胶剂添加：在制备固体培养基时，需要将合适的凝胶剂添加到液体培养基中。
琼脂是最常用的凝胶剂，它可以增加培养基的稳定性和坚固性。
2. 灭菌：由于固体培养基中存在微生物生长的可能性，制备过程中需要严格控制卫生条件，并进行灭菌处理，以杀死潜在的污染微生物。
3. 均匀涂布：在制备固体培养基时，需要将凝胶状的培养基均匀涂布在培养皿或培养瓶的表面上。
培养基的配制 (2)
培养基的配制简介培养基是在实验室中广泛使用的一种生物学培养材料，它提供了生长微生物和其他细胞的所需营养物质和理想的环境条件。
培养基的配制是制备培养基的过程，通过合理的配比和操作，可以获得高质量的培养基。
培养基的组成培养基的组成是根据所培养的微生物或细胞的生理特点和营养需求来确定的。
一般来说，培养基由以下几个组分组成：1.碳源：提供微生物或细胞生长所需的碳质物质，常见的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等。
2.氮源：提供微生物或细胞生长所需的氮质物质，常见的氮源有氨基酸、尿素、氯化铵等。
3.磷源：提供微生物或细胞生长所需的磷质物质，常见的磷源有磷酸二氢盐、磷酸氢二钠等。
4.硫源：提供微生物或细胞生长所需的硫质物质，常见的硫源有硫酸铵、硫酸钠等。
5.微量元素：为微生物或细胞提供必需的微量元素，如铁、锰、锌等。
6.维生素：提供微生物或细胞生长所需的维生素，如维生素B群。
7.pH调节剂：维持培养基的理想pH值，如磷酸盐缓冲液。
8.凝胶剂：使液态培养基凝固成凝胶状，常用的凝胶剂有琼脂和洋菜。
培养基的配制步骤1. 准备所需实验器材和试剂在开始培养基的配制之前，需要准备好所需的实验器材和试剂。
常见的实验器材包括量筒、烧杯、移液管、培养皿等；试剂包括碳源、氮源、磷源、硫源、微量元素、维生素等。
2. 确定培养基组成根据所培养的微生物或细胞的生理特点和营养需求，确定培养基的组成，并计算各组分的配比。
3. 配制培养基按照确定的配比，依次称取所需试剂并溶解于适量的去离子水中，然后使用量筒或烧杯调整总体积。
4. 调节pH值使用pH计测量培养基的pH值，并根据需要使用适当的酸碱溶液进行调节，直到达到理想的pH值。
5. 凝胶化培养基（可选）如果需要制备凝胶状的培养基，可以在配制好的液态培养基中加入适量的凝胶剂，并在加热过程中充分混合，待其冷却凝固。
6. 灭菌配制好的培养基需要进行灭菌处理，常见的方法有高温灭菌和滤过灭菌。
高温灭菌通常使用高压高温的压力罐进行，滤过灭菌则需要使用0.22微米的滤膜进行过滤。
培养基的认识及选择
培养基的选择
培养基的选择
根据标本来源和可能存在的病原菌，确定选用各种分离培养基
大部分细菌培养的标本—血平板、麦康凯平板 痰标本，咽拭子培养--血平板、麦康凯、巧克力平板。 中段尿---血平板，若做菌落计数时，可联合血平板、普通营养琼脂， 及或麦康凯（或中国蓝） 粪便标本---EMB、SS、MAC、TCBS 分泌物培养：血平板、麦康凯 B群链球菌：B群链球菌显色培养 酵母样真菌培养---念珠菌显色平板、沙保弱平板 脑脊液标本---血琼脂、巧克力琼脂、麦康凯
THANKS ！
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量菌液后均匀涂布于平板上。
目的：用于纸片扩散法药敏试验、院感监 测
培养基接种划线
定量接种方法：去已经混匀但未 经离心处理的尿液，用10μl定量 接种环垂直伸入尿液标本，使接 种环内有尿液形成的薄膜，而没 有气泡，按以下方法接种到平板 上：先在平板中心线上划线，再 在与此线垂直的方向左右连续划 线，从上而下完成划线；
β-溶血环：菌落周围的培养基 内红细胞完全被破坏
γ溶血：不溶血
2.巧克力血平板
巧克力血平板其中 含有V和X因子，适 于接种疑有嗜血杆 菌、奈瑟菌等的标 本。 大多数革兰阴性菌 都会生长
3.麦康凯培养基
• 选择性培养基：供肠道致病菌分 离培 非发酵菌鉴别
• 抑制剂——胆盐：抑制革兰阳性 菌
• 指示剂——中性红：区分分解乳 糖和不分解乳糖的细菌
常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴甲 酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂，美兰为 常用的氧化还原指示剂。
常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒 酸钠及一些染料和某些抗生素等。
培养基种类
培养基种类
1基础培养基：含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉 汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验，也 是制备其他培养基的基础成分。
培养基的配制方法
培养基的配制方法培养基是微生物学、生物学等实验中将微生物培养的一种物质基质，它提供了微生物生长所必需的营养和环境条件。
培养基的配制方法主要包括选择基质、添加营养成分、调节pH值、灭菌和包装等步骤。
以下是一般的培养基配制方法及注意事项。
1.选择基质培养基的基质可以选择为水或含有必要营养成分的溶液。
一般情况下，使用蒸馏水或双蒸馏水作为基质是比较常见的选择。
2.添加营养成分培养基中必须添加适当的营养成分，以满足微生物的生长需求。
常用的营养成分有碳源、氮源、无机盐、维生素和生长因子等。
常用的碳源有葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等，常用的氮源有氨基酸、酵母浸出物、肉浸出物等。
此外，还可以根据微生物的特殊要求增加一些其他的营养成分。
3.调节pH值pH值对于微生物的生长十分重要，大多数微生物的最适生长pH在6.5-7.5之间。
因此，培养基在配制过程中需要进行pH值的调节。
可以使用酸碱溶液（如HCl和NaOH）进行pH调节，并通过使用pH试纸或pH计监测pH值。
4.灭菌培养基的灭菌工作非常重要，它可以防止杂菌的污染。
常用的灭菌方法有高压灭菌、干热灭菌和滤过灭菌等。
高压灭菌是指将配制好的培养基放置在高压锅中，经过高温高压的处理。
干热灭菌是将配制好的培养基放置在烘箱中进行加热处理。
滤过灭菌是将培养基通过0.22um的无菌滤膜过滤，以去除微生物。
灭菌后，需要用无菌操作将培养基倒装入无菌培养器皿中。
5.包装灭菌后的培养基需要进行包装保存，以防止污染。
常用的包装方式有试管包装、琼脂平板包装和瓶装包装等。
试管包装是将培养基倒入试管中，用苏打棒打破试管口，并通过注封的方法密封试管。
琼脂平板包装是将培养基倒入无菌琼脂平板中，并使用无菌的平板封口膜密封。
瓶装包装是将培养基倒入无菌玻璃瓶中，用无菌胶塞封闭瓶口。
在配制培养基的过程中，还需要注意以下几点：1.保持操作环境无菌，使用无菌操作台、无菌器具和无菌操作方法。
2.注意各种添加物的浓度，不可过量或过少。
培养基配方及配制方法
培养基配方及配制方法培养基是一种用于寄养和培养细胞、微生物、组织等生物体的基质。
其配方的选择和配制方法对于不同的生物体和研究目的有很大的差异。
以下是一般常用的培养基配方及简单的配制方法：1. LB培养基（Luria-Bertani）LB培养基是常见的用于大肠杆菌等细菌的培养基，其配方包括：- 1% 蛋白胨（tryptone）: 添加营养源和能量- 0.5% 酵母粉（yeast extract）: 提供维生素和生长因子-1%NaCl（氯化钠）:调节渗透压-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将蛋白胨、酵母粉和NaCl加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入1.5%的琼脂。
2. YPD培养基（Yeast extract-Peptone-Dextrose）YPD培养基常用于酵母菌的培养，其配方包括：- 1% 酵母提取物（yeast extract）: 提供维生素和生长因子- 2% 蛋白胨（peptone）: 为细菌提供碳源和能量- 2% 葡萄糖（dextrose）: 为细菌提供碳源和能量-蒸馏水:使混合液体稀释至所需体积配制方法：将酵母提取物、蛋白胨和葡萄糖加入蒸馏水中，调整pH至7.0，将混合液体加热至溶解，过滤杂质，如需固化则加入2%的琼脂。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）DMEM培养基是常用的哺乳动物细胞培养基，其配方包括：-10%胎牛血清（FBS）:提供生长因子和营养物质- 1% 青霉素-链霉素溶液（Penicillin-Streptomycin Solution）: 防止细菌污染- 1% L-谷氨酰胺（L-Glutamine）: 提供细胞代谢所需的基础物质-DMEM基础培养液:包括氨基酸、维生素等成分-蒸馏水：使混合液体稀释至所需体积配制方法：将胎牛血清、青霉素-链霉素溶液、L-谷氨酰胺和DMEM基础培养液加入蒸馏水中，调整pH值至7.4，混合均匀即可。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。
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1、含盐量较高培养基：MS、LS、BL等 无机盐浓度高，微量元素和有机成分含量丰富。 适用于多数营养需求量较大的植物。 2、硝酸钾含量较高培养基：B5、 N6等 铵态氮含量低，但盐酸硫胺素和硝酸钾含量高
*
椰子汁 （添加量100~150ml/l） 酵母提取液 (添加量0.01%~0.5%)
5.天然有机 物质
番茄汁(添加量5%~10%) 香蕉泥（添加量100~200mg/l)
通常富含有机营养成分或者生理活性物质
*
* 5.PH 值 * 灭菌前，一般ph为5.5~6.0之间。最常用的
5.7~5.8。Ph过高时，培养基会变硬，过低会影响 iller等 大量元素浓度约为MS的1/2。微量元素种类少但 含量高。 4、低无机盐含量培养基：WS、 White等。 大量元素浓度约为MS的1/4左右。有机成分、无 机盐含量低
*
*
*
糖类物质 碳源和能源 维生素类 氨基酸类 促进植物生长和分化 提供有机氮源 促进不定芽分化
*3.有机营养
成分
*
* 4．植物生长调节物质
植物激素是植物新称代谢中产生的天然化合物， 它能以极微小的用量直接影响植物细胞的分化、分 裂以及发育，影响植物的形态建成、开花、结实、 成熟、衰老脱落、休眠、萌发等生理活动。 在植物组织培养中，主要通过植物激素及生长调 节物质对离体的组织、器官的形态发生进行调控。 包括诱导细胞分裂、愈伤组织的生长、根芽的分化 以及体细胞胚胎发生等。
*
（1）按培养基组成物质的化学成分 合成培养基、天然培养基。
（2）按物理性质
固体，液体 （3）按用途
选择性培养基、鉴别培养基、富集培养基等
*
培养基的 构成要素
水 无机盐 有机营养成分 植物生长调节物质 天然有机物质 ph 凝固剂 其他添加物
*
* 1．水 1. 水良好的溶剂，溶解营养物质，细胞的渗透、分泌、排泄
*
* 7．凝固剂
*琼脂作为固化剂用于组织培养中，起支持植
物的作用，不提供营养，为海藻中提取的一 种高分子化合物，仅溶于热水（90 ℃以上）， 成为凝胶，冷却后（40 ℃以下）即凝固为凝 胶。 * 琼脂的用量通常在3～10g/L. * 琼脂是组织培养培养基中主要的成本支出， 约占80％。
*
* 8．其他添加物
等作用都是以水为媒介，并且水直接参与代谢作用中的许 多反应 水的比热高，是热的良导体，调节细胞的温度 恒定的水源是发酵工厂的关键，水源质量很重要
2. 3.
*
*
磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 铁、锰、钴等微量元素
*2.无机盐 *
* 功能：构成菌体，参与酶的组成，维持酶活性，
调节渗透压，调节pH值，维持氧化还原电位；
*
培养基（medium）是植物组织培养的重要材料， 是外植体生长的营养物质，只有配制出适宜的培养 基，才能使组织培养获得成功。 通常植物组织培养所用培养基包括以下成分，即 水、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节剂、 天然有机物质、凝固剂以及其他附加物等。 培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物 质的浓度。