高考生物二轮专题复习加试非选择题综合应用特训第32题1生物技术实践(A)

[第32题] 1.生物技术实践(A)1.铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：新生营养芽―→原球茎(类似愈伤组织)――→长芽丛状苗――→长根幼苗请回答以下问题：(1)选用新生营养芽为培养材料的原因是_______________________________，原球茎细胞的细胞壁______(填“厚”或“薄”)。

(2)某小组为研究培养铁皮石斛的培养基中蔗糖和光各自的作用，进行了对照实验，结果如下：根据以上实验结果，下列说法正确的是________。

A.光为生长提供能量，蔗糖促进细胞分化B.整个组培过程中，培养基中都不用加入蔗糖也可发育成幼苗C.光照只会影响到光合作用的效率D.蔗糖为生长、分化提供能量，光促进细胞分化(3)生物碱属于铁皮石斛的________代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过________悬浮培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。

答案(1)分裂旺盛，全能性容易表达薄(2)D (3)次生液体解析(1)新生的芽幼嫩，分裂能力强，全能性易表达，植物组织培养过程中一般选用新生营养芽为培养材料。

原球茎细胞类似愈伤组织，由于愈伤组织是一团未分化的薄壁细胞，因此，原球茎细胞的细胞壁薄。

(2)通过对比加蔗糖条件下，有光组能够正常分化，无光组无法发生分化，说明光能促进细胞分化；比较不加蔗糖条件下，有无光照均死亡，说明蔗糖为生长提供能量。

若保证组培正常，需要加入蔗糖，故A、B、C错误，D正确。

(3)生物碱属于铁皮石斛的次生代谢产物，获取方法可以从植株中提取，也可以通过液体悬浮细胞培养，将愈伤组织(原球茎)分散成单细胞，然后通过培养特定细胞系实现工业化生产。

2.利用废弃的秸秆生产燃料乙醇，不仅缓解了资源危机、环境污染，同时更为可持续发展提供了保证。

下面是利用玉米秸秆来生产乙醇的流程：玉米秸秆―――→预处理纤维素―――→微生物1发酵葡萄糖―――→微生物2发酵乙醇 (1)从纤维素丰富的土壤中获取微生物1，进行一系列的操作后，用________________将菌种涂布在相应的固体培养基中。

(2)下列有关涂布分离法的叙述，错误的是________。

A.从土壤稀释液中取样时，不能只取悬液B.接种时，涂布工具需先在酒精灯火焰上引燃C.培养后菌落在整个平板表面分散均匀D.涂布分离法比划线分离法更易获得单菌落(3)为了提高生产效率，也可通过培养微生物1获得____________酶，并将该酶固定在某介质上制成固定化酶。

(4)微生物2通常是________________，为了确保获得产物乙醇，接种微生物2时要注意避免________，发酵时要注意________。

发酵获得的低浓度乙醇经过蒸馏、提纯等加工，才可以得到浓度大于90%的燃料乙醇。

答案 (1)玻璃刮刀 (2)A (3)纤维素 (4)酵母菌 杂菌污染 无氧3.(2018·金华十校期末调研)回答与“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测”有关的问题：(1)在酶的固定化时，共价偶联法比吸附法对α-淀粉酶活性的影响更________(填“大”或“小”)。

(2)实验室常用枯草芽孢杆菌来制备α-淀粉酶，枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶的最适pH 范围是______________。

(3)在固定化α-淀粉酶水解淀粉作用的检测实验中，固相淀粉酶水解淀粉的鉴定实验结果为：①淀粉溶液加指示剂呈蓝色；②____________________加指示剂呈红色。

(4)枯草芽孢杆菌也是制备蛋白酶的良好原料，为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产菌株，将分别浸过不同菌株(a ～e)的分泌物提取液及无菌水(f)的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面；在37 ℃恒温箱中放置2～3天，结果如下图。

若需要保存a 菌株，可将其接种至斜面上，培养后置于________中保存。

菌株b 提取物周围没有形成明显清晰区的原因：①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。

答案(1)大(2)5.5～7.5 (3)亲和层析洗脱液(4)4 ℃冰箱①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足③分泌的蛋白酶活性低(任意答出两点)4.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。

(1)图中选择培养基应以______为唯一氮源；鉴别培养基还需添加______作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变____色。

(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。

该过程采取的接种方法是_____________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。

答案(1)尿素酚红红(2)涂布分离法 1.75 少解析(1)脲酶由分解尿素的细菌产生，故需用以尿素为唯一氮源的培养基筛选该类微生物。

分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，故培养基中加入酚红指示剂后，菌落周围将出现红色。

(2)涂布分离法常用来统计样品中的活菌数，在计数时一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。

因培养基上两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计结果往往较实际数目少；而用血细胞计数板计数时，死亡的、活的菌体都计数在内。

5.(2018·湖州、衢州、丽水教学质量检测)猕猴桃是人们非常喜爱的一种水果，人们不仅直接食用猕猴桃，还对其进行深加工，制成猕猴桃果汁、果酒等。

下图为生产猕猴桃果汁和果酒的流程示意图，请回答下列问题：(1)在生产猕猴桃汁的流程中，为了提高出汁率，可在压榨前加入一定量的____________处理1小时。

(2)猕猴桃汁在保藏期的某一阶段会产生酚类物质导致果汁褐变或二次浑浊，后来人们发现，漆酶能有效降解酚类物质，使果汁澄清。

将漆酶应用于果汁澄清的过程中，可采用交联法固定该酶，固定化酶技术的优点是__________________________________________。

工业上固定化酶的方式较多，除上述方法外，还有吸附法、________________、共价偶联法等。

(3)制作好的果汁也可继续用于猕猴桃酒的生产。

在进行发酵前需要在猕猴桃汁中接入的菌种是__________，同时添加适量蔗糖，主要目的是________________________________。

在发酵时，当出现________________现象，即表示发酵完毕。

(4)当主体发酵结束后，需将上层“酒液”转移到另一灭菌容器中进行后续贮藏，此时为了防止醋酸菌污染，加入容器中“酒液”的量应为________(A.注满 B.2/3 C.1/3 D.无特殊要求)，以保证果酒的品质。

答案(1)果胶酶(2)酶与产物易分离或酶可反复利用，提高酶的利用率(答出一点即可) 包埋法(3)酵母菌提高果酒的酒精度或甜度(含糖量) 停止产生气泡(4)A6.利用酵母菌生产乳糖酶首先要筛选高产乳糖酶的酵母菌种。

具体如下：(1)在无菌条件下，将经过处理的马奶酒进行稀释，然后用_____法接种于含有乳糖的固体培养基上。

培养后观察到_____；其周围出现水解圈，水解圈的直径大小与_____强弱相关。

(2)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行扩大培养。

扩大培养通常用________培养基，培养时需要________，其主要目的是供氧。

(3)若要保存菌种，可以采用的保存条件是________。

A.平面培养基、37 ℃B.平面培养基、4 ℃C.斜面培养基、37 ℃D.斜面培养基、4 ℃答案(1)涂布分离单菌落乳糖酶的活性(2)液体振荡(3)D7.(2018·全能生B卷)焚烧农作物秸秆给农村带来了极大污染，为了实现可持续发展的目标，我国科学家想到利用特定的微生物将秸秆中的纤维素分解成葡萄糖，再发酵产生清洁能源乙醇。

(1)欲从土壤中分离获取上述分解秸秆的特定微生物，所用培养基以________为唯一碳源。

在培养基上完成接种后，需将培养皿________，然后置于恒温箱中培养。

(2)将上述菌株进行培养，从中分离得到纤维素酶并制成酶液，将该酶液和秸秆粉碎物混合，从发酵物中分离得到葡萄糖，但是酶不可重复利用，因此需要采用______________技术。

在合适条件下，将提纯的该酶与石英砂混合后，不时搅拌，该方法是________。

(A.吸附法 B.包埋法 C.交联法 D.共价偶联法)。

(3)酵母菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，发酵瓶需要定期排气的主要原因是______________________________________________________________________________。

发酵一定时间后，观察到发酵瓶内液面______________，说明发酵基本完毕。

影响乙醇发酵的因素很多，下图是某研究小组的研究成果，请写出该图的名称：________________。

答案(1)纤维素倒置(2)固定化酶 A (3)发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂停止出现气泡发酵天数和pH对发酵产生的乙醇浓度的影响8.(2018·浙江11月选考，32(一))回答与微生物培养及应用有关的问题：(1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从__________________时开始计时。

对于不耐热的液体培养基，一般可将其转入G6玻璃砂漏斗中，采用________方式可较快地进行过滤灭菌。

(2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加________________的过程。

某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是____________。

(3)为筛选胞外α-淀粉酶分泌型菌种，一般从____________(A.果园树下 B.肉类加工厂周围 C.米酒厂周围 D.枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。

若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个______________________比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。

然后将培养液离心，取__________用于检测酶活性。