基因工程题库版--名词解释
基因工程名词解释

名词解释一RNase:RNA水解酶Restriction endonucleasr:限制性核酸内切酶RBS:核糖体结合位点SD sequence:SD序列。
可结合原核生物旳核糖体。
Ori:复制起始原点Promptor:启动子Klenow fragment:大肠杆菌pol1旳大片段Reverse tranecriptase:反转录酶Transferred DNA:转移DNAMCS(multiple cloning site):多克隆位点IPTG: 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷X-gal:5-溴4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷GUS:β-葡萄糖苷酸酶X-gluc:5-溴4-氯-3-吲哚-β-D葡萄糖苷酸酯Ampr(ampicillin resistance gene):氨苄青霉素抗性基因Cmr:氯霉素抗性基因Tetr:四环素抗性基因Kanr:卡那霉素抗性基因Ermr:红霉素抗性基因Neor:新霉素抗性基因supF:琥珀突变克制基因phagemid:噬菌粒plasmid:质粒YAC ( yeast artificial chromosome):酵母人工染色体BAC(Bacterial Artificial Chromosome):细菌人工染色体PAC(P1 artificialchromosome):P1人工染色体TEL: 端粒反复序列CEN:着丝粒ARS: 自主复制序列Cosmid:黏粒PCR(Polymerase Chain Reaction):聚合酶链式反应dNTP:脱氧三磷酸核苷RT-PCR:反转录(reverse transcriptase)PCR或实时定量(real-time)PCR DD(RT)-PCR:差异(反转录)显示PCRTAIL PCR:热不对称相错PCRRACE: cDNA末端旳迅速扩增RAPD:随机扩增多态性DNAAFLP:扩增片段长度多态性SSH:克制性扣除杂交FISH:荧光原位杂交Vector:载体Blunt end:平末端Match end/cohesive end:匹配黏端/黏性末端Deoxyribonuclease:脱氧核糖核酸酶TAP:烟草算焦磷酸酶SDS:十二烷基磺酸钠PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳PFGE:脉冲电场凝胶电泳PEG:聚乙二醇DEPC:焦碳酸二乙酯GFP:绿色荧光蛋白Competent cell:感受态细胞PNA:肽核酸Ptac:乳糖操纵子和色氨酸操纵子旳杂合启动子GST(Glutathione S-transferase):谷胱甘肽-S-转移酶DDT:二硫苏糖醇Tag:标识蛋白Polyhis-6:六聚组氨酸肽名词解释二1 同裂酶(isoschizomer)识别相似序列旳限制酶称同裂酶同尾酶(isocaudarner)许多不一样旳限制酶切割DNA产生旳末端是相似旳,且是对称旳,即它们可产生相似旳黏性突出末端。
基因工程名词解释

名词解释【基因工程】:在体外对不同生物的遗传物质(基因)进行剪切、重组、连接,然后插入到载体分子中(细菌质粒、病毒或噬菌体DNA),转入微生物,植物或动物细胞内进行无性繁殖,并表达出基因产物。
【限制性核酸内切酶】:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列(4-8bp),并由此处切割DNA双链结构的核酸内切酶。
【识别序列】:限制性核酸内切酶在双链DNA上能够识别的特殊核苷酸序列被称为识别序列。
【酶切位点】:DNA在限制性核酸内切酶的作用下,使多聚核苷酸链上磷酸二酯键点开的位置被称为切割位点。
【粘性末端】:是指含有几个核苷酸单链的末端,可通过这种末端的碱基互补,使不同的 DNA片段发生退火。
【平末端】:限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时产生的平齐的末端。
【同裂酶】:一些来源不同的但能识别位点的序列相同的限制性内切酶。
【同尾酶】:一些来源不同且识别序列不同,但能产生相同粘性末端的限制性内切酶。
【DNA的甲基化程度】:DNA被甲基化酶甲基化,识别序列中的核苷酸一旦被甲基化,就会影响内切酶的切割效率。
【位点偏爱】:对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象【内切酶的star活性】:某种限制性核酸内切酶在特定条件下,可在不是原来的识别序列处切割DNA,这种现象称为star活性。
【末端转移酶】:一种能将脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)加到某DNA片段上3’-OH基上的酶。
【DNA连接酶】:借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA双链,DNA片段紧靠在一起的3’-OH末端与5’-PO4末端之间形成磷酸二酯键,使两末端连接【DNA聚合酶】:以DNA为复制模板,使DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
【反转录酶】:与DNA聚合酶作用方式相似:5’→3’聚合,模版是mRNA,合成DNA【碱性磷酸酶】:能够催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA(或RNA)片段的5’-P 末端转换成5’-OH末端。
基因工程原理题库-名词解释

基因工程原理题库-名称解释1.基因:DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。
2.假基因:一种类似于基因序列,其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。
3.重叠基因: 是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列为两个或两个以上基因的组成部分。
4.结构基因:指受调控的编码特定生物合成和代谢过程中的酶/蛋白质的基因。
5.调节基因(regulator gene): 是编码合成那些参与基因表达调控的RNA和蛋白质的特异DNA序列。
6.基因家族:真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因,可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。
7.基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。
8.基因组:该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。
9.基因工程:是指在分子水平上,根据分子生物学和遗传学原理,在体外将一个生物体中有用的目的DNA(或基因)核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之掺入到原先没有这类分子的寄主细胞中内,而能持续稳定的繁殖。
使后者获得所需的新遗传性状或表达所需产物,最终实现该技术的商业价值。
10.操纵子:是原核生物中一组功能上相关,受同一调控区控制的基因组成的一个遗传单位。
11.mRNA (messenger RNA):由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息并指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。
12.启动子:在DNA 转录起始时RNA聚合酶识别并与其结合的一段DNA 片段,一般不编码蛋白,具有与RNA 聚合酶结合位点,并引导转录的起始。
13.增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。
它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。
基因工程名词解释

基因工程名词解释1、基因工程:对不同的遗传物质在体外进行剪切、组合和拼接,使遗传物质重新组合,然后通过载体转入微生物、植物和动物细胞内,进行无性繁殖,并使所需的基因在细胞中表达,产生人类所需的产物或新生物类型。
2、重组DNA技术:是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后再转入另一个生物体(受体)内,按照人们的意愿稳定遗传并表达新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。
3、基因xx:经无性繁殖获得基因许多相同拷贝的过程。
通常是将单个基因导入宿主细胞中复制而成。
(包括把来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组的DNA,然后送入受体生物中去表达。
从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。
)4、限制性内切核酸酶:一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸水解酶。
5、修饰酶:体内有些酶可在其他酶的作用下,将酶的结构进行共价修饰,使该酶活性发生改变,这种调节称为共价修饰调节(covalentmodificationregulation),这类酶称为修饰酶(prosessing enzyme)。
6、同裂酶:识别相同序列的限制酶称同裂酶,但它们的切割位点可能不同。
(同序同切酶、同序异切酶、“同功多位”等)7、同尾酶:切割不同的DNA片段但产生相同的粘性末端的一类限制性内切酶。
8、位点偏爱:某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割,即对不同位置的同一个识别序列表现出不同切割效率。
9、星星活性:极端非标准反应条件下,限制酶能够切割与识别序列相似的序列,这个改变的特殊性称星星活性。
10、甲基化酶:原核生物甲基化酶是作为限制与修饰系统中的一员,用于保护宿主DNA不被相应的限制酶所切割。
11、DNA聚合酶:以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。
DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
基因工程考试名词解释

30、增强子(Enhancer): 增强子是一段DNA序列,其中含有多个能被反式作用因子识别与结合的顺式作用元件。
31、酶(Enzymes) : 酶是由活细胞合成的,对其特异底物起高效催化作用的蛋白质,是机体内催化各种代谢反应最主要的催化剂。
32、真核细胞(Eukaryote): 单细胞或多细胞生物,具有复杂的细胞结构,可通过内部的细胞结构,多染色体和单个核而鉴定。
92、核糖体(ribosome): rRNA与核蛋白体蛋白共同构成核蛋白体或称为核糖体。
94、RNA酶(RNase): 将RNA降解成更小的RNA片段或核糖核苷酸的一类酶。
95、第二信使(second messenger): 通常将Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、cGMP等这类在细胞内传递信息的小分子化合物称为第二信使。
21、感受态细胞(Competent cells): 大肠杆菌悬浮在Cacl2溶液中,并置于低温(0-50℃)环境下一段时间,钙离子使细胞膜的结构发生变化,通透性增加,从而具有摄取外源DNA的能力,这种细胞称为感受态细胞。
26、DNase: 将DNA降解为更小的DNA片段或脱氧核糖核酸的酶。
27、电泳(Electrophoresis): 通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术,称为电泳。
29、末端标记(End labeling) 在DNA或RNA的5'-或3'-加上标记性群体(放射性或非放射性)。较典型的有用激酶标记5'-末端,或用DNA聚合酶或末端转移酶标记3'-末端。
8、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase): 能去除DNA/RNA 5'端的磷酸根的一种酶。制备载体时,用碱性磷酸酶处理后,可防止载体自身连接,提高重组效率。
基因工程名词解释

基因工程名词解释1.载体:能载带微量物质共同参与某种化学或物理过程的常量物质,在基因工程重组DNA技术中将DNA片段(目的基因)转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。
2.克隆:科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术,其本身的含义是无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。
3.限制性内切酶:一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。
4.基因文库:将所有的重组DNA分子都导入宿主细胞进行扩增,得到分子克隆的混合体,这样一个混合体称为基因文库。
5.cDNA基因文库:是指以 mRNA为模板,在反转录酶及其他一系列酶的催化作用下所获得的双链cDNA,经与适当载体连接并转化到寄主细胞内进行扩增,由此而构成包含着相应基因编码序列的一群克隆。
6.粘性末端:当一种限制性内切酶在一个特异性的碱基序列处切断DNA时,就可在切口处留下几个未配对的核苷酸片段,即5’突出。
这些片断可以通过重叠的5‘末端形成的氢键相连,或者通过分子内反应环化。
因此称这些片段具有粘性,叫做粘性末端。
7.基因组:指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。
8.操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起,转录生成一个mRNA,然后分别翻译成几种不同的蛋白质。
这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶,或共同完成某种功能。
这些结构基因与其上游的启动子,操纵基因共同构成转录单位,称操纵子。
9.启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件,包括至少一个转录起始点。
在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。
有时,将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。
10.增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件,最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA,可使旁侧的基因转录提高100倍,其后在多种真核生物,甚至在原核生物中都发现了增强子。
基因工程名词解释

基因工程名词解释1.基因工程:指将一种或多种生物体(供体)的基因或基因组提取出来,或者人工合成的基因,按照人们的愿望进行严密的设计,经过体外加工重组,转移到另一种生物体(受体)的细胞内,使之能在受体细胞遗传并获得新的遗传性状的技术。
2.复制子:DNA复制时从一个DNA复制起点开始最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。
DNA中发生复制的独立单位称为复制子。
3.半保留复制:即DNA复制时亲代DNA的两条链解开,每条链作为新链的模板,从而形成两个子代DNA分子,每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的链。
4.一个单位的限制性核酸内切酶:在合适的温度和缓冲液中,在50ul反应体系中,1h完全降解1ug底物DNA所需要的酶量。
5.星号活性:指限制性内切酶的识别位点测定时,当改变测定条件时,有些酶的识别位点也随之改变,可能切割一些与特异识别序列相类似序列的现象。
6.一个韦氏单位:指在37度,20分钟内催化1nmol 32P从磷酸根置换到y,B-32P-ATP所需要的酶量。
7.载体:指基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”。
8.质粒的不亲和性:也称不相容性,是指在没有选择压力的情况下,两种不同质粒不能够在同一个宿主细胞系中稳定地共存的现象。
9.多克隆位点(MCS):指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制性和酸内切酶酶切位点的DNA片段。
10.阅读框架:指RNA或DNA中,一组连续且不重复的3核苷酸密码子11.T-DNA:能转移到植物细胞内的DNA片段质粒拷贝数:是指生长在标准的培养基下每个细菌细胞中所含有的质粒DNA分子的数目。
12.探针:是指经放射性或非放射性等物质标记的已知或特定的DNA或RNA序列。
13.DNA的变性:通过加热或变性作用可使DNA双螺旋的氢键断裂,双链解离,形成单链DNA。
14.DNA复性:解除变性条件之后,变性的单链可以重新结合起来,形成双链。
15.平台效应:是指PCR循环的后期,合成的产物到达0.3~1pmol的水平,由于产物积累,使原来以指数增加的速率变成平坦曲线,扩曾产物不在循环次数而明显上升。
基因工程名词解释(全)

1.Gene Engineering基因工程:在体外把核酸分子(DNA的分离、合成)插入载体分子,构成遗传物质的新组合(重组DNA),引入原先没有这类分子的受体细胞内,稳定地复制表达繁殖,培育符合人们需要的新品种(品系),生产人类急需的药品、食品、工业品等。
2.HGP人类基因组计划:是一项规模宏大,跨国跨学科的科学探索工程。
其宗旨在于测定组成人类染色体(指单倍体)中所包含的30亿个碱基对组成的核苷酸序列,从而绘制人类基因组图谱,并且辨识其载有的基因及其序列,达到破译人类遗传信息的最终目的.3.Gene Therapy 基因治疗:是指将外源正常基因导入靶细胞,取代突变基因,补充缺失基因或关闭异常基因,达到从根本上治疗疾病的目的。
基因诊断:是利用重组DNA 技术作为工具,直接从DNA水平监测人类遗传性疾病的基因缺陷。
Vector载体:是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增或表达的工具。
plasmid质粒:是生物细胞内固有的、能独立于宿主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。
shuttle vector穿梭载体:是指含有两个亲缘关系不同的复制子,能在两种不同的生物中复制的。
质粒不相容性;同种的或亲缘关系相近的两种质粒不能同时稳定地保持在一个细胞内的现象,称为质粒不相容性。
multiple cloning sites,MCS多克隆位点:DNA载体序列上人工合成的一段序列,含有多个限制内切酶识别位点。
能为外源DNA提供多种可插入的位置或插入方案.α—互补:LacZ’基因的互补:lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β—半乳糖苷酶基因的突变体之间实现互补。
粘性末端:指DNA分子的两端具有彼此互补的一段突出的单链部分,这一小段单链部分和同一分子的另一端或其它分子末端的单链部分如果互补的话,则能通过互补碱基之间的配对, 形成双链。
并在DNA连接酶的作用下,使同一DNA分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子.cos位点:当λDNA进入细菌细胞后,便迅速通过黏性末端配对形成双链环状的DNA分子,这种黏性末端结合形成双链的区域称为cos位点。
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各种题型确定题目重要题目候补题目不确定答案的题目试卷与题库重复题目名词解释同裂酶(同切点酶):有一些来源不同的限制酶识别的是同样的核苷酸靶序列,这类酶称为同裂酶。
同尾酶:与同裂酶对应的一类限制性内切酶,它们来源各异,识别的靶序列也各不相同,但切割后都能产生相同的黏性末端,特称为同尾酶。
测序酶:是经修饰过的T7噬菌体DNA聚合酶,是采用缺失的方法,从外切核酸酶结构域中除去28个氨基酸,这样使得T7DNA聚合酶完全失去了3~-5~外切酶活性,只有5~-3~聚合酶活性,而且聚合能力很强,测序时常用此酶。
与klenow相比优点是:是双脱氧链终止法对长片段进行测序的理想用酶。
限制性核酸内切酶:是一类能识别和切割双链DNA分子中特定碱基系列的核酸水解酶。
限制-修饰系统中的限制和修饰作用:限制-修饰系统中的限制作用是指一定类型的细菌可以通过限制性酶的作用,破坏入侵的外源DNA(如噬菌体DNA等),使得外源DNA对生物细胞的入侵受到限制;而生物细胞(如宿主)自身的DNA分子合成后,通过修饰酶的作用,在碱基中特定的位置上发生了甲基化而得到了修饰,可免遭自身限制性酶的破坏,这就是限制-修饰系统中的修饰作用。
5. 限制性片段长度多态性(RFLP):当DNA序列的差异发生在限制性内切酶的识别位点时,或当DNA片段的插入、缺失或重复导致基因组DNA经限制性内切酶酶解后,其片段长度的改变可以经过凝胶电泳区分,出现的这种DNA多态性称为限制性片段长度多态性。
6. 星号活性:限制性内切核酸酶识别和切割特异性位点是在特定的条件下测定的。
当条件改变时,许多酶的识别位点会改变,导致识别与切割序列的非特异性,这种现象称为星号活性。
(“非最适的”反应条件例如高浓度的核酸内切限制酶、高浓度的甘油、低离子强度、用Mn2+取代Mg2+以及高pH值等。
)克服星号活性的方法:维持反应体系适当的离子强度、较低的温度或酶浓度,尽可能缩短反应时间或DNA 样品的重新处理等。
7. 载体(vector): 在基因操作中携带外源基因进入受体细胞的工具。
克隆载体:主要用于扩增或保存DNA片段,是最简单的载体。
主要有:质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体、人工染色体(YAC和BAC)。
YAC(酵母人工染色体):是利用酿酒酵母的染色体的复制元件构建的载体,其工作环境也是在酿酒酵母中。
BAC(细菌人工染色体):是基于大肠杆菌(E.coli)的F质粒构建的高通量低拷贝的质粒载体。
表达载体是可携带外源基因进入宿主细胞进行复制并进行转录、翻译的载体。
病毒表达载体:是以病毒基因组序列为基础,插入必要的表达元件所构建成的真核基因转移工具。
T-载体:Taq酶的末端转移酶活性可在PCR产物的3’端加上一个不依赖于模板的A,根据这一特性,为方便进行PCR产物的直接克隆而开发出T-载体。
Ti质粒(tumor inducing plasmid):是在根癌农杆菌中发现的可决定冠瘿病(即可诱发寄主植物产生冠瘿瘤)的质粒。
大小在200kb左右。
12. 粘粒载体:由人工构建的、大小一般在5~7kb左右、含有λDNA的cos序列和质粒复制子的一类特殊的质粒载体。
17.一元载体:含目的DNA的中间表达载体与改造后的受体(Ti质粒)通过同源重组所产生的一种复合型载体。
18.双元载体:是指由两个分别含有T-DNA和vir区的相容性突变Ti质粒构成的系统。
16. 卸甲载体:将Ti质粒上的T-DNA的致瘤基因全部去掉,仅保留其两边界及与T-DNA转移所必需的25bp序列而构建成的载体。
8.质粒的相容性:是指两种质粒是否可以共存于同一个细胞,如果能够共存则叫相容又叫亲和。
质粒的不相容性:两个质粒在同一宿主中不能共存的现象,出现这种现象的原因主要是它们常常共用同一复制系统。
9. 转移性:质粒具转移性是指在自然条件下,很多质粒可以通过称为细菌接合的作用转移到新宿主内。
不含tra基因的质粒则不具备转移性。
T-DNA :能导入宿主细胞并插入其DNA中发挥作用的Ti质粒部分DNA片段。
T-DNA区:即转移DNA,能转移并整合在植物细胞核基因组上的、决定植物形成冠瘿瘤的一段DNA。
LTS和RTS对于T-DNA的转移和整合是不可缺少的。
α-互补:指lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,由 1024个氨基酸组成)阴性的突变体之间实现互补。
11. cos序列(cohesive endsite):λDNA分子两端各有12碱基(5′-GGGCGGCGACCT-3′)的单链互补粘性末端,当λ噬菌体进入细菌细胞后,其DNA可迅速按碱基互补配对结合形成双链环状DNA分子。
COS位点:当λDNA进入细菌细胞后,便迅速粘性末端配对形成双链环状DNA分子,这种粘性末端结合形成的双链区域叫做COS位点. 13. 端粒重复序列(telomeric repeat,TEL):定位于染色体末端一段序列,用于保护线状的DNA不被胞内的核酸酶降解,以形成稳定的结构。
14. 自主复制序列:一段特殊的序列,含有酵母菌中DNA进行双向复制所必须的信号。
22. 多克隆位点:含有紧密排列的多个限制性内切酶识别位点的一段DNA片段。
23、分子杂交:是指在分子克隆中的一类核酸和蛋白质分析方法,用于检测混合样品中特定核酸分子或蛋白质分子是否存在及其分子量大小。
24、菌落原位杂交:是将菌落或噬菌斑转到固相膜上,原位裂解细胞后使核酸固定在膜上,然后与探针杂交。
用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射检测体系,在组织细胞间期染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。
26、真核细胞原位杂交:是一项组织化学与分子杂交相结合的技术,使探针与固定在载玻片上的细胞组织切片内的变性染色体杂交。
27、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH):对寡核苷酸探针做特殊的修饰和标记,后用原位杂交方法与靶染色体或DNA 上特定的序列结合,再通过与荧光素分子相偶联的单克隆抗体(单个细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体)来确定该DNA序列在染色体上的位置。
28、凝胶阻滞试验:(gel retardation assay):又叫DNA迁移率变动试验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA),是用于体外研究DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
26. 盒式诱变:就是用一段人工合成具有突变序列的DNA片段,取代野生型基因中的相应序列。
这就好象用各种不同的盒式磁带插入收录机中一样,故而称合成的片段为“盒”,这种诱变方式为盒式诱变。
27. 定点诱变(寡核苷酸介导;重叠延伸PCR、大引物PCR):(site-directed mutagenesis)是使已克隆基因或DNA片段中任何一个特定碱基发生取代、插入或缺失突变的过程。
27、体外随机诱变:指随机的在克隆化DNA中引入碱基置换突变。
28、探针:指用于检测特定基因或转录产物存在或表达的DNA、RNA或寡核苷酸序列,这些序列在使用之前需标记。
29、DNase I足迹试验:DNase I足迹试验是一种鉴别RNA聚合酶等蛋白质在DNA上结合位点的方法,它不仅能找到与特异性DNA结合的目标蛋白,而且能告知目标蛋白结合在哪些碱基部位。
30.衔接物:是指人工合成的由10~12nt组成的、具有一个或数个限制性内切核酸酸识别位点的平末端的双链寡核苷酸短片段。
此方法适用于没有衔接物限制性内切核酸酶酶切位点的外源DNA片段。
DNA接头(人工接头):是指人工合成的含有限制酶识别顺序的核苷酸片段。
人工合成的一类具有某种限制性内切酶粘性末端,另一头为平末端的双链寡核苷酸片段。
31.接头分子连接法(DNA接头连接法):将具有平末端的外源DNA片段与人工接头分子在T4 DNA连接酶的作用下连接起来;然后与具有同样粘性末端的载体DNA分子在T4 DNA连接酶作用下连接成重组体。
32. 转化(transformation):把重组质粒DNA导入受体细胞(大肠杆菌、酵母、动植物细胞等),使其遗传性状改变的过程。
转染(transfection):把重组的噬菌体或病毒导入受体细胞的过程。
相互关系:转化一词严格地说是指,感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程;而转染一词,则是专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。
但从本质上讲,两者并没有什么根本的差别。
无论转化还是转染,其关键的因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易地进入细胞内部。
33.转化子(transformant):经转化获得外源遗传物质/DNA的细胞,是向有功能缺陷的细胞补充相应功能。
34、感受态(competence):作为受体细胞的细菌经一定处理(如冰冷的CaCl2溶液)后处于易于接受外源DNA的状态。
35. “选择(selection)”,是指通过某种外来附加压力(或因素)的辨别作用,呈现具有重组DNA分子的特定克隆类型的一种方法。
“筛选(screening)”则是指通过某种特定的方法,从被分析的细胞群体或基因文库中,鉴定出真正具有所需要重组DNA分子的特定克隆的过程。
36. 启动子:是RNA聚合酶识别和结合的一段DNA序列,位于基因的上游。
是基因表达调控的重要顺式元件,具有以下特征:①序列特异性;②方向性;③位置特异性;④种属特异性37.增强子:是能够增强启动子转录活性的一段DNA序列,由多个元件组成,每一个元件可以与一种或多种转录调控因子结合。
38.沉默子(silencer):是参与基因表达负调控的一种元件(降低转录效率的一段DNA)39.绝缘子(insulator):既是基因表达的调控元件也是一种边界元件。
绝缘子本身对基因的表达既没有正效应,也没有负效应,其作用只是不让其他调控元件对基因的活化效应或失活效应发生作用。
40.衰减子(attenuator):衰减发生处的一种内部终止子序列。
衰减子结构本身不能实现衰减作用,必须借助核糖体与前导序列的结合来发挥其作用。
41.终止子:为转录提供终止信号的一段DNA序列,是基因表达的顺式负调控元件。
42. 目的基因:指那些已被或者准备要被分离、改造、扩增或表达的特定基因或DNA 片段。
融合基因:是指应用DNA体外重组技术构建的一类具有来自两个或两个以上的不同基因核苷酸系列的新型基因。
报告基因:是指编码产物能够被快速测定、常用于判断外源基因是否成功地导入受体细胞(器官或组织),是否表达的一类特殊用途的基因。
44、报告基因与选择基因的区别:选择基因往往要与外界存在的筛选压力如抗生素等相互作用,以筛选出被转化的细胞;而报告基因是提供一种快速测定外源基因是否成功导入的检测手段,它的应用不依赖于外界选择压力的存在。