基因操作技术分章节作业题
第14、21章 基因工程与分子生物学常用技术及其应用习题
第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用复习测试（一）名词解释1．DNA重组2．基因工程3．限制性核酸内切酶4．基因组DNA文库5．cDNA文库6．聚合酶链反应（PCR）7．载体8．转化9．感染10．核酸分子杂交11．Southern印迹杂交12．Northern印迹杂交13．斑点印迹14．原位杂交15．DNA芯片16．基因诊断17．基因治疗（二）选择题A型题：1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：A．在对称序列处切开DNAB．DNA两链的切点常不在同一位点C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点E．酶辨认的碱基一般为4~6个2．限制性核酸内切酶：A．可将单链DNA任意切断B．可将双链DNA序列特异切开C．可将两个DNA分子连接起来D．不受DNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得3．cDNA文库包括该种生物的：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因组C．结构基因与不表达的调控区D．内含子和调节区E．内含子和外显子4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A．从特定组织或细胞中提取mRNAB．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNAE．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：A．粘性末端B．RNA聚合酶附着点C．回文对称序列D．聚腺苷酸E．甲基化“帽”结构6．pUC系列是指：A．经人工改造的大肠杆菌质粒B．天然的大肠杆菌质粒C．天然的酵母质粒D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体E．经人工改造的酵母质粒7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A．质粒B．噬菌体C．逆转录病毒RNAD．结构基因E．乳糖操纵子8．转化常指:A．噬菌体感染B．基因的转位C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D．产生点突变E．产生移码突变9．基因工程的操作程序可简单地概括为:A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B．分、切、接、转、筛C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D．将载体和目的基因接合成重组体E．限制性核酸内切酶的应用10．用于基因治疗较为理想的载体是:A．质粒B．噬菌体C．经改造的逆转录病毒D．人类DNAE．酵母质粒11．常用质粒有以下特性：A．是线形双链DNAB．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C．含有抗生素抗性基因D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E．不随细菌繁殖而进行自我复制12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B．用其它限制性酶将其切出C．用S1核酸酶将其切出D．用DNA酶将切出E．用多种限制性内切酶将其切出13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是:A．反应体系内存在特异DNA片段B．反应体系内存在特异RNA片段C．反应体系内存在特异DNA引物D．反应体系内存在特异RNA引物E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A．大肠杆菌表达体系B．原核表达体系C．酵母表达体系D．昆虫表达体系E．哺乳类细胞表达体系15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生:A．3′-磷酸基末端和5′—羟基末端B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C．3′-磷酸基末端和5′—磷酸基末端D．5′—羟基末端和3′—羟基末端E．3′—羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A．小型环状双链DNA分子B．携带有某些抗生素抗性基因C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞D．具有自我复制功能E．获得目的基因17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：A．DNA的大量复制B．DNA的大量转录C．DNA的大量剪切D．RNA的大量剪切E．RNA的大量反转录18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：A．酶工程B．蛋白质工程C．细胞工程D．发酵工程E．分子克隆技术19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：A．限制性核酸内切酶B．DNA聚合酶C．DNA连接酶D．反转录酶E．DNA解链酶20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A．平端末端B．3′突出末端C．5′突出末端D．粘性末端E．缺口末端21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为： A．限制性核酸外切酶B．限制性核酸内切酶C．非限制性核酸外切酶D．非限制性核酸内切酶E．DNA内切酶22．cDNA是指：A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC．在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23．基因组代表一个细胞或生物体的：A．部分遗传信息B．整套遗传信息C．可转录基因D．非转录基因E．可表达基因24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：A．细菌染色体B．酵母染色体C．细菌染色体外D．酵母染色体外E．病毒DNA外25．就分子结构而论质粒是：A．环状双链DNA分子B．环状单链DNA分子C．环状双链RNA分子D．线状双链DNA分子E．线状单链DNA分子26．聚合酶链式反应可表示为：A．PECB．PERC．PDRD．BCRE．PCR27．在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是： A．化学合成法B．基因组文库法C．cDNA文库法D．PCRE．差异显示法28．重组DNA的基本构建过程是将：A．任意两段DNA接在一起B．外源DNA接入人体DNAC．外源基因插入宿主基因D．目的基因接入适当载体E．目的基因接入哺乳类DNA29．EcoRⅠ切割DNA双链产生:A．平端B．5′突出粘端C．3′突出粘端D．钝性末端E．配伍末端30．催化PCR的酶是：A．DNA连接酶B．反转录酶C．末端转移酶D．碱性磷酸酶E．TaqDNA聚合酶31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属： A．同聚物加尾连接B．人工接头连接C．平端连接D．粘性末端连接E．非粘性末端连接32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称:A．转化B．转染C．感染D．转导E．转位34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A．营养互补筛选B．抗药性筛选C．免疫化学筛选D．PCR筛选E．分子杂交筛选35．α互补筛选法属于：A．抗药性标志筛选B．酶联免疫筛选C．标志补救筛选D．原位杂交筛选E．免疫化学筛选36．下列常用于原核表达体系的是：A．酵母细胞B．昆虫细胞C．哺乳类细胞D．真菌E．大肠杆菌37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶38．在分子生物学领域分子克隆专指：A．细胞克隆B．RNA克隆C．DNA克隆D．抗体克隆E．mRNA克隆39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：A．正超螺旋结构B．负超螺旋结构C．α螺旋结构D．回文结构E．锌指结构40．在基因工程中通常所用的质粒是：A．细菌染色体DNAB．细菌染色体以外的DNAC．病毒染色体DNAD．病毒染色体以外DNAE．噬菌体DNA41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶: A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C．双链DNA中不需一条完整的单链D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E．切口存在相邻的5′—磷酸和3′—羟基末端，使其以磷酸二酯键连接43．末端转移酶是合成酶类:A．作用时不需模板B．是从小牛胸腺中分离C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上D．需要带有5′—端磷酸的末端的ssDNAE．需要有延伸5′—端磷酸的末端dsDNA44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：A．防止DNA的自身环化B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C．制备突出的3′—末端D．特异切除DNA或RNA的3′—末端羟基E．水解特异的核苷酸片段45．以下哪种酶作用时需要引物：A．限制性核酸内切酶B．末端转移酶C．反转录酶D．DNA连接酶E．碱性磷酸酶46．S1核酸酶的功能是:A．切割双链的DNAB．切割单链的RNAC．切割发夹环D．切割单链DNAE．以上有两项是正确的47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：A．限制性核酸内切酶切除B．用3′外切酶切除C．用S1核酸酶切除D．用5′外切酶切除E．碱性磷酸酶切除48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：A．限制酶是外切酶而不是内切酶B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端49．限制性核酸内切酶可以特异识别：A．双链DNA的特定碱基对B．双链DNA的特定碱基序列C．特定的三联码D．双链RNA的特定碱基序列E．双链RNA的特定碱基对50．DNA聚合酶的主要用途：A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds—DNA第二条链B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针 D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E．TaqDNA聚合酶用于PCR51．反转录酶:A．是依赖于DNA的RNA聚合酶B．用于真核DNA反转录生成mRNAC．用于RNA探针的制备D．用于RNA序列测定E．是依赖于RNA的DNA聚合酶52．基因工程中作为载体应具备以下特点:A．能在宿主细胞中复制繁殖B．容易进入宿主细胞C．具有多克隆位点D．容易从宿主细胞中分离出来E．以上均是53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：A．质粒B．粘粒C．酵母人工染色体D．λ噬菌体E．cDNA表达载体54．pUC是一种改造型质粒，含有：A．乳糖操纵子调节基因、启动子B．多克隆位点C．lacZ′基因D．氨苄青霉素抗性基因E．以上均有55．质粒具有以下特点：A．是位于细菌染色体外的RNAB．不能自主复制C．为单链环形DNAD．大小在2～300kb之间E．以上都不对56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环B．本身约4～6kb之间C．进入受体细胞后可进行复制D．可克隆DNA大片段E．以上都不是57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是:A．仅位于质粒载体中B．具有多种限制性内切酶识别的位点C．不同酶的识别序列可以重叠D．一般是人工合成后添加到载体中E．可位于不同载体中58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是： A．限制性内切酶图谱法B．PCRC．Northern印迹法D．Southern印迹法E．抗药性标记基因59．利用基因工程可以进行：A．建立染色体基因文库B．分析基因的结构与功能C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制D．疾病的诊断和基因治疗E．以上均可以60．Southern印迹的DNA探针杂交：A．只与序列完全相同的RNA片段B．可与任何含有相同序列的DNA片段C．可与任何含有互补序列的DNA片段D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E．只与含有互补序列的RNA片段61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤:A．用限制性核酸内切酶消化DNAB．DNA与载体连接C．用凝胶电泳分离DNA片段D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E．用一个标记的探针与膜杂交62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤:A．从细胞和组织中提取RNAB．用凝胶电泳分离RNAC．将RNA转移到支持物上D．与核酸探针进行杂交E．将RNA反转录合成DNA63．原位杂交具有以下特点：A．不需从组织或细胞中提取核酸B．对靶序列有很高的灵敏度C．可完整保护组织与细胞的形态D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E．以上均是64．下列哪项不是探针的特点：A．要加以标记B．应是双链DNAC．只与靶核酸序列杂交D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E．高灵敏度65．探针的种类包括：A．基因组DNA探针B．cDNA探针C．寡核苷酸探针D．RNA探针E．以上均是66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤: A．从基因组文库筛选得到特定基因B．克隆、扩增C．纯化D．连入表达载体E．切取插入片段67．RNA探针具有以下特点，但除外：A．采用反转录方法可以得到B．单链、杂交效率高C．杂交体系稳定D．不存在高度重复序列E．特异性高68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNAB．从相应组织细胞中分离特异的mRNAC．反转录合成cDNAD．与载体连接E．切割cDNA,分离纯化69．常用的标记物有，但除外：A．放射性核素B．生物素C．荧光素D．地高辛E．NTP70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有,但除外： A．32PB．35SC．3HD．125IE．14C71．放射性核素标记物具有,但除外:A．检测时间短B．灵敏度和特异性高C．可检出样品少于1000个分子的核酸量D．半衰期短，稳定性差E．污染环境72．非放射性核素标记物包括，但除外:A．生物素B．地高辛C．荧光素D．酶E．核酸73．非放射性核素标记物具有，但除外：A．灵敏度高于放射性核素B．稳定C．经济D．实验周期短E．安全、无污染74．PCR反应体系包括,但除外：A．基因组DNA（模板）B．引物C．dNTPD．TaqDNA聚合酶E．T4DNA连接酶75．PCR技术主要应用于：A．目的基因的克隆B．基因表达与调控C．DNA微量分析D．遗传病与传染性疾病的诊断E．以上均可以76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．反应体系一般选用50-100μlB．引物、TaqDNA聚合酶C．4种dNTP、模板DNAD．缓冲液E．以上均是77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：A．需将mRNA反转录生成cDNAB．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．以上均是78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：A．样品模板的拷贝数B．PCR扩增效率C．DNA酶种类及活性D．dNTP的大量消耗E．非特异性的竞争因素79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的:A．核糖体B．RNAC．抗体D．抗原E．以上都不是80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段,而Northern印迹则是: A．用RNA探针检测DNA片段B．用RNA探针检测RNA片段C．用DNA探针检测RNA片段D．用RNA探针检测蛋白片段E．用DNA探针检测蛋白片段81．用免疫化学筛选重组体的原理是:A．根据外源基因的表达B．根据载体基因的表达C．根据mRNA与DNA的杂交D．根据DNA与DNA的杂交E．根据RNA与RNA的杂交82．原位杂交包括:A．转膜杂交B．斑点杂交C．菌落杂交或噬菌斑杂交D．直接对染色体或组织的杂交E．以上均有83．外源性DNA进入菌体的方式是：A．转化B．转录C．翻译D．半保留复制E．以上都不是84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在： A．两种片段上都接上聚（dT）尾部B．一种片段接聚(dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部C．两种片段都接上聚（dA）尾部D．反应液中加以T4DNA连接酶E．有两项是对的85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：A．大肠细菌只能表达克隆的cDNAB．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列 C．缺乏翻译后加工机制D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E．以上都正确86．常用载体有：A．质粒B．噬菌体C．病毒DNAD．大肠杆菌基因组DNAE．有3项是正确的87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的:A．染色体DNAB．线粒体DNAC．总mRNAD．tRNAE．rRNA89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的:A．5ˊ端特定序列互补B．5ˊ端任意序列互补C．3ˊ端特定序列互补D．3ˊ端任意序列互补E．中间序列互补90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是： A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA反转录D．免疫学方法E．体外翻译91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：A．样品的准备与标记B．芯片的制备C．信号的检测D．数据分析处理E．杂交92．基因诊断常用的技术方法有:A．核酸分子杂交B．单链构象多态性分析C．DNA序列测定D．DNA芯片技术E．以上均是B型题：A．基因从原来位置转到基因组的另一位置B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变D．移码突变E．非移码突变1．感染是指:2．转化是指：3．转位是指:4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指:5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：A．抗药性选择B．分子杂交选择C．RNA转录D．免疫学方法E．体外翻译6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：A．限制性核酸内切酶B．DNA连接酶C．反转录酶D．TaqDNA聚合酶E．碱性磷酸酶9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是:10．用于聚合酶链式反应的是:11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是:12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：13．mRNA转录合成cDNA的酶是:A．支原体B．衣原体C．噬菌体D．细菌E．酵母14．常用作原核表达体系的是：15．常用作真核表达体系的是：A．基因组文库B．cDNA文库C．mRNA文库D．tRNA文库E．rRNA文库16．分离细胞染色体可制备:17．分离细胞总mRNA可制备：A．抗药性选择B．RNA反转录C．免疫化学方法D．体外翻译E．PCR18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是:A．RNA聚合酶B．末端转移酶C．碱性磷酸酶D．反转录酶E．核苷酸酶20．切除DNA末端磷酸基需要用：21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：22．合成cDNA需要用：A．同聚物加尾连接B．人工接头C．粘性末端连接D．缺口末端连接E．平端连接23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：A．将单链DNA任意切断B．将双链DNA序列特异切开C．将两个DNA分子连接起来D．将缺口末端连接E．切除DNA末端磷酸基团27．限制性内切酶的作用是:28．DNA连接酶作用是：29．碱性磷酸酶作用是：A．某些蛋白质的结构基因B．所有基因结构C．不表达的调控区D．内含子和调节区E．外显子和调节区30．cDNA文库包括：31．DNA文库包括：32．真核mRNA包括：A．DNA聚合酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．RNA连接酶E．限制性核酸内切酶33．切除特异DNA片段:34．连接两个DNA片段：35．大量扩增DNA片段：A．反转录酶B．多聚核苷酸激酶C．引物酶D．RNA聚合酶E．末端转移酶36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上:38．合成cDNA：(三）问答题1．简述基因工程的主要过程。
基因操作习题和答案
第一章一. 名词解释：1. Gene manipulation基因操作。
将在细胞外产生的核酸（物质）分子插入到病毒，质粒或其它载体系统中，再整合到特定的宿主中，从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。
2. Interrupted genes间断基因。
序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA 间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干区段。
我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。
3 .Promotor启动子。
DNA 分子可以与RNA 聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。
4. Subcloning亚克隆。
当初始克隆中的外源DNA 片段较长，含有许多目的基因以外的DNA 片段时，在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行，将目的基因所对应的一小段DNA 找出来，这个过程叫“亚克隆”。
二. 填空题1. 基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning），gene cloning 的基本要点有（），（）和（）。
参考答案：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择2. （）是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）。
参考答案：基因；不连续的；DNA；存在于染色体之外（如质粒，噬菌体等）3. 基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。
参考答案：表达；调控；检测；改造4. 启动子（Promotor）是指（）。
通常一个Gene 是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程中，Promoter还是（）的结合位点。
参考答案：基因转录过程中控制起始的部位；转录起始；RNA 聚合酶5. 原核生物的RNA polymerase 主要由两部分组成：（）和（），其中σ-因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。
基因操作复习题.docx
《基因操作技术》复习题一、名词解释1.基因/转录：2.PCR/cDNA：3.转化子/重组子：4.基因表达/多克隆位点：5.DNA重组/基因操作：6•延伸(PCR) /退火(PCR)：二、填空题1 •将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有_________ 和基因枪法。
2.将重组DNA分子导入植物受体细胞的常用方法有农杆菌介导法和__________ o3.真核生物一般以______ 做为起始密码子。
4.真核生物多肽链合成的第一个氨基酸一般为 _________ o5.切割和连接DNA分子所使用的酶分别是_______ 和_______ 。
6.运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ______ ,后者的形状成_____ o7. ______________________________ 核酸序列分析的方法，主要有和o8.将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和________ 序列上是相同的。
9.热激法把质粒转化到大肠杆菌中的热激条件是________ °C _______ mine10.T4DNA连接酶的酶连条件是 ________ °C过夜。
11. ____________________________ Fermentas快切酶酶切的条件是°C, 15分钟。
12.蓝白筛选时，________ 色菌落是阳性菌落，________ 色菌落是阴性菌落。
13.酶的用量一般是—u L/U,甘油不能超过反应体系的________ %三、单选题1 •下列不属于基因运载体所必须具有的条件是()A.具有某些标志基因B.具有环状的DNA分子C.能够在宿主细胞内复制D.具有多种限制性内切酶切点2.基因治疗是指( )A.对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的B.把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中表达，达到治疗疾病的目的C.运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常D.运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的3.下列关于基因工程成果的概述，不正确的是（）A.在医药卫生方面，主要用于诊断治疗疾病B.在农业上主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗性的农作物C.在畜牧养殖业上培育出了体型巨大、品质优良的动物D.在环境保护方面主要用于环境监测和对污染环境的净化4.科学家将B ■干扰素基因进行定点突变导入人肠杆菌表达，使干扰素第十七位的半胱氨酸，改变成丝氨酸，结果大大提高了B ■干扰素的抗病毒活性，并且提高了储存稳定性。
第二章基因工程习题答案
第⼆章基因⼯程习题答案基因⼯程课程习题选择题001 基因⼯程操作的三⼤基本元件是【Ａ】I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体ＡI + II + IIIＢI + III + IVＣII + III + IVＤII + IV + VＥIII + IV + V002 根据当今⽣命科学理论，基因⼯程的⽤途是【E】I 分离纯化基因 II ⼤量⽣产⽣物分⼦ III 构建新型物种 IV 提⾼基因重组效率Ａ I + II + III Ｂ I + II + IVＣ I + III + IVＤ II + III + IVＥ I + II + III + IV003 根据基因⼯程的定义，下列各名词中不能替代基因⼯程的是【A】Ａ基因诱变Ｂ分⼦克隆Ｃ DNA重组Ｄ遗传⼯程Ｅ基因⽆性繁殖004 基因⼯程的单元操作顺序是【B】Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检005 下列有关基因的叙述，错误的是【A】Ａ蛋⽩质是基因表达的唯⼀产物Ｂ基因是 DNA 链上具有编码功能的⽚段Ｃ基因也可以是 RNAＤ基因突变不⼀定导致其表达产物改变结构Ｅ基因具有⽅向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产⽣的，其⽣理意义是【D】Ａ修复⾃⾝的遗传缺陷Ｂ促进⾃⾝的基因重组Ｃ强化⾃⾝的核酸代谢Ｄ提⾼⾃⾝的防御能⼒Ｅ补充⾃⾝的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】ＡBacillus amyloliquefaciensＢEscherichia coliＣHaemophilus influenzaeＤProvidencia stuartiiＥStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸⼆酯键将两段 DNA ⽚段连接在⼀起，其底物的关键基团是【D】Ａ 2' -OH 和 5' -PＢ 2' -OH 和 3' -PＣ 3' -OH 和 2' -PＤ 3' -OH 和 5' -PＥ 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA ⽤ M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA ⽚段中，能直接与载体拼接的是【D】M NＡ A/AGCTT T/TCGAAＢ C/CATGG ACATG/TＣ CCC/GGG G/GGCCCＤ G/GATCC A/GATCTＥ GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分⼦⽣物学的叙述，错误的是【B】Ａ质粒是共价环状的双链 DNA 分⼦Ｂ天然质粒⼀般不含有限制性内切酶的识别序列Ｃ质粒在宿主细胞内能独⽴于染⾊体 DNA ⾃主复制Ｄ松弛复制型的质粒可⽤氯霉素扩增Ｅ质粒并⾮其宿主细胞⽣长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】Ａ穿梭质粒Ｂ表达质粒Ｃ探针质粒Ｄ整合质粒Ｅ多拷贝质粒012 下列各常⽤载体的装载量排列顺序，正确的是【A】Ａ Cosmid > λ-DNA > PlasmidＢλ-DNA > Cosmid > PlasmidＣ Plasmid >λ-DNA > CosmidＤ Cosmid > Plasmid >λ-DNAＥλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 ⽬前在⾼等动物基因⼯程中⼴泛使⽤的载体是【C】Ａ质粒 DNAＢ噬菌体 DNAＣ病毒 DNAＤ线粒体 DNAＥ叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选⽅法是在筛选培养基中加⼊【D】Ａ半乳糖Ｂ葡萄糖Ｃ蔗糖Ｄ5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷（X-gal ）Ｅ异丙基巯基- b - 半乳糖苷（IPTG ）015质粒是基因⼯程中最常⽤的运载体，它的主要特点是【C】①能⾃主复制②不能⾃主复制③结构很⼩④蛋⽩质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦016 双脱氧末端终⽌法测定DNA 序列是基于【A】ＡDNA 的聚合反应ＢDNA 的连接反应ＣDNA 的降解反应Ｄ特殊的DNA 连接酶Ｅ聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种⽅法中，能有效区分重组⼦与⾮重组⼦的是【E】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选ＢI + IIＣI + IIIＤII + IIIＥI + II + III018鸟枪法克隆⽬的基因的战略适⽤于【A】Ａ原核细菌Ｂ酵母菌Ｃ丝状真菌Ｄ植物Ｅ⼈类019 cDNA 第⼀链合成所需的引物是【D】ＡPoly AＢPoly CＣPoly GＤPoly TＥ发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的⼴泛运⽤成为可能，这是因为【D】ＡTaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物ＢTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物ＣTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性ＤTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ＥTaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进⾏021 为了利⽤PCR 技术扩增下列染⾊体DNA ⽚段上的虚线部分，应选⽤的引物顺序是【D】ＡI + IIＢI + IIIＣI + IVＤII + IIIＥII + IV022 构建基因⽂库⼀般使⽤的载体是【E】I 质粒IIλ-DNA III CosmidＡIＢIIＣIIIＤII + IIIＥI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】Ａ密码⼦Ｂ复制⼦Ｃ启动⼦Ｄ内含⼦Ｅ外显⼦024 启动⼦的特征之⼀是【B】ＡGC 富积区ＢTATA BoxＣ转录起始位点Ｄ长度平均1 kbＥ含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】Ａ阻遏蛋⽩Ｂ启动⼦Ｃ操作⼦Ｄ终⽌⼦Ｅ增强⼦026包涵体是⼀种【E】Ａ受体细胞中难溶于⽔的蛋⽩颗粒Ｂ⼤肠杆菌的亚细胞结构Ｃ噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒Ｄ⽤于转化动物细胞的脂质体Ｅ外源基因表达产物的混合物027 外源基因在⼤肠杆菌中以融合蛋⽩的形式表达的优点是【Ｅ】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋⽩能抗蛋⽩酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离ＡIII ＢI + IIＣI + IIIＤII + IIIＥI + II + III028 第⼆代基因⼯程是指【C】Ａ途径⼯程Ｂ代谢⼯程Ｃ蛋⽩质⼯程ＤRNA 基因⼯程Ｅ细胞器基因⼯程029 基因⼯程菌中重组质粒的丢失机制是【Ｃ】Ａ重组质粒渗透⾄细胞外Ｂ重组质粒被细胞内核酸酶降解Ｃ重组质粒在细胞分裂时不均匀分配Ｄ重组质粒杀死受体细胞Ｅ重组质粒刺激受体细胞提⾼其通透性030利⽤⽑细管作⽤原理，将凝胶电泳分离后的DNA⽚段转移⾄硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进⾏分析的技术是【Ｄ】ＡWestern 印迹转移技术ＢNorthern 印迹转移技术Ｃ基因的表现型分析法ＤSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中．mRNA必需⾸先与核糖体相结合才能进⾏蛋⽩质合成。
基因操作原理_南昌大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
基因操作原理_南昌大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.人工导入基因和正常染色体基因间的同源重组，可以发生基因置换参考答案:正确2.1953年Watson和Crick提出（）参考答案:多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋3.DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散可能因为酶失活参考答案:正确4.松弛型质粒（）参考答案:上述A、B两项正确5.粘粒是一种人工建造的载体，下列哪项是错误的（）参考答案:进入受体细胞后，可引起溶原化反应6.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（）不太恰当参考答案:这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶7.端粒酶的性质是一种DNA外切酶参考答案:错误8.限制性内切核酸酶可以特异性地识别双链DNA的特定碱基序列参考答案:正确9.DNA的变性（）参考答案:包括双螺旋的解链_是可逆的_包括氢键的断裂10.在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（）参考答案:基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋_仅仅当两配对区段中送油的碱基均互补时才会发生11.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制酶量最好参考答案:正确12.下列关于细菌人工染色体BAC的特征描述，除了（）以外都是正确的。
参考答案:BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝13.用下列方法进行重组体的筛选，只有（）说明外源基因进行了表达参考答案:Western 印迹14.下列哪一个不是Southern印迹的步骤？参考答案:DNA与载体的连接15.在利用lacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是参考答案:诱导宿主的α肽的合成16.切口平移是指在（）的作用下，使（）带上放射性标记参考答案:DNA聚合酶I，DNA17.用免疫化学法筛选重组体的原理是（）参考答案:根据外源基因的表达18.如何获取与疾病相关的基因功能信息？（）参考答案:可通过GenBank上的信息，比较正常和异常基因的序列19.如果在人的基因组中新发现一个与先前在酵母中发现的基因具有序列同源性，说明（）参考答案:可推测该基因编码的蛋白质与酵母中表达的同类基因具有类似的功能20.确定人类疾病的分子基础的最重要步骤是（）参考答案:将与疾病相关基因克隆并测序21.下列关于粘粒载体的描述，不正确的是（）参考答案:可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库22.以λ噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。
第14、21章 基因工程与分子生物学常用技术及其应用习题
第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用复习测试（一)名词解释１.DNA重组2.基因工程3.限制性核酸内切酶４．基因组ＤＮA文库5.ｃDＮA文库6.聚合酶链反应（ＰCＲ）７。
载体8。
转化9．感染10。
核酸分子杂交1１。
Ｓouthern印迹杂交１2.Nｏrthern印迹杂交13。
斑点印迹1４.原位杂交15。
DNA芯片1６。
基因诊断１7.基因治疗(二)选择题A型题:1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：Ａ。
在对称序列处切开ＤNAB.ＤＮＡ两链得切点常不在同一位点Ｃ。
酶切后产生得DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链得切点常在同一位点E。
酶辨认得碱基一般为4~６个2。
限制性核酸内切酶：A。
可将单链ＤNA任意切断B．可将双链ＤNA序列特异切开Ｃ。
可将两个DＮA分子连接起来D．不受ＤNA甲基化影响E．由噬菌体提取而得３。
ｃDＮA文库包括该种生物得:Ａ．某些蛋白质得结构基因Ｂ。
所有基因组C。
结构基因与不表达得调控区D．内含子与调节区E。
内含子与外显子4。
下列关于建立cDＮA文库得叙述哪项就是错误得:Ａ。
从特定组织或细胞中提取mＲNAB。
将特定细胞得DNＡ用限制性核酸内切酶切割后,克隆到噬菌体或质粒中C.用逆转录酶合成mRNA得对应单股ＤＮAD。
用DＮA聚合酶,以单股DNA为模板合成双链DNAＥ。
加S－腺苷甲硫氨酸(SＡM),以使新生得DNA双链甲基化5。
限制性核酸内切酶得通常识别序列就是：A。
粘性末端B。
ＲＮＡ聚合酶附着点C.回文对称序列Ｄ。
聚腺苷酸E。
甲基化“帽＂结构6。
pUC系列就是指：A。
经人工改造得大肠杆菌质粒B.天然得大肠杆菌质粒Ｃ．天然得酵母质粒D．经人工改造得大肠杆菌噬菌体E．经人工改造得酵母质粒7。
用于转染哺乳类细胞得常用载体就是：A.质粒B。
噬菌体Ｃ。
逆转录病毒ＲＮAD。
结构基因Ｅ。
乳糖操纵子8.转化常指:A.噬菌体感染Ｂ。
基因得转位C.摄取外来DＮＡ,引起细胞生物学类型得改变D。
基因操作原理题库
基因操作原理题库2008版名词解释：1.亚基因组文库：用基因组DNA的特定部分所构建的基因文库，可用质粒DNA，线粒体DNA，限制性DNA片段来构建。
可通过Southern杂交，用探针找出目标基因所在的限制性片段的大小，然后用相应大小的限制性DNA 片段构建出基因文库。
2.反向PCR：反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段。
实验时选择已知序列内部没有切点的限制性内切酶对该段DNA进行酶切，然后用连接酶使带有粘性末端的靶序列环化连接，再用一对反向的引物进行PCR，其扩增产物将含有两引物外未知序列，从而对未知序进行分析研究。
3.系统缺失：系统缺失就是在不同的DNA位点上所产生的一系列缺失突变。
4.星星活性：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称星性活性。
5.体外分子进化：是指不需事先了解酶分子的空间结构和催化机制，人为地创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，在体外对酶基因进行改造，并定向筛选、获得具有某些预期特征的进化酶。
6.ISM(iterative saturation mutagenesis)：即反复饱和突变，是在已知蛋白质结构前提下，合理选择酶分子某一位点的一个、两个或三个氨基酸进行反复饱和突变，然后筛选酶活性提高的突变株。
7.质粒拯救：一种用来帮助枯草芽孢杆菌和其他革兰氏阳性菌摄入外来质粒的技术。
由目的DNA和载体组成的外来质粒进入宿主后会被宿主里的酶系切成线状，除非它与宿主里的同源质粒重组，否则就会被破坏。
同源质粒和外源质粒各有不同的抗生素抗性基因，最后筛选双抗菌株就可保证获得所要的DNA。
8.同裂酶：识别相同序列的不同的限制性内切酶，但它们的切割位点可能不同。
9.定点饱和诱变：对基因的某一小区域内碱基进行多种形式的置换（在关键位置引入不同的氨基酸探寻何种替换可以获得最大活性）。
10.噬菌体表面展示(phage display techniques, PDT)：是以改造的噬菌体为载体，把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质区，使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面，进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体，最终获得具有特异结合性质的多肽/蛋白质，由于外源蛋白或多肽的基因型和表型统一在同一噬菌体颗粒内，因此，通过表型筛选就可以获得它的编码基因。
基因工程的基本操作程序习题
基因工程的基本操作程序习题一、选择题（每小题3分，共39分）1。
下列关于基因工程的叙述，错误的是( )A．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达2。
下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是(）。
A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNAD．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取3.如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SmaⅠ、Eco RⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
下列说法错误的是（)。
A．图示过程是基因工程的核心步骤B．表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠC．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D．除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构4。
下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（）A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达5．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是(）A．①②③④B．①②④③C．①④②③D．①④③②6．下列关于基因工程的叙述，不正确的是（多选）(）A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B．细菌质粒是基因工程常用的运载体C．通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNA D．为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体7．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。
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项目1
一、名词解释
基因、操纵子、外显子、内含子、启动子、增强子、终止子、SD序列、半保留复制、复制、转录、翻译、遗传密码
二、问答题
1.简述核酸的定义、分类、组成、结构。
2.核酸有哪些重要的理化性质？这些性质在基因操作中有什么作用？
3.比较病毒基因组、原核生物基因组、真核生物基因组的特点。
4.简述DNA复制、RNA转录以及蛋白质翻译的过程及其参与的酶和蛋白因子的作用。
5.以大肠杆菌乳糖操纵子为例说明原核生物基因表达调控的特点。
项目2
一、名词解释
基因工程、基因操作技术、基因克隆、基因文库
二、问答题
1.基因操作的基本步骤是怎样的？每一步骤各需要哪些物质参与？
2.目的基因克隆的方法有哪些？
项目3
一、名词解释
质粒、电泳
二、问答题
1.简述提取核酸的基本步骤。
2.简述提取质粒DNA的经典方法的步骤及原理。
3.简述提取基因组DNA的经典方法的步骤及原理。
4.结合实验比较经典碱裂解法与试剂盒法提取质粒DNA的差异。
5.结合实训简述试剂盒法所加试剂的作用？
6.简述测定核酸浓度和纯度的方法原理及步骤。
7．简述琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理、操作步骤、影响因素
8.结合DNA琼脂糖凝胶电泳实训简述所用试剂的作用。
9.简述SDS-PAGE电泳分离蛋白质的原理及操作步骤
项目4
一、名词解释
PCR、变性、变性温度、退火、退火温度、延伸、延伸温度、载体、质粒载体、λ噬菌体载体、病毒载体、克隆载体、表达载体、多克隆位点（MCS）限制性内切酶、回文结构
二、问答题
1.简述PCR反应的基本原理
2.简述PCR反应体系的组成和体系中各成分的作用
3.简述PCR的标准反应过程设定那些参数？其中那个参数最为重要，需要在实际工作中优化。
4.简述PCR引物设计的原则。
5. 简述载体的概念、种类。
6.简述作为载体应具备的条件。
7.简述表达载体应该具备的条件
8.简述 噬菌体载体的特点及其类型
9.以PBR322、PUC等载体为例，指出载体上应包括那些结构，各有何作用？
10.比较克隆载体与表达载体的异同。
12.现在有一质粒载体大小为4200bp，在560处、1800处有两个EcoR I酶切位点，在2300处有1个BamH I酶切位点，在3100处有一个Hind III酶切位点。
试问，用各个酶进行分别进行单酶切时，各会得到几条片段，大小分别为多少？若两两酶进行双酶切时，又分别会得到几条片段，大小分别为多少？
项目5
一、名词解释
黏性末端、平末端、转化、转导、转染、重组子、感受态细胞、宿主细胞
二、问答题
1.简述连接酶的概念和常用类型
2.简述连接反应的影响因素
3.简述DNA重组技术的基本步骤
4.基因转移的方法主要有哪些？
5.结合实训简述氯化钙转化法的操作步骤和注意事项有哪些？
6.简述筛选重组子的方法有哪些？举例说明抗药性筛选、营养缺陷型筛选、插入失活筛选、蓝白斑的筛选的原理。
项目6
一、名词解释
诱导表达、诱导剂、包涵体
二、问答题
1.原核表达系统与真核表达系统各有何优缺点？
2.结合发酵课或课外资料举例说明大肠杆菌、酵母等表达系统常用的诱导表达方法及原理。