人乳腺癌细胞;MCF7贴壁培养
人骨髓间充质干细胞促进乳腺癌细胞系MCF7上皮间质转化
人骨髓间充质干细胞促进乳腺癌细胞系MCF7上皮间质转化许峰;金晓霞;施民新【摘要】目的探讨在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)与乳腺癌细胞系MCF-7共培养后,MCF-7细胞上皮间质转化(MET)能力是否受到影响,并检测共培养条件下上皮间质转化是否是通过旁分泌因素影响MCF-7细胞的增殖及迁移能力的.方法体外成功分离hBMSCs,利用Transwell小室共培养hBMSCs与乳腺癌细胞系MCF-7,光镜观察MCF-7细胞的形态结构,是否发生上皮间质转化的特征性改变.利用实时定量PCR、Western blot、免疫荧光检测上皮间质转化标志蛋白E-cadherin、vimentin、α-SMA及β-catenin的表达.收集共培养体系中的条件培养液,作用MCF-7细胞,Western blot鉴定MCF-7细胞上皮间质转化的分子标志物的水平;CCK8法检测MCF-7细胞的增殖活力;流式细胞计量术检测细胞增殖周期的变化;Transwell小室法检测MCF-7细胞侵袭及转移能力.结果与对照组相比,与hBMSCs共培养之后的MCF-7细胞表现出明显增强的上皮间质转化能力(P<0.05).培养体系中的条件培养液刺激MCF-7细胞,其上皮间质转化特征及增殖和迁移能力增强(P<0.01).结论人骨髓间充质干细胞可诱导乳腺癌细胞系发生上皮间质转化.骨髓间充质干细胞与乳腺癌细胞系可以通过旁分泌信号促进乳腺癌上皮间质转化,进一步增强其增殖及转移能力.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2018(038)009【总页数】7页(P1244-1250)【关键词】人骨髓间充质干细胞;乳腺癌;上皮间质转化;旁分泌机制【作者】许峰;金晓霞;施民新【作者单位】南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院胸外科,江苏南通226361;南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院病理科,江苏南通226361;南通大学附属肿瘤医院南通市肿瘤医院胸外科,江苏南通226361【正文语种】中文【中图分类】R394.2中国乳腺癌的发病率和致死率正逐年增加，是女性最常罹患的恶性肿瘤，癌细胞发生侵袭与转移影响是乳腺癌患者生存期的根本原因之一[1]。
乳腺癌细胞株整理(二)2024
乳腺癌细胞株整理（二）引言：乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，也是世界范围内死亡率最高的癌症之一。
研究乳腺癌细胞株对于深入了解乳腺癌的发生机制、预防和治疗具有重要意义。
在之前的文档《乳腺癌细胞株整理（一）》中，我们介绍了一部分常用的乳腺癌细胞株。
而本文将继续介绍一些其他有代表性的乳腺癌细胞株并对其特点进行概述。
正文：1. 非侵袭性乳腺癌细胞株：- MCF-7细胞株：MCF-7细胞株是一种常用的非侵袭性乳腺癌细胞系，其来源于人类乳腺癌的原发灶。
这种细胞株生长速度较慢，呈悬浮状态，对雌激素敏感，可用于乳腺癌治疗药物的筛选和雌激素受体相关研究。
- T47D细胞株：T47D细胞株也是一种常用的非侵袭性乳腺癌细胞系，它是从人类乳腺癌的转移灶中建立的。
这种细胞株对雌激素敏感，并且表达雌激素受体。
T47D细胞株可用于研究乳腺癌细胞的增殖、分化以及基因表达调控等。
2. 侵袭性乳腺癌细胞株：- MDA-MB-231细胞株：MDA-MB-231细胞株是一种高度侵袭性的乳腺癌细胞系，可模拟乳腺癌的转移和侵袭过程。
这种细胞株生长迅速，可以形成肿瘤，在体内可产生肺和骨转移。
MDA-MB-231细胞株广泛应用于研究乳腺癌的转移机制、肿瘤微环境以及疗效评估。
- BT-474细胞株：BT-474细胞株是一种来源于人类乳腺癌的转移灶中的细胞株。
这种细胞株表达人类表皮生长因子受体2（HER2）的过度表达。
BT-474细胞株对药物的敏感性较高，可用于研究HER2信号通路的调控及其在乳腺癌中的作用。
3. 耐药性乳腺癌细胞株：- MCF-7/ADR细胞株：MCF-7/ADR细胞株是已知的耐药性乳腺癌细胞株之一。
这种细胞株对化疗药物多药耐药性发生，可用于研究药物耐药机制以及开发新的治疗策略。
- MCF-7/TAM细胞株：MCF-7/TAM细胞株是一种对于抗雌激素药物铁曲红素（TAM）耐药的细胞系。
该细胞株经长期的体内暴露于TAM药物而产生耐药性，可用于研究抗雌激素治疗耐药机制。
布洛芬对人乳腺癌细胞系MCF-的作用及其机制的实验研究
结论：布洛芬可能通过抑制MCF-7细胞的生长和诱导细胞凋亡来发挥其抗肿瘤作用
02
实验方法
细胞培养
细胞系：MCF-7
培养条件：37℃，5% CO2
传代：每2-3天传代一次
培养基：DMEM
细胞状态：细胞形态良好，生长旺盛
细胞鉴定：通过免疫荧光染色进行鉴定
实验结果：布洛芬对MCF-7细胞基因表达有显著影响
具体影响：上调或下调某些基因的表达，如细胞周期相关基因、凋亡相关基因等
机制探讨：布洛芬可能通过调节细胞周期和凋亡相关基因的表达，影响MCF-7细胞的生长和增殖。
04
实验结论
布洛芬对人乳腺癌细胞系MCF-7具有抑制作用
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布洛芬对人乳腺癌细胞系MCF-7的作用及其机制的实验研究
/目录
目录
02
实验方法
01
实验目的
03
实验结果
04
实验结论
01
实验目的
研究布洛芬对人乳腺癌细胞系MCF-7的作用
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实验设计：使用布洛芬处理MCF-7细胞，观察细胞生长、凋亡和细胞周期变化
实验结果：布洛芬处理后，MCF-7细胞生长受到抑制
实验方法：使用布洛芬处理MCF-7细胞，观察细胞生长情况
机制研究：布洛芬可能通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡等方式发挥作用
临床意义：布洛芬可能作为乳腺癌治疗的辅助药物，具有潜在的临床应用价值
布洛芬通过诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用
MCF7
CANCER RESEARCH 61, 348-354, January 1, 2001
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 273, No. 16, Issue of April 17, pp. 9357-9360, 1998
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 276, No. 4, Issue of January 26, pp. 2935-2942, 2001
生长特性
粘附
文献评价
MCF7细胞系表现出分化的乳腺上皮细胞的一些特征，包括通过胞浆雌激素受体呈递雌二醇和形成dome等。MCF7细胞系包含Tx-4癌基因。肿瘤坏死因子α（TNFα）抑制MCF7细胞系的生长。抗雌激素处理可以调节IGFBP的分泌；MCF7细胞系caspase3基因的第3外显子有47bp缺失，导致在成熟mRNA剪接过程中整个第3外显子缺失；第3外显子含有125bp，读码框架的改变使得蛋白质翻译过程提前终止，因此MCF7细胞系不能检测到caspase3蛋白的表达；Caspase3的缺失使得MCF7细胞对各种化疗药物诱导的凋亡十分不敏感，重建caspase3可以增强MCF7细胞对化疗药物的敏感性
caspase3的缺失使得mcf7胞对各种化疗药物诱导的凋亡十分不敏感重建caspase3可以增强mcf7细胞对化疗药物的敏感性传代吸去培养基用025胰酶003edta溶液漂洗一遍
细胞名称
MCF7
种属
人
组织来源乳腺Leabharlann 癌形态特点上皮细胞
致瘤性
+
产物或抗原
产生胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）BP-2，BP-4，BP-5；血型抗原O，Rh+；
《红花多糖抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对其转移能力的影响》
《红花多糖抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对其转移能力的影响》一、引言乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其发生和发展与多种因素有关。
目前，对于乳腺癌的治疗主要依赖于手术切除、化疗和放疗等手段，但治疗效果并不理想，且易发生复发和转移。
因此，寻找有效的抗乳腺癌药物成为当前研究的热点。
红花多糖作为一种天然药物，具有多种生物活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗氧化等作用。
本研究旨在探讨红花多糖对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及转移能力的影响，为红花多糖在乳腺癌治疗中的应用提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料红花多糖购自某某生物科技有限公司；人乳腺癌细胞MCF-7购自某某细胞库；实验所用试剂和耗材均为进口或国产分析纯。
2. 方法（1）细胞培养：MCF-7细胞在含有10%胎牛血清的DMEM 培养基中培养，置于37℃、5%CO2的培养箱中。
（2）药物处理：将红花多糖以不同浓度梯度处理MCF-7细胞，分别设置对照组和实验组。
（3）细胞增殖检测：采用MTT法检测红花多糖对MCF-7细胞增殖的影响。
（4）细胞迁移和侵袭实验：通过划痕实验和Transwell小室实验检测红花多糖对MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响。
（5） Western blot检测：检测红花多糖处理后MCF-7细胞中相关蛋白的表达情况。
三、结果1. 红花多糖对MCF-7细胞增殖的抑制作用MTT法检测结果显示，随着红花多糖浓度的增加，MCF-7细胞的增殖率逐渐降低，表明红花多糖对MCF-7细胞的增殖具有抑制作用。
2. 红花多糖对MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响划痕实验和Transwell小室实验结果显示，红花多糖处理后，MCF-7细胞的迁移和侵袭能力明显降低，说明红花多糖对MCF-7细胞的转移能力具有抑制作用。
3. Western blot检测结果Western blot检测结果显示，红花多糖处理后，MCF-7细胞中与增殖和转移相关的蛋白表达水平发生变化，如MMP-2、MMP-9等表达降低，而p53等表达升高。
胰岛素通过Erk通路促进人乳腺癌细胞MCF—7增殖和迁移
胰岛素通过Erk通路促进人乳腺癌细胞MCF—7增殖和迁移目的观察胰岛素对人乳腺癌细胞MCF-7中Erk信号通路的影响及其对MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的影响。
方法分别采用0、50、100和200nM不同剂量的胰岛素处理MCF7细胞0、24、48和72h，采用Western blot方法检测MCF-7细胞中Erk信号通路的磷酸化活化情况，采用MTT方法检测MCF-7细胞的增殖情况。
通过伤口愈合实验和Boyden小室检测200nM胰岛素处理72h对MCF-7细胞侵袭和迁移能力的影响。
采用Erk信号通路抑制剂预处理MCF-7细胞，观察Erk信号通路在胰岛素促MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭能力中的作用。
结果同0nM胰岛素处理组相比，不同剂量的胰岛素均可显著上调Erk的磷酸化水平，加强MCF-7细胞的增殖能力（P＜0.05），且这种作用具有计量依赖性。
同对照组相比，200nM胰岛素处理72h后，MCF-7细胞侵袭和迁移能力均显著增强（f=188.000、95.640，P＜0.05）。
采用Erk信號通路阻断剂U0126阻断MCF-7细胞中的Erk信号通路后，胰岛素促MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的能力显著降低（P＜0.05）。
结论胰岛素可通过激活MCF-7细胞中的Erk信号通路，增强肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
标签：胰岛素；乳腺癌；MCF-7；增殖；迁移[文献标识码]B胰岛素可与胰岛素样生长因子-1受体（insulin-like growth factor-1 receptor，IGF-1R）和胰岛素受体（insulin receptor，IR）及向下游传递活化信号，进而促进细胞的有丝分裂，胰岛素的这一作用促使研究者们猜想其与肿瘤的发生发展是密不可分的。
研究结果证实，高胰岛素血症、2型糖尿病以及肥胖等代谢相关性疾病可导致肿瘤的发病风险显著升高。
目前女性乳腺癌的发病率已成为女性恶性肿瘤中发病率最高的一种，而胰岛素作为一种生长因子，其在女性乳腺癌发病中的作用也得到相关文献的证实。
细胞转移机制实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本研究旨在探究细胞转移机制，以期为癌症转移的预防和治疗提供理论依据。
通过建立细胞转移模型，观察细胞在不同环境下的迁移和侵袭能力，分析细胞转移的相关分子机制。
二、实验材料1. 细胞：人乳腺癌细胞系MCF-7、人结直肠癌细胞系HCT-116、人肺腺癌细胞系A549、人黑色素瘤细胞系SK-MEL-2。
2. 试剂：细胞培养试剂、细胞迁移实验试剂、细胞侵袭实验试剂、实时荧光定量PCR试剂、蛋白质提取试剂、Western blot试剂等。
3. 仪器：细胞培养箱、显微镜、细胞培养板、酶标仪、凝胶成像系统、Western blot成像系统等。
三、实验方法1. 细胞培养：将人乳腺癌细胞系MCF-7、人结直肠癌细胞系HCT-116、人肺腺癌细胞系A549、人黑色素瘤细胞系SK-MEL-2接种于细胞培养瓶中，置于细胞培养箱中培养。
2. 细胞迁移实验：采用Transwell小室进行细胞迁移实验。
将细胞悬液加入Transwell小室的上室，下室加入含有血清的培养基，培养一段时间后，用棉签刮除未迁移的细胞，固定、染色、观察细胞迁移情况。
3. 细胞侵袭实验：采用Transwell小室进行细胞侵袭实验。
将细胞悬液加入Transwell小室的上室，下室加入含有基质胶的培养基，培养一段时间后，用棉签刮除未侵袭的细胞，固定、染色、观察细胞侵袭情况。
4. 实时荧光定量PCR：提取细胞总RNA，反转录成cDNA，进行实时荧光定量PCR，检测相关基因的表达水平。
5. 蛋白质提取与Western blot：提取细胞总蛋白，进行SDS-PAGE电泳，转膜，用一抗和二抗进行Western blot，检测相关蛋白的表达水平。
四、实验结果1. 细胞迁移实验：结果显示，与正常细胞相比，癌细胞在迁移实验中的迁移距离明显增加，说明癌细胞具有较强的迁移能力。
2. 细胞侵袭实验：结果显示，与正常细胞相比，癌细胞在侵袭实验中的侵袭能力明显增强，说明癌细胞具有较强的侵袭能力。
mcf7分子分型
mcf7分子分型
MCF7是一种乳腺癌细胞系，属于ER阳性乳腺癌。
MCF7细胞系是乳腺癌
细胞系中较为常见的一个，它是雌激素受体阳性（ER+）的细胞系，这意味着它对雌激素具有较高的亲和力和依赖性。
MCF7细胞系的分子分型有多种，常见的包括：
1. Luminal A型：这种类型的乳腺癌细胞通常表达高水平的ER和PR（孕
激素受体），但HER2基因扩增和蛋白表达较低。
这种类型的乳腺癌对激素治疗和内分泌治疗敏感，预后相对较好。
2. Luminal B型：这种类型的乳腺癌细胞也表达高水平的ER和PR，但HER2基因扩增和蛋白表达较高。
这种类型的乳腺癌对激素治疗和内分泌治疗有一定敏感性，但可能对化疗和靶向治疗更敏感。
3. HER2过表达型：这种类型的乳腺癌细胞HER2基因扩增和蛋白表达较高，ER和PR表达较低。
这种类型的乳腺癌对化疗、靶向治疗和曲妥珠单抗治疗敏感，但可能对激素治疗不敏感。
4. 三阴性乳腺癌：这种类型的乳腺癌细胞ER、PR和HER2基因表达均为阴性。
这种类型的乳腺癌对激素治疗、内分泌治疗和靶向治疗不敏感，通常需要采用化疗等治疗方案。
需要注意的是，MCF7细胞系的分子分型并不是绝对的，不同的实验条件和研究结果可能会有所不同。
因此，在实际的实验设计和研究中，需要根据具体情况进行分子分型分析和验证。
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北京索莱宝科技有限公司
人乳腺癌细胞；MCF7贴壁培养
细胞名称：人乳腺癌细胞；MCF7
形态特性：上皮细胞
生长特性：贴壁生长
培养条件：高糖DMEM，10%FBS
传代方法：1:3传代
冻存条件：细胞冻存液
特征特性：MCF-7细胞保留了多个分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物（domes）。
该细胞含有Tx-4癌基因。
肿瘤坏死因子α（TNF alpha）可以抑制MCF-7细胞的生长。
抗雌激素处理细胞能调变IGFBP’S的分泌。
细胞处理方法：
1.细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输，获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒，然后在超
净台中操作。
2.如细胞生长至70%-80%，将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用，保留5-8mL培养基在37℃、5%
的CO2的温箱中继续培养。
细胞培养至90%-100%后，按要求消化传代。
3.弃去培养基，用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次，加入适量胰蛋白酶消化（EDTA胰酶），待细胞
完全脱壁后加培养基吹打混匀，分瓶培养。
注意：
我们使用自产培养基及进口血清培养细胞，在您拿回细胞后，如想更换其它品牌培养基，请依照逐次替换的原则，先保留培养瓶中的培养基，多日多次代逐步更换，以减轻对细胞的刺激。
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