简介果蝇唾液腺染色体
果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验方法
把载玻片置于解剖镜下。载玻片上滴水一滴， 取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解 剖针，左手的解剖针压住幼虫后端１/３处， 固定幼虫。右手解剖针按住幼虫头部，用力向 右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾 腺是一对透明的棒状腺体
在载玻片上除去幼虫其他组织部分，还要把 唾腺周围的白色脂肪剥离干净，再滴上改良 苯酚品红染色。
4.横纹结构：每条染色体的染色线在不同的 区段螺旋化程度不一，出现一系列宽窄不 同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。
5.Puff结构：幼虫 的不同发育期，浓 缩的染色质纤维会 成群解旋、松开， 形成泡状松散结构， 这种泡状结构称 Puff结构，亦称染 色体的疏松。
三、实验用品
实验材料 果蝇的三龄幼虫 用品 解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、吸水纸等
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普通果蝇（2n=8）唾腺染色体的形态：各染色体 着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的 染色中心，第Ⅱ、Ⅲ对染色体呈Ｖ形（中着丝 粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第Ⅳ对染色 体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿 蜒伸展。
果蝇唾腺染色体的特点：
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大 得多，宽约5μm，长约400μm，相当于普通 染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色 体。
果蝇唾腺染色体的制 备与观察
一、实验目的
练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺 染色体标本的方法；������
了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾 腺染色体的形态特征，并根据唾腺染色体 上横纹的形态和排列，识别不同的染色体 识别染色体结构变异的细胞学表现。 练习绘制多线染色体图Βιβλιοθήκη 二、实验原理
遗传实验报告-果蝇唾腺染色体观察
【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾腺染色体
双手各持一枚解剖针，用左手解剖针压住幼虫中部，
用右手解剖针自幼虫口沟后切断头部，体内各器宫便从切 口处挤出，一对唾腺也随之而出。
唾液腺体是一对半透明棒状腺体。迅速剥离唾腺周围
的脂肪体，将唾腺Βιβλιοθήκη 留在载片中央。2. 解离：用吸水纸吸去生理盐水，然后加1滴Imol/L
HCl溶液于腺体上，作用1～2min。 3. 冲洗：用吸水纸吸去HCl ，滴加蒸馏水于腺体上进行 冲洗（两次）。 4. 染色：吸去蒸馏水，加1滴改良苯酚品红溶液，染色
3.谨防腺体干固，及时滴加HCl或染液；
4.掌握好染色时间。
30min以上。用镊子加盖玻片。
5.压片： 染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。 将片子放在实验 压片 台上，用大拇指用力压住，并横向
揉几次。 （注意不要使盖片移动，用力和揉动 是一个方
向，不能来回揉 ） 6. 观察： 镜检
注意事项
1. 尽可能完整剖取唾腺，小心拨除脂肪；
2.冲洗染色时防止腺体丢失；
3.横纹结构：染色体上有横纹结构，这些横 纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果 蝇等昆虫的种的特征；可用于基因定位
实验材料
– 材料：果蝇的三龄幼虫。 – 用品：解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载 玻片、盖玻片、吸水纸等。 – 药品：改良苯酚品红、 0.7％生理盐水、 1mol盐酸
实验方法
1. 将幼虫放在含有一滴生理盐水的洁净载玻片上。在解剖 镜下观察：幼虫头部有黑色的口沟，尾端有一对黄色的后 气门
果蝇唾腺染色体
生物技术——冯德
实验目的
1.练习取出果蝇幼虫唾腺组织 2.制作唾腺组织染色体标本 3.观察果蝇唾腺染色体的形态特征
实验原理
双翅类昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫期(三龄幼 虫)的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色 体（salivary chromosome） 由于在唾腺细胞中 8 条染色体之间以着丝粒 相互连结在一起形成染色盘或 异染中心和同源染 色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观 察到一个染色 较深的染色盘和以染色盘为中心向 外辐射出的 5 条染色体臂。
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果蝇唾腺染色体的观察
解剖
❖ 生理盐水于载波片 ❖ 选取三龄幼虫置于生理盐水上 ❖ 左手持解剖针固定幼虫（压住后端1/3处） ❖ 右手按住头部(小黑点) ❖ 用力向右拉，拉开幼虫身体 ❖ 分离得唾腺（棒状，且透明）
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺剥离示意图
头部
果蝇唾腺染色体的观察
作业及思考题
❖ 什么是染色中心？ ❖ 根据你所学的知识，联会应出现在什么类型
果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体的观察
实验步骤
❖ 解剖（生理盐水） ❖ 染色（15-20min） ❖ 压片 ❖ 镜检
注意事项
果蝇唾腺染色体的观察
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了，请
再剥离唾腺前吸走些，唾腺剥离后请勿吸水，以防将唾 腺一起吸走。 3. 清除脂肪组织时要量力而行。 4. 染色液勿过多，否则压片时唾腺易随染色液漂走。如染 色时间到后，染色液已干，应再少加些染色液，再盖上 盖波片，避免气泡产生。 5. 压片时要均匀用力，轻敲盖片。
如邓铁涛教授以此理论指导慢性肝 炎的治疗，创制了“慢肝六味饮” （四君子汤加川萆薢、黄皮叶）。
邓老还在此方基础上化裁出“软肝煎” 治疗肝硬化（上方去黄皮叶，加楮实子、 菟丝子、丹参、地鳖虫、鳖甲）。并强 调若苔腻者，即去鳖甲，以防其腻滞阻 碍脾胃之运化。体现了“治肝实脾”的
思想。
➢关于“虚实异治的原则”： 仍以肝为例，指出了肝虚证（主要
[精品课件]简介果蝇唾液 腺染色体
果蝇唾腺染色体的观察
主要内容
❖ 实验原理 ❖ 实验目的 ❖ 实验材料 ❖ 实验步骤 ❖ 作业及思考题
实验原理
果蝇唾腺染色体的观察
❖ 果蝇，双翅目，2n=8
果蝇唾腺染色体
实验目的：
1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染 色体的制片方法；
2. 观察果蝇唾腺染色体的结构特点；
3. 了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义。
实验原理：
双翅目昆虫的幼虫期都具有很大的唾腺细胞。 因为这些细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分 裂，停止在间期。但是染色质还是不断地复制，形 成约1000~4000拷贝的染色质丝，比普通的有丝分 裂中期的染色体大得多，称为多线染色体和巨大染 色体。
果 蝇 唾 腺 染 色 体 的 模 式 图
唾腺染色体的特征：染色体巨大；体细胞联会； 形成染色中心；具有深浅不同、疏密相间的横纹。
由于唾腺染色体的重要特征，其在遗传学上， 如染色体结构变异、染色体化学组成、基因差别表 达等方面都是重要的研究材料。
实验材料：
普通果蝇野生型的三龄幼虫活体。
实验用品：
压片
染色
实验报告：
1 绘出观察到的分散良好的唾腺染色体 的图像；
2 剥离唾腺的注意事项有 讨论：
① 果蝇唾腺染色体的特征；
② 查阅资料，了解唾腺染色体的遗传 学意义。
解剖针
解剖针
脂肪体 解剖镜下看到的剥离后的果蝇唾腺
3 染色：用改良苯酚品红染色10~20min。
4 压片：用铅笔轻轻敲盖片几下，然后用拇指 压片。
5 镜检：先在低倍镜下找到染色体分散良好的 图像，再在高倍镜下仔细观察唾腺染色体的特征。
将三龄幼虫 放在载玻片上
用生理盐水 剥离唾腺 清洗三龄幼虫
观察
用具：双筒解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、 载玻片、盖玻片、酒精灯、铅笔、吸水纸等。
药品：蒸馏水、生理盐水、45%醋酸、改良苯 酚品红染液等。
果蝇唾液腺染色体观察课件
实验应在恒温、恒湿条件下进行， 以保持果蝇健康并获得准确的观察 结果。
唾液腺染色体的特
03
点与观察
唾液腺染色体的形态特征
唾液腺染色体呈长带状，具有 明显的带纹和着丝粒。
染色体数目较少，通常为4条， 分别为X染色体、常染色体1、 常染色体2和常染色体3。
染色体上含有大量的重复序列 和基因，这些基因与果蝇的性 别、代谢和行为等密切相关。
的着色反应。
结果分析
染色体结构完整性
观察到的染色体形态完整，没有出现断裂或异常 结构，说明果蝇的体数目与果蝇的染色体数目相 符，表明实验中染色体的计数是准确的。
染色质活性分析
通过染色深浅程度，可以初步判断染色质活性， 为后续研究染色质功能提供依据。
结果讨论
实验方法优化
虽然本次实验取得了较为理想的结果，但仍可考虑采用更先进的 观察技术，如荧光原位杂交技术，以提高分辨率和准确性。
染色体功能研究
根据观察到的染色体形态和着色情况，可以进一步探讨染色体在果 蝇唾液腺中的功能和作用机制。
异常染色体的识别
通过比较正常和异常染色体的形态、数目和着色反应，有助于识别 和诊断染色体异常相关的遗传疾病。
果蝇具有复眼、触角和三 对足，与其他昆虫相似。
果蝇在遗传学研究中的应用
遗传学模型
果蝇作为遗传学研究的模 型生物，有助于揭示基因 与表型之间的关系。
基因定位
果蝇的染色体数目少，易 于进行基因定位和染色体 分析。
基因表达
果蝇唾液腺染色体的观察 有助于研究基因表达和调 控机制。
果蝇的唾液腺染色体
染色体特点
实际应用价值
遗传疾病诊断与治疗
通过研究染色体结构和功能，有助于深入了解遗传疾病的 发病机制，为遗传疾病的诊断和治疗提供理论依据和技术 支持。
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇三龄幼虫解剖图
Salivary gland：唾腺 Gonad: 性腺 Ganglion: 神经节 Trachea: 气管 Ovary
唾腺的位置及形态特征
（2）滴加一滴醋酸洋红，在显微镜下（4倍镜）去除唾腺周 围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体， 外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分， 并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
2、要辨别清楚哪些是唾腺细胞。 3、去除唾腺周围的其它组织部分。
[作业] ：
1、绘出所观察到的唾腺染色体简图。
2、果蝇唾腺染色体与其他染色体在形态结构上有什 么区别？
分离出来的果蝇唾腺
位置：在幼虫体前约1/3 处； 形状：形如一对香蕉，上 小上大。一边常附着带状 的不透明的脂肪。 颜色：半透明如玻璃，略 带白色，比周围组织透明； 细胞特征：唾腺上的细胞 较大，轮廓清晰，用低倍 镜即可清楚看到。
唾腺组织
不同人操作得到的唾腺组织可能不一样
放大的唾腺组织
放大的唾腺组织
黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是 从染色中心向四周放射状地伸出5 长1短共6条臂。果蝇染色体数为2n ＝8。其中1号染色体（X染色体） 为端着丝粒染色体，其着丝粒附着 地一端在染色中心上，另一端游离； 2号、3号染色体为中部着丝粒染色 体，每条呈“V“伸展两臂，4号染 色体很短小，呈点状附在染色中心 边缘。
特征 巨大； 体细胞配对，染色体只有半数（n）； 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互 相靠拢形成染色中心； 深浅不同、疏密个别的横纹。
banded chromosomes 1000x
染色质丝的不同部位螺旋化程度 不同，其中螺旋化程度较高的部位形 成染色粒，这些染色粒经多线染色体 的“放大”，形成染色较深的横纹。 横纹的相对大小和空间排列是恒定的， 可以作为天然的精确基因定位的“坐 标”。这些横纹的数目和位置一般是 恒定的，具有果蝇种的特征，染色体 的缺失、重复、倒位、易位等，都能 在唾腺染色体上辨别出来。
实验八 果蝇唾腺染色体
实验八果蝇唾腺染色体•练习取出果蝇幼虫唾腺的技术•练习制作唾腺染色体标本的方法•观察唾腺染色体的特征（一）概述双翅目昆虫幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5微米，长约400微米，相当于普通染色体100~150倍，因此又称为巨大染色体（二）形成原因：A、螺旋化程度不高B、果蝇幼虫的唾腺细胞在发育过程中细胞核内的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体DNA也不分开，形成多线染色体——多次分裂不分开C、同源染色体相互靠拢在一起，呈现一种体联会状态，使其比一般的体细胞染色体粗大体联会：果蝇唾腺细胞中，同源染色体配对，始终紧密靠近在一起呈联会状态。
（三）果蝇染色体组成：8条染色体之间以着丝粒相互连接在一起，形成染色体盘（或称为染色中心），向外辐射出5条长染色体和一条短染色体臂。
注意：为什么只能看到6条臂？A、果蝇的唾腺染色体共有4对，这4对染色体处于体细胞同源染色体配对状态（即体联会）。
B、其中第2对和第3对染色体为中部着丝粒染色体，所以他们以染色中心以“V”字形伸出4条臂；C、一对性染色体（XY、XX），XX染色体为顶端着丝粒染色体，呈杆状（雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色体中心，因此雄果蝇的X染色体比雌果蝇的细）；D、第4对染色体非常短小，也是顶端着丝粒染色体，所以这对染色体也重合在一起呈点状。
（四）果蝇唾腺染色体的特征：A、巨大B、体联会现象决定了染色体数目只有半数C、各个染色体的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心D、横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列（五）应用利用这些特征不仅可以鉴定不同的染色体，还可以结合遗传实验结果进行基因定位。
此外，由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。
实验材料•黑腹果蝇的三龄幼虫果蝇的生活史图1 果蝇的生活史1.卵2.一龄幼虫3. 二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫实验用具和药品•用具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸•药品：改良苯酚品红、生理盐水、1NHCl实验步骤：1、剥离唾腺：A、在干净载玻片上第一滴生理盐水B、取三龄幼虫放在其中（行动迟缓、肥大、爬上管壁即将化蛹的效果最佳）C、然后两手各握一枚解剖针，左手的解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫。
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色时间到后，染色液已干，应再少加些染色液，再盖上 盖波片，避免气泡产生。
5. 压片时要均匀用力，轻敲盖片。
果蝇唾腺染色体的观察
解剖
? 生理盐水于载波片 ? 选取三龄幼虫置于生理盐水上 ? 左手持解剖针固定幼虫（压住后端 1/3 处） ? 右手按住头部 (小黑点) ? 用力向右拉，拉开幼虫身体 ? 分离得唾腺（棒状，且透明）
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺剥离示意图
头部
果蝇唾腺染色体的观察
作业及思考题
? 什么是染色中心？ ? 根据你所学的知识，联会应出现在什么类型
的细胞中？ ? 绘制你所观察到的果蝇唾腺染色体图。
果蝇唾腺染色体的观察
示X-染色体分区、段、条
如染色体有缺失、重复、倒位、易位等， 很容易在唾腺染色体上识别出来。
实验目的
果蝇唾腺染色体的观察
? 观察果蝇唾腺染色体形态特征。 ? 掌握果蝇唾腺染色体的制片方法。
实验材料
? 果蝇三龄幼虫
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺染色体的观察
成蝇 蛹
三龄幼虫
果
蝇
果蝇唾腺染色体的观察
主要内容
? 实验原理 ? 实验目的 ? 实验材料 ? 实验步骤 ? 作业及思考题
果蝇唾腺染色体的观察
实验原理
? 果蝇，双翅目， 2n=8 ? 果蝇三龄幼虫的唾腺细胞
中，存在着 巨型/多线染色 体，比一般染色体大，上 面带有很多 横纹，易于观 察。
? 多线染色体 ：由体细 胞同源染色体配对， 经10-15次复制，每次 复制后不分开而并列 聚合在一起形成的。 粗约为其它体细胞染 2L 色体的 200倍，为多倍 体细胞。
卵
的
生
活
周
期
一龄幼虫
二龄幼虫
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺
果蝇唾腺染色体的观察
实验步骤
? 解剖（生理盐水） ? 染色（15-20min ） ? 压片 ? 镜检
注意事项
果蝇唾腺染色体的观察
1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。 2. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃。如水多了，请
再剥离唾腺前吸走些，唾腺剥离后请勿吸水，以防将唾 腺一起吸走。
果蝇唾腺染色体的观察
2R 4
3L 着丝粒
3R X
果蝇染色体模式图
2R 4
2L着丝X Nhomakorabea粒
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇染色体模式图
3L
2L
2R 3R
X 4
3R
3L 染色中心
实验原理
果蝇唾腺染色体的观察
? 染色中心 （chromocenter ）：四对多线染色体的 着丝粒区聚合成为一个，从此中心伸出 5个长臂和 １个短臂。
? 具有横纹： 多线染色体中平行排列的染色质在各 段凝缩紧密程度不同形成（ 85%呈带纹区［深 染］， 15%呈间带区［浅染］）。
果蝇唾腺染色体的观察
果蝇唾腺染色体显微照片
带纹 间带
果蝇唾腺染色体的观察
? 每一臂上所有的横纹的大小和位置是恒定的， 即具有种的特征。
? 整个唾腺染色体划分为 102区。 ? 6个段/区：A-F 。 ? 若干条横纹 /段：1、2、3… 。 ? 如3C7表示第三区 C段第7条横纹。