浙大微生物大实验报告
微生物检测的实训报告
一、实训目的通过本次微生物检测实训，使学生掌握微生物检测的基本原理、方法和技术，提高学生实际操作能力和分析问题的能力，培养严谨的工作态度和科学思维。
二、实训内容1. 微生物检测基本原理微生物检测是通过对微生物的形态、生理、生化特性等方面的分析，对微生物进行鉴定、分类、计数等。
微生物检测方法主要包括：显微镜观察、生化试验、分子生物学技术等。
2. 微生物检测基本操作（1）样品采集与处理：根据样品类型，选择合适的采样方法和设备。
对采集的样品进行适当的前处理，如过滤、离心、稀释等。
（2）显微镜观察：通过显微镜观察微生物的形态、大小、颜色等特征，进行初步鉴定。
（3）生化试验：通过微生物的代谢产物，如酶、色素、抗生素等，对微生物进行鉴定和分类。
（4）分子生物学技术：利用DNA或RNA分子序列分析，对微生物进行鉴定和分类。
3. 微生物检测结果分析根据检测结果，对微生物进行鉴定、分类、计数等，分析微生物的种类、数量、分布等。
三、实训过程1. 实训前准备（1）熟悉实训设备、仪器和试剂，了解其性能和操作方法。
（2）查阅相关文献，掌握微生物检测的基本原理和方法。
（3）分组讨论，明确各自职责和任务。
2. 实训操作（1）样品采集与处理：按照实训要求，采集不同类型的样品，并进行适当的前处理。
（2）显微镜观察：使用显微镜观察微生物的形态、大小、颜色等特征，记录观察结果。
（3）生化试验：按照实验步骤进行生化试验，观察微生物的代谢产物，记录实验结果。
（4）分子生物学技术：按照实验步骤进行分子生物学实验，分析微生物的DNA或RNA序列，记录实验结果。
3. 结果分析（1）根据显微镜观察结果，对微生物进行初步鉴定。
（2）根据生化试验结果，对微生物进行鉴定和分类。
（3）根据分子生物学实验结果，对微生物进行鉴定和分类。
（4）分析微生物的种类、数量、分布等，撰写实验报告。
四、实训总结1. 通过本次实训，掌握了微生物检测的基本原理、方法和技术。
微生物学实验报告
微生物学实验报告微生物学实验报告实验目的：观察和学习微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
实验原理：微生物是一类非常小型的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体和空气中。
微生物可以通过分裂、繁殖等方式进行增殖，并且受到温度、pH值、营养条件等环境因素的影响。
实验材料：培养皿、琼脂、试管、移液器、细菌液等。
实验步骤：1. 准备好所需的培养皿，将琼脂均匀地倒入各个培养皿中。
2. 将培养皿放入高压锅中进行高压灭菌处理，以杀死培养皿中的病原体。
3. 等待琼脂冷却固化后，将培养皿倒置放置。
4. 使用无菌手术针，从微生物液体中获取一定量的微生物液体。
5. 将微生物液体均匀地涂抹在琼脂培养皿上。
6. 使用无菌眼刷将一部分涂抹的微生物液体划线，以便观察微生物的生长情况。
7. 将培养皿放入恒温箱中进行培养，并设置不同的温度、pH 值、营养条件等。
8. 每隔一段时间，观察培养皿上微生物的生长情况，并记录下来。
实验结果和分析：根据观察和记录的结果，我们发现微生物在不同条件下的生长速度和繁殖能力是有差异的。
在适宜的温度、pH值和营养条件下，微生物的生长速度相对较快，生物量也相对较高。
而在不适宜的条件下，微生物的生长速度会减慢或停止，甚至会死亡。
实验结论：微生物的生长和繁殖特性与环境条件密切相关。
适宜的温度、pH值和营养条件可以促进微生物的生长和繁殖，而不适宜的条件会影响微生物的生长。
因此，在实际应用中，我们需要根据微生物的需求条件来选择合适的培养条件，以提高微生物的生长和繁殖能力。
实验总结：通过本次实验，我们进一步了解了微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。
微生物的生长和繁殖受到温度、pH 值、营养等环境因素的影响，这是我们在环境控制和微生物培养中需要注意的因素。
掌握微生物的生长和繁殖特性，有利于我们更好地应用微生物技术，并解决一些与微生物相关的问题。
微生物实验实训总结报告
一、前言微生物实验实训是生物技术、食品科学等相关专业的重要实践环节，通过实验操作，使学生在理论知识的指导下，掌握微生物学的基本实验技能，提高实际操作能力。
本次实训旨在培养学生的动手能力、观察分析能力和创新能力，为今后的学习和工作打下坚实的基础。
以下是本次实训的总结报告。
二、实训内容1. 微生物的形态观察与分类本次实训首先对微生物的形态结构进行了观察，通过显微镜观察了细菌、真菌等微生物的形态，了解了它们的生长特点。
随后，对观察到的微生物进行了分类，加深了对微生物分类学的认识。
2. 微生物的分离与纯化实训中，我们学习了微生物的分离与纯化技术，包括平板划线法、稀释涂布平板法等。
通过这些实验，掌握了微生物分离纯化的基本操作，为后续实验奠定了基础。
3. 微生物的鉴定在微生物鉴定实验中，我们学习了细菌、真菌的鉴定方法，如形态观察、生化反应、显微镜观察等。
通过这些实验，提高了我们对微生物鉴定的实际操作能力。
4. 微生物的培养与保藏实训中，我们学习了微生物的培养方法，包括液体培养、固体培养等。
同时，还学习了微生物的保藏方法，如冷冻保藏、石蜡封存等。
通过这些实验，掌握了微生物培养与保藏的基本技能。
5. 微生物的代谢实验微生物的代谢实验主要包括营养物质的需求实验、代谢产物的检测等。
通过这些实验，了解了微生物的营养需求和代谢特点。
6. 综合实训项目在综合实训项目中，我们进行了微生物发酵实验，包括培养基的制备、发酵条件的优化、发酵液的提取与纯化等。
通过这个项目，培养了我们的团队协作能力和创新思维。
三、实训收获1. 理论联系实际：通过本次实训，将微生物学理论知识与实验操作相结合，使我们对微生物学有了更深入的了解。
2. 提高实验技能：在实训过程中，我们掌握了微生物学实验的基本操作，提高了实验技能。
3. 培养团队协作能力：在综合实训项目中，我们分工合作，共同完成实验任务，培养了团队协作能力。
4. 增强创新意识：在实训过程中，我们不断尝试新的实验方法，提高了创新意识。
浙大微生物大实验报告
浙大微生物大实验报告摘要：本实验以土壤中的微生物作为原材料，根据微生物各自的生长特点，配制不同成分的微生物培养基。
将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上培养，在分离出相应微生物后，对其进行进一步的纯化，然后观察其形态特征，并通过微生物的生理生化反应对其种类进行鉴定，最后研究环境条件对微生物生长的影响。
关键字：培养基，分离，纯化，鉴定，环境条件一、实验材料1、分离细菌、真菌、放线菌的材料：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O等。
新鲜土壤；培养基：灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯蔗糖培养基（10mL装）；试剂：5000U/mL 链霉素液、0.5％重铅酸钾液。
2、细菌、真菌、放线菌纯化与鉴定的材料：菌种：大肠杆菌、枯草杆菌、荧光假单胞菌、金黄色葡萄球菌，前实验分离的未知菌；培养基：淀粉培养基、硫化氢实验培养基、石蕊牛乳培养基、油脂培养基；试剂：碘液。
菌种：枯草杆菌斜面；灵杆菌菌液；黑曲霉斜面。
培养基采用：牛肉膏蛋白胨斜面培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（10mL）、马铃薯蔗糖培养基（10mL）、淀粉琼脂培养基（10mL）；供试药剂：2.5％碘酒，75％酒精，0.1％HgCl，5％石炭酸。
2二、实验步骤1、分离细菌、真菌、放线菌的步骤（一）、培养基配制l. 培养基配制的一般方法和步骤（1）称量：按照培养基配方，正确称取各种原料放于搪瓷杯中。
（2）溶化：在搪瓷杯中加入所需水量（根据实验需要加入蒸馏水或自来水），用玻棒搅匀，加热溶解。
（3）调pH值（调pH也可以在加琼脂后再调），用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。
（4）加琼脂溶化，在琼脂溶化过程中，需不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦，待完全溶化后，补足所失水分，一般数量少，时间短不必补水。
微生物实训课实验报告
一、实验目的1. 熟悉微生物实验室的基本操作规程和安全知识。
2. 掌握微生物分离纯化的基本方法，包括平板划线法和稀释涂布平板法。
3. 学会观察和识别不同微生物的菌落特征。
4. 了解微生物的培养方法和培养基的配制。
二、实验原理微生物分离纯化的基本原理是利用微生物在生长过程中对营养、氧气、温度等环境条件的需求差异，通过选择合适的培养基和分离方法，使混合微生物中的某一类微生物获得纯化。
平板划线法是将微生物在固体培养基表面划线，使微生物在培养基表面逐渐稀释，最终获得单菌落。
稀释涂布平板法是将微生物稀释液均匀涂布在固体培养基表面，使微生物在培养基表面形成单菌落。
三、实验材料与仪器材料：1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养琼脂培养基3. 稀释液：无菌生理盐水4. 工具：无菌镊子、无菌滴管、酒精灯、培养皿、平板划线器、显微镜等仪器：1. 培养箱2. 显微镜3. 灭菌器四、实验步骤1. 平板划线法：a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上。
b. 用无菌镊子取一端菌液，在平板表面划线，依次划三横三纵，使菌液逐渐稀释。
c. 将平板倒置，放入培养箱中，37℃培养24小时。
d. 观察菌落特征，记录菌落形状、大小、颜色等。
2. 稀释涂布平板法：a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于无菌生理盐水中，制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的稀释液。
b. 取适量稀释液，用无菌滴管均匀涂布在营养琼脂培养基平板上。
c. 将平板倒置，放入培养箱中，37℃培养24小时。
d. 观察菌落特征，记录菌落形状、大小、颜色等。
3. 显微镜观察：a. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的菌落分别挑取少量，制成悬液。
b. 将悬液滴于载玻片上，加盖玻片。
c. 在显微镜下观察细菌的形态、大小、排列等特征。
五、实验结果与分析1. 平板划线法：a. 金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，表面光滑，边缘整齐。
微生物学实验报告(免费)
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实验目的：
通过实验，了解微生物的基本特征，掌握微生物的培养和观察方法，提高对微生物的认识。
实验材料：
1. 实验室培养基
2. 微生物培养物
3. 显微镜
4. 微生物培养器具（如培养皿、试管等）
5. 显微镜玻片和盖玻片
6. 高温灭菌器
实验步骤：
1. 准备培养基和培养物：将培养基倒入培养器具中，加入微生物培养物。
根据需求，选择不同的培养基进行培养。
2. 培养微生物：将培养器具放入恒温箱或培养箱中，控制好温度和湿度等条件，让微生物得到适宜的生长环境。
3. 观察微生物：取适量的培养物涂抹在显微镜玻片上，加上盖玻片，放在显微镜上观察。
调节显微镜的放大倍数和焦距，观察微生物的形态、数量和运动等特征。
4. 记录观察结果：根据实际观察情况，记录下微生物的性状，如形态、大小、颜色、数量等。
5. 清洁工作：实验结束后，清洁培养器具，将已使用过的玻片进行消毒处理，彻底清洁实验室设备和环境。
实验结果：
根据实际观察，记录下微生物的形态、大小、运动等特征。
可以通过观察和比较不同微生物的特征，进行分类和鉴定。
实验结论：
通过本实验，加深了对微生物的认识和了解。
掌握了一些基本的观察和培养方法，为今后深入研究微生物打下了基础。
注意事项：
1. 实验操作时要注意无菌操作，避免外界细菌的污染。
2. 实验室要保持清洁，定期消毒，防止微生物的交叉感染。
3. 注意个人安全，避免操作时的误伤和化学品的误食等意外情况。
微生物实验报告微生物形态观察、分布、灭菌消毒
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜〔油镜〕的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊构造5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的构造特点二、实验原理1. 普通光学显微镜〔油镜〕的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴，当油镜头几乎接触玻片时停顿转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形〔包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等〕杆菌：杆状〔包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等〕螺旋菌：螺旋状〔包括螺旋菌、弧菌等〕2．细菌的根本构造细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊构造荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌〔白念〕生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、脏感染、S感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜〔比菌体大1-3倍〕致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭S——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验容1. 观察细菌三种形态1〕球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌〔子弹形〕、脑膜炎双球菌〔蚕豆形〕、四联菌2〕杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌〔异染颗粒〕、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3〕螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊构造芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌〔Clostridium Tantenus〕；霍乱弧菌〔vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛〔flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下列图，已交。
微生物学实验报告
微生物学实验报告实验目的，通过观察和研究微生物的生长、代谢和生态特性，加深对微生物学知识的理解，提高实验操作能力和科学研究素养。
实验材料和方法：1. 实验材料，琼脂培养基、试管、移液管、显微镜等。
2. 实验方法：a. 准备琼脂培养基，分装到试管中，加热至溶解后，冷却至50℃左右。
b. 取所需微生物样本接种于琼脂培养基上，摇匀后倒入培养皿中。
c. 将培养皿放入恒温培养箱中，控制好培养温度和时间。
d. 观察微生物在琼脂培养基上的生长情况，记录观察结果。
实验结果：1. 细菌在琼脂培养基上呈现不同的菌落形态，有的呈现圆形、光滑、有光泽的菌落，有的呈现不规则形状、粗糙的菌落。
2. 酵母菌在琼脂培养基上呈现乳白色、光滑的菌落，有的呈现凹陷的表面。
实验分析：1. 不同的微生物在琼脂培养基上呈现出不同的生长特性，这与它们的生态环境和代谢特点有关。
2. 细菌的菌落形态和生长速度受到培养条件的影响较大，不同的培养条件会导致不同的生长情况。
3. 酵母菌在琼脂培养基上的生长受到氧气和营养物质的影响明显，这与其代谢特点有关。
实验结论：通过本次实验，我们对微生物在琼脂培养基上的生长情况有了更深入的了解，不同的微生物呈现出不同的生长特性，这为我们研究微生物的生态和代谢提供了重要的参考。
实验总结：本次实验通过琼脂培养基对细菌和酵母菌进行了培养和观察，对微生物学的实验操作能力和科学研究素养有了一定的提高。
同时，也增加了对微生物生长和代谢特性的了解，为今后的微生物学研究奠定了基础。
实验展望：在今后的学习和研究中，我们将进一步深入探讨微生物在不同培养条件下的生长规律和代谢特性，为微生物学领域的研究和应用提供更多的理论和实验支持。
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摘要：本实验以土壤中的微生物作为原材料，根据微生物各自的生长特点，配制不同成分的微生物培养基。
将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上培养，在分离出相应微生物后，对其进行进一步的纯化，然后观察其形态特征，并通过微生物的生理生化反应对其种类进行鉴定，最后研究环境条件对微生物生长的影响。
关键字：培养基，分离，纯化，鉴定，环境条件一、实验材料1、分离细菌、真菌、放线菌的材料：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O等。
新鲜土壤；培养基：灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯蔗糖培养基（10mL装）；试剂：5000U/mL链霉素液、0.5％重铅酸钾液。
2、细菌、真菌、放线菌纯化与鉴定的材料：菌种：大肠杆菌、枯草杆菌、荧光假单胞菌、金黄色葡萄球菌，前实验分离的未知菌；培养基：淀粉培养基、硫化氢实验培养基、石蕊牛乳培养基、油脂培养基；试剂：碘液。
菌种：枯草杆菌斜面；灵杆菌菌液；黑曲霉斜面。
培养基采用：牛肉膏蛋白胨斜面培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（10mL）、马铃薯蔗糖培养基（10mL）、淀粉琼脂培养基（10mL）；供试药剂：2.5％碘酒，75％酒精，0.1％HgCl2，5％石炭酸。
二、实验步骤1、分离细菌、真菌、放线菌的步骤（一）、培养基配制l. 培养基配制的一般方法和步骤（1）称量：按照培养基配方，正确称取各种原料放于搪瓷杯中。
（2）溶化：在搪瓷杯中加入所需水量（根据实验需要加入蒸馏水或自来水），用玻棒搅匀，加热溶解。
（3）调pH值（调pH也可以在加琼脂后再调），用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。
（4）加琼脂溶化，在琼脂溶化过程中，需不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦，待完全溶化后，补足所失水分，一般数量少，时间短不必补水。
（5）分装：在漏斗架上分装。
根据不同的需要进行分装，一般制斜面的装置为管高的1／5 特别注意不要使培养基粘污在管（瓶）口上以免浸湿棉塞，引起污染。
（6）包扎成捆、挂上标签。
培养基分装好后，塞上棉塞，用防水纸包扎成捆挂上所配培养基名称的标签。
（7）灭菌备用。
灭菌后如需制成斜面的，应在下磅后取出，摆成斜面（见图6-1）。
培养基经灭菌后，必须放在37℃恒温培养箱中培养 24h，如确无菌生长、方可使用。
2．三种培养基的配方及具体配制方法（1）. 牛肉膏蛋白陈琼脂培养基（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）。
配方：牛肉膏 3g 蛋白胨 5g 氯化钠3g琼脂20g 自来水1 000mL pH7.2~ 7.4灭菌l.05kg／cm2，25~30min本实验将原配方配成各种浓缩液。
各种浓度如下：30％牛肉膏、50％蛋白胨、30％氯化钠。
以配制200mL培养基为例。
吸取30％牛肉膏2mL；50％蛋白胨2mL；30％氯化钠2mL；加入有刻度的搪瓷烧杯中，然后用自来水补足到200mL。
用玻棒搅匀，在电炉上稍加热，调 pH至 7.4，加琼脂4g，加热熔化，用玻棒不断搅拌，至琼脂完全溶解为止，趁热在漏斗架上装试管，（见图6－2）。
装带有棉塞的无菌试管，装置1／5的试管高度共12支，作斜面培养基、用铝壳试管帽的里装10mL。
约试管高度的 1／2以上，用作分离时倒平板用。
分装完毕，以12支为一捆，用防水纸包扎成捆（图6-3），挂上标签，灭菌备用。
（2）. 马铃薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）琼脂培养基（用于分离和培养真菌之用，是一种半合成培养基）。
配方：去皮马铃薯（或鲜豆芽）200g 蔗糖（或葡萄糖）20g 自来水1000mL琼脂20g pH天然灭菌（含蔗糖）1.05kg/cm220min（含葡萄糖）0.1kg/cm2 30min制备方法配制200mL培养基为例取上皮马铃薯40g，切成小块、放入无刻度的搪瓷杯中，加水200mL，置电炉上加热煮沸10min，用4层纱布过滤至具刻度的搪瓷杯中，滤液加水补足至200mL。
然后加蔗糖4g，加琼脂4g，加热熔化并用玻棒不断搅拌直至琼脂完全溶化分装试管，下面一系例步骤同配细菌培养基相同。
（3）. 淀粉琼脂培养基（高氏一号Gause’I），用干分离和培养放线菌，是一种合成培养基。
配方：可溶性淀粉 20.0g KNO31.0g K2HPO4 0.5gMgSO4·7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4·7H2O 0.01g琼脂20g 自来水1 000mL 灭菌1.05kg/cm230min 制备方法配制（以配制200mL）培养基为例：吸取配方液：1％KNO320mL；1％K2 HPO410mL；1％MgSO4·7H2 O10mL；l％NaCl10mL；1％FeSO4 7H2O0.02mL．加水补足至 200mL，置电炉上加热.用另一只搪瓷杯称取可溶性淀粉4g，从200mL中取出少量加入淀粉中，用玻棒调成糊状，待液体沸腾后将淀粉糊洗入培养液中，搅匀，调pH至 7.4，加琼脂 4g，加热至琼脂完全溶化为止，趁热分装试管，以下一系例步骤同于配制细菌培养基的操作方法。
3. 无菌水的制备无菌水，为下一次微生物分离实验中所需用而准备。
100mL三角瓶（装有玻璃珠），装自来水45mL，试管中装9mL自来水，塞上棉塞，包扎灭菌备用。
三角瓶和试管须预先塞好棉塞，并经干热灭菌。
（二）分离培养微生物常用器皿的准备1. 清洗一些玻璃仪器：如三角瓶试管，培养皿、吸管等。
2. 棉塞的制作：装培养基和分离培养需用的部分玻璃器皿，需加棉花塞梯塞的作用为过滤空气，使试管内外空气可以流通，但外界空气中杂菌不能进入，避免污染、试管、三角瓶都要做棉塞。
吸管上部也要塞入棉花，在管口约1-2mm处，用解剖针塞入少许棉花，（约1-1.5cm 长）以防止细菌吸入口中，井避免将口中细菌吹入管内。
棉花要塞得松紧适宜。
吹时以能通气但不使棉花塞下滑为准。
3. 包装培养皿和吸管等。
为了使培养皿、吸管、三角玻棒等洗净，干热灭菌后，不让表面暴露，以保证无菌状态，为此干热灭菌前先用旧报纸包装妥当（见示范），每组同学包培养皿6只（一包）。
吸管的包装，将塞好棉花的吸管尖端，放在4~5cm宽的长纸条的一端，约成45°角左右，折叠纸条，包住吸管尖部，用左手握住移液管身，右手将移液管压紧，在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（三）微生物的分离1. 用稀释平板法（又名混菌法）从土壤中分离真菌。
（1）制备土壤稀释液无菌操作过程见教师示范。
A. 取土壤5g，放入装有45mL无菌水的三角瓶中，振荡10min，即为稀释10-1的土壤悬液。
B. 另取装有9mL无菌水试管5支，用记号笔编上10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
取已稀释成10-1土壤液，振荡后静止 0.5min，用无菌吸管吸取 1mL土壤悬液加入 10’的无菌水的试管中，并在试管内轻轻反复吹吸数次，使之充分混匀，即成10-2土壤稀释液。
同法由10-2的试管中吸取1mL稀释液加入编号为10-3的无菌水试管中，混匀后即为10-3土壤稀释液，依次连续稀释至10-4、10-5 、10-6土壤稀释液。
在土壤稀释过程中，以用一支吸管由浓到稀，稀释到底，稀释方法见图7-1。
图7－1 检样的稀释方法（2）每组取无菌培养皿2付，即每个同学做一只。
学号单号学生用10-5稀释度液，双号学生用10-4稀释度液。
①先在无菌培养皿底部贴上标签，注明分离菌名、稀释度、组别、班级。
②取另一吸管，以无菌操作法吸取10-4或10-5土壤稀释液1mL，加在无菌培养皿的一边，在皿的另一边加入 2滴 5 000U/mL的链霉素液。
此时严防两液相混。
③取已融化在水浴锅中保温50oC左右的马铃薯蔗糖琼脂培养基2 管（10mL装，一管倒一皿），以不烫手为准，倒入上述培养皿中（见图7-2），轻轻转动培养皿，使菌液、链霉素液、培养基充分混匀铺平皿底，放在平坦的桌面上，凝固后，翻转培养血，置28～30oC恒温培养养5~6d。
观察真菌菌落形态以及计数菌落数。
并计算出每1g土壤中真菌的数量。
即用某一培养皿内真菌的菌落数乘以该培养皿接种液的稀释倍数即得。
（3）挑取单个菌落接种到外面培养基上作纯化和性能测定，若不纯，需要继续分离。
2. 用平板涂抹法分离土壤中的放线菌（土壤稀释液制备同上）。
①每组取无菌培养皿2付（每个同学各做一只）。
各在培养皿底部贴上标签，注明分离菌名、稀释度、组别、班级。
②以无菌操作法先在培养皿中加入0.5％重铅酸钾溶液2滴，取已融化的淀粉琼脂培养基2管，分别倒入2付培养皿中，轻轻转动培养皿，使培养基与重铅酸钾充分混匀，铺平，制成平板。
③待平板凝固后，另取一支吸管吸取10-3（单学号学生）或10-4（双学号学生）稀释液0.2mL土壤稀释液放在平板上。
④取无菌三角玻棒，把上述稀释液在平板表面涂抹均匀（见图7-4）。
在涂抹时不要弄破平板，以免影响菌落的生长。
翻转培养皿，置28℃~30℃条件下培养6~7d，观察放线菌菌落形态及计数菌落，并算出每g土壤中放线菌的数量（方法同上）。
⑤挑取单个菌落，接种于相应的斜面培养基上，如果不纯再移植或纯化，直至得到纯培养为止。
3. 用平板划线法分离土壤中的细菌（土壤稀释液的制备同上）。
（1）每组取无菌培养皿两付，同上法在培养皿底部贴上标签。
取已融化的牛肉膏蛋白胨培养基，倒入无菌培养血中，制成平板。
（2）平板凝固后，用接种环取相应的菌液一环（10-5或10-6）在平板上划线（教师作示范）①连续划线法：将挑取有样品的接种环在平板培养基表面作连续划法（图7-5），勿划破培养基。
划线完毕后，倒置28oC～30oC温室培养。
②分区划线法：用接种环以无菌操作挑取土壤稀释液1环，先在平板培养基的一边作第1次平行划线3- 4条，再转动培养皿约60”角，并将接种环上剩余物烧掉，待冷却后通过第1次划线部分作第2次平行划线，再用同法通过第2次平行划线部分作第3次平行划线和通过第3次平行划线部分作第4次平行划线（见图7-5）划线完毕，盖上皿盖，倒置于28℃-30℃温室中培养。
（3）挑取单个菌落接种子斜面培养基上，如果不纯再移植成纯化，最后得到纯培养。
用上述分离土壤中真菌、放线菌和细菌的方法，也可用于分离病虫、病蚕或果蔬上的病原菌。
以划线法从病蚕分离黑胸败血病病原菌为例，先用75％酒精棉球进行表面消毒（注意病虫、病蚕、果蔬等分离的样品不要过份腐烂，便于进行材料的处理。
取灭菌手术剪剪去病蚕的一只腹足，流出体液作为划线分离的材料，若是分离苹果炭疽病病原菌，则用无菌镊子揭下有炭疽病苹果的果皮，再从此处切取米粒大小果皮1块，放入盛有1mL无菌水的试管中，用无菌玻棒捣碎制成悬浮液，划线法分离病原菌。