大蒜的高效液相指纹图谱初探_一_李燕菊
大蒜的高效液相指纹图谱初探(一)
要 目的 ： 建立大蒜 的高效液相指纹 图谱（ Ｐ Ｃ Ｆ ） 为大蒜 的鉴别提供 实验依据 。方法： Ｈ Ｌ —Ｐ ， 色谱条件： 色谱
柱： 柱温：５Ｃ 流 动相 ： ３ ￣； 甲醇一 ４ ： ） 流速 ：．ｍ ／ ｎ 检测波长 ：１ｎ 结果 ： 同产地 的大蒜酶解产物 的相似 水（０６ ； ０ ０５ Ｌｍｉ； ２ ４ ｍ。 不 度在 ０９ ．。结论 ： 色谱 图可作 为大蒜的指纹 图谱， 该 用于评价大蒜的质量。 关键词 大蒜 ； 蒜氨酸 ； 高效液相 ； 纹图谱 指
Ｆ ｄ ｒ ｔ ｎ．ｏ ２： ＿１ ． ｅ ｅａ ｏ ２ ｏ ６ ２ ｉ
［ ］ 马爱国 ， ７ 吴佩霞， 匡谊 ， 新疆维吾尔族城乡居 民 ３ 年来膳食 等． ３
营养的变 化． 新疆卫生防疫 ，９５ １（ ）２２２４ １９ ，３４ ：２— ２．
［ ］ Ｊ ｎ ａ ｕｎ Ｐ ｕ ０ Ｂｏ ｎ ，ｔ １ ｖ ｅｃ ｒ ｅ ｎ ｅｔ ８ ｉ ｒ Ｌ ａ ， ａｌ ， ｒ ｅｅ ａ． ｉ ｎｅ ｆ ｎ ｕ ｎ ａ Ｉ ｗ Ｅ ｄ ｏｇ
２ 实验方 法与 结果 ２１ 色谱条 件 ．
色 谱 柱 ： 温 ：５Ｃ； 动 相 ： 醇 一水 （０ ： 柱 ３ｏ 流 甲 ４
标准。到 目前为止 ， 未见有从整体上控制大蒜 的质 量 的报道 ， 本文根据指 纹 图谱 的技术要求［ 采用 ２ １ ， ＨＰ Ｃ法 对大 蒜进 行指 纹 图谱 的技术 研究 ，以期 对 Ｌ 大蒜进 行质 量控 制提 供有效 的方法 。 ｌ 仪 器与试 药 安捷伦 １０ １０系列高效液相色谱仪 （ 美国 ）西 ： 贝乐 Ｓ ２ Ｃ型多功能食 品加工机（ Ｑ １９ １ 上海帅佳 电子 科 技 有 限公 司 ）Ｓ ２ ０Ｌ ；Ｋ ２０ Ｈ超声 仪 （ 海科 导 超声 上
指纹图谱及高效液相
指纹图谱及高效液相
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• 指纹图谱中, 各色谱峰所代表物质光吸收曲线不可 能相同, 而物质含量检测理想条件是取得待测物质 光吸收曲线峰值或最大值, 所以, 固定单波长下准 确检测色谱峰所代表各种物质含量是不可能。
• 假如能够取得指纹图谱中个色谱峰代表物质光吸 收峰值, 就可准确测定这些物质含量, 而二极管阵 列检测器应用使同时准确测定各种物质含量成为 可能。
• ②决定用等度洗脱还是梯度洗脱
• ③预计等度洗脱适宜%B或梯度洗脱终止 %B
• ④了解样品整体情况, 防止有早流出或晚 流出组分被遗漏。
指纹图谱及高效液相
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指纹图谱及高效液相
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指纹图谱在评价中药质量中作用
• 1. 观察指纹图谱整体特征, 判别生产前原料真伪, 对原料药进行质量控制用以确保其质量稳定。
• 2. 可区分药材不一样部位, 还可对不一样采摘期 药材进行分析, 确定最正确生终年限和采收季节。
• 3. 指纹图谱能够考查商品药材及成药质量, 建立 各药材或成药标准指纹图谱, 可用于判断药材优劣, 区分正品与伪品。也可区分不一样产地药材。
度（即分离出成份多少）有所不一样。
指纹图谱及高效液相
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中药高效液相指纹图谱分析方法
• 中药高效液相指纹图谱分析是以样品间色谱峰图 共有峰不一样峰面积和保留时间为对象进行比对 分析。分析时大多结合药材, 制剂有效成份所在部 位以对应溶剂提取该部位有效成份, 而有些制剂或 药材用一个溶剂不能完全获取全部代表性有效成 份时则采取多色谱指纹图谱分析。以不一样溶剂 提取取得多个色谱图。
指纹图谱文件查阅总结
指纹图谱及高效液相
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查阅文件名称
• 中药指纹图谱在中药质量控制中应用—王乐 • 高效液相色谱数字化定量指纹图谱评价维C银翘片中药
高效液相衍生化法测定大蒜氨基酸指纹图谱
高效液相衍生化法测定大蒜氨基酸指纹图谱*杨 瑾1**,陈 坚***,李新霞1,高晓黎1(新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830011)摘要:目的 参照 中药材指纹图谱研究的技术要求(暂行) ,建立大蒜中氨基酸指纹图谱及技术参数。
方法 高效液相色谱法,以邻苯二甲醛为衍生化试剂,以0.045mol/ml磷酸盐缓冲液 乙腈 1,4-二氧六环 四氢呋喃(69.9 25.0 2.9 2.2)为流动相,337nm检测。
10个不同产地大蒜所得的色谱图用 中药色谱指纹相似度评价系统(2004年A版) 分析评价。
结果 精密度、重现性、稳定性实验RSD不大于3%。
指纹图谱共有峰6个,相似度在0.90以上。
结论 本方法稳定、准确,为进一步控制大蒜的质量提供依据。
关键词:大蒜;高效液相色谱;衍生化;指纹图谱中图分类号:R9 文献标识码:A 文章编号:1009-5551(2010)05-0509-03Determination of fingerprint of amino acids in garlic by derivation HPLCYANG Jin,CHEN Jian,LI Xin-xia,et al(Farmacy I nstitute,X inj iang M edical Univer sity,Ur umqi830011,China)Abstract:Objective Determ ination o f fing erprint and technical parameter of amino acids in garlic according to Specification about fingerpr int of Chinese herbal medicines(Tentativ e standard) .Methods A H PLC method w as used w ith o-phthaldialdehy de der iv atization,w ith the detectio n w av elength of337nm,the mobile phase was0.045M Phosphate buffer,acetonitrile,1,4-diox ane,tetrahydr ofuran(69.9 25.0 2.9 2.2).T en samples from differ ent habitats w ere analyzed and evaluated using the similarity evaluation system fo r chr omatogr aphic fing er print of traditional Chinese m edicine(Versio n2004A).Results The relative standard dev iation(RSD)of pr ecision and repro ducibility was no t more than3%.In the fing er-print of g arlic,chr omatogr aphic peak o wned by all of garlic sam ples w as six.The similarity of samples w as all above0.90.Conclusion T he method is accurate,conv enient,stable and the chrom atog raphic fing er prints can be served as a pow erful tool for the further quality control of garlic.Key words:g ar lic;H PLC;der iv ation;fingerpr int百合科葱属植物大蒜(Allium sativum L)的氨基酸可分成两类:一类是组成蛋白质的氨基酸,另一类是非蛋白质氨基酸。
高效液相色谱测定大蒜原料及大蒜片中蒜氨酸和大蒜素的方法研究
大蒜在我国的种植历史悠久，作为食物、香料， 在国内的产销量一直较高。
同时，其作为具有药用价值的食材，在各种疾病的治疗中作为传统民间药物使用[1]，其健康益处主要与有机含硫成分有关[2-3]。
大蒜中的有机含硫化合物主要是蒜氨酸和大蒜素2种活性成分，通常用来表征大蒜和大蒜相关产品的质量。
由doi:10.16736/41-1434/ts.2023.18.050作者简介：李锦晶（1985—），男，本科，工程师，研究方向为化学分析。
通信作者：李凡（1984—），男，本科，工程师，研究方向为植物与食品成分分析。
高效液相色谱测定大蒜原料及大蒜片中蒜氨酸和大蒜素的方法研究Method Development and Validation for Quantitation of Alliin and Allicin in Garlic Raw Materialsand Garlic slice by HPLC◎ 李锦晶，李 凡，易 渡，张沿军（康宝莱蕾硕（湖南）天然产物有限公司，湖南 长沙 410100）LI Jinjing, LI Fan, YI Du, ZHANG Yanjun(Herbalife Natsource (Hunan)Natural Products Co., Ltd., Changsha 410100, China)摘 要：本文利用蒜氨酸的改性衍生物，建立了一种提取蒜氨酸和大蒜素的独特样品制备方法。
对蒜氨酸采用酶抑制剂水溶液，邻苯二甲醛（OPA）试剂为衍生试剂，在pH 值为9.0 ~10.0条件下提取，获得较好的反应和稳定性。
用pH 6.0的醋酸钠缓冲液提取大蒜素，以获得更稳定的大蒜素。
结果显示，5 ℃的进样温度可使蒜氨酸和大蒜素在溶液中保持48 h 的稳定。
关键词：蒜氨酸；衍生化；液相色谱；同时测定Abstract：This article establishes a unique sample preparation method for extracting alliin and allicin using modified derivatives of allicin. Enzymatic inhibitor aqueous solution was used to extract allicin, with o-phthalaldehyde (OPA) reagent as the derivative reagent. The reaction and stability were achieved under pH 9.0-10.0 conditions. Extract allicin with sodium acetate buffer at pH 6.0 to obtain more stable allicin. The results showed that a sample injection temperature of 5℃ can maintain the stability of alliin and allicin in solution for 48 hours.Keywords：alliin; derivatization; liquid chromatography; simultaneous determination 中图分类号：TS207.2于蒜氨酸酶的存在，蒜氨酸是相当不稳定的，可以迅速转化为大蒜素；大蒜素性质极不稳定，容易分解，不能长期保存。
高效液相色谱法测定大蒜提取物中蒜氨酸的含量
高效液相色谱法测定大蒜提取物中蒜氨酸的含量蒋利;常军民【摘要】目的建立高效液相色谱法测定大蒜提取物中蒜氨酸含量的方法 .方法采用YMC-Pack ODSA(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相:0.02%三氟乙酸水溶液;流速:0.5 mL·min-1;紫外检测波长:214 nm.结果在14.7～294 mg·L-1范围内,峰面积与蒜氨酸浓度呈较好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.1%,RSD 为2.0%(n=9).结论该法操作简便,重现性好,结果准确、可靠.【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2009(024)001【总页数】2页(P21-22)【关键词】大蒜;提取物;蒜氨酸;高效液相色谱法【作者】蒋利;常军民【作者单位】新疆医科大学药学院,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R927.2大蒜为百合科葱属植物蒜(Allium Sativum Linn．)的干燥鳞茎，具有抗菌、抗病毒、预防心血管疾病和抗肿瘤等生物活性［1］。
蒜氨酸又名蒜碱，化学名为S－烯丙基－L－半胱氨酸亚砜［S－allyl－L－(+)－cysteine sulfoxide］，白色针状结晶，易溶于水，不溶于乙醚等非极性有机溶剂，以稳定、无臭形式存在于大蒜鳞芽中，是完整、未受损大蒜中含量最丰富的非蛋白类含硫氨基酸，是大蒜中主要的含硫化合物。
研究表明，蒜氨酸具有降血酯、抗动脉粥样硬化、提高机体免疫等功效［2，3］。
有关大蒜中蒜氨酸的含量测定已报道较多，但大蒜提取物中蒜氨酸的含量测定未见报道，因此笔者建立高效液相色谱法测定大蒜提取物中蒜氨酸的含量，为大蒜制剂的质量标准提供参考依据。
1．1 仪器岛津 LC－20A系列高效液相色谱仪，DAD检测器，岛津LC－20A色谱工作站;赛多利斯BP211型电子天平(德国)。
高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用
几种特征成分（如色谱指纹图谱）以保证制剂和产品质量的一致”［２］。
我国国家药品监督管理局２０００年颁布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》，要求到２００２年末，所有申报的中药注射剂均应有相关的指纹图谱资料， 使中药指纹图谱的研究成为中药研究的热点。
为实现中药材、中成药质量标准现代化，使中药走向世界，研究建立指纹图谱对实现中药质量标准现代化具有重要的意义。
２ 高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用２．１ 高效液相色谱法构建中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价由于高效液相色谱仪的诸多优点并能对中药样品中含有的绝大多数成分进行分析检测及质量评价，故高效液相色谱技术已成为当前研究中药指纹图谱的主要手段。
欧洲国家现在普遍采用高效液相色谱法对植物药物中已知及未知组分进行控制，并形成相应的规范。
因此高效液相色谱法在构建中药指纹图谱对中药的定性鉴别与定量分析中得到广泛应用。
采用高效液相色谱法测定指纹图谱可对中药材的产地、采收时间、加工方法、工艺流程等多方面通过化学成分的差异来反映中药材的种属差异、真伪鉴别等，从而达到控制中药质量的目的。
刘梅［３］等采用ＨＰＬＣ色谱指纹图谱可以快速、准确对药材夏天无和延胡索进行定性鉴别。
张玉杰等［４］对不同产地正伪品沙苑子及伪品的主要有效成分黄酮类进行利用ＨＰＬＣ指纹图谱进行鉴别研究，研究显示不同来源的正品沙苑子ＨＰＬＣ指纹图谱十分相似，而２种伪品则显示出完全不同的指纹图谱特征，得出ＨＰＬＣ指纹图谱特征可以作为沙苑子质量评价和药材鉴别的依据。
李磊等［５］以不同产地正宗丹参和市场上充作丹参的其他鼠尾草属植物为分析对象，采用ＨＰＬＣ法构建丹参ＨＰＬＣ指纹图谱，可鉴别不同来源丹参与其他鼠尾草属丹参伪品。
高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用许一平１ 罗启恩２１．山东中医药高等专科学校 ２６５２００２．莱阳农学院 ２６５２００高效液相色谱法（Ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）是在经典液相色谱法的基础上发展起来的一种新的色谱技术。
基于高效液相指纹图谱检测参苓白术散中人参皂苷的含量测定
基于高效液相指纹图谱检测参苓白术散中人参皂苷的含量测定王雪梅;李艳娇;宋燕青【摘要】目的:通过高效液相指纹图的检测方法测试不同批次参苓白术散中人参皂苷的含量.方法:进样量为10μL,采用250 mm×4.6 mm,5μm的色谱柱(ThermoODS-HYPERSIL柱),选择流动相的条件是在A流动相乙腈和B流动相水中以1 mL/min的流速开展实验,检测波长为203 nm,柱温为30℃,根据高效液相(HPLC)(Agilengt-1100高效液相色谱仪)指纹图谱的梯度洗脱程序进行试验,并在Agilengt-1100色谱工作站上进行指纹图谱分析.分别对HPLC方法学的严谨性进行检测,包括专属性试验、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、线性回归试验、加样回收率试验等逐步建立方法的科学性;而后进一步采用HPLC对参苓白术散中人参皂苷的含量进行具体的检测和记录.结果:1)HPLC的专属性试验结果显示人参皂苷Rg1、Re及Rb1均有良好的专属性.2)人参皂苷Rg1的线性回归方程是Y=352.68119X+6.73850;人参皂苷Re的线性回归方程是Y=292.61086X+3.70323;人参皂苷的线性回归方程是Rb1Y=254.20321X+4.56471;其相关系数均>0.999,结果显示人参皂苷线性关系良好.3)精密度试验结果显示人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1峰面积的RSD在0.22％～0.29％;稳定性试验结果显示人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1峰面积的RSD在0.06％～1.83％;重复性试验结果显示人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1总量的含量平均值为9.86 mg,RSD 2.5％表明HPLC 的精密度、稳定性和重复性均良好.4)结果显示人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的加样回收率平均值和RSD分别为95.7％、105.7％、100.4％,3.3％、4.8％、3.1％,表明均HPLC测定参苓白术散加样回收率良好.5)不同批次参苓白术散中人参皂苷总的含量存在较大差别.结论:高效液相指纹图谱检测参苓白术散的操作方法较为简便,其专属性、灵敏度和重复性均较好,而不同批次参苓白术散中人参皂苷总的含量存在较大差别,对临床规范控制参苓白术散的质量有试验基础.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2018(013)011【总页数】5页(P2876-2879,2883)【关键词】参苓白术散;高效液相;指纹图谱;人参皂苷;人参皂苷Rg1;人参皂苷Re;人参皂苷Rb1;含量测定【作者】王雪梅;李艳娇;宋燕青【作者单位】吉林大学第一医院药学部,长春,130000;吉林大学第一医院药学部,长春,130000;吉林大学第一医院药学部,长春,130000【正文语种】中文【中图分类】R284.1参苓白术散出自《太平惠民和剂局方》,是以四君子汤为基础的,处方由人参、茯苓、白术、山药、甘草、白扁豆、莲子等十味药组成,所有药物均以全原粉入药,主要起补脾胃、益肺气的功用[1-3]。
指纹图谱及高效液相
正常使用前后色谱柱要强溶剂冲洗
• 参考图5-23，5-24 • “污物”在柱进口处积聚，柱压高等问 题，用纯溶剂（甲醇、乙腈）正冲，反 冲。当柱子过“脏”时，正相柱可用甲 醇（可加少量水）；反相柱可用异丙醇 加甲醇冲洗；96%二氯甲烷+4%甲醇 +1%氢氧化铵20倍柱体积25cm的柱子 大约50ml
HPLC流动相的选择
乙腈-水，甲醇-水，乙腈-磷酸水溶液，乙腈-乙酸水溶液
流动相组分溶液浓度对色谱峰影响
在选择流动相体系若酸度较大时，峰型好的同时还须考 虑色谱仪酸承载能力
开始方法建立
• 首次HPLC分离较好的实验条件 • 色谱柱 C18、C8 5μm 15×0.46cm • 流动相 甲醇-水， 甲醇-甲酸水（？不太确定） 流速 1.5—2.0ml/min 温度 35—45℃ 样品量 体积<25μL 重量 <100 μg
分析方法的评价方式
• 精密度：取样品一定量按试验方法制备样品溶液， 24小时内连续进样5次，分析仪器及进样的精密 度。 • 重复性：取5份同样量的样品，按试验方法（制备 方法及色谱方法）进样分析，测分析方法的可重 复性。 • 精密度：取同一样品溶液室温下放置，48小时内 进样分析五次，分析样品溶液在室温下的稳定性。
指纹图谱测定实验步骤
• 1.供试品及对照品的制备 • 2色谱条件的选择 • 3.方法学考察
• • • • 线性关系的考察 精密度实验 稳定性试验 重现性试验（保证相对保留时间的RSD<1%,相对保留面 积的RSD<3%） • 加样回收率实验
• 4.指纹图谱的建立和共有指纹图谱峰的指认
样品的溶液制备选择方法
三 压力降
• 同一支色谱柱的渗透性（压力降）或反压力应 该相似。 • 用球形微粒填充的色谱柱的压力降可用下式估 算： P=3000Lη/（t0dp2） 式中P为压力（psi），L为柱长（cm），为流 动相粘度（cp），t0为死时间，dp为微粒的直 径。 新的色谱柱使用纯溶剂（甲醇、乙氰）冲洗时 要记录压力，这是色谱柱很重要的指标
高效液相色谱法测定大蒜提取物中蒜氨酸的含量
的相关 系数 降低 ， 还是 不 能根 据 近红 外 光谱 来 对 大 但
黄样 品进行分类 鉴 别 ， 因此 我们 使用 人 工 网络 方 法对 正 品和非正 品大 黄样品 的分类 鉴定进行 深人 的研 究 。
速无损 分 析 ， 而且 操作 简 便 、 污 染 、 消 耗 ， 一 种 无 低 是
的鉴别 之外 ， 识别错 误 。第 ２个样 品输 出值 为 ０ ４ ， 被 ．９ 第 ３ 个样 品输 出值为 ０ ７ 。这 ２ ６ ．２ 个样 品为鉴别错 误的 样品 ， 其它 ５ ０个样品 的鉴别是 正确 的。从 总体来 看 ， 使 用人工神经 网络鉴别大黄样品识别正确率达到了 ９ 。 ６
为２ ～８时 ， 人工神经 网络对大 黄 的识 别正 确率 基本趋 于平 缓 ； 当隐含层 神经元为 ５时 ， 人工 神经 网络 对大黄 的识 别正确率 最高达到 ９ ， 过上述优 化 ， ６ 经 本次试验 选定 的隐含层个 数为 ５ 。
摘要 ： 目的
建立 高效 液相 色谱 法测 定 大蒜提 取 物 中蒜 氨 酸含 量 采用 Ｙ － ａｋ Ｏ Ｓ Ａ（ ０ｍ ＭＣ Ｐ ｃ Ｄ － ２ ｍ￣４６ｒ Ｔ ５ｕｎ ５ ． ｎ ｌ ｒ） ｌ，
３ 讨 论
２ ３ １ 大 黄 的近红 外光谱 ．．
图 １给 出 了测 得 的正 品
和非正 品大 黄 的 近的近红外 光谱非常相 似 ， 而且存 在 明显 的背底 ， 不
可能用直 接观 察 的方 法 对 正 品和 非 正 品大 黄 做 出 鉴 别 。即使使用传 统的相关 系数 法也很 难对 正 品和非正 品大黄样 品做 出鉴 定 ， 用 导数 光谱 使 正 品和 非 正 品 使
的 方法 。方法
色谱 柱 ； 动 相 ：． ２ 三 氟 乙酸 水溶 液 ； 流 ０ ０ 流速 ：． Ｌ ・ ｉ ； ０ ５ｍ ｍｎ
高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量
高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素的含量
蒋慧;刘斐
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2005(14)2
【摘要】目的:用高效液相色谱法(HPLC法)测定大蒜素注射液中大蒜素的含量.方法:采用C18柱,以甲醇-水-甲酸(85:15:0.1)为流动相,检测波长为225nm.结果:大蒜素浓度在35～250μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 97,平均回收率为100.39%,RSD为0.72%.结论:HPLC法可用于大蒜素注射液中大蒜素的含量测定.
【总页数】1页(P43-43)
【作者】蒋慧;刘斐
【作者单位】山东省药品检验所,山东,济南,250012;山东省药品检验所,山东,济南,250012
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2;R978.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量 [J], 韩贵芝;王文军;王芳
2.高效液相色谱法测定蒜油中大蒜素的含量 [J], 洪亮;张权;陈文生;褚洪潮
3.高效液相色谱法测定大蒜愈伤组织中大蒜素的含量 [J], 刘兰;陈雅楠;尚云涛;范宝莉;王振英
4.高效液相色谱法测定大蒜素注射液中大蒜素含量 [J], 吴敏
5.高效液相色谱法测定大蒜油缓释片中大蒜素的含量 [J], 孙永慧;王桂姬;张颖;王建明
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对照品溶液的制备： 精密称取蒜氨酸对照品 ０．０１ｇ， 置 ２５ｍＬ 量瓶中， 加甲醇 － 水（ ６０： ４０） 适量使 溶解， 稀释至刻度， 摇匀， 即得。
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固 醇 高 、文 化 程 度 高 是 维 吾 尔 族 Ⅱ 型 糖 尿 病 发 生 的 危险因素。而适量水果的摄入和经常饮茶是维吾尔 族Ⅱ型糖尿病的发生的保护因素。
参考文献 ［ １］ 郭红卫．医学营养学．上海： 复旦大学出版社， ２００３： ８５． ［ ２］ Ｍａｇｇｉｅ Ｃ． Ｙ． ＮＧ， Ｓｈａｏ－ Ｃｈｉｎ Ｌｅｅ， Ｇａｒｙ Ｔ． Ｃ． ＫＯ， ｅｔ ａ１． Ｆａｍｉｌｙ
摘 要 目的： 建立大蒜的高效液相指纹图谱（ ＨＰＬＣ－ ＦＰ） ， 为大蒜的鉴别提供实验依据。方法： 色谱条件： 色谱 柱： 柱温： ３５℃； 流动相： 甲醇－ 水（ ４０∶６０） ； 流速： ０．５ｍＬ／ｍｉｎ； 检测波长： ２１４ｎｍ。结果： 不同产地的大蒜酶解产物的相似 度在 ０．９。结论： 该色谱图可作为大蒜的指纹图谱， 用于评价大蒜的质量。
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 ５ｕＬ 注入高效液相色谱仪， 依法测定。 ２．５ 结果 ２．５．１ １０ 批不同产地新鲜大蒜指纹图谱相似度比 较 指纹图谱的相似度比较见表 １。结果表明， １０ 批不同产地的大蒜杀酶后指纹图谱之间的相似度 在 ０．９ 以上， 具有较好的相关性， 且峰形基本一致。 ２．５．２ 新 鲜 大 蒜 的 指 纹 图 谱 及 各 项 技 术 参 数 在 １０ 批大蒜中以喀什沙门乡的蒜氨酸含量为最高， 选 择它作为参照图谱， 以蒜氨酸为参照物， 其相对保
供试品溶液的制备： 精密称取去皮大蒜约 １０ｇ， 精 密 称 定 加 入 ５０ｍＬ 甲 醇 置 于 食 品 加 工 机 中 破 碎 １５ 秒， 转移至 ２５０ｍＬ 三角烧瓶中， 再精密加入纯水
作者简介： 李燕菊（ １９７７－ ） ， 女， 在读药物分析硕士研究生。 基金项目： 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划（ 项目编号： ２００５１１１１２）
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新疆中医药 ２００７ 年 第 ２５ 卷 第 １ 期（ 总第 １０７ 期）
大蒜的高效液相指纹图谱初探（ 一）
李燕菊 １ 于鲁海 ２ 常军民 ３ （ １．新疆医科大学药学院药物分析教研室， 新疆 乌鲁木齐 ８３００５４； ２．新疆维吾尔自治区临床
药学研究所， 新疆 乌鲁木齐 ８３０００１； ３．新疆医科大学药学院， 新疆 乌鲁木齐 ８３００５４）
表 ３ １０ 批大蒜样品指纹峰的相对峰面积
共有峰号
药材批号
１
Ｓ
２
３
４
５
６
１ ０．７３６５ １．００００ ０．１４１４ ０．０８０１ ０．２１３７ ０．３９２８ ０．１１５８
２ １．１１８４ １．００００ ０．２４２９ ０．０６６９ ０．２７７９ ０．４１２０ ０．１０７３
３ １．４６６６ １．００００ ０．０９４６ ０．０３８３ ０．０６２６ ０．３４５４ ０．１２１０
ｅａｒｌｙ－ ｏｎｓｅｔ Ｔｙｐｅ ２ Ｄｉａｂｅｔｅｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｃａｒｅ， ２００１， ２４（ ４） ： ６６３－ ６７１． ［ ３］ 向红丁．１９９６ 年全国糖尿病流行特点基线调查报告． 中国糖尿 病杂志， １９９８， ６（ ３） ： １３１． ［ ４］ 张 巾 超．面 向 ２１ 世 纪 七 年 制 本 硕 连 读 内 科 学—糖 尿 病．北 京 ： 人民卫生出版社， ２００２：９６１－ ９９０．
安捷伦 １１００ 系列高效液相色谱仪 （ 美国） ： 西 贝乐 ＳＱ２１１９Ｃ 型多功能食品加工机（ 上海帅佳电子 科技有限公司） ； ＳＫ２２００ＬＨ 超声仪 （ 上海科导超声
仪器有限药学院提
供） 。 ２ 实验方法与结果 ２．１ 色谱条件
共有峰号
２
３
４
１．１９４ １．２５６ １．３０９
１．１９２ １．２５６ １．３１０
１．１９３ １．２５７ １．３１３
１．１９２ １．２５９ １．３１２
１．１８８ １．２５５ １．３１０
１．１９１ １．２５９ １．３１４
１．１８９ １．２５７ １．３１３
１．１９０ １．２５９ １．３１４
１．１８９ １．２５９ １．３１３
新疆中医药 ２００７ 年 第 ２５ 卷 第 １ 期（ 总第 １０７ 期）
１９
表 １ １０ 批指纹图谱的相似度比较
药材 批号
Ｓ１
Ｓ２
Ｓ３
Ｓ４
Ｓ５
Ｓ６
Ｓ７
Ｓ８
Ｓ９
Ｓ１０
对照指 纹图谱
Ｓ１ １
Ｓ２ ０．９７９ １
Ｓ３ ０．９２６ ０．９６５ １
Ｓ４ ０．９７ ０．９８６ ０．９８１ １
Ｓ５ ０．９５２ ０．９７８ ０．９９４ ０．９８７ １
［ ７］ 马爱国， 吴佩霞， 匡谊， 等．新疆维吾尔族城乡居民 ３３ 年来膳食 营养的变化．新疆卫生防疫， １９９５， １３（ ４） ： ２２２－ ２２４．
［ ８］ Ｊｉａｎ ａｎ Ｌｕａｎ， Ｐａｕｌ ０， Ｂｒｏｗｎｅ， ｅｔ ａ１．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｇｅｎｅ－ ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ａｔ ｔｈｅ ＰＰＡＲ ! ｌｏｃｕｓ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ， ２００１， ５０： ６８６－ ６９０．
７ ０．１６７５ １．００００ ０．０９１８ ０．０３７３ ０．０９６７ ０．２９７５ ０．１２２０
８ １．１３３０ １．００００ ０．０４９３ ０．０４２９ ０．１７８６ ０．３０４０ ０．１０１０
９ １．５１４９ １．００００ ０．０７１４ ０．０７１７ ０．２４８６ ０．３３４９ ０．０４６１
［ ９］ Ｆｒｅｄｅｒｉｃ Ｔｒｅｍｂｌａｙ， Ｃｈａｒｌｅｓ Ｌａｖｉｇｅｎｅ， Ｈｅｌｅｎｅ Ｊａｃｑｕｅｓ， ｅｔ ａ１．Ｄｅｆ－ ｅｃｔｉｖｅ ｉｎｓｕｌｉｎ－ ｉｎｄｕｃｅｄ ＧＬＵＴ４ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｓｋｅｌｅｔａｌ ｍｕｓｃｌｅ ｏｆ ｈｉｇｈ ｆａｔ－ ｆｅｄ ｒａｔｓ ｉｓ ａｓｓｏｃｉｓｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｉｎ ｂｏｔｈ Ａｋｔ／ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｂａｎｄ ａｔｙｐｉｃａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ， ２００１， ５０： １９０１－ １９０８． （ 收稿日期： ２００６－ ０４－ １０）
１０ １．３０１７ １．００００ ０．１１４５ ０．０４０９ ０．１１２０ ０．３２０５ ０．０４５８
图 １ 大蒜杀酶物的对照指纹图谱
留时间为 １．０， 标示了大蒜杀酶后， 共有 ７ 个共有 峰。相对保留时间见表 ２。１０ 批大蒜杀酶后， 指纹图 谱共有峰相对峰面积见表 ３。 ２．５．３ 指 纹 图 谱 及 共 有 峰 标 定 按 国 家 药 品 监 督 管理局“ 中药注射液指纹图谱技术研究的技术要求
１．１８９ １．２５９ １．３１５
１．１９０ １．２５６ １．３１１ ０．１６ ０．２９ ０．３０
５ １．５４７ １．５４７ １．５５０ １．５５１ １．５４７ １．５５１ １．５４９ １．５５０ １．５４９ １．５５１ １．５４８ ０．２７
６ １．６７４ １．６７４ １．６７７ １．６７８ １．６７４ １．６７８ １．６７７ １．６７８ １．６７７ １．６７９ １．６７５ ０．２７
［ ５］ 罗敏．Ⅱ型糖尿病相关基因的研究现状和展望．国外医学·内 分 泌学分册， ２００２， ２２（ ３） ： １４１－ １４５．
［ ６］ Ｍａｒｉａ Ｌ ｄｅ Ａ１ｖａ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ ａｒｏｕｎｄ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ．ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｆｅｄｅｒａｔｉｏｎ．２００２： ６－ １２．
Ｓ１０ ０．９４５ ０．９７６ ０．９９７ ０．９８８ ０．９９６ ０．９９４ ０．９９１ ０．９９５ ０．９９３ １
对照指 纹图谱
０．９５４
０．９８５ ０．９９５
０．９９
０．９９７
０．９９６ ０．９８９
０．９９６ ０．９９４ ０．９９８
１
３０ｍＬ 在 超 声 振 荡 器 中 振 荡 １５ｍｉｎ， 转 移 至 １００ｍＬ 量瓶， 水定容至刻度， 摇匀， 过滤。精密称取续滤液 １．０ｍＬ， 至 １０ｍＬ 量瓶中， 用甲醇 － 水（ ４０∶６０） 定容， 过 ０．４５ｕｍ 膜， 供分析用。 ２．３ 方法学考察 ２．３．１ 稳 定 性 试 验 按“ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ”项 下 方法， 制备样品分别在 ０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、１０ｈ、 １２ｈ、２４ｈ、３６ｈ、４８ｈ 测定， 并进行分析。结果表明， 各 共有峰的保留时间基本一致， 保留时间比值的 ＲＳＤ 为 ２．１８％。 ２．３．２ 精 密 度 试 验 按“ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ”项 下 方法， 制备样品连续进样 ５ 次， 进行日内精密度考 察。结果表明， 各共有峰的保留时间基本一致， 保留 时间比值的 ＲＳＤ 为 １．６７％ 。 ２．３．３ 重 复 性 试 验 取 样 品 ５ 份 ， 按“ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ”项 下 方 法 ， 制 成 供 试 液 ， 在 上 述 色 谱 条 件 下， 分别进样 ５ｕＬ， 进行重复性试验。结果表明， 各共 有峰的保留时间基本一致， 保留时间比值的 ＲＳＤ 为 １．５４％ 。 ２．４ 样品测定
关键词 大蒜； 蒜氨酸； 高效液相； 指纹图谱
大蒜是百合科 Ｌｉｌｉａｃｅａｃｅ 葱属植物大蒜（ Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｒｉｕｍ Ｌ．） 的鳞茎。含有丰富的氨基酸、维生素、微 量元素等。作为药食同源的植物， 大蒜在我国有着 悠久的使用历史。众所周知， 大蒜的功效成份是蒜 氨 酸（ Ａｌｌｉｉｎ） 、蒜 酶（ Ａｌｌｉｎａｓｅ） 及 催 化 裂 解 产 生 的 大 蒜 辣 素（ Ａｌｌｉｃｉｎ） 和 阿 霍 烯（ ｃｉｓ－ ａｊｏｅｎｅ， ｔｒａｎｓ－ ａｊｏｅｎｅ） 等 化 合 物 ［１］。 在 国 外 已 有 大 蒜 药 材 及 其 制 剂 的 质 量 标准。到目前为止， 未见有从整体上控制大蒜的质 量 的 报 道 ， 本 文 根 据 指 纹 图 谱 的 技 术 要 求 ［２］， 采 用 ＨＰＬＣ 法对大蒜进行指纹图谱的技术研究， 以期对 大蒜进行质量控制提供有效的方法。 １ 仪器与试药