第四章 急性毒性作用及其试验方法
毒理学——4
24
3．经皮肤染毒 脱毛：化学法脱毛或机械法脱毛 （体表面积的10%）。 染毒：局部涂敷受试物或大鼠、 小鼠浸尾法染毒。
25
4．经注射途径染毒
静脉注射或滴注；
腹腔注射； 肌肉注射； 皮下注射； 皮内注射； 椎管内注射
究和将研究结果外推到人提供依据。
58
（三）亚慢性毒性试验方法的要点
1. 实验动物的选择
(1) 物种和品系 实验动物对受试物的生物转化、生理生 化、毒性反应与人类相当或相似。
两种实验动物，啮齿类和非啮齿类。
59
(2) 性别、年龄和动物数 两种性别，每组雌雄各半；
13
适宜容积染毒
① 经口：20ml/kg(空腹动物)； ② 经皮：2ml/kg； ③ 静脉：1ml/kg(5min以上)； ④ 肌肉注射：0.5ml/kg(一个部位)； ⑤ 眼睛：0.01ml/每眼； ⑥ 直肠：0.5ml/kg； ⑦ 阴道：大鼠0.2ml，兔lml； ⑧ 吸入：2mg/L； ⑨ 鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。
吞咽胶囊：将受试物装入胶囊中，放至舌 后部，迫使动物咽下。 喂饲：将受试物掺入动物饲料或饮水中供 实验动物自行摄入。
18
2．经呼吸道染毒 吸入染毒 静式吸入染毒；
动式吸入染毒。
气管内注入
19
静式吸入染毒 方法：将实验动物置于有一定体积的密 闭容器中，加入液态或气态受试物，形成 一定浓度的受试物空气环境进行染毒。 优点：简单、方便、受试物消耗少，适 合于小鼠。 缺点：氧气减少；浓度不稳定；经皮吸 收；不适合稍大动物；挥发性。
急性毒性及长期毒性标准操作技术
急性毒性试验佚名试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。
一、啮齿类动物单次给药的毒性试验（一）试验条件1．动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。
选用其他动物应说明原因。
年龄一般为7-9周龄。
同批试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%。
实验前至少驯养观察1周，记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。
2．饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。
若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。
应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。
3．受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。
（二）试验方法：由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。
1．伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。
2．最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。
3．最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。
4．单次口服固定剂量方法（Fixed-dose procedure）。
选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。
实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。
如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。
根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。
急性毒性试验
试验步骤和操作要点
1
试验设计
2
确定试验物质的给药途径、剂量和
暴露时间，合理设计试验组和对照
组，以确保试验数据的可比性。
3
数据分析
4
收集和整理试验数据，进行统计分 析和结果解读，评估化学物质的毒
性潜力和危害等级。
试验准备
准备动物和试验物质，并遵守试验 室安全和伦理规定，保证试验过程 的准确性和可靠性。
试验操作
按照设定的方案进行实验操作，严 格控制剂量和暴露时间，记录动物 的毒性反应和不良效应。
试验结果的解读和评价标准
急性毒性试验结果一般以LD50值为指标进行解读，在国际上有一系列评价标准，用于评估化学物 质的毒性程度和危害等级。
试验的局限性和改进方向
1 动物模型的局限性 2 测试方法的改进
动物模型不能完全代 表人类生物反应，因 此在试验结果的解读 和评估时需要谨慎考 虑。
急性毒性试验
急性毒性试验是一种评价化学物质对生物体的短期毒性潜力的试验方法，通 过暴露一定剂量的物质给实验动物，观察其对动物的毒性反应以及产生的不 良效学物质对生物体的毒性程度及其可能产生的危害， 为了规范评估过程，国际上制定了一系列的试验方法和评价标准。
常用的试验方法和原理
需要进一步发展和改 进更精准、准确的试 验方法，以提高试验 结果的预测性和可比 性。
3 替代和替补模型
发展替代和替补模型， 例如体外细胞实验和 计算机模拟，以减少 对动物实验的依赖。
试验的应用领域和意义
急性毒性试验在化学品安全评估、药物研发、环境保护等领域具有重要意义， 为保障人类健康和环境安全提供科学依据。
LD50试验 通过确定半数致死剂量（LD50）来评估化学物质的毒性，以毫克/ 千克体重作为单位。 急性口服毒性试验 通过将一定剂量的物质通过口服给予 动物，观察其对动物的毒性反应，用于评估化学物质的毒害程度。 急性皮肤 毒性试验 通过将一定剂量的物质涂抹于动物皮肤上，观察皮肤反应和毒性症 状，用于评估化学物质的皮肤刺激和毒害作用。
急性毒性试验
Sx50=0.0307 logLD50及其95%可信限 =0.6329±1.96×0.0307=0.6329±0.0602 小鼠的经口LD50为4.29g/kg，其95%可信范围 为3.74~4.93g/kg
急性毒性评价
外源化学物相对毒性分级标准
急性毒性分级（WHO）
鱼类急性毒性分级
LD50的局限性
急性毒性试验方法
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h
之内多次接触外源化学物后，在短
期内所发生的毒性效应，包括致死 效应。
一次：指瞬间给实验动物染毒，如经
口、经静脉注射染毒。
24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强 度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小 有关。
20只动物的完全随机分配
完全随机分配后各组所属动物号
20只动物完全随机分配的结果
20只动物的完全随机分配
动物编号 随即数字 除4后余数 1 54 2 2 83 3 3 80 0 4 53 1 5 90 2 6 75 3 7 53 1 8 78 2 9 93 1 10 47 3 11 72 0 12 09 1 13 54 2 14 66 2 15 95 3 16 44 0 17 68 0 18 67 3 19 67 3 20 86 2
由急性毒性试验可得到两类毒性参数
上限参数 是以死亡为终点的毒性，包 括绝对致死量、半数致死量、最小致 死量、最大耐受量等；
下限参数 是以非致死性急性毒作用 为终点的毒性，包括急性阈剂量和无 作用剂量等。
用小动物试验可求出外源化学物对一种或几种 实验动物的急性LD50或LC50; 用 大 动 物 试 验 可 求 出 近 似 致 死 剂 量 （approximate lethal dose, ALD）; 根据LD50 （LC50 ）值可进行急性毒性分级，以 初步评价外源化学物对机体急性毒性大小和急 性毒作用的强度。
急性毒性试验
急性毒性试验试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。
一、啮齿类动物单次给药的毒性试验（一）试验条件1．动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。
选用其他动物应说明原因。
年龄一般为7-9周龄。
同批试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%。
实验前至少驯养观察1周，记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。
2．饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。
若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。
应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。
3．受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。
（二）试验方法：由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。
1．伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。
2．最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。
3．最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。
4．单次口服固定剂量方法（Fixed-doseprocedure）。
选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。
实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。
如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。
根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。
学习课件急性毒性实验内容
实验结果有助于确定药物的安全给药 剂量范围，避免治疗过程中出现不良 反应。
在化学品安全性评价中的应用
风险评估
急性毒性实验结果可以为化学品的风险 评估提供参考，帮助确定安全使用条件 。
VS
环境影响评估
对于可能对环境产生影响的化学品，急性 毒性实验有助于评估其对生态系统的潜在 危害。
实验限制与伦理考虑
学习课件：急性毒性实验 内容
汇报人：可编辑
2024-01-11
CATALOGUE
目 录
• 急性毒性实验概述 • 实验操作流程 • 实验结果分析 • 急性毒性实验的应用与限制 • 急性毒性实验的发展趋势与展望
01
CATALOGUE
急性毒性实验概述
定义与目的
定义
急性毒性实验是一种评估物质对 实验动物急性毒性的实验方法。
性。
实验后处理
01
02
03
04
动物安葬
在实验结束后，妥善处理动物 尸体，遵守相关规定。
数据整理与分析
对采集的数据进行整理、分析 ，评估实验结果。
撰写报告
根据实验结果撰写实验报告， 并按照要求进行提交。
实验总结与反思
对整个实验过程进行总结和反 思，提出改进意见和建议。
03
CATALOGUE
实验结果分析
结果解释与报告撰写
结果解释
根据实验数据和毒性分级，解释受试物质的毒性作用机制和潜在风险。
报告撰写
按照规范的格式和要求，撰写急性毒性实验的实验报告，包括实验目的、方法、 结果和结论等部分。
04
CATALOGUE
急性毒性实验的应用与限制
在药物研发中的应用
药物筛选
急性毒性实验可以初步评估候选药物 的毒性，为后续的药物研发提供依据 。
急性毒性实验的原理或应用
急性毒性实验的原理或应用引言急性毒性实验是评估一种物质对于生物体的毒性程度的一种常见实验方法。
它通过将物质暴露给实验动物，并观察动物在一定时间内的反应和死亡情况，来确定该物质的毒性程度。
急性毒性实验在医药、化工、环境保护等领域中具有广泛的应用。
原理急性毒性实验的原理基于以下几个方面：1.暴露：在实验中暴露的时间可以是短暂的，一般在24小时内。
此外，实验动物可以通过不同途径接触毒物，包括经口、经皮、经鼻等。
2.剂量：实验中使用的毒物剂量可以是单一剂量，也可以是逐渐增加的剂量。
这样可以观察到不同剂量对实验动物的不同影响。
3.考虑实验动物的种类：不同种类的实验动物对某种物质的反应可能不同。
通常在实验中使用小鼠、大鼠、兔子等。
4.观察指标：实验中观察的指标可以包括行为、生理参数和生化参数等。
例如，观察动物是否出现异常行为，检测动物的生理指标（如心率、体温、呼吸频率等）以及检测动物体内的生化指标（如血液中的生化参数）等。
5.记录和分析：对观察到的数据进行记录和分析，可以通过统计学方法来评估毒物的急性毒性程度。
应用急性毒性实验在以下几个领域中有广泛的应用：1.医药研究：在医药研究中，急性毒性实验经常用于评估新药物的毒性。
这可以帮助研究人员确定药物的安全剂量范围，并评估药物对实验动物的可能影响。
2.化学工业：在化学工业领域中，急性毒性实验可以用于评估化学品的毒性程度。
这有助于制定安全操作规程和处理方法，确保工作环境的安全。
3.环境保护：急性毒性实验可以用于评估某些化学物质对环境中生物的可能危害。
这有助于制定环境保护政策和监管措施，保护生态环境的健康。
4.毒物鉴定：对于涉嫌中毒的实验动物或人体的样本，可以通过急性毒性实验来确定可能的毒物。
这对于病例调查和刑事侦查都有一定的参考价值。
总结急性毒性实验是评估一种物质对生物体毒性程度的常用实验方法。
它通过将物质暴露于实验动物，并观察动物的反应和死亡情况来评估毒性。
该实验方法在医药、化工、环境保护等领域都有重要的应用。
4-1急性毒性试验概述及染毒方法
4-1急性毒性试验概述及染毒方法第一节急性毒性试验概述及染毒方法一、概念和试验目的(一) 急性毒性概念急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
但须指出化合物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的程度，可因所接触的化合物的质与量不同而异。
有的化合物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内，就可发生中毒症状，甚至死亡。
而有的化合物则在几天后才显现中毒症状和死亡，即迟发死亡。
此外，实验动物接触化合物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同。
凡经口接触和各种方式的注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内。
而经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程，所以“一次”含有时间因素。
(二) 实验目的1.求出受试化合物对一种或几种实验动物的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，以初步估计该化合物对人类毒害的危险性。
2.阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关系与中毒特征。
3.利用急性毒性试验方法研究化合物在机体内的生物转运和生物转化过程及其动力学变化。
也可用于研究急救治疗措施。
二、实验动物和染毒方法(一) 实验动物选择在卫生毒理学领域中，体内试验以实验动物为研究对象，最终是为了阐明受试外来化合物对人的急性危害性质和危害强度。
所以选择实验动物时，要求在其接触化合物之后的毒性反应，应当与人接触该化合物的毒性反应基本一致，虽然利用任何一种或几种实验动物的急性毒性结果向人外推都必须十分慎重，但这一选择实验动物的原则仍非常重要。
1.物种选择以选择哺乳动物为主。
目前实际应用中以大鼠和小鼠为主，尤以大鼠使用很多。
需指出大鼠并非对外来化合物都最敏感。
家兔常用于研究化合物的皮肤毒性，包括对粘膜的刺激。
猫、狗也用于急性毒性试验，但因价贵不易于大量使用。
猪为杂食动物，对一些化合物的生物效应表现与人有相似之处，尤其是皮肤结构与人较近似。
急性毒性实验
1 实验设备
2 实验环境
实验设备包括动物饲养箱、 注射器、生物安全柜等。
实验室应具备良好的通风 条件和必要的安全防护措 施。
3 实验操作
实验应按照标准操作程序 进行，确保结果的准确性 和可靠性。
实验结果分析
剂量-反应关系
分析不同剂量下实验对象的反 应情况，确定毒性的剂量响应 关系。
死亡率分析
计算不同剂量下实验对象的死 亡率，评估物质的致死能力。
实验流程
1
试验前
确定实验目标和方法，准备实验材料和设备。
2
试验进行
按照指定剂量和时间给予实验对象物质，并记录相关数据。
3
试验后
分析实验结果，评估物质的毒性程度。
实验对象和数量
动物实验对象
常用的动物实验对象包括小ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ、大鼠、兔子等。
细胞实验对象
细胞实验对象常用的细胞系包括人类细胞系和 动物细胞系。
实验条件
急性毒性实验
了解急性毒性实验的概述、流程、实验对象和数量、实验条件、实验结果分 析以及实验局限性。最后给出结论和建议。
实验概述
1 定义
急性毒性实验用于评估物 质在给定剂量和时间内对 生物体的毒性。
2 重要性
确定物质的毒性程度对安 全评估和风险控制至关重 要。
3 法规要求
许多国家和地区要求进行 急性毒性实验以确保产品 的安全性。
症状分析
观察实验对象的各种症状，了 解物质对生物体的影响。
实验局限性
1 动物模型的局限性
动物模型不一定能完全反映人体的生理和病理过程。
2 剂量和时间的局限性
实验中使用的剂量和时间可能与实际情况存在差异。
3 伦理道德的局限性
急性毒性试验方案
急性毒性试验方案急性毒性试验是评估单次或短时间内暴露给动物或人类的某种物质引起的致死或可逆的严重生理或行为异常的试验。
该试验方法是衡量化学物质的毒性的基本方法。
本文将介绍急性毒性试验的实施流程、试验动物的选取、试验总体方案和数据分析。
一、试验动物的选取：一般采用小鼠、大鼠、兔子等常见实验动物进行急性毒性试验。
实验前可选用以体重为基础的随机方法进行面部体检和组织检查，确保被选中的动物状态正常，无明显异常。
建议使用健康、年龄相当、性别相同的同种动物。
二、试验总体方案：（一）实验前准备① 确定药物的理论毒性LD50值。
② 检查试验动物的健康状况，重量平均分布。
③ 毒物制备：根据LD50值计算出适量的毒物浓度，制备用于实验的溶液。
（二）实验操作① 实验动物按照体重分组，随机分配到实验组和对照组。
② 实验组的动物分别接受毒性物质，对照组的动物接受纯水或生理盐水等无害物质。
③ 观察动物在接受测试物后出现的任何不良反应和明显症状。
④ 测试持续时间应不超过14天，每日记录实验动物的体重和水分摄入量，并定期检查动物的状态。
（三）数据分析① 研究数据分析应该包括生理指标评价、心理行为表现、体重变化评估等多个方面。
② 分析实验组和对照组的体重变化、摄入量等数据，并比较实验组和对照组的差异。
三、急性毒性试验的实施流程：② 准备用于实验的试验动物，并确保它们健康、无明显异常。
⑦ 分析实验组和对照组的数据，并计算出药物的LD50值。
四、结论：急性毒性试验是评估化学物质毒性的基本方法。
选择健康的、年龄相当的、性别相同的同种动物作为试验对象，并制定出详细的实验方案。
在实验过程中，需要注意观察动物情况和记录关键数据。
最后，根据实验数据计算出药物的LD50值并分析毒物的毒性程度。
研究人员应该严格把握实验过程，保证实验结果的可靠性和准确性。
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SE lg LD50 = d·[∑pi (1- pi )/ni ]1/2
其中，xk:最高剂量的对数； d：相邻两组剂量之比的对数；
pi：各组死亡率；
ni：各组动物数。 LD50的95%可信限为：
i：组数；
SElgLD50：标准误差对数； lg－1（lgLD50±1.96SELD50）
三、霍恩法 （ 也叫剂量递增法或流动平均法）
眼
降低或升高
其它
姿势正常、消瘦
2 观察时间
1）一般观察一周即可。因急性毒性实验中，动 物的中毒症状以及死亡，一般多出现在给予 被检物后24～48h以内。
2）如中毒反应出现较迟，主要在48h或3～4天后 出现，则观察期也必须相应延长至2周甚至4 周，特别是48～70h内。
第二节 急性毒性评价
一、 半数致死量和急性毒作用带
器官系统 观察项目 中毒后一般表现 姿态改变、叫声异常、不安、呆卧 少动 痉挛、震颤、运动失调、麻痹、惊 厥、强制性动作 易兴奋、知觉过敏或缺乏知觉 强直、驰缓 震颤、心动过速或过缓、心律不齐、 心搏过强或减弱 膨胀、凹陷、呕吐、腹泻、便秘 不成形、黑色或灰色
行为
中枢神经 系统 和躯体运 动系统
动作
二、急性毒性分级
目前，我国食品安全性毒理学评价程序中，借用国际上 的六级标准。
急性毒性 分级
大 鼠 经 口 LD50(mg/Kg 体重） ＜1
大约相当 于 体 重 7 0 Kg 人 的 致死剂量 稍尝，＜7 滴 7滴～1茶 匙 1 茶 匙 ～ 35g 35～350g
几种化学物质急性毒性举例
6级，极毒
1 特点
动物数量固定，剂量也固定，因而简单易行
使用动物数量较少 但可信限范围较大，不够精确 2 剂量分组
一般分四或五组，每组四或五只动物，各组中雌 鼠与雄鼠数应分别相等，该方法对剂量系列要求 严格，主要有两种：
1）剂量递增公比为：
即，
1.00 2.15 4.64
×10t
t=0,±1,±2，±3…… 1.00 2）剂量递增公比为： 即， 3.16 t=0,±1,±2，±3…… ×10t
3 急性毒性试验的目的
(1) 测定受试物对一种或几种实验动物的半数致 死量（LD50），以初步估计其对人类毒 害的 危险性。 (2) 了解受试物的毒性强度、性质和可能的靶器 官，阐明受试物急性毒性的剂量反应关系。 (3) 为进一步进行亚慢性和慢性试验以及其它特 殊毒性试验的剂量设常设5～10个剂量组，每组6～10只。首先确定最 高、最低量两个组，分别可使动物90％和10％死亡。
预试时按2倍或3倍递增剂量，每次三个剂量水平（如200， 400，800mg／Kg或100、300、900mg／Kg）测试动物死 亡率。
3 计算公式：
当p1＝0，pk＝1，上式可简化为
1 半数致死量
1）LD50值受多种因素影响： 包括：实验动物的物种、品系、性别、年龄、受试化 合物浓度及稀释溶液的性质、喂饲条件以及试验者的 熟练程度等。 2）存在一定的取样误差
3）LD50是一个点的界限，所以是一个质反应，而不能代
表受试物的急性特征。
2 急性毒作用带（acute effect zone, Zac）：
第四章 急性毒性作用 及其试验方法
第一节 急性毒性和急性毒性试验
一、概念和试验目的
1 急性毒性（acute toxicity）概念
指机体（人或实验动物）一次，或24小时 内多次接触外来化合物所引起的中毒效应（包 括死亡）。
2 急性毒性试验
是研究一次或24小时内多次给予实验动物被 检化学物后，观察在短期内（一般7天）引起动 物毒性表现的实验。
二、实验动物的选择
1 动物种类
一般常用大鼠或小鼠；如果同时用两种动物，其中一种 为非啮齿类如狗、猴等更为理想
2动物年龄
动物年龄不易过老过幼，一般应选用初成年者， 大、小鼠 为出生后2～3个月左右，体重一般分别为200g（180～240g） 和20g（18～25g）左右； 狗为生后一年左右。 所有动物进入实验室后，至少饲养观察一周，选取其健 康动物，体重相差应在10％以内，动物性别除另有要求， 雌雄分别试验外，一般常雌雄各半。
三、给予被检物的途径和方法
原则上要求与人类摄入该物质的实际途径相同， 对食品中化学物质来说，主要是经口给予，在急性 毒性试验中，多采用灌胃法。
四、观察指标和时间
1.观察指标
在测定LD50中，主要观察指标：
动物死亡数目,
动物主要中毒症状和开始出现的时间 死亡的时间也要记录。
啮齿类动物中毒表现观察项目
3 预试
（1） 以10，100，1000mg／Kg剂量，各用2～3只小鼠灌 胃。根据24h内所产生的效应和反应来初步判断毒性。
（2） 以215mg／Kg剂量用5只动物灌胃，以24h内产生的效 应和反应来初步判断毒性。
4查表
对刺激反 应性 肌肉张力
血液循环 系统
心区触诊
腹形 肠胃系统 粪便硬度 颜色
生殖泌尿 系统
阴户、乳 腺 阴茎 会阴部
膨胀、分泌增多 脱垂 被粪便污秽 发红、褶皱、松弛、出现皮疹、竖毛 分泌物增多、充血、苍白、紫绀、黄 疸 上睑下垂 眼球突出、眼球震颤 混浊
皮肤和毛 发 粘膜
颜色、张 力 结膜、口 腔 眼睑 眼球 透明度 直肠、脚 爪部的皮 肤温度 一般情况
2级， 实际无毒
5001 15000
～
3 5 0 ～ 1050g
化森锌（5200）驱蚊酯（8200）
1级，无毒
＞15000
＞1050g
福美铁（＞17000）
第三节 LD50计算方法
一、寇氏法（也叫平均剂量法）
1 原理
要求各组实验动物数相等，相邻组剂量成等比级数，若 满足此要求，则受试物剂量的对数与死亡率成比例关系 要求各剂量大致有一半组所产生的反应率在10～50％之 间，另一半在50～90％之间，最好还有反应率在0％及 100％的组，故需预试。
肉毒杆菌毒素（致死量30～ 50mg人）
5级，剧毒
1～50
对硫磷（6～15） 西力生（30） 磷化锌（47）
4级， 中等毒
51～500
倍硫磷（250～395）氯丹（57） 六六六（125）敌百虫（450） 二氯乙烷（770） 苯甲酸钠 （2000） 赛力散（2080）棉 草枯（5000）
3级，低毒
501～5000