卵磷脂的提取和纯化
卵磷脂的提取实验报告

一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器,如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能,如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂,通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤,得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂:无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取(1)称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄,加入30mL温热的95%乙醇,边加边搅拌均匀。
(2)将混合液冷却至室温,用漏斗过滤,收集滤液。
(3)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化(1)将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚,溶解后过滤。
(2)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定(1)三甲胺的检验:取少量卵磷脂,加入2~5mL氢氧化钠溶液,水浴加热15min,观察红色石蕊试纸是否变蓝,并嗅其气味。
(2)不饱和性检验:取少量卵磷脂,加入3%溴的四氯化碳溶液,振摇观察是否褪色。
(3)磷酸的检验:取少量卵磷脂,加入5~10滴95%乙醇溶液和5~10滴钼酸铵试剂,水浴加热5~10min,观察是否产生蓝色沉淀。
(4)甘油的检验:取少量卵磷脂,加入0.2g硫酸氢钾,小火加热,观察是否有水蒸气放出,嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验,成功从蛋黄中提取出卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀,得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验,验证了提取的卵磷脂纯度较高。
卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于动植物细胞膜中,对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。
本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂,了解其提取方法和鉴定技术,为进一步研究和应用提供参考。
1. 提取卵磷脂的方法。
首先,我们需要准备卵黄,将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂,使卵磷脂从卵黄中溶解出来。
然后,通过离心将上清液和沉淀分离,将上清液转移到锥形瓶中,加入等体积的0.9%氯化钠溶液,摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。
最后,将沉淀离心,得到卵磷脂。
2. 卵磷脂的鉴定。
为了鉴定卵磷脂的纯度和结构,我们可以利用薄层色谱和质谱技术。
首先,将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中,然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品,放入薄层色谱仪中进行分离。
通过比色试剂或者紫外灯照射,我们可以观察到卵磷脂的斑点,并计算Rf值来确定其纯度。
另外,质谱技术也是一种常用的鉴定方法,通过质谱仪的分析,我们可以得到卵磷脂分子的质谱图,进而确定其分子结构和质量。
3. 实验结果与讨论。
经过提取和鉴定,我们成功得到了卵磷脂,并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。
通过比色试剂和紫外灯照射,我们观察到了卵磷脂的斑点,并计算出了其Rf值,证明了其纯度。
同时,质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰,进一步确认了其结构和质量。
在实验过程中,我们也发现了一些问题,比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰,导致提取得到的卵磷脂不够纯净。
因此,在今后的实验中,我们需要进一步优化提取方法,提高卵磷脂的纯度。
4. 结论。
通过本次实验,我们成功提取和鉴定了卵磷脂,了解了其提取方法和鉴定技术。
同时,我们也发现了一些问题,为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。
希望通过我们的努力,能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。
实验3卵磷脂的提取和鉴定

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从组织或细胞中提取卵磷脂。
在提取过程中,卵磷脂会从组织 或细胞中释放出来,并溶解在有
机溶剂中。
通过离心和过滤等操作,去除杂 质和其他磷脂成分,得到纯度较
高的卵磷脂。
卵磷脂的鉴定方法
薄层色谱法
将提取的卵磷脂点样在薄层板上,用 适宜的展开剂展开,然后通过显色反 应(如喷洒硫酸氢钠、高锰酸钾等) 进行鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和作用
生理功能
卵磷脂是生物膜的主要成分,具有保 护细胞膜、促进脂质代谢、降低血脂 等作用,对维持人体正常生理功能至 关重要。
作用
卵磷脂在人体内具有重要的生理作用 ,如促进大脑发育、提高记忆力和智 力水平、抗疲劳等,同时还有抗氧化 、抗衰老的作用。
探究不同提取条件对卵磷脂提取效果的影响
步骤6
通过显微镜观察卵磷脂的形态和结构,并使用色谱柱进 行进一步分析。
04 实验结果与分析
卵磷脂提取效果的测定
01
02
03
卵磷脂含量
通过测定提取液中卵磷脂 的含量,可以评估卵磷脂 的提取效果。
提取率
提取率是卵磷脂实际提取 量与理论提取量的比值, 反映了提取效率。
纯度
通过色谱分析等方法测定 卵磷脂中的杂质含量,以 评估卵磷脂的纯度。
结果分析与讨论
提取效率分析
实验结果显示,使用离心分离技术能 够有效地去除杂质,提高卵磷脂的纯 度。但提取效率较低,可能是由于有 机溶剂用量较大或提取时间较长所致。
鉴定方法比较
红外光谱和质谱分析均能准确鉴定卵 磷脂的主要成分,但质谱分析具有更 高的灵敏度和特异性,能够更准确地 鉴定卵磷脂中的微量成分。
提取卵磷脂实验报告

一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。
2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。
3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。
它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。
本实验采用乙醇作为溶剂,通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂,并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器:离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 取鸡蛋,去壳取蛋黄,用玻璃棒搅拌成糊状。
2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇,搅拌均匀。
3. 将混合液倒入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使卵磷脂充分溶解。
4. 将烧杯置于冰箱中,低温处理2小时,使卵磷脂沉淀。
5. 取出烧杯,用漏斗和滤纸过滤沉淀物,得到卵磷脂粗提液。
6. 将粗提液倒入离心管中,离心分离,取下层卵磷脂沉淀。
7. 将沉淀物用乙醚洗涤,去除杂质,得到纯净的卵磷脂。
8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中,晾干至恒重。
五、实验结果与分析1. 提取结果:通过实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,得到白色蜡状物质。
2. 鉴定结果:a. 硫酸铜试验:取少量卵磷脂,加入硫酸铜溶液,振荡,若出现蓝色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有磷酸基团。
b. 氯化钠试验:取少量卵磷脂,加入氯化钠溶液,振荡,若出现白色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有胆碱。
六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂,能够有效提取蛋黄中的卵磷脂,提取率较高。
2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀,提高提取纯度。
3. 通过硫酸铜和氯化钠试验,对提取的卵磷脂进行了鉴定,验证了其纯度。
七、实验结论通过本实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,并对其进行了鉴定。
实验结果表明,本实验方法可行,提取的卵磷脂纯度较高,为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。
八、实验注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染。
卵磷脂的提取

卵磷脂的提取卵磷脂的提取一、实验原理卵磷脂为两性分子,既具有脂溶性,又具有亲水性,其等电点为6.7。
纯净的卵磷脂为淡黄色,液态,有清淡柔和的风味和香味。
卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中,也能溶于水中成为胶体状态,但不溶于丙酮,且不同的磷脂在有机溶剂中的溶解度不同,故可用这些有机溶剂来提取分离卵磷脂。
卵磷脂的提取方法有有机溶剂法;无机盐复合沉淀法;乙酸乙酯纯化法;超临界Co2萃取法;色谱法和酶法等。
有机溶剂法:根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的,该方法提取卵磷脂具有分离效率高,生产周期短,易实现自动化等优点,但所得卵磷脂纯度不高。
本实验采取有机溶剂法对卵磷脂进行粗提取,再进一步纯化。
二、试验材料的依据三、操作步骤1、原蛋液处理原料蛋去壳,蛋内容物搅拌、过滤,取培养皿称量原蛋液2g于50~55℃的真空干燥器中烘干,磨成粉末。
2、原料粉浸泡用乙醇和甲醇1:1的混合液浸泡,混合液的用量为原料粉的2倍,浸泡时醇液以高出粉面30~35cm为原则:先将混合醇液倒入烧杯中,然后边搅拌边加入原料粉,持续搅拌到醇浸液为金黄色,用倾泻法(即将沉淀上澄清液沿玻棒小心倾入漏斗,尽可能使沉淀留在杯中。
少量是为防止洗涤后溶液太多,多次是为是清洗的更干净)吸取金黄色醇浸液,沉淀物倒入细纱布中,压出余下的浸泡液,移至前浸液中。
3、蒸馏浓缩甲醇的沸点为66.78℃,乙醇的沸点为78.4℃,故将醇浸液加热至78~80℃时醇变成气体,由分馏柱进入冷凝管;再变成液体而积存于接受瓶中。
当蒸馏出2/3的醇液时,便可升高蒸馏温度达80~85℃,继续蒸馏至烧瓶中残液已呈浊厚油状物,而冷凝管中已不再滴下回收醇液时,即可停止蒸馏,准备进行沉淀净化。
沉淀净化是用丙酮进行。
方法是将平底(或圆底)大烧杯中残余的油状物倒出,加入油状物2倍量的丙酮,以便净化沉淀。
加丙酮时应用玻璃棒搅拌,静置,待其沉淀分层。
将上层浑浊的丙酮洗液倾出,加入同量的丙酮搅拌洗净,放入已干燥、称重且标记了的离心管中,4000r/min离心10min,这样重复两三次。
卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言:卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物,存在于生物体细胞膜中,具有重要的生理功能。
本实验旨在通过提取卵磷脂,了解其提取方法和应用。
实验材料与方法:材料:鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器:搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤:1. 取适量鸡蛋,将蛋黄与蛋清分离。
2. 将蛋黄放入搅拌器中,加入适量乙醇,搅拌均匀。
3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心,离心后分为两层,上层为乙醇层,下层为沉淀层。
4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
5. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。
6. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。
7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
8. 加入适量水,摇匀后放置静置。
9. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。
10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
11. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。
12. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。
13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。
14. 加入适量水,摇匀后放置静置。
15. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。
结果与讨论:经过多次提取,我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。
实验过程中,通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用,能够有效地分离出卵磷脂。
乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂,而氯化钠则用于调节溶液的渗透压,帮助分离。
氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂,能够与卵磷脂形成复合物,从而实现分离。
卵磷脂作为一种重要的生物大分子,具有多种生理功能。
首先,卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一,能够维持细胞膜的完整性和稳定性。
其次,卵磷脂还参与细胞信号传导,调节细胞功能。
此外,卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能,常被用作食品添加剂和药物载体。
在实际应用中,卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。
例如,可以根据不同来源的卵磷脂进行提取,以获得特定的卵磷脂种类。
卵磷脂的提取和纯化-学长

卵磷脂的提取和纯化浙江工业大学药学院罗杨春宋建林杰摘要:本实验探索以油菜花油脚为原料,制备高纯度卵磷脂的最佳条件,选择树脂类型、反应温度、反应时间、萃取剂等因素进行单因素实验。
实验结果表明:关键词:卵磷脂提取纯化离子交换树脂正文:1. 前言卵磷脂是一类具有重要生理活性和表面活性的生命物质,在生物细胞膜的功能和代谢方面具有十分重要的调节作用。
药用卵磷脂是磷脂类产品中最具高附加值的产品形态。
它不仅要求纯度高,而且要求乳化能力强,并达到静脉注射用的相关要求,其提取工艺和技术比较复杂、难度较大。
其中分离脑磷脂与卵磷脂方面为提高卵磷脂产品纯度较为关键的步骤。
国内外学者利用溶剂萃取法、超临界流体分离法、高效液相色谱法和柱层析法等方法分离纯化磷脂酰胆碱的分离效果一般不理想并且适应面窄;柱层析法是目前主要的研究方法,多数采用Al2O3为分离介质,但分离过程中PC和PE分离的选择性仍不理想,分离后PC中溶血磷脂(LPC)的分离不彻底,使该方法在制备注射级卵磷脂时受到极大限制。
利用大孔型离子交换树脂对PC,PE,LPC吸附能力的不同,可进行分离。
离子交换树脂法具有吸附容量大、选择性好、易于解吸、机械强度高、再生处理简单、吸附速度快等特点,从而达到高效的分离效果。
2.材料和方法2.1 药品与试剂自备粗卵磷脂(PC含量约为47%)丙酮(分析级)、无水乙醇(分析级)、超纯水 ZnCl2、CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl22.2 实验步骤2.2.1离子交换:用0.1mol/L NaOH 10mL碱洗、0.1mol/L Hcl 10mL酸洗各种树脂(D113、116、001x7、001x10、201x4)最后再水洗。
取一定量的CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl2、Zn(Ac)2配成浓度为0.05mol/L的溶液。
活化后的树脂各取1g至50ml具塞锥形瓶中,分别加入0.03mol/L的各溶液,恒温水浴震荡24 小时,水浴温度为36℃。
鸡蛋中卵磷脂提取鉴定

卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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汇报人:
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
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剂中,在密闭的层析缸中展层。
由于各种物质的结构和性质的不同,其在吸附 剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸
附,而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被
吸附剂吸附,而易被展层剂携带至较远的距离。这
样,各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被
吸附与解吸附,就表现出不同的迁移率而得以分离, 并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。
7、显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶
液,热风吹干至色斑显现。
五、实验结果
1、卵磷脂收率 卵磷脂收率 = 卵磷脂粗品重量 / 蛋黄重量×100% 2、计算各组分的Rf 值 3、判断卵磷脂粗提物的组分 四种磷脂标准品的Rf值分别为:溶血卵磷脂0.18;神 经鞘磷脂0.33;卵磷脂0.65;磷脂酰乙醇胺0.96
胆
碱
HO
二、实验原理
(一)卵磷脂的提取和纯化
磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,极难溶于丙酮; 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂,但不溶于 丙酮; 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
因此,本实验用乙醇、乙醚为溶剂,丙酮为沉淀剂,干燥后
获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为 白色蜡状物 ,与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈 黄褐色 。卵磷脂中的胆碱,
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1,2, 3,4列, 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来, 就得到 上表的 试验安 排。
(二)薄层层析
薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄 层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是 点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层
表1
抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
水平
1 2
影响因素 [乙醇]∶ [乙醚] 5∶1 4∶1 温度 4℃ 25℃ 时间(min) 10 20 料液比 1∶4 1∶5
3
3∶1
60℃
30
1∶6
表3
L9
表
按一般方法,如对4个因素3个水平的各种搭配都要考虑,共 需做3*3*3*3=81次试验,而用正交表只需做9次试验,即选用L9 表(L是正交表的代号,下标数字表示试验次数)。
卵磷脂的提取、纯化和鉴定
一、实验目的
1、学习和掌握卵磷脂的提取和鉴定方法; 2、掌握薄层层析的原理、方法和应用。
是细胞膜磷脂双分子层的重要成分。
卵磷脂又称磷脂酰胆碱,是甘油磷脂的一种。在动植物
体内均有分布,在动物的脑、精液、心、肝、肾上腺和 卵细胞中含量较多,蛋黄中含量可达8-10%。
其结构式:
在碱性溶液中可分解为三甲胺,而具有特异的鱼腥味,可用
于鉴定。
正交法实验设计
物质提取、纯化受到多种因素的影响,如抽提物 的种类及其配比、抽提条件(温度、时间等)都能影 响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法, 即用一特制的表格—正交表来安排试验,计算和分析 试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。 本实验运用正交法抽提物的种类及其配比、时间 温度和料液比这4个因素对卵磷脂提取和纯化的影响, 并求得在什么样的条件下可以达到最佳的试验效果。
(2)0. 2%羧甲基纤维素钠溶液;
(3)展层剂 :氯仿∶甲醇∶水(65∶25∶4) ;
(4)显色剂:1% 碘液。
四、实验步骤
(一)卵磷脂的提取
1、卵磷脂的粗提 蛋黄 10g 放入洁净的带塞三角瓶中,加入 95% 乙醇 40ml ,搅拌 15min 后,静置 15min ;然后加入 10ml 的乙 醚,搅拌15 min后,静置15min;过滤;滤渣进行二次提 取,加入乙醇与乙醚 (体积比为 3: 1)的混合液 30ml,搅拌、 静置一定时间;第二次过滤,合并二次滤液,加热浓缩至少 量,加入一定量丙酮除杂,卵磷脂即沉淀出来,即得到卵磷 脂粗品。
三、实验材料、仪器和试剂
(一)卵磷脂的提取和纯化
1、实验材料:鸡蛋黄
2、仪器:恒温水浴锅 蒸发皿 漏斗 磁力搅拌器 天平
3、试剂: 95%乙醇
乙醚
丙酮
(二)卵磷脂的薄层层析
1、实验材料:提取的卵磷脂
2、仪 器: 电热鼓风干燥箱、 层析玻璃板、 层析 缸、吹风机、小型喷雾器 。
3、试 剂:
(1)硅胶-G;
2.卵磷脂的纯化
取一定量的卵磷脂粗品,用无水乙醇溶解,得到约10% 的乙醇粗提液,加入相当于卵磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶 液,室温搅拌0.5h;分离沉淀物,加入适量冰丙酮(4℃) 洗涤,搅拌1h,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无 色止,得到白色腊状的精卵磷脂;干燥;称重。
(二)卵磷脂的薄层层析
试验号
影响因素 [乙醇]∶ [乙醚] 1 5∶ 1 1 5∶ 1 1 5∶ 1 温度 1 4℃ 2 25℃ 3 60℃ 时间(min) 1 10 2 20 3 30 料液比 1 1∶ 4 2 1∶ 5 3 1∶ 6
试验结果
表 4 试 验 安 排
1 2 3
4
5 6 7 8 9
2 4∶ 1
2 4∶ 1 2 4∶ 1 3 3∶ 1 3 3∶ 1 3 3∶ 1
1、调浆:称取硅胶-G 4.5g →烧杯→ 12ml 0. 2%羧甲 基纤维素钠溶液→用玻璃棒调匀搅拌为浆状液。 2、涂布:取洁净、干燥玻璃板一块→下衬一张白纸→ 在桌面上放平→用烧杯将浆状物均匀倒在玻璃板上, 从一端开始,保持均匀一致,涂布面积1 ~4/5 。 3、干燥:在室温下凉干2分钟→60℃干燥箱烘30分钟。 4、活化:将干燥箱升温至120 ℃ ,活化30分钟后,关 闭电源,当玻璃板面温度降至不烫手时取出。
5、点样:样点距玻璃板一端下缘1cm ,相互间隔
1~1.2 cm ;每位点重复点五次,每次用冷风吹干 后再点,每次点样直径不超过2mm 。 6、展层:在层析缸中加入展层剂0.5cm深,加盖平 衡30分钟,将点样端浸入,密闭展层10-30min。后
取出薄层板,标出展层剂前沿位置,用电吹风热风
将薄层板吹干。
1 4℃
2 25℃ 3 60℃ 1 4℃ 2 25℃ 3 60℃
2 20
3 30 1 10 3 30 1 10 2 20
3 1∶ 6
1 1∶ 4 2 1∶ 5 2 1∶ 5 3 1∶ 6 1 1∶ 4
I (I水平试验结果总合) II (II水平试验结果总合) III(III水平试验结果总合) I/3 II/3 III/3 级差