14.实验十四 从蛋黄中提取卵磷脂
卵磷脂的提取实验报告
一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。
2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。
3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。
4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。
二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。
本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。
2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。
四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。
（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。
2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。
3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。
（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。
（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。
（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。
3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。
蛋黄中卵磷脂的提取项目报告
序言卵磷脂是过去五十年间既蛋白质、维生素被发现的最重要的营养素。
它没有副作用，却在抗击疾病和促进健康方面有着稳定、长远、整体的效果。
越来越多的营养学家、药物学家和医学家投身到对卵磷脂的研究中去。
越来越多的国际权威研究组织为卵磷脂对人类健康的神奇作用都给予高度的评价！1996年9月在布鲁塞尔召开的卵磷脂国际会议上，赢得了世界营养专家、药物学家和医学家的普遍认同；1997年第七届卵磷脂国际会议曾作出结论：“总结这些研究成果，建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于幼儿的智力发育是很重要的。
”1998被联合国粮农组织(FAO)列为世界五大营养食品之一的高度认可1999在美国食品与药物管理委员会（FDA）的批准下，所有的婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。
2001年被美国时代杂志上评选为“二十一世纪最伟大的健康食品”卵磷脂集中存在于脑及神经系统，血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官。
是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。
卵磷脂在人体中占体重的1%左右，但在大脑中却占到脑重量的30%；神经系统机能低下带来的疾病，如焦躁不安，食欲不振，耳鸣，性无能力，神经性下痢，习常性便秘，以及神经传达物质缺乏所带来的痴呆症，内存力减退，每天充分地补充卵磷脂，会收到很好的疗效。
——麻省综合医院的J. H.克劳顿博士啮齿动物口服由大豆卵磷脂合成的磷脂醚丝氨酸能够改善大脑功能，预防老年性痴呆症——日本东京“Yakult Central Institute for Microbiological Research”的研究人员称大豆卵磷脂为天然营养食品，几乎没有什么副作用，每天吃多一点也没有危险。
——世界卫生组织（WHO）用卵磷脂饲育怀孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后代。
——美国北卡罗来纳州DUKE大学心理学教授药学博士沃伦来克“总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于她们的婴儿的智力发育是很重要的。
蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告
实验申请实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。
辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的：1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。
实验原理：卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。
可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。
吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。
在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。
在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。
参考文献： 刘宝全，所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。
用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
蛋黄卵磷脂的提取
蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2.更好的理解和利用相似相容原理。
3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
卵磷脂实验报告答案
一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法。
2. 学会使用光谱分析法鉴定卵磷脂的纯度。
3. 了解卵磷脂的生物学功能及其在食品和医药领域的应用。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，属于磷脂类，由磷酸、脂肪酸、甘油和胆碱等成分组成。
卵磷脂具有降低血液中胆固醇、改善脑功能、增强免疫力等生物学功能。
本实验采用乙醇提取法从蛋黄中提取卵磷脂，并通过光谱分析法鉴定其纯度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蛋黄、乙醇、正己烷、蒸馏水、硫酸、碘化钾、淀粉、硅胶、层析板、紫外灯、旋转蒸发仪、分光光度计等。
2. 实验试剂：无水乙醇、正己烷、碘化钾、淀粉、硅胶、硫酸等。
四、实验步骤1. 卵磷脂提取（1）取一定量的蛋黄，加入适量的无水乙醇，充分搅拌，使蛋黄中的卵磷脂溶解。
（2）将溶液转移至分液漏斗中，加入适量的正己烷，振荡，静置分层。
（3）取下层正己烷层，通过旋转蒸发仪去除溶剂，得到卵磷脂粗品。
2. 卵磷脂鉴定（1）取少量卵磷脂粗品，加入适量的硫酸，充分溶解。
（2）使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度值。
（3）以硫酸溶液为空白对照，计算卵磷脂的纯度。
五、实验结果与分析1. 卵磷脂提取实验中，通过乙醇提取法成功从蛋黄中提取了卵磷脂。
提取过程中，蛋黄中的中性脂肪和卵磷脂在乙醇中溶解，通过正己烷的萃取，实现了卵磷脂的分离。
2. 卵磷脂鉴定实验结果显示，卵磷脂在特定波长下的吸光度值与纯度呈正相关。
通过计算，得到卵磷脂的纯度为95.6%，说明实验提取的卵磷脂纯度较高。
六、实验讨论1. 实验中，卵磷脂的提取效果与乙醇的浓度、蛋黄的量、搅拌时间等因素有关。
本实验中，采用适量的乙醇、适量的蛋黄和充分的搅拌，提高了卵磷脂的提取效率。
2. 卵磷脂的鉴定方法采用光谱分析法，具有快速、简便、准确等优点。
通过测定特定波长下的吸光度值，可以较为准确地判断卵磷脂的纯度。
七、实验结论1. 本实验成功从蛋黄中提取了卵磷脂，并采用光谱分析法对其纯度进行了鉴定。
蛋黄中提取卵磷脂技术
蛋黄中提取卵磷脂技术人和动物的肾、肝、小肠和其他器官内均有卵磷脂酶存在，卵磷脂首先水解而生成甘油、脂肪酸、磷酸及胆碱，其中胆碱能在肝脏中对脂肪代谢起作用。
最重要的是它能参与合成乙酰胆碱而成为神经系统活动的重要物质。
在药用方面，可作强身滋补剂，又能治疗婴儿湿疹，可配制成注射剂及乳剂应用，又可作生物试剂，用于细菌培养，其中尤以培养固氮菌及磷菌效果很好。
1卵磷脂的特性卵磷脂主要存在于蛋黄中，含量为10%左右。
卵磷脂溶于乙醚、乙醇、甲醇、三氯甲烷等脂肪溶剂中，但不能溶解于丙酮，也不溶解于水，它的亲水性很强，能在水中膨胀而生成乳状液和胶体溶液，卵磷脂也能与酸、碱和其他盐类如氯化镉等相结合。
卵磷脂一般为淡黄色，但由于卵磷脂分子中含有不饱和脂肪酸，所以很容易氧化而逐渐由淡黄色变为棕褐色。
卵磷脂在空气中易被氧化，同时它能与蛋白质及其他物质生成化合物，所以卵磷脂一般很难得到结晶状态，而是无晶性物质。
2卵磷脂的提取2.1原料及其处理鸡蛋或变质发臭的次劣蛋及全蛋粉、蛋黄粉、冰全蛋和冰蛋黄，均可用于提炼卵磷脂。
除已成为干燥状态的全蛋粉和蛋黄粉外，其他原料还要经过一定的处理。
将鸡蛋或变质发臭的次劣蛋放在存器内，送入-10℃冷库内，使蛋的内容物凝固，然后取出，打蛋壳，将蛋黄分离出来，集中在铝质存器或搪瓷盘中。
如果黄白不能分离的变质蛋或打开壳后取出的蛋液，黄白不能分离的，若不及时提炼，存放在搪瓷盘中，也应送入-10℃冷库里贮存备用。
变质发臭的次劣冰蛋，要分装在搪瓷盘或铝质盘里贮存备用。
将上述原料放入烘箱或烘房内，在55℃下烘6h左右便成干燥状态，研磨成粉末，贮存备用。
2.2提炼卵磷脂2.2.1浸提2.2.1.1浸液的配制处理过的原料（即干燥蛋粉）1份，96%乙醇1份，98.5%甲醇1份。
2.2.1.2浸泡将上面配制好的醇浸液放入大釉缸中，徐徐加入干燥蛋粉，边加边搅，蛋粉加完后，再继续不断地搅拌4～5h。
醇浸液的液面务必高出原料面约30cm，搅拌4～5h后放在室温下使其继续浸泡24～48h，甚至更长时间。
鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
注意事项
1. 注意安全：本实验中的乙醚、丙酮及乙醇 均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。
2. 实验过程要细致，培养耐心。
精品课件
将上述加热过的溶液过滤。滤液性状：
2.磷酸的检验 取干净试管一支，加入10滴上述滤液，加入10滴95%乙
醇，摇匀，再加入10滴钼酸铵试剂，观察现象；最后将试管 放入热水浴中加热5～10min，观察有何变化。
精品课件
七、思考题
1. 卵磷酯的用途？ 2. 医药工业中制备卵磷酯的方法？ 3. 本实验有哪些步骤可以改进？ 4. 文字与照片记录实验过程的重要性？ 5. 通风橱的重要性？
并以希腊文命名为Lecithos（
卵磷脂）。
精品课件
二、卵磷脂的理化性质
• 化学名称：磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine） • 简称：PC • 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制
取或精制方法、储存条件不同被氧化而呈现淡黄色至棕色 。白色蜡状物质，无熔点，有旋光性，在空气中因不饱和 脂肪酸烃链氧化而变色。极易溶于乙醚及乙醇，不溶于水 和丙酮 • 磷脂酰胆碱（PC）在醇中的溶解度比磷脂酰乙醇胺（ PE)及磷脂酰肌醇（PI）高，故根据溶解性能的不同使之 分离提纯。
精品课件
6、有效地化解胆结石
• 体内过多的胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石，胆结石90% 是由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂，此外还有水份、 胆固醇、矿物质及色素等，卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、 消化及吸收，从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄 取一定量的卵磷脂可以有效地防止胆结石的形成，并对已形成 的胆结石也能起到化解的作用。
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g （两吸管）蛋黄于50 mL小烧杯中
提取卵磷脂实验报告
一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。
2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。
3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。
二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜中。
它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。
卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。
本实验采用乙醇作为溶剂，通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂，并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器：离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 取鸡蛋，去壳取蛋黄，用玻璃棒搅拌成糊状。
2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇，搅拌均匀。
3. 将混合液倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌，使卵磷脂充分溶解。
4. 将烧杯置于冰箱中，低温处理2小时，使卵磷脂沉淀。
5. 取出烧杯，用漏斗和滤纸过滤沉淀物，得到卵磷脂粗提液。
6. 将粗提液倒入离心管中，离心分离，取下层卵磷脂沉淀。
7. 将沉淀物用乙醚洗涤，去除杂质，得到纯净的卵磷脂。
8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中，晾干至恒重。
五、实验结果与分析1. 提取结果：通过实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，得到白色蜡状物质。
2. 鉴定结果：a. 硫酸铜试验：取少量卵磷脂，加入硫酸铜溶液，振荡，若出现蓝色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有磷酸基团。
b. 氯化钠试验：取少量卵磷脂，加入氯化钠溶液，振荡，若出现白色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有胆碱。
六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂，能够有效提取蛋黄中的卵磷脂，提取率较高。
2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀，提高提取纯度。
3. 通过硫酸铜和氯化钠试验，对提取的卵磷脂进行了鉴定，验证了其纯度。
七、实验结论通过本实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，并对其进行了鉴定。
实验结果表明，本实验方法可行，提取的卵磷脂纯度较高，为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。
八、实验注意事项1. 实验过程中，注意操作规范，避免交叉污染。
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一、实验目的
1. 掌握抽滤等基本操作 2.了解从蛋黄中提取卵磷脂的实验方 法
二、实验原理
结构
卵磷脂是磷脂酸的衍生物、别名为磷脂酰胆碱。它 由磷酸、甘油、高级脂肪酸和胆碱组成，其结构式 为：
二、实验原理
性质
1、卵磷脂分子中同时具有亲水基团和亲油基 团、具有良好的乳化性能。
5、加热时，会促使胆碱分解，产生三甲胺的臭味。
6、加硝酸酸化，脂肪酸析出，溶液变浑浊，加酸铅 有脂肪酸铅盐生成，浑浊进一步增强。
7、生成的氢氧化铜沉淀，因水解液中的甘油与之反 应，生成甘油配合物，沉淀溶解。
思考题
1、蛋黄中分离卵磷根据什么原理？ 2、卵磷脂可以化，从结构上分析应做何 解释？
注解和实验指导
1、第一次减压过滤，因刚析出的醇中不溶物很细以 及有少许水分，滤出物浑浊，放置后继续有沉淀析出， 需合并液后，以原布氏漏斗（不换滤纸）反复滤清。
2、蒸去乙醇时，可能最后有少许水分，需搅动加速 蒸发。
3、黄色油状物蒸干后，蒸发皿上的油状物一定要使 其溶于氯仿中，否则会带入杂质。
4、搅动时，析出的卵磷脂可附于玻璃棒上，成团状。
2、可溶于乙醇、乙醚、氯仿，不溶于丙酮。
3、卵磷脂在碱性溶液中加热水解：甘油、脂 肪酸盐、磷酸盐、胆碱
二、实验原理
提取流程
蛋 乙醇提取
残渣
黄
（蛋白、脑磷脂等）
（
含 蛋 白 、
提取液 去乙醇 油状物 （脂肪、卵磷脂等）
脂 肪
氯仿
氯仿-丙酮溶液
、 卵 磷
氯仿溶液 丙酮（脂肪）Fra bibliotek脂 、
沉淀
脑 磷
（卵磷脂）
四、实验步骤
二、卵磷脂水解及鉴定
1.水解：取一支干燥大试管，加入提取的一 半量的卵磷脂，并加入5mL200g/L氢氧化钠溶 液，放入沸水浴中加热10min，并用玻璃棒加 以搅拌，使卵磷脂水解，冷却后，在玻璃斗 中用棉花过滤。滤液供下面检查用。
四、实验步骤
2.鉴定：
脂肪酸的检查：取棉花上沉淀少许，加1滴氢氧化钠溶 液与5mL水，用玻璃棒搅使其溶解，在玻璃漏斗中用棉 花过滤得澄清液，以硝酸酸化后加入醋酸铅2滴，观察 溶液的变化。 甘油的检查：取试管一支，加入1mL硫酸铜溶液，2滴 氢氧化钠溶液，振摇；有氢氧化铜沉淀生成，加入1mL 水解液振摇，观察所得结果。
脂
等
）
三、仪器及试剂
仪器：
研钵，布氏漏斗、抽滤瓶、蒸发皿，棉花，大试管 玻璃棒、玻璃漏斗
试剂：
乙醇（95%），氯仿，熟鸡蛋黄，丙酮，硝酸，硫酸 铜（ 100g/L ），氢氧化钠（200g/L），醋酸铅 （ 100g/L ）
四、实验步骤
一、卵磷脂提取
1、取熟鸡蛋黄一只于研钵中研细，加入10mL95%乙醇研磨， 再加入10mL95%乙醇充分研磨，减压过滤。（充分滤干） 2、滤渣移入研钵、加入10mL95%乙醇，减压过滤，合并两 次滤液于蒸发皿。（如浑浊，再过滤一次） 3、滤液水浴除去乙醇得黄色油状物后冷却至室温。 4、黄色油状物加入5mL氯仿搅拌使其完全溶解，然后搅拌 下慢慢加入10mL丙酮，搅动使卵磷脂尽量析出，抽滤，得 固体物质卵磷脂，待检。