色谱柱的日常维护

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色谱柱的使用注意事项及维护 色谱柱如何操作

色谱柱的使用注意事项及维护 色谱柱如何操作

色谱柱的使用注意事项及维护色谱柱如何操作在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过在日常分别分析工作中,色谱柱的正确使用和维护特别紧要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。

(1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。

必需防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

(2)假如仪器用来做仪器分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。

(3)避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形;柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料,因此在调整流速时应当缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

(4)应渐渐更改溶剂的构成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂更改为全部是水,反之亦然。

(5)如使用柱温掌控装置时,应注意在通人流动相后才能升温。

(6)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会快速降低柱效。

(7)选择使用适合的流动相,以避开固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避开分析柱中的硅胶基质被溶解。

(8)避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。

保护柱一般是填有相像固定相的短柱。

保护柱可以而且应当常常更换。

(9)常常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50—75mL。

(10)保存色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。

色谱柱的保养 色谱柱如何做好保养

色谱柱的保养 色谱柱如何做好保养

色谱柱的保养色谱柱如何做好保养在正常情况下,色谱柱至少可以使用3—6个月,能完成数百次以上的分别。

但是,若操作不慎,将使色谱柱很易损坏而不能使用。

因此为了保持柱效、柱容量及渗透性,必需对色谱柱进行认真地保养。

1.色谱柱极在正常情况下,色谱柱至少可以使用3—6个月,能完成数百次以上的分别。

但是,若操作不慎,将使色谱柱很易损坏而不能使用。

因此为了保持柱效、柱容量及渗透性,必需对色谱柱进行认真地保养。

1.色谱柱极易被微小的颗粒杂质培塞,使操作压力速上升而无法使用,因此必需将流动相认真地蒸馏或用0.45μm孔径的滤膜过滤。

在流动相组贮槽与色谱柱间,安装0.45μm孔径的过滤器。

在柱子上端接头处装上多孔过滤片,以防止固体颗粒进入色谱柱中。

在水溶液流动相中,细菌简单生长,可能堵塞筛板加入0.01%NoHa 能防止能防止细菌生长。

2.可以使用进祥阀进样,以防止注射器进样时、注射隔膜碎屑堵塞柱子入口。

3.对硅胶基键合相填科,水溶液流动相的PH值不得超出2—8.5的范围,使温度不宜过高。

柱子在酸性或碱性条件下使用之后。

应依次用水、甲醇清洗,对短时间不用而需要较长时间保存的柱子,要用纯甲清洗,柱子两端用金属螺帽封闭,保存于干净的有机溶剂中。

4.要防止色谱柱被振动或撞击,否则柱内填料床层产生裂缝和空隙,会使色谱峰显现“驼峰”或“对峰”。

5.要防止流动相逆向流动,否则将使固定相层位移,柱效下降。

6.使用保护柱。

连续注射含有未被洗脱样品时,会使柱效下降,保留值更改。

为了延长柱寿命,在进样阀和分析柱间加上保护柱,其长度一般为3—5cm,填充与分析柱性质相像的表面多孔型固定相,因此可干法填装。

而且价廉、更换简单。

试验表明,使用保护柱后,除了使扩为零的组分的塔板数削减外,其柱效下降很少。

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色谱柱日常维护的一些方法

色谱柱日常维护的一些方法

色谱柱日常维护的一些方法一、流动相的pH应在使用范围内以硅胶为基质的反相色谱柱的pH范围为2~9,流动相超过其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,寿命变短。

二、去除样品和流动相汇总的固体颗粒样品和流动相中含有固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,不仅会引起柱压的升高,而且也会引起柱效下降。

因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,碳硫分析仪在分析前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45um滤膜。

三、使用保护柱或在线过滤器保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱筛板孔径相同,因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。

由于柱压升高在分析故障中占很大比例,因此除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。

四、正确使用缓冲盐缓冲盐使用不当会使其在流动相(含有机溶剂)中析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻碍了基质上的键合的碳链自由舒展,使用色谱柱的保留能力下降,柱效降低。

建议使用前要过滤,使用后要冲洗。

具体方法如下:1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需要过滤流动相1.0ml/min流速冲洗60min.2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过滤流动相似1.0ml/min流速冲洗60min;分析完成后,碳硫分析仪再用该过滤流动以1.0ml/min 冲洗色谱柱120min。

含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。

五、柱清洗方法:1、未使用缓冲盐:每天分析完成后,用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱60min。

2、使用过缓冲盐:分析完成后,先后用上述方法除去缓冲盐,然后再用纯甲醇或乙腈反向冲洗色谱柱60min。

色谱柱的维护与保养

色谱柱的维护与保养

色谱柱的维护与保养一、C8及C18反相色谱柱(新的色谱柱)应该在自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。

使用前应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。

具体步骤如下:(1)准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇,冲洗色谱仪器系统,保证仪器系统管路干净。

(新柱老化前,此步决不可忽略)(2)将色谱柱反向连接,不接检测器。

用水-有机相(90:10~95:5),以0.3~0.6ml/min流速冲洗20~30min。

(目的是冲洗出柱入口端无机杂物与筛板孔杂物,使筛板正常)(3)再将色谱柱正向连接,不接检测器。

用水-有机相(90:10~95:5),以0.3~0.6ml/min流速冲洗20~30min。

(目的是冲洗出柱出口端无机杂物与筛板孔杂物,使筛板正常)(4)连接检测器,开启柱温达30℃~40℃,用水-有机相(90:10~95:5),以0.3~0.6ml/min流速冲洗4h以上。

(目的是充饱和色谱柱,去除柱内空气)(5)用水-有机相(10:90~5:95),以0.3~0.6ml/min流速冲洗2h以上[或在120min内以水-有机相(95:5→0:100)梯度变化,以0.3~0.6ml/min流速冲洗]→再用100%有机溶剂,以0.3~0.6ml/min流速冲洗1h以上→最后用100%有机溶剂,以1ml/min流速冲洗1h以上。

(目的是老化色谱柱)(6)在平衡前根据水相-有机相的比例,首先调整水-有机相的比例接近流动相水相-有机相的比例,以1ml/min流速冲洗30左右(目的是相平衡过渡)。

如果流动相中含有缓冲盐,决不可在柱老化后立即用流动相平衡,必需先用90%以上水进行预平衡30min以上,否则,会导致缓冲盐在柱内析出结晶,严重时会将新柱永久不可逆地损坏。

(7)然后更换成新制并经0.45um滤膜过滤,超声脱气后的流动相,按检测方法平衡至少1h,待基线稳定后,开始进样检测。

相色谱柱的保养与维护

相色谱柱的保养与维护

相色谱柱的保养与维护
相色谱柱是高精度仪器,需要进行专业的保养与维护,以保证其正常使用和延长使用寿命。

以下是相色谱柱的保养与维护方法:
1.保持干燥:相色谱柱应该存放在干燥、阴凉、通风的地方。

2.避免受力:安装相色谱柱时,应该根据操作手册准确安装,不强行扭曲、移动或者碰撞柱子。

以免影响柱内填料的均匀性。

3.避免受污物:在使用相色谱柱之前,需要清洁检查进样口,以保证样品的干净度。

另外,避免塞入颗粒物质。

4.定期清洁:使用过程中的一些尘垢,会附着在柱外表面。

可以用专用清洗剂或者乙醇进行清洗。

不可使用有机溶剂。

5.恰当使用:相色谱柱在使用过程中,需要根据操作手册进行良好的操作,避免流速过快、被串染、被污染等影响柱子使用寿命的问题。

6.正确仓储:在不使用相色谱柱时,应当拆下接头,用压板杆和塞子封闭固定孔、流出口,避免灰尘、水分等杂质污染柱子。

总之,保养相色谱柱的关键是要注意细节、方法科学,以保证柱子完好可用、长寿。

色谱柱使用维护及解决方案

色谱柱使用维护及解决方案

色谱柱使用维护及解决方案色谱柱使用维护1、色谱柱的使用说明:(1)色谱柱使用前注意事项:色谱柱的储存液无特别说明,均为评价报告所示的流动相。

在使用前,确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出,堵塞色谱柱。

(2)流动相:流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水可以是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。

另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0,BDSC18适合于碱性化合物,PH值适用范围为 2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并完全置换掉原来所使用的流动相。

(3)样品:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时,全部的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存:(1)反相色谱柱每天试验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。

注意:不能用纯水冲洗柱子,应当在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。

(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必需存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度可以是室温。

3、色谱柱的再生:由于色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的加添,会显现色谱峰高降低,峰宽加大或显现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

色谱柱的维护保养

• 分辨率 3/4 = 2.06 • 分辨率 4/5 = 1.89
优化后
• 峰宽 – 峰3: 0.057 min – 峰4: 0.076 min – 峰5: 0.099 min
• 分辨率 3/4 = 2.73 • 分辨率 4/5 = 2.35
优化前
DAD1 B, Sig=254,8 Ref=off (F:\PROJECTS\0217_M~1\IN-PRO~1\INSTRU~1\CONFIG07.D) mAU
色谱柱的维护保养
第5页
收到新色谱柱
• 核实色谱柱信息 – 是你订购色谱柱吗? – 规格是否正确? – 固定相是否正确?
• 检验物理性损坏 • 用标准测试样品在标准条件下测试柱子,以验证柱效 • 每支菲罗门色谱柱都经过单独检测
色谱柱的维护保养
第6页
管路和接头
• 色谱性能取决于整个系统,而不但仅是色谱柱 • 管路和接头会造成系统死体积 • 系统死体积会造成:
Nitroaromatics
4
3
4
3
1
2
7 56
5
6
7
1
2
2.0 Time (min)
Kinetex™ 2.6 µm C18 100 x 4.6 mm
36
色谱柱的维护保养
3.0
3.0
1. HMX 2. RDX 3. 1,3,5-Trinitrobenzene 4. 1,3-Dinitrobenzene 5. Nitrobenzene 6. 2,4,6-Trinitrotoluene 7. 2,4-Dinitrotoluene
23 1
1.0 Time (min)
Kinetex™ 2.6 µm C18 50 x 2.1 mm

液相色谱柱的日常维护保养

液相色谱柱的日常维护保养液相色谱柱是一种常见且重要的分析仪器,在实验室中被广泛应用。

为了保证液相色谱柱的良好工作状态和分析结果的准确性,日常维护保养是必不可少的。

预测维护在实验过程中,对液相色谱柱的使用会产生一定程度的损耗。

因此,在使用液相色谱柱的过程中,需要对其进行预测维护。

预测维护包括以下几个方面:1.液体进样器:每天使用前需要使用5%甲酸或醋酸水溶液进行清洗,冲洗10次;2.处理样品之前,需要使用纯水冲洗固相萃取(SPE)柱,以避免在反相色谱柱中残留的盐和其它非极性化合物损害色谱柱;3.沉淀时,孔径小的使用 0.45 微米滤膜;4.在一次实验操作中,同一规格的 Sample Loop 的使用次数不要超过30 次。

使用前,需要用洗针液清洗洗针头和 Sample Loop;5.使用过程中,如果发现色谱图出现异常,或者分离峰出现交叉、拖挂的情况,则需要对色谱柱进行常规维护。

常规维护常规维护主要涉及以下方面:色谱柱的清洗准备工作:1.将色谱柱固定在色谱仪上;2.关闭色谱仪,并将系统空气排出。

清洗步骤:1.用离子交换水(或去离子水)进行快速洗脱。

每 10 分钟换一次水,连续换 3 次;2.用5%甲酸(或乙酸)水溶液和纯水依次进行梯度洗脱,各洗 10 分钟,共需进行 20 分钟;3.用离子交换水(或去离子水)进行冲洗达 20 分钟,温度一般设置为室温;4.最后用重组缓冲液冲洗至少 30 分钟,直到色谱图正常为止。

清洗完毕后,需要用纯氮对色谱柱进行干燥,再关闭系统气路。

柱的保存柱的保存需要在低温,干燥,阴凉和避光的环境下进行。

存储柱的时间不宜过长,建议每次使用后立即保存,并在下次使用前先进行重新均衡。

色谱柱的更换在使用一段时间后,液相色谱柱的效果会逐渐降低,这时需要进行更换。

在更换时,需要注意以下几点:1.需要按照生产厂家提供的说明书进行更换;2.更换前需要对新柱进行校准;3.更换完成后,需要重新运行QC 样品,验证新柱的分离效果是否正常。

色谱柱保养与存储技巧

色谱柱保养与存储技巧色谱柱是科学研究和实验室分析中常见的工具,但是它的保养和存储对于保证实验结果的准确性和稳定性至关重要。

在本文中,我将分享一些色谱柱的保养和存储技巧,帮助读者更好地使用和维护色谱柱。

第一部分:保养技巧1. 清洗:每次使用完色谱柱后,都需要对其进行清洗。

由于样品残留和杂质等因素可能会影响下一次的实验结果,因此彻底清洗是必要的。

使用纯净溶剂(如甲醇或乙醇)进行反流清洗,直到洗液流出无色为止。

2. pH范围:注意样品的pH值,避免使用超出色谱柱pH稳定范围的溶液。

如果溶液过酸或过碱,可能导致色谱柱的损坏或降解,影响分离效果和柱寿命。

3. 避免高温:避免色谱柱暴露在高温环境下,尤其是在存储和操作过程中。

高温可能导致柱内压力升高,造成泄漏或损坏。

4. 防止柱堵塞:色谱柱堵塞是常见的问题,可以通过使用样品前进行过滤或退火的方式来预防。

此外,定期更换柱前过滤器也是必要的,以确保样品的纯净度和色谱柱的正常工作。

第二部分:存储技巧1. 保持干燥:色谱柱在存储时应保持干燥,避免潮湿环境。

潮湿可能导致柱内压力升高、背压异常等问题,影响柱的使用寿命和分离效果。

2. 避免阳光直射:色谱柱在存储过程中应避免阳光直射。

阳光中的紫外光可能会破坏柱内填充物,导致柱效率下降。

3. 适当密封:在长时间存储色谱柱时,应将柱头和柱底进行适当密封,以防止空气和灰尘等杂质进入柱内。

可以使用橡胶塞或塑料薄膜进行密封。

4. 温度控制:存储色谱柱的温度也需要注意。

最好将色谱柱存放在稳定的室温环境中,避免温度的快速变化或过高过低,以免对柱内填充物产生不利影响。

总结:色谱柱的保养和存储对于实验结果的准确性和稳定性至关重要。

通过彻底清洗、控制pH范围、防止高温等保养技巧,可以延长色谱柱的使用寿命并保证分离效果。

同时,通过保持干燥、避免阳光直射、适当密封、温度控制等存储技巧,可以有效防止柱内填充物的损坏和污染。

希望这些技巧能够帮助读者更好地使用和维护色谱柱,提高实验效果。

如何保护色谱柱柱效 色谱柱维护和修理保养

如何保护色谱柱柱效色谱柱维护和修理保养1.色谱柱断裂熔融石英色谱柱的聚酰亚胺涂层如有少许分裂它就会断裂。

聚酰亚胺涂层可保护易碎的熔融石英管线。

柱温箱持续的加热或冷却、柱温箱风扇的震动以及把色谱柱绕在圆形柱架上均会对管线造成压力。

zui后在薄弱处发生断裂。

通过轻划或磨损聚酰亚胺涂层会造成显现薄弱处。

通常锋利的尖或边划管线时会造成划痕。

色谱柱挂钩和标签、GC柱温箱的金属边、色谱柱切割器以及试验室试验台上的各种物品都带有锋利的尖或边。

色谱柱自身断裂的情况很少。

色谱柱制造业试图找出全部有缺陷的管线并避开在已制好的色谱柱中使用这些管线。

直径较大的色谱柱更简单断裂。

也就是说在处理0.45—0.53mm 内径的管线时要比处理0.18—0.32mm内径的管线更加谨慎以防断裂。

已断裂的色谱柱并非不能用。

假如已断裂的色谱柱保持在高温下连续运行或运行多个温度程序,则将特别简单损坏。

已断裂色谱柱的后半段暴露在高温的氧中会快速损坏固定相。

而色谱柱的前半段因有载气通过仍会保持完好。

假如已断裂的色谱柱未经加热而是仅在高温或含氧的环境下暴露很短时间,则后半段将不会受到任何严重损坏。

可以通过安装接头来接上已断裂的色谱柱。

任何合适的接头都可重新连接色谱柱。

一支色谱柱上不能装入超过2—3个接头。

多个接头会造成死体积(拖尾峰)问题。

2.热损坏超杰出谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。

这样会造成色谱柱的过分流失,活性组分形成拖尾,以及/或降低柱效(分别度)。

幸好热损坏是一个很慢的过程,因此,在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。

当有氧存在时会大大加速热损坏。

对有泄漏或载气中氧含量较高的色谱柱进行过度加热可快速并*地损坏该柱。

将GC的柱温箱zui高温度设定为色谱柱温度极限或稍高于该温度极限是防止热损坏的zui 佳方法。

这样可避开色谱柱意外的过热。

即使色谱柱受到热损坏,仍旧可使用。

把色谱柱从检测器上卸下来。

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色谱柱的日常维护
色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关外,最主要的是与日常的维护密切相关。

为延长色谱柱的使用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。

色谱柱的使用寿命主要是根据柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱的使用寿命已经结束。

因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除引起柱效下降和柱压升高的因素。

以下是色谱柱的日常维护方法:
一、流动相的pH应在使用范围内
Welch公司的色谱柱除反相氰基柱除反相基柱pH范围均为1.5~9.0,其它反相色谱的pH 范围均为1.5~10,由于填料中存在Si—C和Si—O键,流动相超过其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,使用寿命变短。

由于流动相的pH控制不当而对色谱柱造成的损害,通常很难使色谱柱恢复,因此必须认真对待,严格控制流动相的pH值。

二、去除样品和流动相中的固体颗粒
样品和流动相中含有的固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,筛板被堵不仅会引起柱压的升高,而且也会引起柱效下降,因为筛板的堵塞会引起液流不均,导致色谱峰形拖尾、变宽,从而使柱效下降。

因此,建议使用超纯水和色谱柱试剂,在分析前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45um滤膜。

三、使用维护柱或在线过滤器
样品和流动相经过滤后并不能完全消除固体颗粒物质,因为泵的磨损、密封圈和管路的老化也会产生固体颗粒物质,这些固体颗粒被流动相带入色谱柱,堵塞筛板,导致柱压升高、柱效下降。

维护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱筛板孔径相同,因此可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。

由于柱压升高在分析故障占很大比例,因此,除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱进样端加上保护柱或在线过滤器。

如果确认色谱柱柱压升高是由于进样端筛板被堵引起的,可选择一下方式进行补救:
1、先在色谱柱前加上保护柱或在线过滤器,然后用甲醇/水=20/80 1.0ml/min 反向冲洗色谱柱180min。

2、先在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器,然后反向使用。

四、正确使用缓冲盐
缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时障碍了基质上键合的碳链自由舒展,使色谱柱的保留能力下降,柱效降低。

缓冲盐析出后,去除非常困难,因此,正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。

正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出,因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话:使用前要过渡,使用后要冲洗。

具体方法如下:
1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需用过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗60min;使
用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗色谱柱过夜。

2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0ml/mim流速冲洗60min;分析完成后,再用该过渡流动相以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。

含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。

主意:过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同,区别只是过渡流动相中不含缓冲盐。

3、缓冲盐析出的补救方法:
⑴方案1:用甲醇/水=20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min.
⑵方案2:用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。

五、防止强保留物质在色谱柱中存留
强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积,对样品中的化合物产生额外的保留行为,不仅引起峰形变宽、拖尾,使柱效下降,同时也会引起保留时间的变化,累积到一定程度时还会导致柱压升高。

由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应,需要一定的时间才会体现出来,但对许多样品特别是复杂样品而言,很难判断其是否含有强保留物质,因此要防止强保留物质的累积,需要在每天的日常维护中用纯甲醇或乙腈清洗色谱柱。

清洗方法:
1、未使用缓冲盐:每天分析完成后,用纯甲醇或乙腈反向冲洗色谱柱60min。

2、使用过缓冲盐:分析完成后,先用上述方法除去缓冲盐,然后用纯甲醇或乙腈反向冲洗色谱柱60min。

3、补救方法:水—乙腈—氯仿(或异丙醇)—乙腈—水,每一步以1.0ml/min流速反向冲洗色谱柱60min。

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