临床微生物样本采集规范
临床微生物项目与样本采集规范
汇报提纲
01
微生物新技术
02
微生物新项目组合
03
微生物项目采集规范
2
1 微生物新技术
3
微生物新技术
• MALDI-TOF-MS • 16S rRNA和真菌ITS/D2（28S)测序
4
微生物质谱仪
16S rRNA
• 判断16S rRNA序列扩增是否成功：经琼脂糖凝胶电泳在1500bp附近 出现条带，说明16S rRNA已经扩增成功。由于16S rRNA序列长度一 般1500bp左右。
• 不可避免地受到污染 • 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。 • 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现
象。
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咳痰标本不合格，退检吗？
• 如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个， 应不做或仅在特殊要求时做培养。
• 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污 染明显”。
带菌样本
相对无菌样本
痰、咽拭子
尿液
生殖道分泌物：
女：阴道分泌物、宫颈分泌 物、后穹窿分泌物；
血管内导管 肺泡灌洗液
粪便
生殖道分泌物：
男：前列腺液、精液、尿道分 泌物
脓液、伤口分泌物、眼部分泌 物
无菌样本
全血、骨髓
脑脊液
胸腹水
穿刺液：关节腔积液、鞘膜 积液、盆腔积液、心包积液 等全身各个部位的体液穿刺 胆汁
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六、生殖道标本采集规范 • 推荐使用男性或女性专用拭子，置运送培养基送检。 • 男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通过直肠按摩前列
腺，用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内。 • 男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2～4cm，旋转拭
标本采集、运送标准操作规程
4 7
血培养 淋球菌培养
立即 30分钟
1小时 30分钟
阳性结果3天以上，阴性结果7天 2天
8
真菌培养
1小时
2小时
3天后
细菌室项目检验周期表
9 解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培 养 1小时 2小时 2天后
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一般涂片革兰氏染色
1小时
2小时
5小时
当天下午
12
涂片找抗酸杆菌
1小时
2小时
5小时
当天下午
Байду номын сангаас
查询申请医师，补足标本信息。
仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本
与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本
标本外漏及明显受污染（如开塞） 标本收集不符合采集要求 样本混入消毒液 或防腐剂
与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本 退回申请单，及时通知临床，建议重送标本。
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新型隐球菌墨汁染色
1小时
1小时
5小时
当天下午
• 注： 1. 细菌室正常上班时间为周一至周六
全天、周日上午；其他时间（包括中午、 夜班、周日下午、）常规培养请送急诊化 验室。 • 2．各类血清学检测周一至周五做；支原体、 衣原体检查周一至周六上午做，其余时间 标本一律不接收。 • 3． 空气培养、物表监测周六、周日不做， 于周一至周五打电话给细菌室告之数量。
【标准操作程序】
• 3. 粪便样本
养：
• 5.1采集指征： • 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培
粪便涂片镜检白细胞＞5/HP 体温＞38.5℃ 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集，储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本，以免皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位：采集时应特别小心；应明确检查的目的菌在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时，如窦道标本，应从窦道底部取活组织检查，而非从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或使用一次性无菌容器，不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂，一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少，可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：三1ml尿液标本：＞3ml4.1.3粪标本：1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊：4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml;4.2.2清晨中段尿：5-10ml;4.2.3粪标本：>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等)：5- 10ml。
2024版年度临床微生物标本采集规范总结
优化采集方法和工具
根据不同类型的标本和采集需求， 选择合适的采集方法和工具，确 保采集到足够的标本量。
规范标本运输和保存
制定详细的标本运输和保存规范， 包括温度、光照等环境条件的控 制，确保标本在运输和保存过程 中保持质量稳定。
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未来发展趋势预测
2024/2/2
自动化和智能化技术应用 随着科技的不断发展，自动化和智能化技术将在临床微生 物标本采集中得到更广泛的应用，提高采集效率和准确性。
节。
2024/2/2
关键控制点分析
对标本采集过程中的关键控制点进 行了深入剖析，如无菌操作技术、 标本采集时机、采集量等因素对标 本质量的影响。
成功经验总结
总结了在实际操作过程中取得的成 功经验，如合理选用采集工具、正 确保存和运输标本等。
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存在问题及原因分析
标本污染问题
分析了标本污染的主要原因，包括采集过程中未严格执行无菌操作、 采集容器不洁净等。
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重症患者样本
对于重症患者，其样本也 应优先处理，以便医生及 时了解患者病情。
特殊项目样本
对于某些特殊项目，如细 菌培养、药敏试验等，也 应优先处理，以缩短检验 周期。
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及时反馈问题并改进工作流程
反馈问题
分析原因
在接收和处理过程中发现的问题，应及时反 馈给相关科室和人员。
对反馈的问题进行分析，找出问题产生的原 因。
临床微生物标本采集规范总结
2024/2/2
1
目 录
2024/2/2
• 标本采集重要性 • 标本采集前准备 • 不同类型标本采集方法 • 标本采集过程中质量控制措施 • 实验室接收和处理流程优化建议 • 总结反思与未来展望
临床微微生物标本的采集注意事项接种及涂片染色
导管尖端阳性培养结果
第三十一页，共67页
6、脑脊液标本
⑴ 培养基：5%羊血琼脂、5%兔血巧克力琼脂、
葡萄糖肉汤
⑵ 培养环境：置5 % CO2、35℃环境培养。
第三十二页，共67页
7、胆汁或胸水或腹水标本
⑴ 培养基：如标本量大时可按血液培养方法直接
取16-20ml分别种入需氧和厌氧培养瓶。如标本
的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。
5、长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取
尿标本。
第四页，共67页
（三）分泌物的采集
1、对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃
体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、 生殖道分泌物等均属于开放性病灶。应先用灭菌生理盐 水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集 病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检。
宜做培养的标本；
当白细胞≤10个／L ，上皮细胞≤25个／L时再参照油
镜观察标本中细菌分布作出判断。
第四十八页，共67页
痰镜检的判断标准：
当标本中细菌种类超过3种以上，未见到钎毛拄状上 皮细胞，作为不合格标本；如见到数量不等的白血
胞或钎毛拄状上皮细胞或两者同在，含1-2种不同细
菌，可考虑继续培养，结果可根据病情再作分析；当 涂片中见到1-3种细菌，少量的扁平上皮细胞，少量 或较多钎毛拄状上皮细胞均可按合格标本继续培养。
10ml）。 9、粪标本培养，放置时间过长，已干。
第十七页，共67页
三、分离培养基本操作规范
合格的标本是保证培养成功的重要条件，但如 果没有适宜的分离培养基、培养环境以及正确 的处理方法同样不能获得好的结果，为此制定
如下基本操作规范以保证致病细菌分离成功 。
临床微生物检验标本采集规范要求★
24小时尿
记录尿量，将尿液混匀后取适量用于 检验。
粪便标本采集
自然排便
排便后用干净竹签取粪便 表面部分。
直肠拭子
在特殊情况下，如肠道感 染，可用直肠拭子采集粪 便。
粪便量
一般需采集足够量的粪便 用于检验。
呼吸道标本采集
痰液
患者自行咳出痰液，避免唾液和 鼻咽部分泌物。
支气管肺泡灌洗
在特殊情况下，如重症肺炎，可通 过支气管肺泡灌洗采集呼吸道标本 。
确定采集时间
根据患者的病情和检验目的，选择最 佳的采集时间，如空腹采集、餐后采 集等。
注意采集时间与用药时间的间隔，避 免药物对检验结果的影响。
采集人员防护措施
采集人员应穿戴符合要求的防护服、手套、口罩等，确保自 身安全。
采集过程中应遵循无菌操作原则，避免交叉感染和环境污染 。
02
标本采集方法
足或采集方法不当导致检验结果出现偏差。
03
标准化采集时间
根据疾病类型和病情发展，选择合适的采集时间可以提高检验准确性。
例如，对于急性感染患者，应在发热期采集标本；对于慢性感染患者，
应选择在疾病活动期采集。
保障患者安全
减少交叉感染风险
遵循无菌操作原则可以降低交叉感染的风险，保护患者安全。
避免患者不适
采集过程中，应避免接触非检 验部位，确保标本不受污染。
采集后应及时送检，避免长时 间存放导致污染。
防止标本变质
采集的标本应尽快送检，避免长时间 存放导致变质。
保存过程中应定期检查，确保标本质 量。
对于需要长时间保存的标本，应采取 适当的保存措施，如低温、干燥等。
其他注意事项
采集前应了解患者病情和用药情 况，避免干扰检验结果。
临床微生物标本采集和运送规范
➢ 可疑细菌性心内膜炎,在1～2h内采集3份血标本,如 果24h后阴性,再采集3份以上的血标本。
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脑脊液标本采集送检规范
❖ 采集时间：最好在抗菌药物使用前采集。 ❖ 采集方法：通常用腰穿的方法采集脑脊液，
➢ 采集数量：对于细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连 续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状 出现改变。
➢ 标本运送：标本应尽快送检（1-2h内），如不能及时
送检，室温保存≤2h，4℃冰箱保存≤24h。
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生殖道标本采集送检规范
❖ 应由临床医师采集，用无菌棉拭子采集。淋球菌 检查时，不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入 尿道及子宫颈3cm深取样送检，要避免受阴道分 泌物污染。
离体后回迅速自溶。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌 离体后极易死亡。）。延迟送检时一定不能放冰 箱，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对温度敏感的 细菌在冰箱会很快死亡。 ❖ 各种无菌体液标本，如胸腹水、浆膜腔积液及各 种穿刺液等亦可注入血培养瓶以提高培养的阳性 率。
14
尿液标本采集运送规范
❖ 采集时间：尽量在抗菌药物使用前（多数药物从尿道 排泄）。
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痰标本采集运送规范
❖ 采集时间：尽量在使用抗菌药物之前 ❖ 采集方法： ➢ 自然咳痰：以晨痰为佳。咳痰前应清洁口腔如刷牙和
漱口，然后用力咳出呼吸道深部痰，直接吐入于无菌 容器中。痰少或无痰者可用3-5%NaCl水溶液5ml雾化吸 入5min导痰（气道高反应如哮喘病人不宜采用此法）。 对于难于自然咳痰者可用微生物室提供的一次性无菌 吸痰杯抽取气管深部分泌物。 ➢ 小儿取痰法 最好用微生物实验室提供的一次性无菌 吸痰杯抽取气管深部分泌物。
临床微生物学检验标本的采集
快速运输
03
在运输过程中应尽量缩短时间，选择适当的交通工具，保持容
器密封、避光、防震，以确保标本质量不受影响。
05
临床微生物学检验标本采集的常见问
题及解决方案
采集方法不当
总结词
采集方法不正确可能导致微生物污染或样本质量下降，影响检验结果的准确性。
详细描述
采集过程中应遵循无菌操作原则，正确使用采集工具，避免交叉感染。对于不同种类的标本，应采用不同的采集 方法和注意事项。
尿液标本
尿常规检查
检测尿液中的蛋白质、糖、酮体等成分，辅助诊断肾脏疾病和糖尿病等。
尿培养
用于检测尿液中的病原菌，如尿路感染等。
粪便标本
粪便常规检查
检测粪便中的红细胞、白细胞、寄生 虫等，辅助诊断消化道疾病。
粪便培养
用于检测粪便中的病原菌，如细菌性 痢疾等。
呼吸道标本
痰液检查
通过痰液中的细胞和病原菌，辅助诊断呼吸道感染。
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采集时机不当
总结词
采集时机不合适可能影响微生物的存活和繁殖，进而影响检验结果。
详细描述
应根据检验目的和要求选择合适的采集时机，如空腹采集血液、尿液等。同时，应注意采集过程中的 时间控制，避免长时间暴露在空气中。
采集容器选择不当
总结词
采集容器选择不当可能导致微生物死亡或繁殖受限，影响检验结果。
详细描述
量。
减少外界干扰
在采集过程中应尽量减少外界因 素的干扰，如避免过度挤压、避 免接触非采集部位等，以降低外
界微生物的混入。
采集后的保存和运
及时处理
01
采集后的标本应及时进行处理，避免长时间放置，以免影响微
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临床微生物样本采集规范
临床微生物样本采集规范
1. 范围和目的
本规范适用于临床微生物样本的采集、处理和管理，旨在保证样本采集的质量和规范性，确保临床微生物诊断结果的准确性和可靠性。
2. 术语和定义
（1）微生物：指包括细菌、真菌、病毒、支原体、立克次体、螺旋体等在内的微小生物体。
（2）临床样本：指从患者体内采集的各种生物标本，如血液、口腔、鼻咽部、骨髓、尿液、痰液、脑脊液等。
（3）采集容器：指用于采集临床样本的容器，如血液采集管、尿样瓶、培养皿等。
（4）采集套装：指一次完整的样本采集过程中所需的所有采集工具和材料。
3. 采集前准备
（1）确定采集部位、时间和采集方式，注意患者的生命体征和病情变化。
（2）准备好所需的采集套装和采集容器，在样本采集前做好标签，并核对患者信息。
（3）认真阅读所有相关规范和实验室要求，确保样本采集符合
要求。
4. 采集操作步骤
（1）根据采集部位和样本类型选择合适的采集套装。
（2）采集前应让患者了解采集的目的和过程，并获得其同意。
（3）采集前要检查采集部位，患者的身体状态和生命体征，确
保采集过程安全和无痛苦。
（4）采血时应注意采血量、采血速率、采血部位、采血方式等。
（5）尿样采集时应注意尿样的采集量、采集时间、采集方式、
保护好样本的完整性和纯度。
（6）痰液采集时应注意痰液的颜色、黏度、量和纯度，选择合
适的采集器具和采集方式。
（7）脑脊液采集时应注意采集部位、采集方式、采集量、采血
顺序和样本处理标准等。
（8）其他临床样本采集时，应根据具体要求和操作规范，选择
合适的采集方法和器具。
5. 样本运输和储存
（1）在采集后，立即将样本放入相应的采集容器中，尽快送至
实验室进行处理。
（2）若无法立即处理样本，应按要求在采集容器中注明采集时
间和采集者信息，并存储在规定温度下，以便后续处理。
（3）运输过程中应遵循规范，确保样本不泄漏、不污染，并尽
快送至目的地。
（4）储存过程中应保持样本的纯度和完整性，控制储存温度，
在保质期内使用。
6. 附录
本文档所涉及附件如下：
（1）临床样本采集套装清单
（2）常用临床微生物样本采集方法及注意事项
（3）样本运输和储存标准
7. 法律名词及注释
（1）医疗器械管理条例：国务院颁布的《医疗器械管理条例》，该条例是我国医疗器械管理的基本法规之一。
（2）生物安全管理规定：国务院颁布的《生物安全管理规定》，该规定是我国生物安全管理的基本法规之一。
8. 遇到的困难及解决办法
（1）患者状态复杂，临床样本采集过程不一定顺利，出现问题
时要及时向医生咨询并调整采集方案和操作。
（2）样本处理、运输和储存过程中出现泄漏、污染等问题时，
要按照规范进行处置和报备，并采取相应的应急措施。
（3）在实验室中，可能会遭遇一些技术难题，需要及时咨询专
业人员，调整操作方案，保证实验结果的准确性。