2.γ-氨基丁酸(GABA)的分布及测定方法
γ-氨基丁酸（GABA）的分布及测定方法周青生物化工2110805057一、分布：γ-氨基丁酸在动、植物体内都有分布，在动物体内，GABA主要分布于神经组织中，在哺乳动物的脑组织内分布最为集中，其含量是单胺类含量的1000倍，而在外围器官中含量很少。
在植物体内，GABA是细胞自由氨基酸库的重要组分，胞液中有几种构型，可形成类似脯氨酸的环状结构。
高等植物组织中GABA含量通常在0.3～32.5μmol／g之间，超过许多蛋白质类氨基酸的含量。
在一些与根瘤菌共生固氮植物的根瘤中，GABA以结合态形式存在，苜蓿中结合态形式的GABA高达干重的6.6%[1]。
除此之外，GABA还存在于以下植物中，见表一。
①薄层色谱：原理：用一定波长的光照射在经薄层层析后的层析板上，对具有吸收或能产生荧光的层析斑点进行扫描，用反射法或透射法测定吸收的强度，以检测其浓度。
方法：展开剂是正丁醇：醋酸：水=4：1：1。
分别吸取5μl γ-氨基丁酸标准品溶液和样品洗脱液，点于自制的硅胶薄层板上，以正丁醇：醋酸：水体积比为4：1：1为展开剂展开，取出晾干，用体积分数0.2％茚三酮乙醇溶液显色，105℃烘数分钟，直至获最大斑点，用Camag TLC scanner 3 扫描仪扫描。
扫描条件为：反射式双波长锯齿扫描,扫描波长λS=515nm,参比波长λR=680nm，狭缝50×0.45 mm。
黄怀生用最小二乘法对标准溶液点样量和色谱峰面积值进行回归分析，其相关系数可达到0.99以上[14]。
黄美娥[15]用此方法测得得蕨菜叶、茎中γ-氨基丁酸的质量分数分别为0.319％、0．141％。
采用双波长扫描法[16]，可以避免分离度不佳的其他氨基酸的相互干扰；二、双波长扫描可以排除背景干扰使基线平直；三、能提高灵敏度。
②纸电泳法：原理：纸上电泳法，以纸为支持剂，使带电的γ-氨基丁酸于纸上在外电场作用下定向移动，从而达到分离目的。
方法：取上清液用于点样于滤纸上，以标准GABA溶液做对照，在电压300V、室温条件下电泳60min，电泳缓冲液为吡啶-冰醋酸混合溶液[吡啶：冰醋酸：蒸馏水(体积比)=2：2：121，pH4.7]。
电泳完毕后取出电泳纸，水平摆放，室温下自然晾干，再在80℃电烘箱中风干，挥发掉残留吡啶和醋酸。
用喷雾法向电泳纸上均匀喷洒显色剂，于电热恒温干燥箱中90℃烘10 min，即显出在有氨基酸区域呈紫红斑点的层析图谱。
将与GABA标准品位置一致的斑点剪下，加4ml洗脱液(洗脱液由0.1％硫酸铜溶液和75％乙醇溶液按1:19的体积比混合而成)洗脱90min，在520nm波长处比色测定洗脱液的吸光度[17,18]。
③纸层析法原理：纸层析是以滤纸作支持物，用一定的溶剂系统展开，利用不同物质在固定相中的分配系数不同，而使混合样品达到分离的层析方法。
方法：展开剂V(正丁醇)：V(醋酸)：V(水)=4：1：3，茚三酮溶解于展开剂中，质量浓度为0.4g/L，在展开过程中，茚三酮随着展开剂沿滤纸向上移动。
点样后的滤纸条在展开剂中展开、风干显色，将与标准品位置一致的斑点剪下，用洗脱液[V(1 g／L硫酸铜)：V(体积分数75%乙醇)=2：38]洗脱，520nm处比色测定[19,20]。
④比色法：原理：利用苯酚和次氯酸钠与游离氨反应显色。
方法：先做GABA标准曲线：取不同浓度的GABA标准液0.4ml，加0.2mol／L(pH 9.0)硼酸盐缓冲液0.6 mL，摇匀，加5%苯酚溶液2mL，摇匀，加质量分数6%次氯酸钠溶液1mL，摇匀，放人沸水浴加热5min，立即置冰浴中5min，待溶液出现蓝绿色后，加入2.0mL60％酒精，进行波谱扫描，在最大吸收峰处测定溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，GABA的含量为横坐标，绘制标准曲线。
把处理的样品按以上方法测吸光度，求出样品中GABA的含量。
赵大伟[21]用此方法测得大麦籽粒γ-氨基丁酸含量地区顺序为中国>美国；类型顺序为裸>皮，多棱>二棱。
冀宪领[22]测得相同叶位桑叶中GABA的含量为早期叶片高于后期叶片,同一时期不同叶位桑叶中GABA的含量随叶龄的增加逐渐降低，桑叶中GABA的含量在一天中以5：30时含量最低，17：00时含量最高。
彭光荣[23]用此方法测得糙米发芽γ-氨基丁酸含量从7．24±0．02mg／100g增加到43．51±0．03mg／100g，当采用10mg／L硒处理后，富硒发芽糙米γ-氨基丁酸38．83±0.12mg／100g。
史小峰[24]通过此方法测得明传统发酵豆制品中腐乳汤汁和坯所含GABA的量为最高1225.7mg/L和735.2mg/kg,而豆酱中的较低仅为368mg/kg 。
测定微生物中谷氨酸脱羧酶的活力也可以用此方法，如孙波[25]利用比色法测定L-谷氨酸在谷氨酸脱羧酶催化下生成γ-氨基丁酸含量，实验确定测定γ-氨基丁酸适宜反应条件为酶反应液1．0 mL ，1．0 mol ／L Na2CO 溶液0.2 mL ，1.0 mL 四硼酸钠缓冲液（0.01mol/L,pH9．18),6％苯酚溶液1.0 mL ，7.5％NaClO 溶液5.0 mL ，沸水浴10 min ，冰浴5min ，60％乙醇溶液2.0 mL ，并与氨基酸分析仪法测定进行比较，测得结果相对误差<5％，表明两种测定方法没有显著性差异。
王芳权和许建军也通过此方法测得酶转化中GABA 含量[26,27]，此方法快速，常用于米胚芽和谷氨酸脱羧酶转化体系中GABA 质量浓度的定量测定。
⑤氨基酸分析仪测定原理：利用各种氨基酸的两性离子特性、极性和分子大小等性质的不同，使用阳离子交换树脂进行色谱分析，采用不同pH 和离子强度的缓冲溶液依次进行洗脱。
氨基酸洗脱的顺序为：酸性氨基酸、中性和芳香族氨基酸，最后是碱性氨基酸；相对分子质量小的氨基酸比相对分子质量大的氨基酸先洗脱下来。
被洗脱的氨基酸与茚三酮进行柱后衍生，大多数衍生物呈蓝紫色，在570nm 处有最大吸收；脯氨酸，羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质，在440nm 处有吸收峰，用紫外可见光检测器进行测定[28]。
方法：以日立835—30型氨基酸分析仪为例，先按仪器说明配制缓冲溶液及茚三酮溶液，标准GABA 溶液用0.02mol ／L 盐酸配制成不同浓度，测得峰面积，绘制标准曲线。
把处理的样品按以上方法测峰面积，求出样品中GABA 的含量[29]。
钱爱萍[30]等人用此方法对γ-氨基丁酸标准品作精密度和回收率试验，结果表明：峰位置重现性变异系数为0.17，峰面积重现性变异系数为0.23，回收率97．89%～101.2%。
说明此方法稳定、快速，准确。
张华[31]和何轶[32]通过此方法测得南瓜中GABA 含量为2.956%和沙棘果汁GABA 含量为13.4mg/100ml 。
Chen [33]和Komatsuzaki [34]也采用氨基酸分析仪检测发酵牛奶中GABA 含量和发芽糙米经过浸泡和厌氧处理后GABA 含量，结果显示用乳酸菌发酵的牛奶和发芽糙米处理后GABA 含量为80.6mg/ 100g 和24.9 mg/100 g 。
还有报导[35，36]可以检测米胚芽、茶叶中GABA 含量。
⑥毛细管电泳-电化学检测该方法使用比较少。
孔令瑶[37]用亚硫酸钠替代硫醇试剂使GABA 与OPA 反应，生成稳定具有电化学活性的衍生物，然后采用毛细管电泳-电化学检测(CE —ED)法测定发芽黑米胚芽中GABA 的含量。
他以自制碳圆盘电极为工作电极，以50mmol ／L 的硼砂-硼酸缓冲液为运行缓冲液，采用电动进样，检测池为阴极电泳槽。
⑦高效液相色谱法该方法精密度和灵敏度高，常被用来测定GABA 含量，主要有以下几种方法：1. γ-氨基丁酸与邻苯二甲醛(OPA)衍生原理：γ-氨基丁酸与邻苯二甲醛(0PA)衍生反应生成稳定的荧光物质，且在λex （最大激发波长）=348nm ，λem （最大发射波长）=450nm 波长下有很强的发射，可以准确测定其含量。
其反应如下： CHOCHO +SH-CH 2-CH 2-OH NH 2-CH 2-CH 2-CH 2+2-CH 2-OHCH 2-CH 2-CH 2-COOH衍生剂的配制：称取10mgOPA，加0.5ml甲醇溶解后，加入2ml 0.4mol／L硼酸盐缓冲液(pH9.4)和30μl 2-巯基乙醇，此衍生剂溶液可保持2d。
样品衍生：取样品或标准溶液10μl，加入上述溶液100μl，混匀，反应1min后进样。
黄怀生采用分离柱ISC--07Na型，流动相：02M柠檬酸钠缓冲液，pH3．25～10.0，pH梯度洗脱测定Gabaron茶中的γ-氨基丁酸[38]。
葛菁萍也利用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法定量测定短乳杆菌发酵液中γ-氨基丁酸含量，利用C18色谱柱，以50mmol／L的乙酸钠(pH6.8)-甲醇-四氢呋喃(A相，82：17：1；B相，22：77：1，V/V)为流动相进行梯度洗脱，可以检测到痕量γ-氨基丁酸(2．2mg ／100g)[39]。
2. γ-氨基丁酸与2,4-二硝基氟苯（FDNB）衍生：样品衍生化及预处理：以1％FDNB的乙腈溶液作为衍生剂，取配制好的标准GABA溶液或待测样品1mL置于10mL棕色量瓶中，加入0.5mol／L NaHCO3 (pH=9.0)溶液1mL，再加入1％2，4-二硝基氟苯的乙腈溶液1mL，置于60℃水浴中暗处加热1h后取出，冷却，添加pH=7.0的磷酸盐缓冲液至刻度，混匀，过0.45μm 滤膜。
不用时样品于4℃下避光保存。
吕莹果采用C18柱检测植物中谷氨酸脱羧酶活力，流动相：由A、B双组分组成，A为V(CH3CN)：V(H2O)=1：l；B为pH=7.0的磷酸盐缓冲液。
流速为1.0 mL ／min；检测波长：360nm；柱温：35℃；进样量：5μL。
洗脱条件如表二。
在一个月内都能保持稳定[40]。
孟祥勇采用2，4—二硝基氟苯柱前衍生法测定发芽前后糙米中GABA的含量，结果显示：糙米中的γ-氨基丁酸由5.01 mg／100g 提高到35.03mg／100g[41]。
3.γ-氨基丁酸与异硫氰酸苯酯(PITC)衍生NH-C=SN=C=S+NHCH2-CH2-CH2-COOH归纳有两种不同的衍生方法：方法一：样品衍生化：精密量取供试品贮备液适量(80～400μl)，置1mL量瓶中，加异硫氰酸苯酯—乙腈溶液(25μl:2mL)200μl，加三乙胺—乙腈溶液(1.4:8.6)稀释至刻度，摇匀，放置1 h，转移至试管中，加正己烷1mL，振摇，分取下层液体，滤过，取续滤液作为待测溶液。
陈文琼等人用此方法，利用Venusil—AA氨基酸分析柱(250mm ×4.6mm，5μm)，用二元梯度洗脱，流动相A为0.05mol／L醋酸钠溶液(pH=6．5)，流动相B 为乙腈-水(80：20)，检测波长为248nm，得到γ-氨基丁酸的检测浓度在2.056～12.336μg/ L范围内与峰面积积分值呈较好的线性关系[42]。
高效液相色谱法测定莜麦米酒中γ-氨基丁酸
高效液相色谱法测定莜麦米酒中γ-氨基丁酸刘文勃;易好诚;李苏红;徐杰;王俊伟;张雷【摘要】建立紫外—高效液相色谱测定莜麦米酒中的γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)含量的分析方法.利用碱性条件下,GABA可与邻苯二甲醛(OPA)发生衍生化反应,生成具有较强紫外吸收的衍生物.采用紫外—高效液相色谱仪检测,色谱条件:Eclipse XDB-C18分析柱(5μm,4.6×150 mm),以50 mmol/L 的乙酸钠(pH6.8)—甲醇—四氢呋喃(THF,A相,82∶ 17∶1；B相,22∶ 77∶1,V/V)为流动相进行梯度洗脱,可检测到GABA在0.04～0.5 g/L范围内与GABA峰面积的线性关系良好R2=0.9985,样品衍生时间1 min最佳,平均回收率为99.5％,精密度相对标准偏差(RSD)为1.6％,重复性(RSD)为0.66％,最低检出限为0.0254 g/L.方法简单快捷、重复性好、灵敏度高,可用于莜麦、莜麦发酵酒等中GABA含量测定.【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2013(021)001【总页数】4页(P67-70)【关键词】莜麦米酒;γ-氨基丁酸;紫外检测;高效液相色谱【作者】刘文勃;易好诚;李苏红;徐杰;王俊伟;张雷【作者单位】沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034;沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034;沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034;沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034;沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034;沈阳师范大学粮食学院,辽宁沈阳 110034【正文语种】中文【中图分类】TS207.3γ－氨基丁酸(γ－Aminobutyric acid，简称GABA)是一种非蛋白质氨基酸，为哺乳动物中枢神经系统内重要的氨基酸类神经递质［1］，分布非常广泛，在动物、植物、微生物中均有GABA存在。
γ-氨基丁酸的高效液相色谱测定法
二、γ-氨基丁酸的高效液相色谱测定法本方法适用于保健食品中γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid）的测定。
本方法γ-氨基丁酸的检出限为10ng。
1.方法提要γ-氨基丁酸用异硫氰酸苯酯柱前衍生，衍生物采用氨基酸分析柱分离，二元流动相梯度洗脱，248nm波长下紫外检测器检测，以保留时间定性，以峰面积外标法定量。
2.仪器（1）高效液相色谱仪，配紫外检测器。
（2）旋涡混合器3.试剂本方法除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
（1）乙腈：色谱纯。
（2）异硫氰酸苯酯乙腈溶液：吸取0.5mL异硫氰酸苯酯，加入40mL乙腈溶解。
（3）盐酸溶液（0.1mol/L）：取分析纯浓盐酸8.3mL，加水稀释至1L。
（4）三乙胺-乙腈溶液：15mL三乙胺与85mL乙腈混合而成。
（5）γ-氨基丁酸标准品：纯度99.9%，Sigma公司。
（6）γ-氨基丁酸标准溶液：精确称取γ-氨基丁酸10mg，置于10mL容量瓶中，加0.1mol/L 盐酸溶液溶解并稀释到刻度，摇匀，得浓度为1mg/mL的标准储备溶液。
将此标准储备液用0.1mol/L盐酸溶液稀释成浓度分别为10.0μg/mL、20.0μg/mL、40.0μg/mL、80.0μg/mL的标准溶液系列。
（7）醋酸钠溶液：0.05mol/L，用作流动相A。
（8）乙腈-水溶液：乙腈-水（80+20），用作流动相B。
（9）正己烷。
4．测定步骤（1）供试样品溶液的制备1）提取：称取适量样品(相当于γ-氨基丁酸4mg，精密至0.001g)，置于100mL三角烧瓶中，加入盐酸溶液(0.1mol/L)适量，40℃超声提取20min，冷却，转移至100mL容量瓶，加盐酸溶液(0.1mol/L)至刻度，摇匀，静置，取适量过滤，得样品提取液。
2）衍生化：取样品提取液0.2mL，置于5mL具塞试管中，加异硫氰酸苯酯-乙腈溶液0.4mL，再加三乙胺-乙腈溶液1.4mL，摇匀，放置1小时，然后加入正己烷2mL，漩涡混合1min，静置，取下层液体作为待测溶液。
2.γ-氨基丁酸(GABA)的分布及测定方法
γ-氨基丁酸（GABA）的分布及测定方法周青生物化工2110805057一、分布：γ-氨基丁酸在动、植物体内都有分布，在动物体内，GABA主要分布于神经组织中，在哺乳动物的脑组织内分布最为集中，其含量是单胺类含量的1000倍，而在外围器官中含量很少。
在植物体内，GABA是细胞自由氨基酸库的重要组分，胞液中有几种构型，可形成类似脯氨酸的环状结构。
高等植物组织中GABA含量通常在0.3～32.5μmol／g之间，超过许多蛋白质类氨基酸的含量。
在一些与根瘤菌共生固氮植物的根瘤中，GABA以结合态形式存在，苜蓿中结合态形式的GABA高达干重的6.6%[1]。
除此之外，GABA还存在于以下植物中，见表一。
①薄层色谱：原理：用一定波长的光照射在经薄层层析后的层析板上，对具有吸收或能产生荧光的层析斑点进行扫描，用反射法或透射法测定吸收的强度，以检测其浓度。
方法：展开剂是正丁醇：醋酸：水=4：1：1。
分别吸取5μl γ-氨基丁酸标准品溶液和样品洗脱液，点于自制的硅胶薄层板上，以正丁醇：醋酸：水体积比为4：1：1为展开剂展开，取出晾干，用体积分数0.2％茚三酮乙醇溶液显色，105℃烘数分钟，直至获最大斑点，用Camag TLC scanner 3 扫描仪扫描。
扫描条件为：反射式双波长锯齿扫描,扫描波长λS=515nm,参比波长λR=680nm，狭缝50×0.45 mm。
黄怀生用最小二乘法对标准溶液点样量和色谱峰面积值进行回归分析，其相关系数可达到0.99以上[14]。
黄美娥[15]用此方法测得得蕨菜叶、茎中γ-氨基丁酸的质量分数分别为0.319％、0．141％。
采用双波长扫描法[16]，可以避免分离度不佳的其他氨基酸的相互干扰；二、双波长扫描可以排除背景干扰使基线平直；三、能提高灵敏度。
②纸电泳法：原理：纸上电泳法，以纸为支持剂，使带电的γ-氨基丁酸于纸上在外电场作用下定向移动，从而达到分离目的。
方法：取上清液用于点样于滤纸上，以标准GABA溶液做对照，在电压300V、室温条件下电泳60min，电泳缓冲液为吡啶-冰醋酸混合溶液[吡啶：冰醋酸：蒸馏水(体积比)=2：2：121，pH4.7]。
γ-氨基丁酸的有关研究与进展
γ-氨基丁酸的有关研究与进展1.引言γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid），简称GABA，别名氨酪氨酰或哌啶酸，是一种广泛分布于哺乳动物、植物和微生物中的四碳非蛋白质氨基酸，主要由谷氨酸（glutamic acid，Glu）经谷氨酸脱羧酶（glutamate decarboxylase，简称GAD 或GDC）催化而来[1，2]。
GABA 是哺乳动物中枢神经中的一种重要神经抑制性介质，介导了40% 以上的神经抑制性信号[3]。
GABA在人体内发挥着极其重要的生理功能，主要功能是降血压[3]，另外也可以促进脑的活化，镇静、抗惊厥、抗癫痫，促进睡眠，延缓脑衰老，补充人体抑制性神经递质，同时还能抑制脂肪肝及肥胖症，活化肝功能等[3-5]。
GABA因其较好的生理功能和应用前景，已受到世界学术和企业界越来越多的关注和研究。
而与国外相比，我国有关GABA的研究开发报道较少，有待大力研究开发。
GABA作为一种新型的功能性因子正越来越引起国内人们的关注，对GABA的保健功能和作用机理的进一步深入探讨，必将对其应用起到极大的推动作用。
2.GABA的物化特性GABA为白色结晶或结晶性粉末，熔点202℃，极易溶于水，微溶于热乙醇。
GABA在绝大多数状态下是以带正电的氨基和带负电的羧基的两性离子形式存在的。
GABA的存在状态决定了分子构象：气态时，由于两个带电基团的静电作用，分子构象高度折叠，固态时，由于两个基团构象产生的分子间相互作用，分子构象伸展;液态时，这两种分子构象同时存在。
GABA多变的构象便于和不同的受体蛋白结合，从而发挥其不同的生理功能[6]。
3.GABA的生物活性GABA是哺乳动物脑组织中重要的起抑制作用的神经抑制剂。
根据对激动剂和拮抗剂敏感性的不同，GABA受体可以分为A型（GABAA）、B型（GABAB）、C 型（GABAC）这三种类型[4，6]。
哺乳动物大脑中含量最多的也是最重要的GABA受体是GABAA。
γ-氨基丁酸(GABA)的研究与应用
04 参考文献
参考文献
γ-氨基丁酸（GABA）的研究与应用
[1]陈恩成,张名位,彭超英,池建伟. γ-氨基丁酸的功能特性及其在食品原料中的富集技术研究 进展[J]. 湖北农学院学报,2004(04):316-320. [2]郑红发,黄亚辉,刘霞林,王旭. γ—氨基丁酸的药理作用[J]. 茶叶通讯,2004(04):14-18. [3]穆小民,吴显荣. 高等植物的γ－氨基丁酸及其代谢的酶学研究[J]. 生命的化学(中国生物化 学会通讯),1995(05):21-24. [4]徐慧慧,章益明,梁新珍. γ–氨基丁酸检测方法的比较[J]. 发酵科技通讯,2014,43(03):37-41. [5]郝艳丽,巨修练. GABA_AR研究进展[J]. 武汉化工学院学报,2006(02):12-16+18. [6]白松,林向阳,阮榕生,郑丹丹,刘玉环,何承云. γ—氨基丁酸的分布和制备[J]. 现代食品科技, 2005(02):202-205. [7]徐屯,陳蘭生. γ—氨基丁酸生物学作用的进一步研究[J]. 哈医大学报,1965(01):111.
γ-氨基丁酸（GABA）的研究与应用
结合分子研究、动物研究和临床研究 的证据表明GABAAR 复合物在调节焦虑 症上起着主要作用。对DZ 抗焦虑作用的 实验如明暗选择试验(light dark choice test) 和增强迷宫试(elevated plus maze test)证明 DZ 抗焦虑作用是通过能表达含α2 受体的 神经元群增强其GABA 传导进行选择性介 导的。另外在α3[H126R] 突变小鼠与野生 型小鼠的行为去抑制实验中证明含α3 受体 并不参与DZ 抗焦虑作用。
降血压
1988 年日本发现GABA对人体具有很好的 降压作用。高血压患者往往肾功能降低, GABA 有肾功能活化作用, 肾功能活化后, 即使盐分摄 取量增多,由于利尿作用激活, 过剩盐分可从尿中 排出, 使血压降低, 从而可预防高血压。此外, GABA 作用于延髓的血管运动中枢, 使血压降低, 同时抑制抗利尿激素后叶加压素的分泌, 扩张血 管, 降低血压。
高效液相色谱法测定发芽麦粒中γ-氨基丁酸GABA含量
高效液相色谱法测定发芽麦粒中γ-氨基丁酸GABA含量张志清;徐杰;丛军;任飞【摘要】建立了一种测定发芽麦粒中γ-氨基丁酸(GABA)含量的HPLC方法,并对四川10个小麦品种中GABA含量差异及其发芽培养期间变化规律进行了分析.采用FDNB(2,4-二硝基氟苯)为柱前衍生剂,色谱条件为:色谱柱Luna C18(2)(150 mm×4.60 mm,5μm),乙腈-0.02 mmol/L乙酸铵混合溶液为流动相(V: V=15: 85),柱温30℃,流速1.0 mL/min,测定波长320 nm.结果表明,在0.025 5～0.127 6μg 范围内,呈良好的线性关系,最低检出限1.081×10-5 μg/mL,方法的平均加标回收率为97％.采用建立的方法测定不同小麦品种在萌发12 h后的GABA含量在0.238～5.26 mg/100 g之间,不同品种间GABA的含量差异显著,在萌发的0～12h内,GABA含量呈现先上升后下降的趋势,在8h时含量达到最高.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2015(030)011【总页数】5页(P135-139)【关键词】发芽麦粒;γ-氨基丁酸(GABA);高效液相色谱法【作者】张志清;徐杰;丛军;任飞【作者单位】四川农业大学食品学院,雅安625014;四川农业大学食品学院,雅安625014;四川农业大学食品学院,雅安625014;四川农业大学食品学院,雅安625014【正文语种】中文【中图分类】TS210γ－氨基丁酸（GABA）是一种非蛋白质氨基酸和重要的神经递质［1］，广泛存在于植物和动物体内，具有抗焦虑［2］，抗氧化［3］和生殖生理作用［4］。
GABA的制备主要有化学法、微生物法和植物富集法。
然而前2种方法各有欠缺，化学法条件苛刻，耗能大，且有化学物质的残留；微生物法效率较高，但高产菌株难以获得。
有学者报道可通过基因工程的办法来重组高产的大肠埃希氏菌富集GABA，但其能力仍不及通过植物富集的方法［6］。
GABA茶中_氨基丁酸的TLC测定及提纯研究
收稿日期:2008-05-19作者简介:黄亚辉,男(1969-),研究员,主要从事茶叶加工及生化研究。
E mail:yahuihuangzz@ 。
基金来源:国家科技部项目(2001BA535L -18)研究内容之一。
G ABA 茶中γ-氨基丁酸的T LC 测定及提纯研究黄亚辉1,曾 贞1,郑红发2,黄怀生2(1华南农业大学园艺学院,广州,510642;2湖南省茶叶研究所,长沙,410125)摘要:本文对G ABA 茶中有效成分γ-氨基丁酸的薄层扫描(T LC )检测以及提取、分离、纯化进行了研究,结果表明:正丁醇ν醋酸ν水体积比为4ν1ν1展开剂分离效果较好,Rf 值为0.46。
采用双波长扫描法检测,扫描波长分别为λS =515n m,λR =680n m,检测线性范围:0.5μL ～15μL,样品平均回收率为98.75%。
采用水提取法比乙醇提取法γ-氨基丁酸含量提高20%左右,732阳离子树脂对γ-氨基丁酸的静态最大吸附量为32.9mg ・g -1,1h 内其吸附速度较快,达吸附量的70%。
样液pH 值、流速等因子对树脂的吸附效率有影响,当pH 值为3.0,流速3m l ・m in -1时,树脂的吸附量达到最大值。
采用柠檬酸缓冲液和NH 3・H 2O 进行洗脱,当pH 为8.0～9.0时,γ-氨基丁酸洗脱率达94.68%。
关键词:γ-氨基丁酸;测定;提取;分离;纯化中图分类号:Q503文献标识码:A文章编号:1006-8376(2008)03-0011-05γ-氨基丁酸(G ABA )广泛存在于哺乳动物脑和脊髓中,是一种重要的抑制性神经传递物质,具有降血压、抗惊厥、镇痛和改善记忆等生理活性[1]。
最新研究表明还有调节激素分泌,改善更年期综合症,促进酒精代谢以及高效减肥等活性[2～4]。
日本茶学研究者首先发现,将茶鲜叶经过一定时间的厌氧处理会产生大量的γ-氨基丁酸,以此加工成的绿茶富含γ-氨基丁酸(含量一般在0.15%以上),并且将这种茶命名为G ABA 茶[5],经试验证实这种茶具有明显的降血压效果。
[转载]抑制性递质——γ-氨基丁酸（GABA）
[转载]抑制性递质——γ-氨基丁酸（GABA）原⽂地址：抑制性递质——γ-氨基丁酸（GABA）作者：浙江嘉兴王甫荣试题问题：试题中出现了抑制性递质——γ-氨基丁酸（GABA），来源、分布、机理和应⽤如何？⼀、发现过程1950 年有⼈发现哺乳动物正常脑内的 GABA 的浓度很⾼，但⽣理意义不明。
随后，有⼈从⽜脑中提取出⼀种能抑制螯虾牵张感受器神经元产⽣冲动提取液，发现其具有抗⼄酰胆碱及对脉⿏和家兔的回肠有收缩作⽤，并证明此提取液中起抑制作⽤的组分就是 GABA。
Segal等⼜证实 GABA 对哺乳动物的中枢神经具有普遍抑制作⽤，将⽤离⼦电泳分离得到的 GABA 注射于猫⽪层⼗字沟周围的神经元，可引起神经元的超极化，其电位与刺激⽪层表⾯突触所产⽣的抑制性电位相同，并发现⽤电刺激猫的⼩脑浦⽒细胞时第四脑室灌流液中的 GABA 含量增加 3 倍，因⽽推测浦⽒神经元释放的化学递质是 GABA。
⼆、来源和分布GABA由⾕氢酸经过⾕氨酸脱羧酶作⽤⽣成。
γ-氨基丁酸（GABA）是⼀种天然活性成分，⼴泛分布于动植物体内。
植物如⾖属、参属、中草药等的种⼦、根茎和组织液中都含有GABA。
在动物体内，GABA⼏乎只存在于神经组织中，其中脑组织中的含量最多，免疫学研究表明，其浓度最⾼的区域为⼤脑中⿊质。
三、⽣理作⽤γ-氨基丁酸是中枢神经系统中很重要的抑制性神经递质，它是⼀种天然存在的⾮蛋⽩组成氨基酸，具有极其重要的⽣理功能。
能促进脑的活化性，健脑益智，抗癫痫，促进睡眠，美容润肤，延缓脑衰⽼机能，能补充⼈体抑制性神经递质，具有良好的降⾎压功效。
促进肾机能改善和保护作⽤。
抑制脂肪肝及肥胖症，活化肝功能。
每⽇补充微量的γ-氨基丁酸有利于⼼脑⾎压的缓解，⼜能促进⼈体内氨基酸代谢的平衡，调节免疫功能。
GABA受体⼏乎分布于中枢神经系统内的所有神经元，主要存在于神经元的细胞膜上。
GABA受体分为GABAA、GABAB和GABAC三种亚型。
快速测定红曲中γ-氨基丁酸含量的薄层色谱-比色法研究
快速测定红曲中γ-氨基丁酸含量的薄层色谱-比色法研究李利;陈莎;赵颖;陈福生【摘要】通过对红曲中γ氨基丁酸(GABA)的提取方法、薄层色谱(TLC)展开剂及其显色斑洗脱液的比色法测定波长及范围的研究,建立了一种简便、快速测定红曲中GABA含量的方法.结果表明,红曲中GABA最佳提取方法为水提法,TLC分离的最佳展开剂为95％乙醇:25％氨水=4:1,GABA显色斑洗脱液的最大吸收波长为512nm,在2～10μg范围内GABA的含量同洗脱液光密度的线性关系良好(R2=0.9983).此方法对红曲样品中GABA的测定结果与高效液相色谱法0致性好,回收率为91.00％～96.33％,适合于大批量菌株筛选和发酵条件优化实验中GABA含量的定量分析.【期刊名称】《长江大学学报（自科版）农学卷》【年(卷),期】2012(009)012【总页数】4页(P23-26)【关键词】红曲;γ-氨基丁酸;薄层色谱;分光光度法【作者】李利;陈莎;赵颖;陈福生【作者单位】华中农业大学食品科学与技术学院,湖北武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】TS201.2红曲亦名丹曲，是以大米为原料，经红曲菌(Monascus spp.)发酵而成的米曲。
红曲在我国的应用至今已有一千多年的历史，它广泛用于酿酒、食品着色、发酵及中药等方面[1]。
γ-氨基丁酸(GABA)被认为是红曲中降压的主要成分[2-4]。
研究证明，GABA是哺乳动物中枢神经系统的抑制性神经递质，是一种生理活性物质，能够降低血压、促使精神安定、促进脑部血流、增进脑活力、改善脑机能、增加生长激素分泌，以及改善更年期综合症等[3,5-6]。
由于GABA对于电化学和紫外、可见光等不灵敏，因此，对其进行直接检测存在一定困难。
目前，国内外报道的GABA检测方法有高效液相色谱法[5,7]、毛细管电泳法[8]、放射受体法[9]、酶法[10]、纸层析法[11]等，但这些方法大多价格昂贵，多应用于医学领域。
高效液相色谱法测定发芽麦粒中γ-氨基丁酸(GABA)含量
硝 基氟 苯 （ Ｆ Ｄ Ｎ Ｂ） 、 异硫 氰酸苯酯 （ Ｐ Ｉ Ｔ Ｃ） ［ ５ ３ 和Ａ Ｑ Ｃ （ ６一氨基 喹啉 基 一Ｎ一羟 基琥 珀酰 亚 氨基 氨 基 甲酸 酯） ， 但 往往 会 因样 品类 型 不 同而 有所 差异 。本 研 究 拟 采用 ２ ， ４二硝 基氟 苯 （ Ｆ Ｄ Ｎ Ｂ） 作 为 柱 前衍 生 剂 ， 在
著， 在 萌发 的 ０—１ ２ ｈ内 ， Ｇ Ａ Ｂ Ａ含 量 呈现 先上 升后 下降 的趋 势 ， 在８ ｈ时含 量 达到 最 高。
关键 词 发 芽 麦粒 一氨基 丁 酸 （ Ｇ Ａ Ｂ Ａ） 高效液相 色谱 法 文献标 识码 ： Ａ 文 章编 号 ： １ ０ ０ ３— ０ １ ７ ４ （ ２ ０ １ ５ ） １ １ — ０ １ ３ ５— ０ ５ 中图分 类号 ： Ｔ Ｓ ２ １ ０
且有化学物质的残留 ； 微生物法效率较高 ， 但高产菌
株 难 以获得 。有 学 者报 道 可 通 过基 因工 程 的办 法 来
重 组高 产 的大肠 埃希 氏菌 富集 Ｇ Ａ Ｂ Ａ， 但 其 能 力仍 不 及 通过 植 物 富 集 的方 法 。 。 。相 比而 言 ， 植 物 富 集 方
蛋 白酶水解 后 生成 大 量 谷 氨 酸 ， 在 一 定 条 件 下 可 被 谷 氨酸 脱羧 酶催 化转 化生 成 Ｇ Ａ Ｂ Ａ， 同时可 以通过 补
充 谷 氨酸 钠 等 方 法 使 谷 物 中 Ｇ Ａ Ｂ Ａ 的 含 量 大 大 提 高 。麦粒 在萌 发 的过程 中 ， 各 种 酶 被 活化 ， 谷 氨 酸 在谷 氨酸脱 羧 酶 的作 用 下不 断转化 为 Ｇ Ａ Ｂ Ａ， 加 之麦 粒本身 就 含有一 定 的 Ｇ Ａ Ｂ Ａ， 通过 发 芽富集 能 显 著提