柱后衍生应用
伏格列波糖柱后衍生反应原理
伏格列波糖柱后衍生反应原理
伏格列波糖柱后衍生反应是一种氨基酸分析方法，基于氨基酸与试剂之间的化学反应来增加氨基酸的检测灵敏度和选择性。
以下是该方法的原理：
1. 柱后反应：在氨基酸分离柱后，将柱洗脱的氨基酸直接送入后衍生试剂溶液中进行反应。
常用的后衍生试剂包括维尔德试剂（ninhydrin）、二硫苏糖醛、邻苯二酚等。
2. 衍生反应：后衍生试剂在一定条件下与氨基酸发生反应，生成有色的衍生物。
这些衍生物通常具有强吸光度或发荧光的性质，可以通过光谱分析仪器进行检测。
3. 反应机理：不同的后衍生试剂与氨基酸反应机理有所差异。
以维尔德试剂为例，维尔德试剂的酸性酐环与氨基酸中的氨基反应生成胺基酸酐环络合物，再通过加热或碱处理转化为有色产物。
这种有色产物的颜色与氨基酸的种类、浓度相关，可通过光谱仪器进行定量测定。
通过伏格列波糖柱后衍生反应，可以实现氨基酸的分离和定量测定，该方法广泛应用于生物医学研究、食品分析等领域。
柱后衍生交换离子色谱法测定氨基酸组成
柱后衍生交换离子色谱法测定氨基酸组成
柱后衍生交换离子色谱法（Postcolumn Derivatization Ion Exchange Chromatography，PDIEC）是一种常用来测定氨基酸组成的分析方法。
该方法使用带有离子交换功能的柱进行色谱分离，将样品中的氨基酸分离开来。
在柱后，通过衍生化反应将氨基酸与某种试剂发生反应形成带有荧光或紫外可见吸收性质的产物，并通过检测这些产物的荧光或吸收信号来定量分析。
常用的衍生试剂有二硫染料（如二硫苏丹黑D、二硫苏丹红G 等）、芳香酮类（如二硫二羟甲基苯基乙酮，DABS-Cl）等。
这些试剂在与氨基酸发生反应后，会产生被吸收或荧光激发的物质，从而使氨基酸能够被检测到。
PDIEC方法具有高分离能力、高灵敏度和高选择性的优点，能够同时测定多种氨基酸，且对一些特定的氨基酸有较好的分析效果。
同时，该方法还能够测定非天然氨基酸和残基组成，对于生物样品的分析具有较高的应用价值。
总之，柱后衍生交换离子色谱法是一种常用的测定氨基酸组成的分析方法，可用于生物样品的分析和研究。
HPLC柱前衍生和柱后衍生
HPLC柱前衍生和柱后衍生1、为什么要衍生？衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。
对于GC来讲，多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性；对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。
2、衍生化分类：柱前衍生和柱后衍生。
柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物；柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。
3、适用的化合物：生物酸/碱、胺类、抗生素（聚醚类抗生素多见）和氨基酸类。
4、衍生化要求？1）衍生剂必须过量且稳定；不过量反应不完全，检测不充分。
不稳定，重现性差。
2）衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。
当然如果只能检测到衍生产物最好。
3）衍生反快速完全。
反应慢，柱前衍生还可以，但柱后不行。
因为流速固定，衍生池管路长度一定，留给衍生化的时间是一定的。
柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样，但也是影响效率的。
5、两种衍生比较柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生，而且对衍生时间要求相对宽泛。
缺点是，引入了过多的物质，如：衍生剂、衍生产物（当然这个是检测需要的）和衍生副产物，对柱子有潜在的负面影响，另如采用手工衍生也会引入过多的认为因素。
柱后衍生优点是，重现性好，认为因素少，引入物质比较少。
缺点是，可能有扩散问题，在柱子中分离结束后，就存在扩散，如果衍生慢（必然流速低）、管路长扩散问题就会比较严重，再有就是要求有一套外源的泵系统和一个检测池，对于设备要求较高。
仪器管路的清洗Agilent的液相，反相柱，想用异丙醇清洗下系统.用纯异丙醇,流速一般在0.2~0.4ml/min先用甲醇-水，甲醇洗，再用异丙醇洗，流速低一点，根据你的压力决定，不要超过平时使用压力就可以了,洗完了，再用甲醇洗把流通池拿掉，看基线，基本可以确定，问题在哪个方向，如果基线稳定，那就是流通池或者流动相或者泵什么的问题了.再有，检测器光路透镜老化什么的也会有这个情况，光电倍增管是否老化等基线走不平一般是1.流动相脏，2.灯能量不够（流通池），3.系统有气泡，4.泵压力不稳。
光化学柱后衍生
光化学柱后衍生
光化学柱后衍生是一种分析化学方法，它结合了光化学反应和化学分离技术，可用于有机化合物的检测和分析。
该方法能够对样品中的化合物进行选择性检测和分离，而且具有高灵敏度和分辨率。
光化学柱后衍生的基本原理是，在紫外辐射下，荧光染料和有机化合物发生光化学反应，形成新的化合物。
通过进样和色谱技术，可将反应产物从样品中分离出来，经过检测器的检测后，就能够得到化合物的结构和含量信息。
光化学柱后衍生有许多优点，例如可检测多种化合物、低浓度下也能检测、具有高选择性和灵敏度等等。
另外，该方法可在短时间内完成分析，是一种比较快速的分析方法。
当然，光化学柱后衍生也存在一些问题。
例如，样品的情况会影响反应效果，因此对样品的处理是十分重要的，而且反应后的产物也需要注意保存，以免失去灵敏度。
总之，光化学柱后衍生是一种健康环保、快速分析并获取信息的方法，特别适用于有机化合物的检测和分析。
同时，也需要注意样品的处理和反应产物的保存等问题。
hplc柱前衍生和柱后衍生[整理版]
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HPLC柱前衍生和柱后衍生1、为什么要衍生？衍生化最为主要的目的就是提高目的物的可检测性。
对于GC来讲，多数是为了增强目的物挥发性或者改善目的物极性；对于HPLC来讲多数是为了提高检测器对目的物的相应。
2、衍生化分类：柱前衍生和柱后衍生。
柱前衍生是在经过分析柱前使分析物与衍生剂反应，反应产物在分析柱上实现分离，实际分离的是衍生产物，检测的也是衍生产物；柱后衍生是分离物在分析柱中实现分离后，在衍生池内与衍生剂反应，在柱子中分离的是目的物，在检测器处检测的衍生产物。
3、适用的化合物：生物酸/碱、胺类、抗生素（聚醚类抗生素多见）和氨基酸类。
4、衍生化要求？1）衍生剂必须过量且稳定；不过量反应不完全，检测不充分。
不稳定，重现性差。
2）衍生物、衍生产物和衍生副产物至少是好分离的。
当然如果只能检测到衍生产物最好。
3）衍生反快速完全。
反应慢，柱前衍生还可以，但柱后不行。
因为流速固定，衍生池管路长度一定，留给衍生化的时间是一定的。
柱前衍生可以在系统外等衍生完毕后进样，但也是影响效率的。
5、两种衍生比较柱前衍生优点是，对设备要求不高，可以手工衍生，而且对衍生时间要求相对宽泛。
缺点是，引入了过多的物质，如：衍生剂、衍生产物（当然这个是检测需要的）和衍生副产物，对柱子有潜在的负面影响，另如采用手工衍生也会引入过多的认为因素。
柱后衍生优点是，重现性好，认为因素少，引入物质比较少。
缺点是，可能有扩散问题，在柱子中分离结束后，就存在扩散，如果衍生慢（必然流速低）、管路长扩散问题就会比较严重，再有就是要求有一套外源的泵系统和一个检测池，对于设备要求较高。
仪器管路的清洗Agilent的液相，反相柱，想用异丙醇清洗下系统.用纯异丙醇,流速一般在0.2~0.4ml/min先用甲醇-水，甲醇洗，再用异丙醇洗，流速低一点，根据你的压力决定，不要超过平时使用压力就可以了,洗完了，再用甲醇洗把流通池拿掉，看基线，基本可以确定，问题在哪个方向，如果基线稳定，那就是流通池或者流动相或者泵什么的问题了.再有，检测器光路透镜老化什么的也会有这个情况，光电倍增管是否老化等基线走不平一般是1.流动相脏，2.灯能量不够（流通池），3.系统有气泡，4.泵压力不稳。
柱后衍生系统
柱后衍生系统简介柱后衍生系统（Post-Column Derivatization System）是一种用于气相色谱（GC）和液相色谱（LC）技术中的衍生化方法。
该系统通过在色谱柱分离之后，对样品中的目标分析物进行化学衍生，从而使分析物在检测器中产生更强的信号，提高检测灵敏度和选择性。
工作原理传统的色谱分析方法往往受限于分离柱对一些化合物的保留和分离能力。
柱后衍生系统的出现打破了这样的限制。
它采用两个色谱柱串联的工作方式。
第一个色谱柱负责分离和保留目标化合物，而第二个柱则用于进行化学衍生反应。
在柱后衍生系统中，样品在第一个色谱柱中被分离和富集。
接下来，经过柱间连接器，样品被导入到第二个柱中。
在第二个柱中，经过一个或多个化学反应，目标分析物被转化为具有更好特性的衍生物。
最后，在检测器中对衍生物进行检测和分析。
应用领域柱后衍生系统在各种领域中得到了广泛应用。
以下是柱后衍生系统的一些常见应用领域：环境监测柱后衍生系统可以用于环境样品中有机污染物的分析。
在环境监测中，样品通常非常复杂，含有大量不同的有机化合物。
柱后衍生系统可以通过对目标化合物进行衍生化反应，减少背景干扰物质的干扰，提高目标物的检测灵敏度。
食品安全检测柱后衍生系统也可以应用于食品安全领域。
食品中常常含有一些残留农药、兽药和食品添加剂等有害物质。
柱后衍生系统可以对这些目标物进行衍生化反应，提高检测的准确性和灵敏度。
药物分析在药物分析中，柱后衍生系统可以将药物代谢物和其它衍生物与药物相分离，从而提高药物分析的准确性和选择性。
此外，柱后衍生系统还可以进行药物代谢动力学研究，帮助了解药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
生物医学研究在生物医学研究中，柱后衍生系统可以应用于生物样品（例如血清、尿液等）中目标物的确定和定量。
通过对生物样品中的目标分析物进行化学衍生，可以提高目标物的检测灵敏度和选择性。
同时，柱后衍生系统还可以进行代谢物的分析，从而帮助探索生物过程中的新生物标志物。
柱后衍生—HPLC测定与分析沉香中黄曲霉毒素
柱后衍生—HPLC测定与分析沉香中黄曲霉毒素目的：对沉香中黄曲霉毒素进行测定。
方法：采用柱后衍生-HPLC联用技术，测定沉香中黄曲霉毒素的含量，了解所获沉香中黄曲霉毒素污染情况。
结果：按照《中国药典》2015版的要求与指导原则，69批次沉香样品均未检出黄曲霉毒素。
结论：柱后衍生-HPLC联用技术测定沉香中黄曲霉毒素方法可行，我国沉香黄曲霉毒素未受到黄曲霉毒素污染。
标签：沉香；黄曲霉；柱后衍生-HPLC黄曲霉毒素是真菌毒素中毒性最强的一种真菌毒素，具有极强的毒性和致癌性。
在自然界中，无论是土壤、腐烂有机质物品与植物纤维、农产品或者其他食品上都有黄曲霉毒素存在。
黄曲霉最适宜生存在相对湿度85%左右的热带、亚热带地区并产生黄曲霉毒素。
我国地域十分辽阔以及气候的多样性和复杂性导致我国中药材和中药饮片在加工、贮藏、运输的过程中，很容易发生霉变而导致被黄曲霉毒素污染。
因此，检测中药材中黄曲霉毒素具有极其重要的意义[1-4]。
目前2015版《中国药典》仅仅对少数几种中药材规定有关黄曲霉毒素含量的限度标准，如陈皮，胖大海等。
沉香是我国的名贵中药材之一，2016年广东省通过立法保护广东八种道地中药材，沉香为其中之一。
由于沉香主产越南、海南和广东等热带和亚热带地区，该地区的环境条件极易被黄曲霉等真菌类污染而产生黄曲霉毒素。
因此，笔者拟采用柱后衍生与高效液相色谱联用技术[5-8]，通过对沉香进行黄曲霉毒素测定，建立沉香中黄曲霉毒素含量测定的方法，为监管部门提供技术支持。
1仪器与材料11仪器Waters 2695/2475高效液相色谱仪及柱后衍生系统；色谱柱：Shim-pack CLC-ODS C18（150mm×6mm，5μm）、phenomenex gemini C18（250mm×46mm，5μm）、Thermo ODS-2 HYERSIL（200mm×46mm，5μm）、Agilent Zorbax SB-C18（250mm×46mm，5μm）；离心机：Thermo Scientific Multifuge X1R 12材料黄曲霉素混合对照品（批号：46304-U LB8422，B1、B2、G1、G2纯度分别为990%、990%、997%、995% ，Supelco Analitical）。
斯威特柱后衍生系统原理
斯威特柱后衍生系统原理解析1. 背景介绍斯威特柱后衍生系统（Swivel Posterior Derivation System）是一种用于语言模型的后处理技术。
在自然语言处理中，语言模型是指能够预测下一个词或者短语的模型。
斯威特柱后衍生系统通过对已生成的文本进行修正和改进，提高了生成文本的质量和流畅度。
2. 基本原理斯威特柱后衍生系统基于以下两个基本原理来进行文本修正和改进：2.1 后验概率调整在生成文本时，语言模型会根据上下文预测下一个词或短语。
然而，由于训练数据的限制以及模型复杂度等因素，语言模型可能会产生一些不合理或不流畅的词组。
斯威特柱后衍生系统通过计算每个词组出现的条件概率，并与一个经验阈值进行比较，来判断该词组是否需要调整。
如果该词组出现的条件概率低于经验阈值，则认为需要对其进行调整。
具体地，在判断一个词组是否需要调整时，斯威特柱后衍生系统会考虑以下几个因素： - 词组的上下文信息：词组出现的上下文信息对该词组的合理性有很大影响。
如果一个词组在给定的上下文中不够合理，那么可能需要进行调整。
- 词组的频率信息：如果一个词组在训练数据中出现的频率较低，那么它可能是一种不常见或者不合理的表达方式，需要进行调整。
- 词组的语法信息：如果一个词组违反了语法规则，那么它可能需要进行调整。
基于以上因素，斯威特柱后衍生系统可以计算出一个后验概率，用于判断是否需要对该词组进行调整。
如果后验概率低于经验阈值，则认为该词组需要调整。
2.2 调整算法当判断出一个词组需要调整时，斯威特柱后衍生系统会使用一种基于统计和规则的算法来对其进行修正。
具体地，在修正过程中，系统会考虑以下几个因素： - 上下文信息：通过分析上下文中其他相关的词汇和短语，系统可以更好地判断该词组应该如何调整。
- 语法规则：根据语法规则，系统可以调整词组的顺序、形态和结构，使其更符合语言的规范。
- 语义信息：通过分析词组的语义信息，系统可以对其进行合理的替换或修改。
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38 Lysine
赖氨酸
39 Histidine
组胺酸
40 3-Methyl-histidine
3-甲基组氨酸
41 1-Methyl-histidine
1-甲基组氨酸
Sarcosine 12
肌氨酸
-Aminoadipic acid 13
α-氨基己二酸
Proline
14 脯氨酸
Glycine 15
仪器： z 二元液相 z 荧光检测器 z 钾盐阳离子交换柱，4.0 x 150 mm z 钾盐阳离子交换保护柱 3.0 x 20 mm z SPE 小柱，阳离子交换
衍生剂： z 钾盐洗脱液 z 钾盐再生试剂 z 次氯酸盐 z 邻苯二甲醛稀释液（o-Phthalaldehyde） z 巯基乙醇 (Thiofluor) z 邻苯二甲醛 z 5%次氯酸钠溶液 z 二氯甲烷 z 酸性调节剂
λex: 365 nm λem: 430 nm
黄曲霉毒素 B1，B2，G1，G2，M1，和 M2
荧光检测和柱后衍生法测定氨基甲酸酯类(Carbamate)农药多残留
柱后衍生条件： 衍生剂 1： 0.05mol/L NaOH 水解衍生剂 衍生剂 2： 100 mg 邻苯二甲醛 (O-Phthaladehyde，OPA), 巯基乙醇 (Thiofluor) 反应器 1（水解温度）： 100 °C, 0.5 mL 反应器 2（衍生温度）： 室温，0.1ml 衍生剂流速： 0.3ml/min
0 0 0 0 0
Li375 % 0 0 0 0
100 100 80 80
0
RG003 % 0 0 0 0 0 0 20 20 0
λem: 465nm
步骤
0 1 2 3
时间 （min）
0 0-15 15.1-17 17.1-25
间隔 （min）
0 15 1.9 7.9
钾盐洗脱液 （%） 100 100 0 100
钾盐再生试剂 （%） 0 0 100 0
0.40 mL/min
进样 等度分离 阶跃变化 重新平衡
苜蓿和西红柿中草甘膦和氨甲基磷酸残留量含量的色谱图
碘化衍生法测定黄曲霉毒素含量
分析条件： 色谱柱：C18 柱（150 x 4.6 mm，5 pm) 温度：42 °C 流速：1.0 mL/min 流动相：甲醇：乙腈：水=22:22:56，等度 柱后衍生条件： 温度: 90 °C 反应器体积: 1.4 mL 柱后衍生溶液(0.05%碘溶液): 称取 0.1 g 碘，溶解于 20 mL 甲醇后，加纯水定容至 200 mL,，以 0. 45 um 的尼龙滤膜过滤,4℃避光保存。 流速: 0.3 mL/min 检测: 荧光计，氙灯
柱温箱条件
时间 [min] 0 13 30 67 80 90 95
温度 [°C] 32 32 56 61 70 70 32
HPLC 条件
时间 [min] 0 20 40 57
57.1 78 78.1 95 95.1
Li290 % 100 100 0 0 0 0 0 0 100
Li365 % 0 0
100 100
甘氨酸
Phenylalanine 27
苯丙氨酸
-Alanine 28
β-丙氨酸
-Amino-i-butyric acid
29 β-氨基-i-正丁酸
Homocystine 30
高胱氨酸
42 Anserine
甲肌肽
43 Carnosine
肌肽
44 Homocarnosine
高肌肽
45 Arginine
精氨酸
衍生法测定氨基酸
分析条件： 色谱柱: 高效锂盐阳离子交换色谱柱， 4x100 mm
锂盐阳离子交换保护柱, 2x20 mm. 流速: 0.4 mL/min 流动相: Li292, Li365, Li375, RG003
柱后衍生条件： 反应器体积：0.5 mL 温度: 130 °C 衍生剂: 茚三酮 流速: 0.3 mL/min 检测: UV/VIS 在 570 nm 检测主要的氨基酸
液相分析条件 柱温: 55°C 进样体积: 100 μL 流速: 0.40 mL/min 流动相: 钾盐洗脱液，钾盐再生试剂
柱后衍生条件
反应器体积: 0.5 mL 反应器温度: 36°C 衍生剂 1: 100μL ，5%次氯酸钠( NaOCl) 衍生剂 2: 100 mg 邻苯二甲醛(o-Phthalaldehyde) 和 2g 巯基乙醇(Thiofluor) 衍生剂流速: 0.3 mL/min each 检测: 荧光检测器 λex: 330nm
磷酸乙醇胺
Urea 4
尿素
Aspartic acid
5 天门冬氨酸
Hydroxyproline 6
羟基脯氨酸
Threonine 7
苏氨酸
Serine
8 丝氨酸
Asparagine 9
氨羰丙氨酸(天门冬酰胺)
Glutamic acid 10
谷氨酸
Glutamine
11 谷氨酸盐
Alanine 16
丙氨酸
在 440 nm 检测次要的氨基酸
注意 在这个方法中我们建议使用氨基葡糖酸作为内标物。 己氨酸和 a-氨基 –b-胍基丙酸 不适合作为内标物，因为它们分别会随着络氨酸和 3-甲基组氨酸一起 洗脱出来。
氨基酸校正标准
MSUD 病人血清
Phosphoserine 1
磷酸丝氨酸
Taurine 2
牛磺酸
Phosphoethanolaminห้องสมุดไป่ตู้ 3
12 BDMC (internal standard)
甲醇性样品的条件:
时间
水%
甲醇 %
0
85
15
1
85
15
44
25
75
44.1
0
100
49
0
100
49.1
85
15
57
85
15
流速： 1ml/min 柱温 42°C, 进样体积 10 µL
OPA 衍生法测定草甘膦类(Glyphosate)除草剂残留
检测： 荧光计： ex 330 nm, em 465 nm
C18, 4.6 x 250 mm, 5 µm
1 Aldicarb sulfoxide 涕灭威亚砜 2 Aldicarb sulfone 涕灭威砜 3 Oxamyl 草氨酰 4 Methomyl 灭多威 5 3-Hydroxycarbofuran 3-羟基呋喃丹 6 Aldicarb 涕灭威 7 Propoxur 残杀威 8 Carbofuran 克百威 9 Carbaryl 胺甲萘 10 1-Naphthol 1-萘酚 11 Methiocarb 灭虫威
异白胺酸
Leucine 25
白胺酸
Tyrosine
26 酪氨酸
31 γ-Aminobutyric acid
γ-氨基丁酸
32 Tryptophan
色氨酸
33 Ethanolamine
乙醇胺
34 Hydroxylysines
羟(基)赖氨酸
35 Ammonia
氨水
36 Creatinine
肌氨酸酐
37 Ornithine
Citrulline
17 瓜氨酸
α-Amino-n-butyric acid
18
α-氨基-n-正丁酸
Valine 19
缬氨酸
Cystine
20 胱氨酸
Methionine 21
蛋氨酸
Allo-isoleucine 22
异白胺酸（同分异构体）
Cystathionine
23 丙氨酸丁氨酸硫醚
Isoleucine 24