公共用品微生物的采样方法
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。
3培养：于37℃培养24小时。
4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。
1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。
结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2，5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2一般区域：细菌总数≤100个∕cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。
公共场所公共用品用具微生物、室内空气细菌总数采样操作规程
1.目的公共场所公共用具微生物采样和公共场所/室内空气细菌总数采样，应当规范采样操作、正确使用仪器，保证样品的准确、有效性。
2.文件说明根据公司情况，最为常见、最难的采样类别就是以上两种，以后遵照本文件进行现场检测采样工作。
其他像室内空气质量、水质监测等各类采样和环境采样无实质性的区别，就不一一说明。
3.公共场所公共用具微生物采样方法3.1一般要求随机抽取清洗消毒后准备使用的公共用品、用具，无菌操作，使用灭菌干燥棉试子，于10ml灭菌生理盐水内浸润（吸取约1ml 溶液）后，在用品用具的适当部位来回均匀涂抹进行样品采集，再用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入剩余的9ml 生理盐水内，4h内送检。
3.2采集部位与采集面积3.2.1 杯具在杯具内、外缘与口唇接触处，即1cm-5cm高处一圈采样。
采样总面积为502cm。
3.2.2棉织品1）在毛巾、枕巾、浴巾对折后两面的中央5cm×5cm(252cm)面积范围内分别均匀涂抹5次，每252cm采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
2）在床单、被单的上下两部即与颈部、脚部接触部位5cm×5cm(252cm采样面cm)面积范围内分别均匀涂抹5次，每252积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
3）睡衣、睡裤随机选择2个5cm×5cm(252cm)面积范围内分别均匀涂抹5次，每252cm采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
3.2.3洁具1）浴盆：在盆内一侧壁二分之一高度及盆底中央5cm×5cm(252cm)范围内分别涂抹采样，每252cm采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
2）脸（脚）盆：在盆内二分之一高度相对两侧壁5cm×5cm(252cm)范围内分别涂抹采样，每252cm采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
3）坐便器：在坐便圈前部弯曲处选择两个5cm×5cm(252cm)范围内分别涂抹采样，每252cm采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。
公共微生物采样
规定了公共场所空气中细菌总数、 真菌总数、β-溶血性链球菌和 嗜肺军团菌的现场采样与实验 室培养方法。
细菌总数
• 公共场所空气中采集的样品，计数在营养 琼脂培养基上经35℃~37℃、48h培养所生 长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的 总数。
采样方法
• 撞击法 • 自然沉降法
撞击法
• 仪器设备： 六级筛孔撞击式生物采样器
坐便器：在坐便圈前部弯曲处选择2个5㎝×5 ㎝（25c㎡）范围内分别涂抹采样，每25c ㎡采样面积为1份样品，每件用具共采集2 份样品。 按摩床（椅）：在床（椅）面中部选择2个5 ㎝×5㎝（25c㎡）范围内分别涂抹采样， 每25c㎡采样面积为1份样品，每件用具共 采集2份样品。
• 4.鞋类：在每只次，1双鞋 为1份样品，采样总面积为50c ㎡.
自然沉降法
• 布点要求
室内面积
2 不足50m
采样点数
2 50m 以上
3 5
• 均匀布点的原则，3个点的设置在室内 对角线四等分的3个等分点上，5个点 按梅花布点 • 距离地面高度采样点距离地面高度 1.2~1.5m，距离墙壁不小于1m • 采样点应避开通风口、通风道等
自然沉降法
采样环境条件：同撞击法 采样方法：将营养琼脂平 板置于采样点处，打开皿 盖，暴露5min
公共场所卫生检验方法
第3部分：空气微生物
• • • • • •
GB/T 18204 物 理 因 素 化 学 污 染 物 空 气 微 生 物 公 共 用 品 用 具 微 生 物 集 中 空 调 通 风 系 统
卫 生 监 测 技 术 规 范
所 卫 生 检 验 方《 法公 》共 场
GB/T18204.3-2013《空气微生物》
公共场所用品用具微生物检验原始记录
公共场所用品用具微生物检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：检测依据：GB/T 18204.4-2013采样、检验及结果计算：1 杯具﹑鞋类﹑购物车（筐）﹑修脚工具细菌总数与真菌总数：用无菌生理盐水棉拭子50cm²被检物表涂抹采样，拭子放入10mL生理盐水内，取1mL倾注注营养琼脂平板，平行一次，36±1℃温箱48小时。
计算方法：细菌菌落总数（cfu/50cm²）=平皿上菌落的平均数×采样液稀释倍数；真菌菌落总数（cfu/50cm²）=平皿上菌落的平均数×采样液稀释倍数。
2 杯具﹑鞋类﹑购物车（筐）﹑修脚工具大肠菌群：（发酵法）：按GB/T18204.4-2013操作。
3 毛巾、枕巾、浴巾细菌总数与真菌总数：对折后两面的中央用无菌生理盐水棉拭子25 cm²被检物表涂抹5次采样，拭子放入10mL生理盐水内，每件用品共采集2份样品。
取1mL倾注营养琼脂平板，平行一次，36±1℃温箱48小时计数。
计算方法：细菌菌落总数（cfu/25cm²）=平皿上菌落的平均数×稀释倍数；真菌菌落总数（cfu/25cm²）=平皿上菌落的平均数×采样液稀释倍数。
4毛巾、枕巾、浴巾大肠菌群：按GB/T18204.4-2013操作。
5 理发用具大肠菌群、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌检验：按GB/T18204.4-2013操作。
2初发酵实验：36±1℃发酵管培养小时；分离培养：36±1℃倒置培养小时；证实性实验：36±1℃注：○+产酸产气；+产酸不产气或有可疑菌落；-不产酸不产气或无可疑菌落；G-b革兰氏阴性杆菌；G+b革兰氏阳性杆菌；G+c革兰氏阳性球菌。
电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：样品编号：三、真菌总数：（平皿计数法）注：+生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；G+c革兰氏阳性球菌；G-c革兰氏阴性球菌；注：+生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；G+c革兰氏阳性球菌；G-c革兰氏阴性球菌；电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：。
公共用品微生物的采样方法
公共用品微生物的采样方法涂抹是公共用品微生物样品采集的常用方法之一。
公共卫生执业医师考核的样品包括：茶具、餐具，毛巾和枕巾、枕套，床单和被套等卧具，脸盆、脚盆和浴盆，拖鞋，理发用具六类不同公共用品的采样。
采样所需设备：灭菌试管（内装10mL生理盐水）、100mL无菌烧瓶（内装50mL生理盐水）、250mL无菌烧瓶（内装125mL生理盐水）、无菌棉拭子、灭菌剪刀、灭菌5c m×5cm规格板、酒精灯、酒精棉球、工作服（白大衣、帽子、口罩）、记号笔、灭菌镊子、采样记录单。
采集样品前的准备：1穿好白大衣，带好帽子及口罩2点燃酒精灯3手消毒。
茶具、餐具微生物的采样方法：1打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口。
2随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具或餐具，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具或餐具与口唇接触处，1-1.5cm处内外缘涂抹一周。
3用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10mL生理盐水中。
4用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖。
5试管上标明样品编号。
毛巾或枕巾（套）微生物的采样方法：1打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口。
2随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾或枕巾、枕套，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾或枕巾、枕套对折后两面的中央各25cm2面积上，在灭菌规格板里用力、均匀涂抹5次。
3用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10mL生理盐水中。
4用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖。
5试管上标明样品编号。
床单、被套等卧具微生物的采样方法：1打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口。
2随机抽取清洗消毒后准备使用的床单或被套等物品，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，分别在床单或被套两端的中间25cm2处以及床单或被套中央部位25cm2面积上，在灭菌规格板里用力、均匀涂抹5次。
3用灭菌剪刀剪去棉签手接触部分，将棉拭子放入10mL生理盐水里。
4用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖。
5试管上标明样品编号。
6注意：浴巾或浴衣、浴裤采样时，可随机选择某部位25cm2面积上用力、均匀涂抹5次。
公共场所空气中细菌总数检验方法
公共场所空气中细菌总数检验方法1 定义撞击法（impacting impacting methodmethod ）是采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流，使用空气通过狭颖或小孔而产生高整气流，使用使用悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37°、48h 培养后，计算出每m3空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
自然沉降法（natural sinking method ）是指直径）是指直径9cm 的营养琼脂平板在采样点暴露15分钟，经37°、48h 培养后计数生长的细菌菌落数的采样测定方法。
2 仪器和设备2.1高压蒸汽灭菌器。
2.2干热灭菌器。
2.3恒温培养箱。
2.4冰箱。
2.5平皿（直径9cm ）。
2.6制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH 计或精密pH 试纸等。
2.7撞击式空气微生物采样器。
3培养基3.1营养琼脂培养基3.1.1成分；蛋白胨牛肉浸膏10g 氯化钠 3g 氯化钠琼脂 15～20g 琼脂蒸馏水 1000ml 蒸馏水3.1.2制法制法 将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min高压灭菌。
用自然沉降法测定时，倾注约15ml于灭菌平皿内，制成营养琼脂平板。
撞击法参照采样器使用说明制备营养琼脂平板。
平板。
4操作步骤操作步骤4.1撞击法撞击法4.1.1选择有代表性的位置设置采样点。
将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。
说明进行采样。
4.1.2样品采完后，将带核辐射营养琼脂平板置36±36±11℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每m3空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。
报告结果。
4.1.3选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。
选择撞击式空气微生物采样器的基本要求。
（a）对空气中细菌捕获率达95%。
（b）操作简单，携带方便，性能稳定，便于消毒。
公共卫生采(抽)样技术
（1）、种植业滥加农药；
（2）、养植业滥加饲料添加剂及 兽药；
（3）、食品业滥加添加剂。
二、食物中毒发病特点：
食物中毒的发病与食物有关。 发病潜伏期短，来势急剧，呈爆发性。 所有中毒病人临床表现基本相似。 一般无人与人之间的直接传染。
三、食物中毒的分类：
最常见的分类方法按病原学分类，将 食物中毒分为4类。
• 细菌性食物中毒 • 有毒动植物食物中毒 • 化学性食物中毒 • 霉菌毒素与霉变食品中毒
2、一般采样程序
采样至少2人，到达被检查单位应出示“采（抽）样 员证”，由被检查单位派员陪同，按规定方法采样。
对样品进行编号签封，并填写“样品采集记录表”一 式3份，详细记录样品名称、采样的时间、地点、方 法、数量等，最后采样者和被检查单位在“样品采集 记录表”上签字。
必要时，应作现场情况调查，（如原料来源、加工方 法、运输保存条件、销售各环节的卫生状况及有关证 件等）并作详细记录。现场监测时，应准确记录所测 数据。
公共卫生采（抽）样技术
现场采（抽）样程序和方法
采（抽）样的目的 样品的分类 采样的程序和方法 不同样品的采样方法 采样的数量 样品的保存和运送 现场采样操作的质量控制
一、采（抽）样的目的
采样是从整体样品采（抽）取能有代表 性的样品，通过感官检查和实验室检查， 了解样品的卫生质量，作出正确的卫生评 价。
+
+
蜡样芽孢 杆菌
黄水样便、 少数 量少有恶 嗅
+
少数
±
少数
金黄色葡 萄球菌
肉毒梭 菌
公共卫生基本操作技能——第二章 样品的采集与现场检测
公共卫生基本操作技能——第二章样品的采集与现场检测考情分析本章样品采集与现场检测是在第三站第一题的位置，分为样品采集和现场检测两部分内容。
题目为两者之一。
样品采集为三部分：环境样品、食品样品、医院消毒效果检测。
这部分内容较多，考生遇见的可能性大。
现场检测主要为仪器的使用方法和注意事项等，这部分内容相对少，但是要注意仪器使用细节，容易丢分。
考试大纲样品采集1.环境样品◆水样品采集◆空气样品采集◆公共用品采集2.食品样品散装食品（固态、液态）的微生物样品采集3.医院消毒效果检测空气、手、物体表面、医疗用品、消毒剂的样品采集现场检测仪器的操作：噪声测定仪、风速仪、照度仪、紫外辐照计水样品采集采样前准备采样容器的选择水样采集一般要求类型▲水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）▲出厂水▲末梢水（龙头水）▲二次供水▲分散式供水1.水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）采样工具：河流、湖泊、水库水和自涌泉---水桶直接采集一定深度的水---直立式采水器非自涌泉水、深井水---充分抽汲后采集（1）河水样品的采集河流不同深度的采样点（垂直）不同规模河流的采样点（断面）河流采样断面的设置（2）湖泊、水库水样品的采集采样断面的设置①进入湖泊、水库的河流汇合口处。
②在生活污水和工业污水的排污口、城乡生活饮用水源取水口的辐射线上设置弧形采样断面。
③在湖泊、水库中心和沿水流流向以及滞流区分别设置采样断面。
④风景游览区、游泳场、排灌站、不同鱼类的回游产卵区和水生生物经济区等处设置采样断面。
（3）地下水样品的采集地下结构复杂，调查与监测点的设置受到限制1）浅层地下水监测点：目标井及周围30m范围的井及河流。
2）深层地下水和泉水：结合情况在补给水源范围内的井及河流布点。
3）机井水、手压泵井：泵抽水、压水15min后采集水样。
2.出厂水的采集出厂水：集中式供水单位水处理工艺完成的水采样点：水出厂进入输配水管网前监测点：集中式供水单位的出水口处采样点数=水厂出水口数末梢水采样点数公共卫生基本操作技能---末梢水样品采集一、测定一般理化指标的水样采集1.选择采样容器——5000ml（5L）的聚乙烯采样桶。
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公共用品微生物的采样方法：
涂抹是公共用品微生物样品采集的常用方法之一
样品包括（六类不同公共用品的采样）：茶具、餐具；毛巾和枕巾、枕套；床单和被罩
等卧具；脸盆、脚盆和浴盆；拖鞋、理发用具。
采样所需设备：灭菌试管（内装10ml生理盐水）、100ml无菌烧瓶（内装50ml生理盐
水）、250ml无菌烧瓶（内装125ml生理盐水）、无菌棉拭子、灭菌剪刀、灭菌5cm X 5cm规格板、酒精灯、酒精棉球、工作服/白大衣、口罩、帽子、记号笔、灭菌镊子、采样记录单
采集样品前的准备：
1 穿好白大衣、戴好帽子及口罩
2 点燃酒精灯
3手消毒
一茶（餐）具微生物的采样方法
1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口
2 随机抽取清洗消毒后准备使用的茶具或餐具，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具或餐具与口唇接触处，1-1.5cm高度的内外缘各涂抹一周
3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中
4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
5 试管上标明样品编号
二毛巾、枕巾（套）微生物的采样方法
1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口
2 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、枕巾（套），用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾（套）对折后两面的中央，各25cm²面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次
3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中
4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
5 试管上标明样品编号
三床单和被罩等卧具微生物的采样方法
1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口
2 随机抽取清洗消毒后准备使用的床单和被罩等用品，用灭菌生理盐水湿润棉拭子，分别在床单或被罩两端的中间，25cm²面积处以及床单或被罩中央部位25cm²面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次
3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中
4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
5 试管上标明样品编号
6注意：浴巾或浴衣、浴裤采样时，可随机选择某部位25cm²面积上，在灭菌规格板里用力均匀涂抹5次
四脸盆、脚盆和浴盆微生物的采样方法
1 打开100ml无菌烧瓶盖，用酒精灯烧灼瓶口
2 选择在脸盆或脚盆的内壁，1/2-1/3高度，相对两侧壁采样，采样时用两支浸有生理盐水的棉拭子，分别在两个采样点的灭菌规格板，25cm²面积内，来回均匀涂满整个方格，并随之转动棉拭子
3 用灭菌剪刀，剪去棉拭子与手接触部分后，将涂抹脸盆或脚盆的两支棉拭子一并放入内装有50ml生理盐水的100ml无菌烧瓶中
4 用酒精灯烧灼瓶口，盖好瓶盖
5 试管上标明样品编号
6 注意：浴盆采样点分布，盆内四壁中间及盆地，呈梅花状分布，用五支浸有生理盐水的棉拭子分别在5个采样点的规格板，25cm²面积内，来回均匀涂满整个方格，并随之转动棉拭子，用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分后，将涂抹脸盆或脚盆的五支棉拭子一并放入内装有125ml生理盐水的250ml无菌烧瓶中
五拖鞋中微生物的采样方法
1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口
2 将无菌棉拭子蘸取生理盐水，在每只拖鞋鞋面，与脚趾接触处，25cm²面积上（两只鞋共计面积），有顺序各均匀涂抹3次，一双拖鞋为一份样品
3 用灭菌剪刀，剪去棉签与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中
4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
5 试管上标明样品编号
六理发用具微生物的采样方法
1 打开试管盖，用酒精灯烧灼试管口
2 将蘸有无菌生理盐水的棉拭子，在理发刀或理发剪等修剪工具的两个侧面，各涂抹一次，两个刀或两个剪为一份样品
3 用灭菌剪刀，剪去棉拭子与手接触部分，将棉拭子放入10ml生理盐水中
4 用酒精灯烧灼试管口，盖好试管盖
5 试管上标明样品编号
6 注意：推子采样时，在其前部上下均匀各涂抹三次，一个推子为一份样品。