微生物采样方案
食品微生物样品的采样与处理、检验与报告(一)2024
食品微生物样品的采样与处理、检验与报告（一）引言概述:食品微生物样品的采样与处理、检验与报告是食品安全领域的重要环节。
微生物样品的准确采样、合理处理，以及正确的检验与报告方法，对于保障食品质量和消费者健康具有重要意义。
本文将从采样方法、样品处理、检验方法、报告要点和问题解决方面进行探讨，并总结相关注意事项和建议。
正文：一、采样方法1.1 食品种类选择1.2 采样地点选择1.3 采样器具及消毒1.4 采样时机选择1.5 采样数量和样本规格二、样品处理2.1 样品收集与保存2.2 样品运输和储存2.3 样品预处理2.4 样品分装与配平2.5 样品处理的质量控制三、检验方法3.1 常规微生物检验方法3.2 分子生物学检验方法3.3 快速检测方法3.4 自动化检测方法3.5 检验方法选择及标准要求四、报告要点4.1 报告格式和内容4.2 检测结果的解读4.3 结果的报告范围和描述4.4 报告中的参考标准和限值4.5 报告的保密性和审阅程序五、问题解决方案5.1 样品异常情况处理5.2 检验误差的排除与处理5.3 报告结果的异议解决5.4 数据纠正与调整5.5 技术支持与反馈机制建立总结：食品微生物样品的采样与处理、检验与报告是确保食品安全的关键环节。
在采样过程中，选择合适的食品种类、采样地点、采样器具等要素是保证样品质量的前提。
样品处理过程中，严格遵守收集、运输、储存和预处理的规范，确保样品的完整性和稳定性。
在检验方法方面，根据检测目的和需求选择相应的方法，并遵循相关标准要求进行检测。
报告的准确性和完整性关系到食品安全和法律责任，因此合理的报告格式和内容、结果的解读和报告范围等要点应得到重视。
同时，建立问题解决方案和技术支持机制，及时处理异常情况和误差，保证数据的准确性和可靠性。
微生物检测标准
微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。
3培养：于37℃培养24小时。
4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。
1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。
2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。
结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2，5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2一般区域：细菌总数≤100个∕cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。
医院环境微生物采样方法及注意事项
2021/10/10
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环境卫生学监测结果分析流程
细菌学数据超标
正视结果，不要盲目 的重复采样
是 重复采样
回忆采样过程 是否存在污染
到一线去查看设施和
否
每个操作环节，询问
相关人员的日常操作
方法，检查操作记录
2021/10/10
否 判断是否存在问题
是
采取措施改进操作流程
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空气微生物消毒方法
（一）采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采 样。
（二）采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应 中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲 面从指跟到指 端往返涂擦2次，一只手涂擦面积 约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭 子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和 剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
2021/10/10
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卫医发[2000]431号《医院感染管理规范》
第三十一条 环境卫生学监测：包括对空气、 物体表面和医护人员手的监测。
医院应每月对手术室、重症监护病房／室 （ICU）、产房、母婴室、新生儿病房、骨髓移植 病房、血液病房、血液透析室、供应室无菌区、 治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。 当有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素 有关时，应及时进行监测。
2021/10/10
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三、物品和环境表面消毒效果监测
（一）采样时间：在消毒处理后进行采样。
（二）采样面积：被采面积＜100cｍ2取全部表面； 采样面积≥100 cｍ2，取100cｍ2
（三）采样方法：棉拭子法：用5×5cm的标准灭菌 规格版，放在被检物体表面，用浸有含有相应中 和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在规格板内横竖往 返均匀涂抹5次，并随之转动棉拭子，可连续采样 1～4个规格板面积。剪去手接触部分，并将棉拭 子放入装有10ml含相应中和剂的试管内，立即送 检。
微生物样品的取样方法及取样要求
微生物样品的取样方法及取样要求样品取样的要求1）在取样之前应确认货、证是否相符。
2）取样过程中应避免与水等环境的不良因素影响，防止样品被污染。
3）取样用具（如注射器、采血管、试管、探子、铲子、匙、取样器、剪子、样品袋等）必须是经过灭菌的。
4）对采集的样品一般要求随机取样。
若怀疑最有可能受病原体污染或者带有病原体的样品，可以进行选择取样。
5）根据样品种类（如盒装、袋装、瓶装和罐装），应取完整密封的样品。
如果样品很大，则需用无菌取样器取样；若样品是粉末，应边取边混合；若样品是液体的，通过振摇即可混匀；若样品是冷冻的，应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），而非冷冻动物产品须保持在0℃~5℃中保存。
6）取样前或取样后应在盛装样品的容器或样品袋上立即贴上标签，每件样品必须标记清除（包括品名、来源、数量、取样地点、取样人及取样日期）。
7）获取有关取样产品的信息：如样品名称、批量大小、包装类型、包装容器体积、生产线、产品编号或控制号、批量号、标签内容、包装破损状况、产品存放地点或建筑物的基本情况等。
8）当客户对所规定的取样程序有偏离、添加或删节的要求时，应详细记录这些要求和相关的取样资料，并记入包含检测结果的所有文件中，同时告知相关人员。
9）当取样作为检测一部分时，实验室应有程序记录与取样有关的资料和操作。
这些纪录应包括所用的取样程序、取样人的识别、环境条件（如果相关）、必要时有抽样地点的图示或其他等效方法，如果合适，还应包括取样程序所依据的统计方法。
食品微生物学的取样点食品微生物的取样计划中常包括以下取样点：原料、生产线（半成品、环境）、成品、库存样品、零售商店、或批发市场、进口或出口口岸。
原料的取样包括食品生产所用的原始材料、添加剂、辅助材料及生产用水等。
生产线样品是指食品生产过程中不同加工环节所取的样品，包括半成品、加工台面、与被加工食品接触的仪器面以及操作器具等。
对生产线样品的采集能够确定细菌污染的来源，可用于食品加工企业对产品加工过程卫生状况的了解和控制，同时能够用于特定产品生产环节关键控制点的确定和HACCP的验证工作。
微生物采样方案和限量要求
微生物采样方案和限量要求一、引言微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
微生物的采样是研究微生物学、环境科学、医学等领域的重要基础工作。
为了保证采样结果的准确性和可比性，需要制定合适的微生物采样方案，并对采样限量进行要求。
二、微生物采样方案1. 采样目的：明确采样目的，如研究微生物多样性、环境污染程度等。
2. 采样地点：选择代表性和典型性的采样点，确保采样结果具有代表性。
3. 采样工具：根据采样目的和环境特点，选择合适的采样工具，如采样棉签、培养皿等。
4. 采样方法：根据采样目的和样品类型，选择合适的采样方法，如刷拭法、吸附法、过滤法等。
5. 采样时间：根据微生物的生活特性，选择合适的采样时间，如白天、夜晚、季节等。
6. 采样频率：根据采样目的和研究需要，确定合适的采样频率，如每天、每周、每月等。
三、限量要求微生物采样过程中，为了保证采样结果的准确性和可比性，需要对采样限量进行要求。
限量要求主要包括以下几个方面：1. 采样体积：根据采样目的和分析方法的要求，确定采样体积，如100 ml、500 ml等。
2. 采样面积：根据采样目的和样品类型，确定采样面积，如10 cm²、100 cm²等。
3. 采样时间：根据微生物的生活特性和采样目的，确定采样时间，如15分钟、30分钟等。
4. 采样剂量：根据样品类型和分析方法的要求，确定采样剂量，如10 mg、50 mg等。
5. 采样次数：根据采样目的和研究需求，确定采样次数，如3次、5次等。
四、采样方案与限量要求的重要性合理的微生物采样方案和限量要求对于保证采样结果的准确性和可比性至关重要。
只有在明确的采样方案指导下，采样人员才能准确选择采样点、采样工具和采样方法，从而获得具有代表性的样品。
同时，严格的限量要求可以避免采样过程中的人为误差，确保采样结果的准确性和可靠性。
采样方案和限量要求的制定需要充分考虑采样目的、样品类型、采样环境等因素。
食品微生物检验的采样方案取样方案有
×××××采样单
样品编号：━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 产品名称（商品名）______规格型号__________注册商标_____________ 生产厂家_______________通讯地址__________邮政编码□ □ □ □ □ □ 受检地点_______________通讯地址__________邮政编码 □ □ □ □ □ □ 采样地点_______________采样日期__________采样基数______________ 生产日期_______________批 号__________产品依据标准__________ 有效成分及含量 ____________________________________________________________ 检验目地________________检测项目_____________________________
采样前调查→现场观察→确定采样方案 →采样 →样品封存 →开具采样证明
（3）采样的要求
1、严格遵守样品采集的操作规程。 2、所采样品必须具有代表性。 3、采样操作要防止污染，防止变质、损坏、 丢失。 4、不得加入防腐剂、固定剂等。 5、样品采集和现场测定必须有二人以上参 加。
（4）食品微生物检验的采样方案
一、微生物检验的工作流程
检验前准备 样品的采集及样品的送检 样品的预处理方法 样品的检验 检验结果的报告
（一）.检验前的准备
1. 2. 准备好所需的各种仪器。 按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷 却后送无菌室备用。 准备好所用的各种试剂，做好普通营养琼脂或其他选择必培养 基。 做好无菌室或超净工作台的灭菌工作，提前1h灭菌30~60min. 工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。 工作人员进入无菌室后，实验没有完成之前不得随便出入无菌 室。
医院环境微生物采集与注意事项详解
医院环境微生物采集与注意事项详解一、引言医院环境中的微生物是指病原体、细菌、真菌、病毒等微生物，它们在医院环境中的存在既可能对患者的健康构成威胁，也可能对医院员工的健康构成威胁。
因此，对医院环境中的微生物进行采集和检测是非常重要的工作。
二、采集方法1.空气样品采集：在待测的区域内布置空气采样器，定期收集空气中的微生物样品。
常见的空气采样器有菌落计数器、单孔培养器等。
在采样前应保持区域的密闭性，并注意避开风口、通风设备等干扰因素。
2.表面样品采集：使用消毒过的无菌擦拭棒或无菌纱布，对待测区域表面进行擦拭采样。
擦拭时应均匀用力，覆盖整个表面。
采样后立即将擦拭棒或纱布送至实验室进行分析。
3.液体样品采集：使用消毒过的无菌容器，采集待测液体样品。
液体样品的采集应注意避免污染，尽量避免空气接触。
采样后应尽快送至实验室进行分析。
三、注意事项1.采集手法：采集样品时要佩戴无菌手套、口罩等防护用品，以避免自身对样品的污染。
手法要准确、规范，消耗品要守御严格的无菌原则。
2.采集时间：采集时间应选择在医院的高峰期，以获取最真实有效的样品。
同时，随着环境的变化，微生物负荷也会发生变化，因此需要定期进行采集。
3.采集地点选择：采集的地点应选择与目标微生物相关的区域，如手术室、病房、门诊区等。
同时还应采集一些对病人影响较小的区域做为对比，以得出相对准确的结果。
4.采集条件：采集前应关闭空调、通风设备等干扰因素。
同时要留意室温、湿度等对微生物生长影响的因素。
5.样品保存：样品采集后应尽快送至实验室进行分析。
如果无法即时送达，应妥善保存。
如液体样品应置于低温条件下保存，避免微生物生长；表面样品应干燥保存，避免湿度引起微生物生长。
6.数据解读：获得的数据应结合实际情况进行解读，不能单纯依靠数据得出结论。
同时也应根据采样点位、采样时间等因素，考虑微生物负荷的合理范围。
7.卫生管控：根据采样结果，针对存在问题的区域进行卫生管控。
如加强清洁消毒、通风换气等措施，以减少微生物负荷。
微生物采样方案
微生物限量采样方案采样方案分为二级与三级方案,二级采样方案设有ｎ、c、m值,三级采样方案设有ｎ、c、ｍ与M值。
ｎ:同一批次产品应采集的样品件数c:最大可允许超出m值的样品数m:微生物指标可接受水平的限量值M:微生物指标的最高安全限量值例:ｎ=5,c=2,m=100ｃfu/g,M＝1０00cｆu/ｇ,即从一批产品中采集５个样品,若５个样品的检测结果均小于或等于m值(≤１00ｃｆｕ/ｇ),则这种情况就是允许的,若≤２个样品的结果(Ｘ)位于m值与M值之间(１０0cfｕ/ｇ≤X≤1０００cfu/g),则这种情况也就是允许的;若有3个及以上样品的检验结果位于m与M之间,则这种情况就是不允许的;若有任一样品的检验结果大于M(>1000cfｕ/g),则这种情况也就是不允许的。
0/25g a,标准限量,就就是每２5g样品不得检出。
a通常为５次。
挥发性盐基氮:代表动物蛋白受微生物的作用程度,就是动物蛋白新鲜度的代表。
MPN:基于泊松分布的一种间接计数方法,mosｔ pｒobａble numberGB 77１8,直接向消费者提供的预包装食品标签,标示应包括食品名称、配料表、净含量与规格。
生产者与经销商的名称、地址与联系方式、生产日期与保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其她需要标识的内容。
ADI:每日允许摄入量 aｃｃeptable daｉlｙ iｎtaｋｅ。
净含量字体高度≥４mm。
下列预包装食品豁免强制标示营养标签1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜与水果、禽蛋等2、乙醇含量≥0.５％的饮料酒类3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤２0cm3的食品4、现制现售的食品5、包装的饮用水6、每日食用量≤10g或１0mL的预包装食品7、其她法律法规标准规定可以不标识营养标签的预包装食品。
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微生物限量采样方案
采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。
n：同一批次产品应采集的样品件数
c：最大可允许超出m值的样品数
m：微生物指标可接受水平的限量值
M：微生物指标的最高安全限量值
例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。
0/25g a，标准限量，就是每25g样品不得检出。
a通常为5次。
挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。
MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number
GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。
生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品生产许可证编号、产品标准代号及其他需要标识的内容。
ADI：每日允许摄入量 acceptable daily intake。
净含量字体高度≥4mm。
下列预包装食品豁免强制标示营养标签
1、生鲜食品如包装的生肉、生鱼、生蔬菜和水果、禽蛋等
2、乙醇含量≥0.5%的饮料酒类
3、包装总面积≤100cm3或最大表面面积≤20cm3的食品
4、现制现售的食品
5、包装的饮用水
6、每日食用量≤10g或10mL的预包装食品
7、其他法律法规标准规定可以不标识营养标签的预包装食品。