(沃特世)UPLC超高效液相色谱介绍
UPLC超高效液相色谱（沃特世）
主要特点
超高速度
1.小颗粒填料色谱柱能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度
2.显著增加样品的通量，提高工作效率，降低分析成本
3.节省以往一向耗时的方法开发与认证的时间
超高灵敏度
1.小颗粒技术和整体化的仪器设计，UPLC®能在改善分离度的同时提高灵敏度
2.更高的柱效和更窄的色谱峰，意味着更高的色谱峰高和更高的灵敏度
3.在得到超高分离度和超高速度的同时能够得到超高灵敏度
超高分离度
1.利用高效创新小颗粒填料（1.7μL），获得超强分离能力
2.超低扩散体积，充分发挥小颗粒填料分离能力
3.超高分离度，适合复杂混合物的分离分析
超级创新
为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由沃特世公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
色谱柱安装后，智能化的芯片会自动地把关键参数采集进入色谱柱的历史文档，并记录色谱柱整个寿命周期的历史。
该记录不能被删除。
技术参数
最大操作压力：15000psi（1mL/min）
溶剂输送精度：0.075%RSD或0.02minSD
流速范围：0.010-2.000mL/min，增量0.001mL/min
梯度曲线：11种。
包括线性、凹线、凸线和两种步进梯度变化
有效系统体积:<140μL，与系统反压无关。
带标准混合器
溶剂选择:最多四种。
可在A1与A2和B1和B2之间选择
交叉污染:0.005%或2nL
进样范围:0.5-50μL
进样精度:<0.3%RSD
进样线性:>0.999
样品室温度控制:4 - 40℃
色谱柱历史追踪:使用eCord技术
检测器配置:紫外可见检测器、光电二极管矩阵检测器、蒸发光散射检测器以及所有质谱检测器
超高速度,超高灵敏度,超高分离度,超级创新
为满足色谱实验室对历史追踪不断增长的需求，每根ACQUITY UPLC®色谱柱出售时均带一个永久性的eCord，它能记录进样次数，最高的反压和柱温，其中还含有由Waters公司提供的该色谱柱的分析测试合格证书。
色谱柱安装后，智能化的芯片会自动地把关键参数采集进入色谱柱的历史文档，并记录色谱柱整个寿命周期的历史。
该记录不能被删除。
waters_uplc_超高液相色谱仪使用方法_概述及解释说明
waters uplc 超高液相色谱仪使用方法概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在介绍和解释Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法。
超高液相色谱技术作为一种快速、高效、灵敏的分析方法，已广泛应用于生命科学、环境监测、药物研发等领域。
而Waters UPLC超高液相色谱仪则作为当前市场上领先的仪器之一，拥有先进的特点和优势。
1.2 文章结构本文将按照如下结构来进行介绍和说明：首先，在第2部分中，我们将对Waters UPLC超高液相色谱仪进行详细的介绍，包括其工作原理、构成和组件以及特点和优势。
然后，在第3部分中，我们将概述超高液相色谱分析方法的基本步骤，并重点讨论样品准备工作、色谱柱和流动相选择与优化以及仪器参数设置与调节等方面的内容。
接着，在第4部分中，我们将详细解释使用Waters UPLC超高液相色谱仪的具体步骤和操作说明，包括开机与准备工作、样品处理与注射操作以及方法运行与数据分析等方面。
最后，在第5部分中，我们将总结使用过程中的经验和解决技巧，并展望超高液相色谱在分析领域中的发展方向和应用前景。
1.3 目的本文旨在帮助读者全面了解Waters UPLC超高液相色谱仪的使用方法，包括仪器介绍、分析方法概述以及具体操作步骤。
通过阅读本文，读者将能够熟练运用该仪器进行高效、准确的样品分析，并对超高液相色谱技术在各个领域中的应用前景有更深入的了解。
同时，我们也希望通过分享使用经验和问题解决技巧，能够为相关科研人员提供一些实用的参考和指导。
2. Waters UPLC超高液相色谱仪介绍2.1 原理Waters UPLC（Ultra Performance Liquid Chromatography）超高液相色谱仪是一种高效的色谱分析技术。
其原理基于传统液相色谱，通过使用减小粒径和增强填充剂的方式，实现更高的分离效率和分辨率。
UPLC仪器利用高压泵将样品溶液加速通过色谱柱，在极短的时间内完成分离、富集和检测。
色谱分析(中国药科大学)超高效液相色谱(UPLC)
超高效液相色谱(UPLC)超高效液相色谱技术（ultra performance liquid chcromatography，简称UPLC）是一种综合了小颗粒填料、非常低系统体积(死体积)及快速检测手段等全新的检测技术。
在全面提升HPLC的速度、灵敏度及分离度的同时，保留其原有的实用性及原理。
基于小颗粒技术的UPLC，并非普通HPLC系统改进而成。
它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料（可达1.7µm），而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障，以充分发挥小颗粒技术优势。
这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。
世界第一个商品化UPLC产品是Waters ACQUITY UPLC TM超高效液相色谱系统，它于2004年3月投入市场。
图1：填料技术的沿革1．小颗粒填料改善分离的理论与科学基础液相色谱30年的发展史是颗粒技术的发展史。
颗粒大小的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产生直接影响。
由上图可知：随着颗粒度的不断降低，色谱分离度不断提高。
事实上，上述规律的理论基础是著名的Van Deemeter方程。
Van Deemeter方程是色谱科学家预测颗粒度变化而引起的色谱变化的根本依据。
Van Deemeter曲线（见图2）预测最佳柱效与相应的流动相流速。
由Van Deemeter方程得知：随着颗粒度减小，相应的理论塔板高度（HETP）也下降，得到的柱效会更高。
还应该注意到1.7 µm颗粒的HETP最小值区域扩大了（见图2），这表明可以在比大颗粒更宽的流量范围内得到最高的柱效，结果可以不损失高分离度的同时来适当提高流动相的流速（分析速度）。
小颗粒填料为色谱分离带来如此的高柱效和速度优势，使得利用小颗粒技术成为色谱科学家梦寐以求的目标。
然而HPLC系统的设计，一直难于发挥出最小颗粒的优点。
小颗粒技术的运用，不但要求仪器在超出目前限度（6000 psi/ 400 bar）的压力下工作，同时要求仪器系统的死体积要更小，以便不影响梯度性能，而且还要检测器能高速检测出峰宽只有几秒的色谱峰。
超高效液相色谱UPLC在药物分析上的应用
超高效液相色谱UPLC在药物分析上的应用超高效液相色谱（UPLC）近年来发展迅速，由于其灵敏度高、高分离度以及耗时少等优点而被广泛应用。
本文对高效液相色谱的工作原理及其在药物分析上的应用进行综述。
标签：超高效液相色谱；药物分析；应用0 引言目前，液相色谱已经成为用于分析的主要方法之一。
高效液相色谱在生物化学、食品科学、环境检测、药物分析等领域得到了广泛的应用。
其主要原因是HPLC具有分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、适用范围广、样品处理简单等特点。
2004年3月，由Waters公司率先推出了第一台商品化的超高效液相色谱系统（Ultra Performance liquid chromatography，UPLC）。
它不但继承了传统HPLC的所有优点，而且在速度和分离程度以及灵敏度这些方面都有了显著的提高。
因此，UPLC在药物分析等领域获得了极大的应用。
本文对UPLC的主要原理以及它在药物分析领域的应用做了阐述。
1 UPLC的原理UPLC和HPLC都以范德米特（Van Deemeter）方程为理论基础。
HETP=AdP+B/v+CdP2V，其中HETP表示理论塔板高度；A表示涡流扩散系数；dP表示填充料粒径；B表示分子径向扩散系数；C表示传质因子；v表示流动相线速度。
根据这个方程可以看出颗粒度越小柱效越高；颗粒度不同，最适流速也不相同；更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速（线速度）方向移动，而且有更宽的线速度范围。
因此，减小颗粒度不但能够提高柱效，而且还能提高分析速度。
UPLC与HPLC相比解决了色谱填料耐压和小颗粒填料的填装问题。
采取小于2微米的色谱填料，大大的提高了色谱柱的性能，并且极大的缩短了开发方法所需的时间，使其与HPLC色普柱有了质的飞跃。
超高效液相色谱与传统的高效液相色谱相比具有很多有点。
（1）分析速度快，Nguyen等[2]分别用1.7um的色谱柱的UPLC和5um的色谱柱的普通高效液相色谱法分析尼泊金酯累同系物，在分离度保持不变的情况下分析速度提高了8倍。
超高效液相色谱UPLC课件
UPLC的发展趋势与展望
REPORTING
提高仪器性能与稳定性
更高的分离效能
通过改进泵、柱温箱等关键部件，提高仪器的分离效能，缩短分 析时间。
更高的灵敏度
采用新型检测器技术，提高检测器的灵敏度和响应速度，降低检测 限。
更高的重现性
优化仪器内部流路设计，减少流体不稳定性和交叉污染，提高仪器 重现性。
存过程中的变化情况，为制剂的有效期提供依据。
2023
PART 06
UPLC在食品安全检测中 的应用
REPORTING
食品中农药残留的检测
农药残留检测
UPLC技术可以快速准确地检测出食品中农药残留的种类和浓度 ，确保食品的安全性。
优势
UPLC具有高分离效能、高灵敏度、高分析速度等优点，特别适 合于复杂基质中微量、痕量农药残留的检测。
2023
PART 05
UPLC在药物分析中的应 用
REPORTING
药物成分的分离与检测
分离复杂药物混合物
UPLC具有高分离效能，能够将药物混合物中的各个成分进行有效 分离，为后续的检测提供基础。
检测灵敏度高
UPLC的检测器具有高灵敏度，能够检测出低浓度的药物成分，满 足药物分析中对痕量成分的检测需求。
开发新型固定相材料
1 2
新型硅胶基质
研发具有更高稳定性、更低成本和更环保的硅胶 基质固定相材料。
新型有机高分子固定相
开发具有优异分离性能、高选择性和高稳定性的 有机高分子固定相材料。
3
混合固定相
将硅胶基质和有机高分子固定相结合，制备出具 有优异分离性能的混合固定相材料。
拓展应用领域
环境样品分析
利用UPLC的高分离效 能和灵敏度，拓展其在 环境样品分析领域的应 用。
UPLC(超高效液相色谱)简介
UPLC（超高效液相色谱）简介超越HPLC随着科学技术的进步，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术角度的改进已经不行。
这就需要同时从科学与技术的角度出发，或者说从理论高度对液相色谱重新认识。
因此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，将HPLC的极限作为自己的起点。
在1996年，Waters公司推出Alliance HPLC时的主要目标是提高液相色谱的"精度"。
当时多数公司都认为HPLC技术已经发展到极致了、而同时用户对性能没有更高的需求，因此HPLC的目标应该是降低成本、走向更低的价格以获得更广泛的应用。
针对这样的观念，Waters公司提出：HPLC的技术没有到达极限，用户对HPLC有更高的要求，HPLC精度的提高对更好、更可靠的结果有极大的益处，对法规的遵从也是一个极大的促进。
站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。
首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成，例如代谢组学分析；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与MS及MS/MS等检测技术联用时，对连接的质量提出了更高的要求。
简而言之，我们需要"更快地得到更好的结果"。
今天我们发现，随着科学技术的进步，对液相色谱技术的要求也不断提高，单从技术角度的改进已经不行。
这就需要同时从科学与技术的角度出发，或者说从理论高度对液相色谱重新认识。
因此UPLC（超高效液相色谱）概念的提出也就十分自然。
简而言之，UPLC是用HPLC的极限作为自己的起点。
理论基础早在1956年，J.J van Deemter就发表了他著名的理论：van Deemter曲线及其方程式。
最早这个理论是用在气相色谱上的，但是后来出现的液相色谱上也能应用这个理论。
Waters公司引入UPLC的概念就是由研究这个著名的方程式开始。
首先探讨一下这个著名的方程式。
UPLC超高效液相色谱入门指南沃特世
首先，导入采集到的色谱数据；其次，进行基线校正以消除背景干扰；接着，进行峰识 别与积分以确定各色谱峰的保留时间和峰面积；最后，根据标准曲线进行定量分析，得
到各组分的浓度信息。
结果解读与报告生成
结果解读
根据处理后的色谱数据和定量分析结果， 可以解读出样品中各组分的含量和相关信 息。需注意检查数据的合理性和准确性。
妥善处理。
核实实验室是否遵守环保法规 和相关标准，如废水、废气、 噪声等排放是否符合环保要求。
个人防护措施和应急处理能力培训
对实验人员进行个人防护知识培训，包括如何正确佩戴和使用个人防护装备，如防护服、护目镜、手 套等。
提供应急处理能力培训，包括如何应对实验过程中可能出现的突发情况，如化学品泄漏、火灾等。
避免污染和交叉污染措施
使用高质量的试剂和溶剂， 减少杂质和污染物的引入。
对于不同性质的样品，要 采用不同的进样器和色谱 柱，避免交叉污染的发生。
ABCD
定期清洗进样器、色谱柱 和检测器等部件，避免残 留物对后续分析的影响。
在更换样品或溶剂时，要 彻底清洗相关部件，确保 无残留物对后续分析造成 干扰。
生物分析
要点二
食品分析
UPLC可用于生物样品（如血液、尿液等）中生物标志物的检 测和分析。
UPLC可用于食品添加剂、营养成分等的检测和分析。
沃特世UPLC技术特点
高品质色谱柱
先进的仪器设计
沃特世提供多种类型的高品质色谱柱，满足 不同分离需求，确保分析结果的准确性和可 靠性。
沃特世UPLC仪器设计先进，操作简便，具有 高度的稳定性和可靠性，确保长时间运行的 稳定性和准确性。
分离系统
即色谱柱，是实现样品中各组分分离的关 键部分。
超高效液相色谱法(uplc)检测防腐剂和色素
1．柠檬黄 2．苋菜红 3．胭脂红 4．日落黄 5．诱惑红 6．赤藓红
订购电话：
18103820566
1．苯甲酸 2．糖精钠 3．山梨酸
*以上实验数据来源于北京市疾病预防控制中心
UPLC 法检测色素及防腐剂相关产品信息：
货号 名称 样品前处理 37177 37180 针头式过滤器 Nylon 针头式过滤器 Nylon 色谱柱及保护柱 87003 超高效液相色谱（UHPLC）专用柱 Endeavorsil C18 标准品 56-03322-25MG 56-87612-25MG 56-18137-25MG 56-68775-25MG 56-38213-25MG 56-87613-25MG 46615 51-47839-1G 46613 酒石黄/柠檬黄[1934-21-0] 苋菜红[915-67-3] 胭脂红[2611-82-7] 日落黄[2783-94-0] 诱惑红[25956-17-6] 赤藓红/藻红[16423-68-0] 苯甲酸[65-85-0] 糖精钠[82385-42-0] 山梨酸[110-44-1] HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂 50101
乙腈 HPLC 级
2 上海：021-6126 3966 天津：400-633-6606 南京：025-8347 9007
4L
广州：020-8559 3520 青岛：0532-8372 5230 石家庄：0311-6668 6220
50138
乙酸铵 HPLC 级 通用色谱产品 瓶架/蓝色 瓶架/白色 样品瓶（棕色/螺纹） 样品瓶盖/含垫（已经组装） HPLC 进样针
订购电话： 北京：400-608-7719 沈阳：024-2294 3513 成都：028-8661 2625
规格 13 mm,0.22 μm 100/pk 13 mm,0.45 μm 100/pk
超高效液相色谱(uplc)
超高效液相色谱(UPLC TM)：重新定义液相色谱分离科学的能力随着首次成功地使用小颗粒得到惊人的分离能力而进入了一个新的时空。
这个新的色谱领域，所谓超高效液相色谱（UPLC TM），与传统的HPLC技术相比提供了更高的效率，因而具有更强的分离能力。
作为世界第一个商品化UPLC TM产品的Waters ACQUITY UPLC TM超高效液相色谱系统，利用创新技术进行整体设计，大幅度地改善了液相色谱的分离度、样品通量和灵敏度。
UPLC TM的商品化，是分离科学和技术的巨大进步，液相色谱亦由此进入了全新的时代。
基于1.7 μm小颗粒技术的UPLC TM，与人们熟知的HPLC技术具有相同的分离原理。
不同的是：UPLC TM不仅比传统HPLC具有更高的分离能力，而且结束了人们多年不得不在速度和分离度之间取舍的历史。
使用UPLC TM可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作，并获得优异的结果。
小颗粒分离的理论与科学基础图1：填料技术的沿革液相色谱30年的发展史是颗粒技术的发展史。
颗粒度的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产品直接影响。
由上图可知：随着颗粒度的不断降低，色谱分离度不断提高。
事实上，上述规律的理论基础是著名的范德米特(van Deemeter)方程――这是全世界所有从事色谱研究的科学家熟知的理论。
由此得到的范德米特(van Deemeter)曲线，亦是色谱科学家预测颗粒度变化而引起的色谱变化的根本依据。
该曲线预测最佳柱效与相应的流动相流速。
由曲线得知：随着颗粒度减小，相应的理论塔板高度（HETP）也下降，得到的柱效会更高。
还应该注意到1.7 μm颗粒的HETP最小值区域扩大了，这表明可以在比大颗粒更宽的流量范围内得到最高的柱效，结果可以不损失高分离度的同时来优化流速（分析速度）。
小颗粒为色谱分离带来如此的高柱效和速度优势，使利用小颗粒技术成为色谱科学家梦寐以求的目标。
然而HPLC系统的设计，一直苦于难于发挥出最小颗粒的优点。
什么是UPLC？和HPLC有什么区别？
什么是UPLC？和HPLC有什么区别？UPLC是一个新兴的领域，今日就跟大家共享一些干货。
UPLC：超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography）色谱理论认为提高色谱柱的效能（efficiency）就能增加仪器的解析度（resolution），而运用粒径低于2m的小颗粒无疑是增加效能的好方法。
但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能始终的色谱仪器科学的瓶颈，由于小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如9000psi），需要更小的系统体积（死体积），并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。
UHPLC：超高效液相色谱(Ultra-High Performance Liquid Chromatography)特点是工作压力超过6000 psi或工作温度超过环境温度的应用。
由于 UHPLC 应用中使用的硬件通常可以承受 9000 psi或更高的系统压力，因此色谱工作人员可以使用由更高级固相（其颗粒远远小于传统的5 m直径硅胶）填充的色谱柱。
采纳颗粒更小的固相不仅可以实现更高的辨别率，同时还能缩短整体分析时间。
HPLC：高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography）又称"高压液相色谱'、"高速液相色谱'等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流淌相，采纳高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流淌相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分别后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分别分析技术。
UPLC和HPLC的区分与传统的高效液相色谱(HPLC)相比，UPLC具有高分别度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。
色谱分析(中国药科大学) 超高效液相色谱(UPLC)
色谱分析（中国药科大学）超高效液相色谱(UPLC)超高效液相色谱(UPLC)超高效液相色谱技术（ultra performance liquid chcromatography，简称UPLC）是一种综合了小颗粒填料、非常低系统体积(死体积)及快速检测手段等全新的检测技术。
在全面提升HPLC的速度、灵敏度及分离度的同时，保留其原有的实用性及原理。
基于小颗粒技术的UPLC，并非普通HPLC系统改进而成。
它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料（可达 1.7µm），而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障，以充分发挥小颗粒技术优势。
这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。
世界第一个商品化UPLC产品是Waters ACQUITY UPLC TM超高效液相色谱系统，它于2004年3月投入市场。
图1：填料技术的沿革1．小颗粒填料改善分离的理论与科学基础液相色谱30年的发展史是颗粒技术的发展史。
颗粒大小的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产生直接影响。
由上图可知：随着颗粒度的不断降低，色谱分离度不断提高。
事实上，上述规律的理论基础是著名的Van Deemeter方程。
Van Deemeter方程是色谱科学家预测颗粒度变化而引起的色谱变化的根本依据。
Van Deemeter曲线（见图2）预测最佳柱效与相应的流动相流速。
由Van Deemeter 方程得知：随着颗粒度减小，相应的理论塔板高度（HETP）也下降，得到的柱效会更高。
还应该注意到1.7 µm颗粒的HETP最小值区域扩大了（见图2），这2表明可以在比大颗粒更宽的流量范围内得到最高的柱效，结果可以不损失高分离度的同时来适当提高流动相的流速（分析速度）。
小颗粒填料为色谱分离带来如此的高柱效和速度优势，使得利用小颗粒技术成为色谱科学家梦寐以求的目标。
然而HPLC系统的设计，一直难于发挥出最小颗粒的优点。