西林瓶轧盖气密性再验证方案
(生产管理知识)冻干粉针剂生产工艺验证方案
冻干粉针剂生产工艺验证方案1.验证目的为评价冻干粉针生产系统要素和生产过程中可能影响产品质量的各种生产工艺变量，特根据GMP要求制订本验证方案，对其整个生产过程进行验证，以保证在正常的生产条件下，生产出质量合格、均一、稳定的冻干粉针产品。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案修改申请（附件1）并报验证领导小组批准。
2.验证范围在本方案指定的厂房、设施、设备、工艺条件下冻干粉针的生产，当上述条件改变时，应重新验证。
3.验证组织及职责3.1验证小组成员：成员：组长：3.2验证领导小组职责3.2.1负责验证方案的审批。
3.2.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
3.2.3负责验证数据及结果的审核。
3.2.4负责验证报告的审批。
3.2.5负责发放验证证书。
3.2.6负责再验证周期的确认。
3.3公用工程部职责3.3.1负责组织试验所需仪器、设备的验证。
3.3.2负责仪器、仪表、量具等的校正。
3.3.3负责设备的维护保养。
3.4质量保证部职责3.4.1负责拟订验证方案。
3.4.2负责取样及对样品的检验。
3.4.3负责收集各项验证、试验记录，并对试验结果进行分析后，起草验证报告，报验证领导小组。
3.5生产技术部职责3.5.1负责验证方案的实施。
3.5.2负责设备的操作。
4.有关背景材料4.1概况根据冻干粉针生产品种情况，我们选择用注射用×××为代表连续生产三批，进行对冻干粉针剂生产工艺进行验证。
4.2验证条件此验证是建立在厂房、空气净化、工艺用水及设备已验证并合格基础上，才进行的冻干粉针剂生产工艺验证。
4.3工艺规程注射用×××工艺规程。
4.4工艺流程图见下页4.5生产设备生产冻干粉针剂的所用主要设备（见附件2）均经验证，符合生产工艺的要求。
生产工艺流程及环境区域划分示意图冻干粉针剂主要设备验证报告4.6相关文件、规程5.验证项目、评价方法及标准5.1人员生产操作人员及检验人员，评价其培训及健康检查情况是否符合GMP及操作的要求。
注射剂工艺验证方案
注射剂工艺验证方案根据注射用头孢西丁钠的工艺规程及岗位标准操作规程，制定工艺验证方案以评价注射用头孢西丁钠工艺的各要素及生产全过程可能出现影响到该产品质量的各类生产工艺变化因素，通过工艺验证结果，以确定本工艺是否可行，确保在正常的生产条件下，生产出质量能符合注射用头孢西丁钠质量标准的产品。
2．适用范围适用于注射用头孢西丁钠生产工艺验证的全过程。
3．责任范围公司验证委员会、注射用头孢西丁钠生产工艺验证小组。
4．内容4.1引言4.1.1背景注射用头孢西丁钠生产用设备、设施及公用系统已进行了全面的验证，验证报告由相应的验证小组整理完成。
随后又进行了三次培养基灌装试验，“培养基灌装试验报告”也由相应的验证小组整理完成。
注射用头孢西丁钠是第一次在本公司生产的无菌粉针剂，此验证方案的设计有助于证明注射用头孢西丁钠产品生产过程的稳固性及生产系统的可靠性。
4.1.2方案目标本产品工艺验证方案的目的在于为评价该产品生产系统要素与生产过程中可能影响产品质量的各类生产工艺变化因素提供系统的验证计划，以保证实现在正常的生产条件下，生产出符合产品质量标准及局颁标准的注射用头孢西丁钠无菌粉针剂的宗旨。
4.1.3方案概要本产品工艺验证方案计划在注射用头孢西丁钠无菌粉针剂在本公司最初生产的前3批产品的生产过程中实施。
本方案的第一部分是对本方案的介绍，其中包含必要的有关资料的介绍以助于对本方案的懂得及本方案的实施。
第二部分包含阐述无菌生产准备、无菌粉针分装及包装生产工艺工艺流程并说明关键的生产步骤。
第三部分为注射用头孢西丁钠无菌粉针剂的生产文件包含生产处方与生产工艺规程。
第四部分为质量检验标准，其中包含产品质量标准即注射用头孢西丁钠无菌粉针剂成品质量检验内控标准、原料质量、包装材料质量标准及它们的检验操作规程。
第五部分阐述工艺过程的评价方法，具体分为3个生产过程。
（1）无菌生产准备与灭菌过程；（2）无菌分装过程；（3）包装过程。
注射用甲泼尼龙琥珀酸钠西林瓶密封完整性检测染色法检验方法研究
注射用甲泼尼龙琥珀酸钠西林瓶密封完整性检测染色法检验方法研究2天津金耀药业有限公司天津市300457摘要：为保证我公司所使用的注射用甲泼尼龙琥珀酸钠西林瓶密封完整性良好,现对所使用的注射用甲泼尼龙琥珀酸钠西林瓶密封完整性进行研究，验证该注射用西林瓶密封完整性具有良好的可检出性。
本方法研究的检测结果符合容器密闭完整性检测的可接受标准。
染料法检测注射用西林瓶容器密闭完整性已被成功验证。
通过染色法检验方法验证结果。
再验证周期一般五年一次，如果供应商、检验方法、检验条件改变则需进行重新验证。
关键词：西林瓶密封完整性检测、染色法、检验方法研究1.概述：为保证我公司所使用的注射用甲泼尼龙琥珀酸钠西林瓶密封完整性良好,现对该注射用西林瓶密封完整性进行验证，验证该注射用西林瓶在一定条件下，是否对其密封完整性具有良好的可检出性。
2.研究项目：2.1验证用材料：亚甲基蓝，注射用西林瓶（2g，1g，500mg，125mg，40mg）2.2验证用设备：紫外分光光度仪UV-1601、天平XS105C2.3验证用仪器：实验中所用计量器具须经计量部门校验合格后方可使用。
3.研究用染色溶液的配制：3.1 染色溶液(1)的配制：精密称取亚甲基蓝0.1g制成0.1%浓度的染色溶液储备液。
3.2 染色溶液（2）的配制：吸取3.1所述染色溶液5ul置于西林瓶中，加水溶解并转移至25ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得0.00002%浓度的染色溶液。
3.3 染色溶液（3）的配制：同3.2吸取4ul制成0.000016%浓度的染色溶液。
3.4 染色溶液（4）的配制：同3.2吸取3ul制成0.000012%浓度的染色溶液。
3.5 染色溶液（5）的配制：同3.2吸取2ul制成0.000008%浓度的染色溶液。
3.6 染色溶液（6）的配制：同3.2吸取1ul制成0.000004%浓度的染色溶液。
3.7 染色溶液（7）的配制：同3.2吸取0.5ul制成0.000002%浓度的染色溶液。
化学实验各种装置的气密性检查验证方法归纳中学高中皆适用最全
检查装置的气密性常见的方法一、基本方法：装置气密性检验采用的一般方法是：通过气体发生器与附设的液体构成封闭体系，依据改变体系内压强时产生的现象（如气泡的生成，水柱的形成，液面的升降等）来判断装置气密性的好坏。
①受热法：将装置只留下1个出口，并先将该出口的导管插入水中，后采用微热（手捂、热毛巾捂、酒精灯微热等），使装置内的气体膨胀。
观察插入水中的导管是否有气泡。
停止微热后，导管是否出现水柱。
②压水法：如启普发生器气密性检查③吹气法（不常用，略）使气压增大的常见方法有：二、基本步骤：①观察气体出口数目，若有多个出口，则通过关闭止水夹、分液漏斗活塞或用水封等方法，只装置只剩一个气体出口。
②采用加热法、水压法、吹气法等进行检查③观察气泡、水柱等现象得出结论。
注：若连接的仪器很多，应分段检查。
在叙述上要注意细节描述的严密性。
如：1.将导管末端浸入水中(或是加水或是插入)。
2.要注意关闭或者开启某些气体通道的活塞或弹簧夹。
3.关闭分液漏斗活塞，或加水至“将长颈漏斗下口浸没”等。
三、实例【例1】如何检查图A装置的气密性图A图B方法：如图B将导管出口埋入水中，用手掌或热毛巾焐容积大的部位，看水中的管口是否有气泡逸出，过一会儿移开焐的手掌或毛巾，观察浸入水中的导管末端有无水上升形成水柱。
若焐时有气泡溢出，移开焐的手掌或毛巾，有水柱形成，说明装置不漏气。
【例2】请检查下面装置的气密性方法：关闭分液漏斗活塞，将将导气管插入烧杯中水中，用酒精灯微热园底烧瓶，若导管末端产生气泡，停止微热，有水柱形成，说明装置不漏气。
【例3】启普发生器气密性检查的方法，图A 图B 图C方法：如图所示。
关闭导气管活塞，从球形漏斗上口注入水，待球形漏斗下口完全浸没于水中后，继续加入适量水到球形漏斗球体高度约1/2处，做好水位记号静置几分钟，水位下降的说明漏气，不下降的说明不漏气。
【例4】检查下面有长颈漏斗的气体发生装置的气密性。
方法1：同启普发生器。
西林瓶轧盖密封性检测仪检测密封性项目方法
西林瓶轧盖密封性检测仪检测密封性项目方法
西林瓶轧盖密封性指的是西林瓶密封性,为防止其他物质进入或内装物逸出。
在药品灌装生产的过程中，由于环节较为繁杂，在压盖、冻干等环节中形成内外连通的小孔或强度薄弱点。
这些都会对药品产生不利的影响，直接影响产品的质量。
尤其是小孔，造成药品部分直接暴漏在空气中，失去了包装的意义。
因此，对于西林瓶密封事先防范和事后检测都很重要。
济南三泉中石实验仪器有限公司研发生产的西林瓶轧盖密封性检测仪是一款比较合适的内部质量控制检测仪器。
西林瓶轧盖密封性检测仪MFY-05S检测仪器
西林瓶轧盖密封性检测仪MFY-05S适用于西林瓶压塞、轧盖气密性验证, 用来保证西林瓶的气密封，主要用来检测西林瓶胶塞与容器密合性和自密封性两个方面，详细内容为：
【胶塞与容器密合性】取本品10个，置烧杯中，加水煮沸5分钟，取出，在70℃干燥1小时，备用。
另取10个与之配套的注射剂瓶加水至标示容量，用上述胶塞塞紧，再加上与之配套的铝盖，压盖。
放入高压蒸汽灭菌器中，121℃±2℃，保持30 分钟，冷却至室温，放置24 小时。
将上述样品倒置，放入含有10%亚甲兰溶液的带抽气装置（密封试验仪负压）的容器中，抽真空至真空度为25kPa，维持30 分钟，恢复至常压，再放置30分钟取出，用水冲洗瓶外壁，观察，亚甲蓝溶液不得渗入瓶内。
【自密封性】取胶塞与容器密合性项下样品，采用符合注射剂用胶塞、垫片穿刺力测定法（YBB00332004-2015）第二法的注射针，向胶塞不同穿刺部位。
气密性试验方案范文
气密性试验方案范文气密性试验是指对建筑物进行密封性能测试，以确定其是否符合国家或地区建筑规范和标准的要求。
测试方法一般采用压差法，即在建筑物内外部分建立压力差，通过检测压力差变化来评估建筑物的气密性能。
本文将介绍一个常用的气密性试验方案。
首先，确定测试内容和目标。
根据特定的建筑规范和标准要求，确定进行气密性试验的建筑物部位和测试参数。
通常包括建筑物的外墙、窗户、门以及连接部位等。
目标是确定建筑物的气密性等级，以保证建筑物的能源效率和室内空气质量。
其次，确定测试设备和方法。
常用的测试设备包括压差发生器、差压传感器、风速传感器等。
其中，压差发生器能够产生建筑物内外部分的压差，差压传感器用于测量压差的变化，风速传感器用于测量风速。
测试方法一般包括静态压差法和动态压差法。
其中，静态压差法是指在建筑物内外部分维持稳定的压差，通过测量压差的大小来评估气密性能。
动态压差法是指在建筑物内外部分施加变化的压差，通过监测压差的变化来评估气密性能。
根据具体情况选择合适的测试设备和方法。
然后，制定测试方案。
根据建筑物的结构和具体要求，制定测试的具体步骤和参数。
例如，确定测试的时间和地点，确保测试环境稳定；确定测试的压力差范围，根据建筑物的要求确定合适的压力差；确定测试的次数和间隔，以提高测试结果的可靠性。
同时，要注意制定安全措施，确保测试的过程安全可靠。
最后，进行测试和数据分析。
按照测试方案进行实际操作，记录测试数据。
根据测试数据进行数据分析，评估建筑物的气密性能。
根据测试结果，可以制定相应的改进措施，提高建筑物的气密性能。
在气密性试验过程中，还需注意以下几点。
首先，测试前需要将建筑物进行充分的准备工作，确保建筑物内外的环境与实际使用情况一致。
其次，测试过程中要正确使用测试设备，保证测试数据的准确性和可靠性。
第三，要进行合理的数据分析，了解建筑物气密性能的具体情况。
最后，测试结果的有效性和合规性要由相关机构认证，确保测试结果的可信度。
密封系统完好性试验验证方案
密封系统完好性试验验证方案文件编号:验证部门:验证时间: 年月至年月目录1､验证方案1.验证方案皮审批2.系统概述3.验证目的4.验证组织及职责5.验证实施日期6.验证内容7.偏差情况8.再验证2､验证记录3､验证报告1.验证方案审批1.1验证方案起草1.2验证方案批准:(不)同意执行此验证方案｡批准人:日期:2.系统概述本次冻干车间密封系统的完好性试验采用灌装大豆胰蛋白胨肉汤培养基,经压塞､轧盖､灭菌､微生物侵入试验,试验分为两组,A组为正常微生物侵入试验,B组为微生物挑战试验,检查产品密封可靠性是否达到要求,并对试验结果进行分析研究｡3.验证目的通过密封系统的完好性试验确认5ml和10ml瓶塞盖组成的密封系统完好性良好,能够保证产品能防止外界污染的工艺要求｡4.验证组织及职责根据验证内容,成立密封系统完好性试验验证工作小组,人员组成和职责见下表｡本公司验证小组提出密封系统完好性试验实施计划,经验证委员会批准后实施｡因为需做2种规格密封系统的验证,整个验证活动分二个阶段完成｡5.1 5ml规格验证:从年月日至年月日｡5.2 10ml规格验证:从年月日至年月日｡6､验证内容6.1人员培训检查验证小组成员对《密封系统完好性试验验证文件》的培训,要求参与人员熟悉验证的步骤和方法及工作内容｡6.2检查确认确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日6.4.1试样制备6.4.1.1培养基的配制:用大豆胰蛋白胨肉汤培养基,按30g加1L注射用水的比例配制1.6L｡6.4.1.2试样密封:在生产线上灌装大豆胰蛋白胨肉汤培养基(或取洁净西林瓶用洁净注射器灌装),装量为5ml或9ml/瓶,灌装150瓶,使用自动压塞和轧盖设备将西林瓶密封｡6.4.1.3试样灭菌:将密封后试样于121℃,15mi n湿热灭菌｡6.4.1.4试样预培养:从蒸汽灭菌器中取出试样,冷却,将每一试样倒转,使培养基与西林瓶内表面充分接触,在30~35℃下竖放培养14天｡6.4.1.5 A组试样培养:小心拧松至少50个试样的铝盖,注意不要破坏其密封口｡将拧松铝盖时不慎损坏西林瓶密封性的所有试样剔除;同时挑选至少10个封口处缺损的西林瓶,在30~35℃下竖放培养14天｡6.4.1.6试样制备统计确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日6.4.2确定培养基促菌生长能力——营养性试验6.4.2.1所有试样培养14天均不长菌时,随机取20个带盖试样,每个试样内接种1ml 的铜绿假单胞菌,菌液浓度:10~100CFU/1ml｡6.4.2.2 30~35℃下培养7天,或培养至所有试样都呈阳性结果｡6.4.2.3若7天内,所有接种铜绿假单胞菌的试样中,微生物生长良好,则西林瓶内培养基的促菌生长能力可判为合格｡6.4.2.4使用革兰染色和紫外灯下肉汤呈蓝绿色荧光的性质,来鉴定并确认试样西林瓶内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌｡6.4.2.5营养性试验结果统计确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日6.4.3挑战菌悬浮液制备6.4.3.1从铜绿假单胞菌的新鲜斜面上取一整环培养基,分别接入含10ml无菌培养基的试管中,在30~35℃下培养16~18h｡6.4.3.2将每管的培养物分别转入含1000ml相同培养基(SCDM/2)的容器中,于30~35℃下培养22~24h｡在培养结束时,能明显见容器内培养基出现浑浊｡6.4.3.3培养结束后的挑战菌悬浮液即可用来作密封系统完好性试验｡6.4.3.4挑战菌悬浮液制备时间统计6.4.4微生物侵入试验6.4.4.1本试验须在生物安全柜或其他不影响生产环境的地方进行｡6.4.4.2 两组试样浸泡菌液试验6.4.4.2.1将按“6.4.3”项制备的新鲜铜绿假单胞菌的挑战菌悬浮液倒入合适的盆中,用金属丝架固定试样西林瓶,使试样倒置在挑战菌悬浮液中｡6.4.4.2.2将50个经121℃,15min湿热灭菌的试样倒置,并侵入挑战菌悬浮液中,该组试样为A组｡试样西林瓶内的无菌培养基应充分接触封口内表面,样品的颈部及封口的外表面应完全浸泡在挑战菌悬浮液中,见图:浮液中,该组试样为B组｡6.4.4.2.4实验开始时取一份挑战菌悬浮液,平均计数每毫升所含活菌数｡按“6.4.2.4”项确认试验用微生物是铜绿假单胞菌｡6.4.4.2.5将A组和B组试样西林瓶在挑战菌悬浮液中持续浸泡约4小时｡6.4.4.2.6浸泡结束时,再用平板计数挑战菌悬浮液的浓度｡6.4.4.2.7从挑战菌悬浮液中取出试样,擦干试样西林瓶外残余的挑战菌悬浮液,然后用含0.5%过乙酸的70%异丙醇消毒西林瓶外表面｡6.4.4.2.8将消毒后的西林瓶放在塑料袋中,置30~35℃培养7天,操作中应特别注意不要损坏B组无铝盖试样胶塞的密封性｡6.4.4.2.9挑战试验用挑战菌悬浮液经121℃,30min湿热灭菌后丢弃｡6.4.4.2.10待经挑战试验的试样培养7天后,观察检查对每一试样西林瓶内培养基中微生物的生长情况,有生长的记作十,无生长的记作—｡6.4.4.2.10.1如果试样西林瓶长菌,需确认生长菌是挑战微生物——铜绿假单胞菌｡6.4.4.2.10.2如果所有西林瓶都不长菌,则从浸过挑战菌悬浮液的A组取10个试样,B组5个试样,分别按“6.4.2”项进行培养基的营养检查｡6.4.4.3阳性对照试验6.4.4.3.1本项试验与两组试样浸泡菌液试验同步进行｡6.4.4.3.2取装满培养基未拧松铝盖与拧松铝盖的试样各2个作阳性对照｡阳性对照用样品制备方法同试样,但不经挑战菌悬浮液浸泡,其外表面用含0.5%过乙酸的70%异丙醇消毒｡此后,接种入10~100CFU(1ml)铜绿假单胞菌,按步骤“6.4.2”项进行培养基的营养试验｡6.4.4.4微生物侵入试验结果统计6.4.4.4.1试验时间及菌液浓度6.4.4.4.2 A组微生物侵入检查结果6.4.4.4.3 B组微生物侵入检查结果6.4.4.4.4阳性对照试验长菌检查结果6.4.4.4.5挑战试样培养基的营养检查确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日6.4.5试验注意事项6.4.5.1步骤“6.4.2”､步骤“6.4.4.2.10.2”､步骤“6.4.4.3.2”中进行的营养试验都合格,试样的挑战试验才有效｡6.4.5.2在挑战试验开始时,挑战菌悬浮液浓度(活菌数)必须达到1×106CFU/ml｡6.4.5.3挑战试验中A组和B组如有长菌,需记录长菌的试样数｡在A组中如出现长菌试验,则需按下述需求进一步调查｡第一,仔细去除微生物生长的西林瓶盖和塞,检查西林瓶封口是否有缺损,造成微生物侵入｡第二,将观察到试样西林瓶封口的缺陷,采用拍照或及其他适当详细记录｡6.4.5.4如果任何挑战试验中长菌的西林瓶不是由于西林瓶封口明显的物理性缺损所致,即判定冻干粉针剂及小容量注射剂密封系统挑战试验作失败｡6.4.6检验方法与可接受标准6.4.6.1培养基无菌检查6.4.6.1.1取样方法:生产线上罐装100ml SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基,经过121℃,15min湿热灭菌,从灭菌釜中取出试样,冷却,将每一试样倒转,在30~35°C下竖放培养14天｡6.4.6.1.2检测方法:所有试样在30~35°C下竖放培养14天,或者培养到所有试样都呈阴性结果｡6.4.6.1.3可接受标准:若14天内,所有试样内的培养基无混浊,则判断培养基无菌｡6.4.6.2营养试验6.4.6.2.1取样方法:随机抽取经检验过的20个带盖试样｡6.4.6.2.2检测方法:每个试样内接种0.1ml铜绿假单胞菌,菌液浓度:10~100CFU/0.1ml｡在30~35°C 下培养7天,或者培养到所有试样都呈阳性结果｡6.4.6.2.3可接受标准:若7天内,所有接种的铜绿试样,微生物都生长良好,则培养基的促进生长能力判断合格｡6.4.6.3菌种鉴别试验6.4.6.3.1取样方法:取接种铜绿的试样,经革兰氏染色实验肉汤培养基在紫外灯下呈蓝绿色荧光的性质,鉴别待检试样存在铜绿假单胞菌｡6.4.6.3.2检测方法:革兰氏染色实验;紫外灯下目视观察｡6.4.6.3.3可接受标准:镜检结果应呈红色,并观察细胞形态结构符合铜绿假单胞菌特征,证明是铜绿假单胞菌;肉汤呈蓝绿色荧光｡6.4.6.4菌悬液浓度检查6.4.6.4.1检查方法:平板计数法｡6.4.6.4.2可接受标准:活菌数必须达到1×106CFU/ml｡6.4.6.5接种菌准备6.4.6.5.1培养方法:铜绿假单胞菌斜面培养物少许至10ml无菌营养肉汤中30℃培养24小时｡6.4.6.5.2稀释方法:铜绿假单胞菌新鲜肉汤培养物1ml加入到9ml0.9%的无菌NaCl 溶液中,如此10倍系列稀释至所需浓度｡6.4.6.5.3浓度标准:10~100CFU/1ml｡6.4.6.6微生物侵入试验(挑战试验)6.4.6.6.1试验方法:试样在挑战菌悬浮液中持续浸泡约4小时,消毒后的西林瓶放在塑料袋中,置30~35℃培养7天后观察结果｡6.4.6.6.2可接受标准:在营养试验都合格､菌种鉴别试验合格的情况下,所有试样应无菌生长,如长菌应排除是由于西林瓶封口明显的物理性缺损所致,否则即判密封系统完好性(挑战)试验失败｡6.4.7试验要求本试验可以与培养基模拟灌装试验同步进行,经灌封､轧盖后的试样直接取自于培养基模拟灌装试验｡7.偏差情况处理验证过程中出现偏差或发生异常情况可能会影响验证结果时,需对验证方案予以修订批准后再进行验证｡8.再验证周期8.1每一年验证一次｡密封系统完好性试验验证记录附件1 人员培训检查记录附件2 检查确认记录附件3 试样制备统计记录附件4 营养性试验结果统计记录附件5 挑战菌悬浮液制备时间统计记录附件6 试验时间及菌液浓度记录附件7 A组微生物侵入检查结果记录附件8 B组微生物侵入检查结果记录附件9阳性对照试验长菌检查结果记录附件10挑战试样培养基的营养检查记录附件1 人员培训检查记录确认结论: 检查人: 检查日期:附件2 检查确认记录确认结论:检查人: 检查日期:复核人: 复核日期:附件3 试样制备统计记录确认结论:检查人: 检查日期:复核人: 复核日期:附件4 营养性试验结果统计记录(5ml规格)附件4 营养性试验结果统计记录(10ml规格)确认结论:检查人: 检查日期:复核人: 复核日期:附件5 挑战菌悬浮液制备时间统计记录附件6 试验时间及菌液浓度记录确认结论:检查人: 检查日期:复核人: 复核日期:附件7 A组微生物侵入检查结果记录(5ml规格)附件7 A组微生物侵入检查结果记录(10ml规格)附件9 阳性对照试验长菌检查结果记录确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日附件10 挑战试样培养基的营养检查记录(5ml规格)附件10 挑战试样培养基的营养检查记录(10ml规格)确认结论:检查人: 日期: 年月日复核人: 日期: 年月日密封系统完好性试验验证报告1.验证过程小结确认人: 日期:2.偏差情况记载确认结论: 确认人: 日期:3.再验证周期确定3.1每一年验证一次｡确认结论: 确认人: 日期:4.评价和建议评价人: 日期:5.验证报告审核上述密封系统完好性试验验证报告已审阅,同意该验证报告内容｡审核人: 日期:批准人: 日期:。
输液瓶密封系统完好性(微生物侵入试验)再验证方案
验证方案审批验证小组名单目录 (4) (4) (5) (5) (7) (8) (8) (8) (8)1. 概述：微生物侵入试验是最终灭菌容器/密封件系统完好性的挑战性试验。
在验证试验中，取输液瓶，灌装入培养基，在正常生产线上压塞、压盖灭菌，此后，将容器密封面侵入高浓度运动性菌液中，取出、培养并检查是否有微生物侵入，以确认容器密封系统的完好性。
此同时，需作阳性对照试验，确认培养基的促菌生长能力。
2.验证范围：本验证方案适用于输液瓶密封系统完好性（微生物侵入试验）的再验证。
3.准备工作：3.1.试验样品的制备：.在生产线上取足够量的输液瓶，灌装SCDM/2（大豆胰蛋白胨肉汤）培养基，使用自动压塞和压盖设备将输液瓶密封。
（完全按照现行工艺条件及标准操作规程进行压塞、压盖、灭菌）.将灌装后的输液瓶经最长灭菌程序灭菌。
.从灭菌柜中取出试样，冷却，将每一试样倒转，使培养基与输液瓶内表面充分接触，在30～35℃下竖放培养14天。
.小心去除至少50个试样的铝盖，注意不要破坏其密封口，将去铝盖时不慎损坏输液瓶密封的所有试样剔除，按（3.1.3.）要求培养样品。
.评价标准：输液瓶内培养基培养后，不得发现试样长菌详细情况见验证记录1。
――营养性试验.所有试样培养14天均不长菌时，随机取20个带盖试样，每个试样内接种0.1ml的铜绿假单细胞（Pseudomonas aeruginosa）ATCC9027，菌液浓度：10－100CFU/0.1ml。
.在30～35℃下培养7天，或培养至所有试样都呈阳性结果。
.若在7天内，所有接种铜绿假单胞菌的试样中，微生物生长良好，则输液瓶内培养基的菌生长能力可判为合格。
使用革兰染色和紫外灯下肉汤呈蓝绿色荧光的性质，来鉴定并确认试样输液瓶内生长的菌为接入的铜绿假单胞菌。
详细情况见验证记录 2. 从铜绿假单细胞（Pseudomonas aeruginosa）ATCC9027的新鲜斜面上取一整环培养物，分别接入含10ml无菌培养基的试管中，在在30～35℃下培养16～18h。
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冻干粉针剂生产线西林瓶轧盖气密性再验证方案文件编号：VAL-工-301-Ⅰ编制人：编制日期：批准人：批准日期:目录1、引言1.1 验证概述 (3)1.2 验证目的 (3)1.3 验证范围 (3)2、验证准备2.1 验证人员及职责...........................................................................（3，4）2.2仪器仪表校验 (5)2.3参考文件 (5)2.4相关文件 (5)2.5相关条件的确认………………………………………………………………（5，6）3 、验证实施3.1验证步骤.......................................................................................（6-9）3.2测试方法 (9)3.3可接受标准 (9)1. 引言1.1 验证概述冻干箱顶部安装有液压油泵站，油缸等。
油缸在油压泵站的驱动下使板层在箱内上下升降。
冻干粉针经冻干箱真空冷冻干燥结束后，在冻干箱内启动液压系统将瓶塞完全压入瓶口内。
出箱后，用轧盖机（ZG400型）轧铝盖，以保证西林瓶的气密性。
西林瓶灌装药液冻干后，在冻干的终点为了确保瓶内的无菌条件，并使胶塞完全压入瓶内，在冻干箱内进行全压塞以前，使瓶内保持一定的负压状态。
由于制品从出箱到轧盖完毕，中间要有一定的暂存时间，制品西林瓶的负压有利于维持瓶塞的气密性。
事实上这个负压（真空）在全压塞，轧铝盖后，一直将持续到制品的使用。
工艺过程→→→在负压状态下该验证共分三批共同完成，通过对西林瓶压胶塞的压力试验和对灌装后的样品进行细菌挑战性试验（微生物侵入试验）以验证压塞及轧盖后西林瓶的密封完整性。
实施时间为2015年2月份,确定验证批号为P2*******、Y20150201、Y20150202，批量分别为6000支、500支、500支，每支装量1ml，其中每批准备400支灌装培养基的样品，在与产品相同的贮存条件下贮存。
在贮存一定的时间间隔（如 12、24个月）后，取出部分样品，按上述方法进行检测，以确定密封系统在贮存期内的有效性。
1.2 验证目的西林瓶的气密性除与西林瓶轧盖强度有关外，还与冻干箱内压胶塞油泵的设置压力，胶塞在此压力下的弹性和塑性变形等因素相关，通过西林瓶压塞和轧盖密封后瓶密封试验和细菌挑战性试验验证密封完好性，确认西林瓶压塞、轧盖工艺对冻干产品质量的可靠性。
1.3 验证范围适用于西林瓶压塞、轧盖气密性验证。
2 、验证准备2.1 验证人员及职责2.2 仪器仪表校验2.2.1 验证使用的仪器2.2.2 验证使用的仪表2.3 参考文件《2010版GMP实施指南》《2003版药品生产验证指南》2.4 相关文件《冻干粉针剂轧盖岗位标准操作规程》《冻干粉针剂冻干岗位标准操作规程》《轧盖机(ZG400型)标准操作规程》《真空冷冻干燥机标(LYO-15型)标准操作规程》《洁净区容器具清洁标准操作规程》2.5相关条件2.5.1 公用设施及主要设备的验证情况（2）主要生产设备的验证情况（3）验证前必须对设备的仪表进行校验并在有效期内。
（4）系统检查：试验前检查真空冷冻干燥机真空系统，液压系统，电控系统运转是否正常。
（5）验证前必须确认本验证所用的西林瓶、胶塞和铝盖按相关操作规程清洗、灭菌并符合规定要求。
（6）人员培训3 、验证实施3.1 验证步骤3.1.1 西林瓶轧盖后负压保持试验（1）真空冷冻干燥机油压系统设置压力为4～6Mpa。
（2）取5ml西林瓶100支，进行模拟作业，按《直线式灌装加塞机(KGS10A型)标准操作规程》操作，将西林瓶半加塞后和托盘支架一起放入冻干箱内，按《真空冷冻干燥机标(LYO-15型)标准操作规程》抽真空至880mbar，在设定油压下全压塞，然后升高干燥箱压力后出箱。
（3）出箱后目检压塞后外观。
（4）为保证压塞后产品风险控制，将3.1.1（3）项下经压塞合格产品100支放置2小时后放入色水中进行浸泡，检查是否有进入色水情况。
3.1.2 细菌挑战性试验（1）试验样品的制备（a）在生产线上取足够量的西林瓶，灌装经最长灭菌程序灭菌的 SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基，在冻干机内自动压塞后经轧盖机轧盖后将西林瓶密封。
（b）将每一试样倒转，使培养基与西林瓶内表面充分接触，在 30～35℃下竖放培养14 天。
（c）小心去除60 个试样的铝盖，注意不要破坏其密封口。
将去铝盖时不慎损坏容器密封性的所有试样剔除。
按3.1.2（1）（b）要求培养样品（在培养期内，当试验中发现任何带盖试样长菌时，则试验无效，须弃去全部试样，重新从头开始试验）。
（2）确认培养基促菌生长能力——营养性试验（a）所有试样培养14 天均不长菌时，随机取20 个带盖试样，每个试样内接种0.1ml 的大肠埃希菌（Escherichia coli），菌液浓度：10～100CFU/0.1ml。
（b）在30～35℃下培养7 天，或培养至所有试样都呈阳性结果。
（c）若7 天内，所有接种大肠埃希菌的试样中，微生物生长良好，则容器内培养基的促菌生长能力可判为合格。
使用紫外灯下观察肉汤呈蓝白色荧光的现象，来鉴定并确认试样容器内生长的菌为大肠埃希菌。
（3）挑战菌悬浮液的制备（a）从大肠埃希菌（Escherichia coli）的新鲜斜面上取一整环培养物，分别接入含lOml 无菌培养基的试管中，在30～35℃下培养16～18h。
（b）将每管的培养物分别转入含1000ml 相同培养基(SCDM ／2)的容器内，于30～35℃下培养22～24h。
在培养结束时，明显见容器内培养基出现浑浊。
（c）培养结束后的菌悬液即可用来作容器／密封系统完好性试验。
（4）微生物侵入试验操作步骤将 3.1.2（1）（a）生产后的容器倒置并将瓶口完全浸没于高浓度（如大于105个/ml）的运动型菌液中，如大肠埃希菌、铜绿假单胞菌或黏质沙雷菌，4小时后，将容器外表面消毒并培养，看是否有挑战性细菌在容器中生长。
（a）将新鲜的大肠埃希菌（Escherichia coli）的菌悬液倒入合适的盆中，将试样西林瓶倒置在菌悬液中。
（b）将50 个灌装有经最长灭菌程序灭菌的 SCDM/2(大豆胰蛋白胨肉汤)培养基的试样倒置，并浸入菌悬液中。
该组试样为A 组。
试样西林瓶内的无菌培养基应充分接触封口内表面，样品的颈部及封口的外表面应完全浸泡在菌悬液中，见图4-54 。
（c）同时将25 个去铝盖的试样容器倒置入菌悬液中，该组试样为B 组。
（d）试验开始时取一份菌悬液，平板计数每毫升所含的活菌数。
按3.1.2（2）（c）确认试验用微生物是大肠埃希菌（Escherichia coli）。
（e）将A 组和B 组试样容器在菌悬液中持续浸泡约4h。
（f）浸泡结束时，再用平板计数菌悬液的浓度。
（g）从菌悬液中取出试样，擦干试样容器外残余的菌悬液，然后用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒容器外表面。
（h）取装满培养基有铝盖和去铝盖的样品各两个，作阳性对照。
阳性对照用样品制备方法同试样，但不经菌悬液浸泡，其外表用含0.5％过乙酸的70％异丙醇消毒。
此后，接种入10～100CFU大肠埃希菌（Escherichia coli），按6.6.2进行培养基的营养试验。
（i）将消毒后的容器放在塑料袋中，置30～35℃培养7天。
操作中应特别注意不要损坏B组无铝盖试样胶塞的密封性。
（j）挑战试验用菌悬液经灭菌后丢弃。
（k）将挑战试验用的试样培养7 天，观察试样容器内培养基中微生物的生长情况。
Ⅰ对每一试样进行观察，有生长记作+，无生长计作－。
Ⅱ如果试样容器长菌，按3.1.2（2）（c）方法确认生长菌是挑战微生物——大肠埃希菌。
Ⅲ如果所有西林瓶都不长菌，则从浸过菌悬液的A 组取10 个试样，B 组取5 个试样，分别按3.1.2（2）进行培养基的营养检查。
3.2 测试方法3.2.1 西林瓶压塞后负压保持试验（1）出箱后目检压塞后外观，胶塞与西林瓶是否配套。
（2）为保证压塞后产品风险控制，将3.1.1（3）项下经压塞产品100支不进行轧盖，放置2小时后，将西林瓶倒置于色水中，通过观察西林瓶内是否有色水，最终验证西林瓶与胶塞的气密性。
（3）本验证试验连续进行三次。
3.2.2 细菌挑战性试验（1）结果评价（a）步骤3.1.2（2）、步骤3.1.2（4）（h）、步骤3.1.2（4）（k）Ⅲ中进行的营养试验都合格，试样的挑战试验才有效。
（b）在挑战试验开始时，挑战用菌悬液浓度(活菌数)必须达到1×106 CFU/ml。
（c）挑战试验中A 组和B 组如有长菌，需记录长菌的试样数。
在A 组中如出现长菌试验，则需按下述要求作进一步调查。
Ⅰ仔细去除微生物生长的容器的盖和塞，检查容器封口是否有缺损，造成微生物侵入。
Ⅱ将观察到试样西林瓶封口的缺陷，采用拍照或及其他适当详细记录。
Ⅲ如果任何挑战试验中长菌的容器不是由于容器封口明显的物理性缺损所致，容器／密封系统挑战试验作失败论处。
（2）贮存稳定性Ⅰ将剩余未经过挑战试验的容器放入箱中，保存在室温，黑暗处。
Ⅱ在适当的时间间隔(12 个月、24 个月)后取出一些容器，重复挑战试验。
3.3 可接受标准3.3.1 西林瓶压塞后负压保持试验：检查有真空西林瓶内没有色水，即符合要求。
3.3.2 细菌挑战性试验：培养基澄清不浑浊。