中药制剂的含量测定

第四节 薄层扫描法
（ Thin Layer Chromatography Scan TLCS ） 一、定义 薄层扫描法（TLCS）系指用一定波长的光照射在薄层板上， 对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生
荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品
定性定量分析的方法。
二、特点 具有分离分析双重功能。与高效液相色谱法比 较，具有多通道效应，可同时平行分离分析多个 样品；流动相用量少且选择范围宽、更换方便； 固定相为一次性使用，对样品的预处理要求不高 等优点。目前随着制板、点样、展开等操作的仪 器化及仪器性能的改进，该法检测的灵敏度，结 果的精密度与准确度均大大提高，在中药及其制 剂检验中，已成为重要的分析方法。《中国药典》 中有32个中成药品种采用该法进行含量测定。
五、含量计算
VO 含量（V/W ％）= WS ×100% VO ×DO
含量（V/W ％）=
VO 含量（V/W ％）= ×100% VS VO 挥发油体积（ml） VS 样品体积（ml）
WS
×100%
WS 样品重量（g）
DO 挥发油密度（g/ml）
第三节 可见-紫外分光光度法 （Ultraviolet and Visible Spectrophotometry） 一、定义 根据被测物质在可见-紫外光的特定波长处或 一定波长范围内光的吸收度对该物质进行定性定 量分析的方法称可见-紫外分光光度法。
射法测定，其灵敏度比吸收法高。
4.测定波长
（1）单波长 一般用于荧光测定法，即用某一波长的紫外光（激发光） 进行扫描。对玻板和斑点的质量要求较高。 （2）双波长 主要用于吸收测定法。该法可消除背景干扰，对玻板和 斑点的质量要求不高，故较常用。测定时，样品波长（λs） 和参比波长（λR）依次扫描斑点，所测吸收度为 ΔA=Aλs －AλR
二、意义
这是一种较为粗略的定量分析方法。但对于有效成 分不明确或无法建立确切的定量分析方法的中药材及 其制剂，尚具有一定的意义。 《中国药典》附录收载了三种测定方法：水溶性浸出 物测定法、醇溶性浸出物测定法和挥发性醚浸出物测 定法。有的品种还采用了乙酸乙酯浸出物测定法。 《中国药典》收载的中成药浸出物测定品种及其规定 见表4-18。 供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。
含量（W/W %） =
mi×100 20 × ms
×100%
mi 为水溶性浸出物重量（g）
ms 为干燥供试品的重量（ g ） = 供试品重量×
（1﹣含水量%)）
2.热浸法(中成药较少用 自学)
3.实例 暑症片的水溶性浸出物测定（P128）
四、醇溶性浸出物测定法
本法系以甲醇、乙醇或正丁醇为溶剂，提取药品中相应的醇 溶性成分，并计算其含量（ %）。正丁醇浸出物测定法主要用 于含较多皂苷类成分的制剂，更具专属性。 1.甲醇、乙醇浸出物的测定 照水溶性浸出物测定法测定。 2.正丁醇浸出物的测定 按各品种项下规定的方法测定。一般说来，水溶液制剂可直 接用水饱和的正丁醇提取数次，合并提取液，臵已干燥恒重的 蒸发皿中，蒸干，臵105℃干燥3小时，移臵干燥皿中，冷却30 分钟，迅速精密称定重量，计算供试品中正丁醇浸出物的含量 （W/V %）。固体制剂可先加水溶解，移至分液漏斗中，用水 饱和的正丁醇提取数次，合并提取液，照上述方法蒸干，干燥， 称定浸出物重量，计算出制剂中正丁醇浸出物的含量（ W/W %）。
供紫外光（200～400nm）测定，扫描有紫外吸收的成分斑点。
（3）氙灯（Xe） 供荧光测定，发射不连续光谱，常用波长为365nm。
四、含量测定方法（外标法）
TLCS含量测定有外标法和内标法，中国药典仅采用外标法。 1.原理 外标法系将一定量的供试品溶液和对照品溶液分别点加在 同一块薄层板上，展开，显色，定位，扫描被测成分和对照品 斑点，测得相应的吸收度或荧光强度积分值，根据定量关系， 计算出被测成分的含量。 2.类型 根据对照品标准曲线性质的不同，外标法又分为外标一点 法和外标两点法。 若标准曲线通过原点，采用外标一点法。 若标准曲线不通过原点，采用外标两点法。
第五章 中药制剂的含量测定 （Content Determination）
概
一、含量测定的定义和意义

述
中药制剂的含量测定是指用适当的化学方法或仪
器分析方法对制剂中某种（些）有效成分或有效部 位进行的定量分析。并以其测定结果是否符合药品 标准的规定来判断药品的优劣，是控制和评价药品 质量的重要方法。
二、含量测定方法
1.测定法
取供试品（过四号筛）2~5g，臵五氧化二磷干燥器中，干燥12小时， 精密称定重量（ms）,臵索氏提取器中，加乙醚适量，除另有规定外， 加热回流提取8小时，取乙醚液，臵干燥至恒重的蒸发皿中，放臵， 挥去乙醚，残渣臵五氧化二磷干燥器中，干燥18小时，精密称定 （m1），缓缓加热至105℃，并于105℃干燥至恒重（m2）。其减失 重量即为挥发性醚浸出物的重量（m1-m2）。计算，即得。
一、意义 某些药品中的主要有效成分为挥发油，故《中国药 典》收载了挥发油测定法，采用水蒸气蒸馏法对药品 中挥发油总量进行测定，以控制药品质量。例如，正 骨水、牡荆油胶丸、保妇康栓和满山红油滴丸等中挥 发油的测定。 二、测定原理 首先利用挥发油的挥发性用水蒸气蒸馏法将其提取 完全；再利用其较强的亲脂性与水不相溶而分层，即 可读取油的总量并求算出含量。
中药制剂含量测定的方法包括化学分析法和仪
器分析法两大类。由于中药制剂组成复杂，仪器
分析法更为常用。《中国药典》中药制剂含量测 定方法概况见下表。 本章重点介绍浸出物测定法、挥发油测定法、 分光光度法 、TLCS、 HPLC 和GC等。
仪 器 分 析 法 化 学 分 析 法
方法 总数 HPLC 339 TLC 32 GC 23 分光光度法 18 滴定法 13 重量法 5 氮测定法 5 挥发油测定法 3 浸出物测定法 13 总计 456
三、仪器及其工作原理
1.薄层扫描仪 中国药典采用双波长薄层扫描仪。 常用的有岛津CS-930型和CAMAG-Ⅱ型等。 2.扫描仪工作原理
3.测定方式 （1）吸收法
适用于有紫外（可见）吸收的成分，较常用。该法又可采
用反射法或透射法测定。理论上讲，透射法比反射法优越， 但实际工作中常用反射法，因为紫外光不能通过玻板。 （2）荧光法 适用于有荧光性质的成分，例如小檗碱等。该法仅采用反
紫外分光光度计工作原理
紫外吸收光谱图
二、特点
本法操作简便，灵敏度高，常用于中成药含测。 但本法不具分离功能，常用于总成分的测定。
三、定量分析的理论基础
朗伯比尔定律
A=KCL
A为吸收度
K为吸收系数
C为溶液浓度 L为溶液厚度
四、药典收载了三种测定方法 1.吸收系数法 仅用于UV,不需对照品。 2.对照品比较法 主要用于Vis,需用对照品。 3.标准曲线法 主要用于Vis,需用对照品。 （原计算分光光度法取消）
2.乙法
本法适用于测定相对密度在1.0以上的挥发油。取水约 300ml与玻璃珠数粒，臵烧瓶中，连接挥发油测定器。自 测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶时为止， 再用移液管加入二甲苯1ml，然后连接回流冷凝管。将烧瓶 内容物加热至沸，并继续蒸馏，其速度以保持冷凝管的中 部呈冷却状态为度。30分钟后，停止加热，放臵15分钟以 上，读取二甲苯的容积。然后照甲法自“取供试品适量” 起，依法测定，自油层中减去二甲苯量，即为挥发油量， 计算即得。
3.注意事项 （1）回流加热乙醚须在水浴上进行。 （2）蒸发皿中挥去乙醚须在室温下风橱中进行。 （3）加热挥去浸出物中挥发性成分时，应缓缓加 热至 105℃
4.实例
（1）儿康宁糖浆正丁醇浸出物的测定
（2）刺五加浸膏的甲醇浸出物测定
五、挥发性醚浸出物测定法
本法以乙醚为溶剂，对制剂中挥发性醚溶性成分进行提取，并计算 其在制剂中的含量（W/W %）。本法主要用于含挥发性成分较多的 制剂，专属性较强。
修订 30 3 3 0 0 0 1 0 1 37
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删除 0 12 0 9 0 1 0 1 1 23
第一节 浸出物测定法 （Determination of Extractive）
一、定义
浸出物测定法系根据制剂中化学成分的溶解性， 选择适当的溶剂浸提 ( 提取 ) 样品，并测定浸出物 （提取物）的含量，以此来控制药品的质量。
三、挥发油测定装臵（图）
四、测定方法
供试品需粉碎后过二号至三号筛，混匀再测定。
1.甲法 本法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油。取供试品适量 （约相当于挥发油0.5ml～1.0ml），称重（准至0.01g），臵烧 瓶中，加水 300ml ～ 500ml （或适量）与玻璃珠数粒，振摇混 合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使 充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。臵电热 套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约 5 小时， 至测定器中油量不再增加，放臵片刻，开启测定器下端的活塞， 将水缓缓放出，至油层上端到达刻度 0 线上面5mm处为止。放 臵1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平 齐，读取挥发油量，计算即得。
含量（W/W %） =
m1- m2 ms
×100%
2.实例 九味羌活丸的挥发性醚浸出物测定
本品由羌活、防风、苍术、细辛、川芎、白芷、
黄芩、甘草、地黄等九味中药组成，其主要有效成
分为挥发油，故测定其中挥发性醚浸出物的含量。
第二节 挥发油测定法 （ Determination of Volatile Oil）
类别 醇 溶 性 浸 出 物 测定
品名 七厘散 刺五加浸膏 刺五加片 儿康宁糖浆 独一味胶囊 鼻窦炎口服液
溶剂 乙醇 甲醇 甲醇 正丁醇 正丁醇 正丁醇