感觉神经缺失对兔下颌骨牵张成骨影响的生物力学观察
神经生长因子对兔下颌骨骨折愈合的影响

神经生长因子对兔下颌骨骨折愈合的影响于立明,陈 坤,兰 青,张 伟1112(1.广东医学院附属医院口腔科,广东湛江524001;2.吉林大学口腔医学院,吉林长春130041)EffectofnervegrowthfactoronmandiblefracturehealingYU Li-ming ,CHEN Kun ,LAN Qing ,ZHANG Wei1112(1.Department of Stomatology,Affiliated Hospital of GuangdongMedical College,Zhanjiang 524001,China)Abstract:Keywords:Objective Methods Results Conclusion To study the role of nerve growth factor (NGF)in fracture healing of mandible.Thirty rabbits were randomly divided into NGF and control groups.After establishing right mandible fracture model and then fixing with titanium plate,the animals received local injection of 0.4g/d NGF or normal saline for 7days.The rabbits were sacrificed,and the mandibles were removed 7,14,and 28days after operation.The density,gray scale and morphometry of osteotylus were detected by bone densitometer,molybdenum target X-ray and HE stain,respecyively.The density and gray scale of osteotylus were significantly higher in NGF group than those in control group (<0.01)on days 7,14and 28postoperation.Osteoblast index,percentage of trabecular volume and trabecular thickness increased remarkably in NGF group on days 14and 28postoperation compared with control group (<0.01).Exogenous NGF can promote the fracture healing ofmandible.nerve growth factor;fracture healing;bone density;morphometryμP P 摘 要:关键词:中图分类号:文献标识码:文章编号:目的方法结果结论DOI:(NGF)30NGF 15NGF 0.4g/d 71428X-71428NGF (<0.01)1428NGF (<0.01)NGF R 683A1005-4057(2011)02-0122-0410.3969/j.issn.1005-4057.2011.02.002探讨神经生长因子对下颌骨骨折愈合的作用。
兔下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立

和 实 验 C组 , 组 6只 。 每
12 下颌骨 牵张成骨模型的建立 .
者扩张产生的牵张力 , 从而激发机体的 自我修复和 自我再 生
潜力 , 使两骨 段延 长并 在其 间隙 内形成 新生 骨组 织… 。 目
前 , 张成 骨 还 存 在 着 成 骨 不 良 、 段 不 连 接 以及 治 疗 周 期 牵 骨
tke u o — r ya itlg xa ia in . s t Al fte ma dil swe elngh ne u c sf ly. a n o tf rX a nd hsoo y e m n to s Re uls lo h n b e r e te d s c e su l Thedi— s
t ci n g p e e f ld wi e e ea e o e t s e l o h x mi ain h we h tt e b n s w r omi g r t a s w r l t rg n r t d b n i u .A l ft e e a n t s s o d t a h o e e e f r n a o i e h s o g a u l i i . n l s n T e meh d s d i h ssu y w r r ci a a d rp aa l . r d al w t t y h me Co cu i h t o s u e n ti td e e p a t l n e e t be o c
d i1 .9 9ji n 17 — 3X.00 1 . 1 o:0 36 /. s.6 1 3 i, O 是一种内源性 组 Ds at nO t gns D ) t i e s 织工程技术 , 指在骨缝处或截开的骨断端处施加机械拉伸或
兔下颌骨放射后牵引成骨术式选择的实验研究

双 侧 下领 骨 截 断 、 侧牵 引 的截 骨 办 式 可 作 为 兔 下 颌 骨放 射 后 牵 引成 骨 术 的饿 骨 模 式 。 单 【 键 词 】 },成 , 张 ; 颁 骨 ; 关 iI 牵 1 n ’ 下 兔
d i O 99 .s. 7 —8 0 0 010 4 o: . 6 /i n1 1 0 . 1 .l0 1 3 js 6 0 2 【 图 分 类 号】 R 1 中 38 【 献标志码】 A 文 【 章编 号 】 l 7—8 02 1)110 .4 文 6 1 0 (0o 1.2 70 0
,
sd it ce n o f a in wa d n t eoh r i e Co t l r u :h r d ae i e s s o s da dd — i ed s a td a dn x t sma eo t e d . n r o p t ei a i d s t mi n i r i o h s og r t d wa o e e src e , n o o ea in wa o eOl h t e i e Eih a slt r dsr c in wa c i ae t aeo 4 m m t td a d n p r t sd n it eo h rs . g t y ae, it to sa t t da r t f a o d d a v a 0
兔下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立

兔下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立中文摘要目的:建立兔下颌骨牵张成骨实验动物模型。
方法:选用30只新西兰大白兔,随机分为5组,每组6只。
在右侧下颌骨第一前磨牙前方和颏孔之间行骨切开术,用自制牵张器固定。
经过7天潜伏期,以每次0.25mm,每天2次的速度牵张,连续6天。
在术后每周进行X线观察,观察模型建立后牵张成骨(distraction osteogenesis.DO)的可行性。
分别在牵张结束,固定期第2、4、6、8周处死动物,切取标本行组织学观察,免疫组化观察和定量CT测定。
结果:大体标本示:实验动物手术后均成活、健康状况良好。
全部动物右侧下颌骨被成功的延长3mm,安置D0装置后伤口愈合良好,自制的DO装置固定牢靠。
X 线示:随固定时间的延长,牵张区均可见新骨逐渐形成,密度影逐渐增强。
组织学观察示:牵张结束牵张区中央为沿牵张力方向排列的胶原纤维束为主;固定期2周牵张间隙内可见沿牵张方向走行的较细的骨小梁结构;固定期4周:牵张区己被沿牵张方向走行的较粗的骨小梁结构所充满;固定期6周牵张区骨小梁沿牵拉方向呈编织状;固定期8周可见成熟的板层骨。
随着牵张时间的延长,新骨在牵张区内不断生成,成熟。
牵张区新骨的成骨方式为膜内成骨。
免疫组化染色示成骨细胞内Ⅰ型胶原呈阳性表达。
在固定期2、4周,成骨细胞内Ⅰ型胶原表达强于固定期6、8周。
结论:1. 根据兔下颌骨离体标本设计的内置式兔下颌骨牵张器,完全符合DO 动物实验的要求。
2. 兔下颌骨牵张成骨中新骨的成骨方式为膜内成骨3.兔作为牵张成骨动物模型具有很高的可行性和可重复性。
关键词:牵张成骨下颌骨动物模型兔The establishment of an animal model of mandibular distraction osteogenesis in rabbitsabstractObjective:To establish an animal model of mandibular distraction osteogenesis in rabbitsMethods:30 white New Zealand rabbits were divided into 5 groups randomly. Each group has 6 rabbits. Osteotomy was performed on right mandible between the first premolar and mental foramen .Bone stumps were repositioned and fixed with self-devised distraction equipment. After 6 days latency period,the distraction was carried out with the frequency of 2 times a day and with the rate of 0.25 mm once for 6 days. The new generation bone were studied by X- ray every week after the operation. When distraction completed , and the rabbits sacrificed after 0, 2 ,4 ,6 ,and 8 weeks. The specimens were take for Quantitative Computed Tomography(QCT),immunohistochemistry and histology examination.Results:specimens macrography All rabbits were in good condition with in the experiment period. The right mandible of every rabbits were lengthend 3mm successful.During the experiment period ,well healing was found between the distraction device and surrounding tissues.The instrument fixed well.X-ray With the time of fixation passing,the density of new bone was enhanced gradually.Histology showed that at the end ofdistraction period the distraction zone was filled with fibers arrayed from the distraction direction;on the second week of consolidation period the new bone trabecula extended from the distraction direction; on the fourth week of consolidation period the distraction zone was filled with mature bone trabecula arrayed from the distraction direction; on the sixth week of consolidation period ,woven bone was found in the distraction zone;on the eighth week of consolidation period, lamellar bone was found in the distraction zone.New bone gradually formed and matured within distraction gap along the time of study. The new bone regeneration was formed by intramembranous ossification.Immunohistochemistry show that the expression of CollagenⅠwas observed in the osteoblasts.The expression of CollagenⅠin the osteoblasts on the fourth week of consolidation period and on the second week of consolidation period was stronger than other time.Conclusion: 1.The internal fixed distracter that designed according to the structure of the mandible of rabbits maybe used for animal experiment.2.The new bone regeneration was formed by intramembranous ossification.3.Rabbit is a good animal for developing an experimentalmodel on study of distraction osteogenesis.Key words:Distraction Osteogenesis(DO) Animal model Mandible Rabbit前言牵张成骨(distraction osteogenesis.DO)是一种内源性组织工程技术,指在骨缝处或截开的骨断端处用特制的牵张装置以一定的速度和频率牵开,从而激发机体的自我修复和自我再生潜力,使两骨段延长并在其间隙内形成新生骨组织,以达到延长骨组织的目的。
感觉神经及运动神经束构建神经化组织工程骨修复兔股骨缺损实验的研究

第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备建立。
要建立骨不连接的实验动物模型,目前常用的有两种方法,其一是通过损害或阻止骨再生,其二是去除足够的骨质,后者称为基准大小缺损型骨不连接。
基准大小骨缺损的修复有许多影响因素:l、动物的种类。
骨再生能力与动物的生物等级成反比,即越是高等的动物,骨再生修复能力越低。
2、动物的年龄。
发育期年龄的动物的成骨能力高于其他时期。
3、实验性缺损的解剖部位。
在动物个体之间不同骨骼、不同部位,其骨修复能力不同,而在同一动物的对称两侧骨之问则无差别。
4、骨缺损的大小。
5、骨膜的损伤程度。
l、实验方法1、1实验动物相关解剖数据的测量l、1、1实验动物:五月龄成年新西兰大白兔,体重2.0—2.5kg,雌雄不限。
实验部位:股骨。
特点:股骨为单一负重骨;可制作长的缺损;附近有可以进行手术操作的感觉神经、运动神经和血管;可以采用钢板螺丝钉固定。
标本:双侧股骨标本,共10具。
l、1、2测量项目:股骨干长度;股骨干中段骨皮质厚度;骨干横径与矢径;髓腔横径与矢径。
l、1、3测量器材:游标卡尺。
1、l、4方法:取5月龄成年新西兰大白兔(所有实验动物均由南方医院动物实验中心提供)5只,体重2.0-2.5kg。
耳缘静脉注射空气栓塞处死,剔取双侧股骨,用游标卡尺测量股骨长度、股骨干中点处矢状径和横径、股骨干中点骨皮质厚度(屈、伸、内、外侧四点骨皮质厚度的均值)和髓腔内径(髓腔横第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备图1—1大腿外侧入路,切开皮肤,皮下组织及深筋膜。
图1—2从股外侧肌与股二头肌之间的外侧肌间隙进入。
图1.3分别制作10mm、15mm、20mm股骨干中段的骨与骨膜缺损。
图l-4股骨前面钢板固定,钢丝辅助固定。
anddeepfascia.Fig.1-1Approach:Discussionoftheskin,subcutaneoustissueFig.1-2Enteringthroughthespatiumintermuscularebetweenmusculusvastuslateralisandbicepsmuscleofthigh.Fig.1-310mm、15mm、20mmoftherabbitfemoralshaftsboneandpefiosteumwereresectedseparatelyinthethreegroupsaccordingtotheexperimentdesign.Fig.1-4TheplateWasfixedontheanteriorsurfaceoffemur,addedbysteel—wire.10第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备2、2骨缺损模型手术结果分析2、2、1一般观察:所有实验动物无感染或死亡现象,皮肤无坏死,无内固定松动失败,全部进入结果分析。
兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型的建立

兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型的建立作者:李刚等来源:《中国美容医学》2013年第12期[摘要]目的:使用CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器,建立兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型,并评价其牵引效果。
方法:新西兰大白兔8只,行双侧下颌骨截骨术,安置牵引器。
延迟5天后,两侧下颌骨均以0.5mm/次,2次/天的速度牵引15天,牵引结束后固定8周,新骨分别行大体、放射学和组织学检查。
结果:所有动物均良好耐受牵引及固定,未发生死亡,双侧下颌体均显著延长。
固定8周时,两侧新骨均接近正常骨。
结论:兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型牵引效果可靠,新骨再生良好。
[关键词]双侧下颌骨;牵引成骨;动物模型[中图分类号]R782 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2013)12-01299-03牵引成骨(distraction osteogenesis, DO)是一种通过一定频率和速度缓慢牵引骨裂隙,获得新骨再生的临床技术[1]。
建立有效的动物模型是进行牵引成骨临床研究的基础。
本研究应用自行设计的CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器,进行兔双侧下颌骨截骨,并安置牵引器,对称性牵引,获得了良好的骨再生,未发生动物死亡,现报道如下。
1 材料和方法1.1 新西兰白兔8只,由徐州医学院实验动物中心提供,全身骨骼系统发育良好,口颌系统无异常,体重2.8~3.2kg。
1.2 牵引器:为自行设计,由浙江省慈溪市慈北口腔器械有限公司生产的纯钛CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器。
可牵引距离20mm,螺杆每旋转360°牵开0.4mm。
1.3 动物手术及牵引过程:予2%戊巴比妥钠,30mg/kg,经兔耳缘静脉注射行全身麻醉。
颌下备皮,碘伏消毒铺无菌巾。
切开皮肤、皮下、肌层,分离达下颌骨下缘,贴骨面翻开骨膜,显露下颌骨体部及颏孔,在下颌第一臼齿与颏孔之间,裂钻垂直于下颌骨下缘行双侧下颌骨皮质骨截骨,折断下颌骨,注意保护下牙槽血管神经束,避让近下颌骨下缘骨内段下牙槽神经,使用直径1.6mm钻头钻孔,直径2.0mm钛钉固定牵引器。
转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中表达的实验研究的开题报告

转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中表达的实验研究的开题报告
一、研究背景
随着人口老龄化程度的加剧和骨缺损相关疾病的不断增多,神经生长因子在骨修复治疗中的临床应用愈加广泛。
为了进一步探究神经生长因子在骨修复过程中的作用和机制,本研究以转化生长因子(TGF)作为研究对象,从分子层面深入探究其在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的表达情况和作用机制,为临床治疗提供理论参考和实践指导。
二、研究目的
本研究旨在探究转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的表达情况,分析其作用机制,为临床治疗提供重要的理论依据和实践指导。
三、研究方法
1.实验对象及组分:
本研究选取30只健康有满口牙齿、体重相近的新西兰大白兔为实验对象,分为对照组和实验组。
2.实验方法:
对照组采用普通缝线进行硬膜下注射;实验组采用TGF进行硬膜下注射。
3.实验过程:
制作下颌骨缺损模型后,加入TGF进行硬膜下注射,注射进程术后第3天开始并持续14天。
4.实验指标:
主要观察指标包括下颌骨缺损面积、骨组织生长情况、血管新生情况等,并进行统计分析。
四、研究意义
本研究将深入探究转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的作用机制,为临床治疗提供更为全面、深入的指导和参考,为改善人类生命质量、推动医疗技术水平的提升贡献力量。
失神经支配在胫骨牵张成骨延长过程中的骨再生及Runx2表达

失神经支配在胫骨牵张成骨延长过程中的骨再生及Runx2表达郑科;宋冬惠;冯兴梅;祝颂松;胡静;叶斌【摘要】BACKGROUND:During the healing of fractures, removal of sciatic nerve can result in insufficient mechanical rigidity of newborn woven bone. However, there are less reports concerning the denervation effects during distraction osteogenesis. OBJECTIVE:To observe the effect of removal of the sciatic nerve on bone regeneration and the expression of Runt-related transcription factor 2 (Runx2) protein during distraction osteogenesis in a rabbit model. METHODS:Twenty-four adult male New Zealand rabbits were selected and underwent left tibial osteodistraction to construct animal models of distraction osteogenesis. Before distraction, the animals were randomly divided into group R (resecting the left sciatic nerve) and group I (intact left sciatic nerve). Six weeks after completion of distraction, the animals were kil ed and the lengthened tibias were harvested for radiography, three-dimensional CT reconstruction, histological evaluation, connectivity density (Conn.D) evaluation. RESULTS AND CONCLUSION:New regenerated bone was present and Runx2 protein was expressed in the distraction gaps of al animals at the end of the study, as revealed by radiography, three-dimensional CT reconstruction, and histological observation. However, less new bone formation and a lower degree of mineralization and expression of Runx2 protein were observed in group R compared with group I. The results suggest that thedenervation appears to have an inhibitory effect on bone formation and the expression of Runx2 protein during distraction osteogenesis.%背景:研究发现,去除坐骨神经会导致骨折愈合过程中新生编织骨机械硬度不足,而目前对有关失神经因素在牵张成骨过程中作用的相关报道较少。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
感觉神经缺失对兔下颌骨牵张成骨影响的生物力学观察(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)作者:雷德林,王磊,曹健,杜兆杰,杨镟凝【摘要】目的研究离断下牙槽神经对兔下颌骨牵张成骨新生骨痂生物力学性能的影响。
方法对20只新西兰白兔进行双侧下颌骨牵张成骨,左侧(实验侧)在手术显微镜下暴露并切取约0.6cm下牙槽神经,保护下牙槽血管束,右侧(对照侧)仅暴露下牙槽神经而不切断。
术后动物随机分为2组,分别在固定期14、28天取材。
对双侧兔下颌骨新生骨痂进行外径测量、苏木精伊红(HE)染色及生物力学测试。
应用SPSS12.0软件包进行配对t检验,分析离断下牙槽神经侧与对照侧牵张区新生骨痂上述指标的差异。
结果双侧牵张区新生骨痂长度与外径未见明显差异(P0.05);离断下牙槽神经侧牵张间隙可见神经组织完全变性,对照侧牵张间隙内神经组织完好。
三点弯曲测试显示固定期14、28天时实验侧最大载荷及挠曲强度分别比对照侧低40.1%、26.8%(P0.05)。
结论离断下牙槽神经可引起牵张区新生骨痂生物力学强度不足,提示感觉神经系统在牵张成骨的成骨过程中起到一定调控作用。
【关键词】感觉神经;下颌骨;生物力学Abstract:Objective To investigate the effects of inferior alveolar nerve resection on mandibular distraction osteogenesis in rabbit.Methods Twenty new Zealand white rabbits underwent bilateral distraction osteogenesis with a rate of 1mm/d.The inferior alveolar nerve of one side was resected under the surgical microscope,with great care of protecting the inferior alveolar vessel bundle.The contralateral side received sham operations.The rabbits were sacrificed at consolidation time of 14 and 28 days.After three dimension measurements,neoformative callus underwent HE staining and three points bending test.A paired t test was performed using SPSS 12.0 software package.Results The three dimension measurement of both sides were of no significant difference(P0.05).The nerve tissues in the experimental side were severely damaged,whereas the nerve tissues in the control side were intact.Three point bending test showed that the bending strength on the denervated side was 40.1% and 26.8% lower than the contralateral side at 14 days and 28 days after consolidation repectively(P0.05).Conclusion The inferior alveolar nerve resection can result in mechanical weakness of new bone,thus suggesting that the peripheral nerves play a role during the new boneformation in the distraction osteogenesis.Key words:sensory nerve;mandible;biomechanics牵张成骨(distraction osteogenesis)是通过特殊的装置,使被切开的骨断端在受到缓慢的牵引力条件下,形成新骨,以延长或拓宽骨骼的外科新技术。
由于该项技术在修复创伤后骨缺损及畸形方面具有多种优势,目前在临床应用越来越广[1]。
同时,这项技术也为我们提供了一个深入研究骨组织再生与修复的理想模型。
周围神经系统对于四肢长骨的骨折愈合的影响一直是临床及基础研究的热点问题[2]。
但在牵张成骨这一特殊的“骨再生”过程中,周围神经系统尤其是感觉神经,对新骨的形成有何影响,尚未见确切的报道。
在下颌骨中,感觉神经即下牙槽神经自下颌孔处进入下颌管,沿下颌骨轴向穿行,并由颏孔穿出。
本实验拟通过单侧离断下牙槽神经兔双侧下颌骨牵张成骨模型,研究感觉神经系统对牵张成骨新生骨痂生物力学性能的影响,以期为研究神经系统对骨再生修复的作用提供参考。
材料与方法1 动物模型与分组健康成年雄性新西兰白兔20只,体重2.8~3.2kg,购自第四军医大学实验动物中心。
氯胺酮(50mg/kg)全身麻醉后,无菌条件下沿颏下中线作长约3.0cm切口并翻瓣,暴露双侧下颌骨颊侧中份骨皮质,保护颏神经,用细裂钻与小骨凿沿第1前磨牙和颏孔之间作垂直骨切开, 放置由西安中邦钛生物材料公司与本课题组共同研制的双侧下颌骨牵张器(图1)。
左侧下颌骨(实验侧)于下颌骨下缘角前切迹处凿孔、去骨,在手术显微镜(成都科奥达,ASOM-4)下暴露下牙槽神经血管束,保护下牙槽血管束,分离并切取约0.6cm下牙槽神经,两侧断端反折缝扎(图2)。
右侧(对照侧)给予伪操作,即暴露下牙槽神经血管束但不切断。
关闭伤口并磨短上切牙。
术后3天内给予10%葡萄糖溶液浸泡的半流食,并肌注青霉素20万U/d,3天。
牵张参数为:延迟期4天,牵张速率0.5mm/12h,连续牵张10天,牵张总长度为10mm。
实验动物依照随机化表的方法,随机分为2组,每组各10只(n=10),分别设定为在固定期14、28天处死、取材。
在上述2个时间点,分别检测、比较每组动物实验侧与对照侧牵张区新生骨痂的各项指标差异。
2 标本获取实验动物分别于固定期14、28天在全麻下解剖双侧颈总动脉并插管,4%多聚甲醛灌注处死。
将双侧下颌骨离体并去除软组织,用游标卡尺测量新生骨痂的实际牵张距离和外径( 包括颊舌径和上下径) ,结果用±s表示。
3 苏木精伊红(HE)染色沿原骨断端外2~3mm完整截取包含邻近正常骨的新生骨痂。
所取标本经4%多聚甲醛固定24小时后,10%乙二胺四乙酸(ethylenediamine tetraacetic acid,EDTA,pH 7.2)脱钙,常规脱水、透明、石蜡包埋,标本沿牵张方向连续水平切片,厚度为4μm。
标本切片后,行常规苏木精伊红(HE)染色,光镜下观察。
4 生物力学检测将截取的兔下颌骨新生骨痂连同两侧断端骨质标本以金刚砂片切割的方法制成18mm×6mm×2mm大小的试件(包括完整的颊舌侧骨皮质),切割过程中不断向骨组织滴加生理盐水,在万能电子力学试验机(AGS10kNG,日本SHIMADZU公司)上测定各试件在三点弯曲状态下的应力-应变指标:把试件横向固定于综合试验台上,试件跨度为15mm,在其中点以0.75mm/min速度匀速加载,直到试件断裂,在X Y 函数记录仪上记载该试件的应力应变曲线,记录试件破坏时的最大载荷并测定各组应力应变曲线线性段的斜率、应力和应变值,计算挠曲强度,计算公式参照第三版《口腔材料学》:δ=3FL/2BH2,其中δ为挠曲强度(MPa),F为最大载荷值(N),L为试件跨距(mm),B为试件宽度(mm),H为试件高度(mm)。
5 统计分析测量结果用±s表示,运用SPSS12.0软件进行配对t检验,分析离断下牙槽神经侧与对照侧之间各检测指标的差异。
P0.05时认为有统计学差异。
结果20只兔均耐受实验过程,双侧下颌骨成功延长,术后动物体重减少均在10%范围内。
术后1周内部分实验动物有轻度进食障碍,给予软食,1周后均恢复正常。
仅有2只兔在固定期1周后口腔前庭牵张器穿出口腔黏膜处发生感染,经局部处理后好转,不影响实验结果。
实验动物经颈动脉灌注处死后,分离双侧下颌骨,大体观察发现全部20只兔的左侧(实验侧)颏神经均严重萎缩,而对照侧颏神经色泽光亮、饱满有弹性。
1 牵张区新生骨长度与外径实验动物牵张间隙内均充满新生骨痂,其长度与外径均未见统计学差异(表1)。
2 HE染色石蜡切片HE染色显示,固定期14天,离断下牙槽神经侧牵张间隙可见神经组织完全变性;对照侧牵张间隙内神经组织完好(图3)。
3 生物力学检测生物力学方法测定牵张区新生骨痂的三点弯曲最大载荷、应力应变曲线线性段的斜率、挠曲强度结果(表2)显示,实验侧的最大载荷及挠曲强度在固定期14天时均比对照侧低40.1%(P0.05);在固定期28天均比对照侧低26.8%(P0.05)。
表1 新生骨痂外径测量表2 新生骨痂三点弯曲试验结果讨论大量临床和实验研究表明骨生长修复及再建都受神经系统影响。
早在上世纪30年代,Hurrell[3]通过研究成骨细胞附近的神经纤维,就推测这些纤维与骨的塑型和生长有关。
通过切除大鼠股神经及坐骨神经,观察其对大鼠胫骨骨折愈合的影响,发现骨折5周后,对照组骨痂达到正常骨质约50%强度,而切除神经组骨痂仅达到正常骨质20%机械强度[4]。
另外一些研究表明,感觉神经和自主神经共同支配骨组织,且可能通过释放不同神经肽类递质调节骨组织的代谢活动[5]。
但是,对于神经系统在牵张成骨这一特殊的”骨再生”过程中对新骨的形成有何影响,以及其作用机制都尚未明了。
本研究组[6]在兔下颌骨牵张成骨模型中局部应用神经生长因子,发现对新生骨痂有明显的促进成骨作用,其作用机制之一可能为神经生长因子诱导感觉和交感神经纤维长入骨痂。
本实验采用兔双侧牵张成骨模型,内置式牵张器由课题组与西安中邦肽生物材料公司共同研制。
此动物模型选择在兔下颌无牙区进行双侧同时牵张,为进行自身双侧对照研究创造了条件。
本实验中双侧牵张区新生骨痂三维外径无明显差异,表明此动物模型牵张效果较好,稳定性较高,具有很高的可操作性和可重复性。