遗传学实验指导

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遗传学实验教学大纲

遗传学实验教学大纲

遗传学实验教学大纲一、实验目的本实验旨在通过实际操作,让学生掌握遗传学基本实验技能,深入了解遗传学的基本原理和方法,并培养学生的观察力、分析能力和解决问题的能力。

二、实验内容及步骤1. 实验前准备:- 确定实验室所需材料和设备,并检查其完好度。

- 将实验材料分类整理,确保有序,方便学生使用。

- 确定实验操作规范和安全注意事项,向学生作出详细讲解。

2. 实验一:显微镜观察染色体- 学生按照实验指导书的步骤,取得待观察的样本。

- 学生准备好显微镜和玻璃载玻片,将样本制作成干片,并放置于显微镜下观察。

- 学生观察各种细胞类型的染色体形态和数量,并记录相关数据。

3. 实验二:交配试验- 学生按照实验指导书的步骤,选择不同性状的实验材料,进行交配实验。

- 学生观察和记录各代子代的表型,并根据观察结果进行分析和推理。

4. 实验三:基因型检测- 学生准备好实验所需的基因型检测试剂和仪器。

- 学生将待测标本提取DNA,并根据实验步骤进行基因型检测。

- 学生记录检测结果,并进行数据分析和统计。

5. 实验四:变异诱发- 学生按照实验指导书的步骤,选择适当的变异诱发方法。

- 学生诱发变异,并观察和记录变异结果和表型。

- 学生根据观察结果进行数据分析和推理,探讨变异的原因和机制。

6. 实验后总结:- 学生针对每个实验进行总结和思考,分析实验结果和现象的原因,并与相关理论知识相对照。

- 学生撰写实验报告,包括实验目的、实验方法、实验结果和分析等内容。

三、实验要求1. 学生要严格遵守实验室规则和安全操作规范,确保实验过程安全。

2. 学生要准备充足,并提前预习实验内容,了解实验原理和相关背景知识。

3. 学生要认真观察实验现象,并及时记录相关数据和结果,保持实验结果的准确性。

4. 学生要积极参与实验讨论,与同学合作完成实验和分析,共同探讨问题和解决方案。

四、实验评估1. 实验报告:学生根据实验内容和观察结果撰写实验报告,包括实验目的、方法、结果及讨论等,并逻辑清晰、表达准确。

医学遗传学实验指导

医学遗传学实验指导

实验守则一、一般要求1、预习:学生在实验课前应认真预习本实验指导以及教材有关章节,必须对该次实验的目的要求、实验内容、基本原理和操作方法有一定的了解。

2、讲解:教师只对该实验内容的安排及注意事项进行讲解,让学生有充分的时间按实验指导的顺序进行独立的操作和观察。

3、独立操作与观察:实验一般都由学生独立进行,在实验中要按操作程序反复练习,以达到一定的熟练程度。

4、示教:有些实验备有示教。

其目的是帮助学生对某些较难的操作过程和观察材料给予演示,学生建立初步认识后,再独立操作,仔细观察。

5、作业:实验报告必须根据各人的观察,以实事求是和一丝不苟的精神忠实地记录、分析、综合。

不得抄袭教材或其他同学的报告。

实验报告一般应于实验结束时呈交。

它的形式可因实验内容而不同。

6、总结:实验结束后,一般由教师说明该次实验的主要收获及今后应注意的事项。

二、实验室规则和注意事项1、学生上实验课时必须携带教材、实验指导、实验报告纸和文具,进入实验室要求穿好工作服,按规定座位入座。

2、实验开始前要检查所用仪器、材料、实验用品是否完好齐全。

如有缺损及时向带课教师报告,自己不得随意调换仪器和实验用品。

3、实验时要遵守纪律,听从教师指导,保持肃静。

有问题时举手提问,严禁彼此谈笑喧哗或随意走动,也不得进行和实验无关的其他活动。

4、实验时要遵守实验操作规程,严格按照教师的安排和实验指导的要求进行。

操作要正规,观察要认真仔细,边做边看、边想,及时完成实验报告。

5、要爱护仪器、标本和器材设备,注意节约实验材料、试剂和水电。

如损坏了仪器或器材应主动报告,说明情况。

6、实验结束后,应自觉清理实验台面,认真清理好仪器、试剂及其他用品,放回原处。

值日生要负责清扫地面,收拾实验用品,处理垃圾,关好水电、门窗后再离开实验室。

7、实验课不得迟到、早退或无故缺课。

实验一正常人类染色体核型观察及分析一、实验目的1、熟悉人类染色体的数目及形态特征。

2、掌握非显带染色体的核型分析方法。

新医学遗传学实验指导3

新医学遗传学实验指导3

实验室规则医学遗传学是高等医学院校本科生的重要生物医学课程,医学遗传学实验是现代医学研究的基础之一,它正在渗透到基础医学和临床医学的各个领域之中。

医学科学的发展与实验技术的不断提高和创新密不可分,现代医学的发展要求医学生具有扎实的生物学基础和基本的实验操作能力。

为此,在医学遗传学实验中,同学们应该掌握基本操作技能,勤于动手,培养自己认识问题和解决问题的能力。

为了保证实验课的学习效果,特制订以下规则,请同学们共同遵守。

1. 不迟到、不早退。

一定要穿白大衣准时进入实验室,上课期间保持安静,不做与实验无关的事情。

2. 课前认真预习,了解实验目的、原理和方法,准备好实验用品(实验指导、绘图本、绘图笔、尺子、橡皮等)。

3. 实验时认真操作,仔细观察,做好实验记录,认真书写作业与思考,按时完成作业。

4. 操作时注意安全,不要擅自离开。

爱护各种仪器、设备、标本,如有损坏应及时向老师报告,主动登记,必要时按价赔偿。

5. 保持实验室整洁,实验完毕,主动清理好实验用品,放回原处。

6. 显微镜使用完毕后认真填写使用登记卡。

7. 值日生要清理实验用具,打扫卫生,并关好门、窗、水、电。

实验一人类的皮纹分析一实验原理皮纹学是一门起源于西方的应用科学,目前广泛应用于人类学、遗传学、法医学以及作为临床某些疾病的辅助诊断。

皮纹学(Dermatoglyphics)系指手指、手掌、脚掌等处皮纹的呈现形态。

皮纹包括指纹、掌纹和足纹。

人类的皮肤由表皮和真皮构成。

真皮乳头向表皮突起,形成许多排列整齐、平行的乳头线,此线称为嵴纹,嵴纹上有许多汗腺的开口。

突起的嵴纹相互又形成凹陷的沟。

这些凹凸的纹理就构成了人体的指(趾)纹和掌纹。

人体的皮纹既有个体的特异性,又有高度的稳定性。

手指末端腹面的皮纹称为指纹。

指纹是在三个月的胎儿时期形成的,形成后终生不变。

根据纹理的走向和三叉点的数目,可将指纹分为三种基本类型:弓形纹、箕形纹和斗形纹。

弓形纹(Arch,A):特点是嵴线由一侧至另一侧,呈弓形,无中心点和三叉点。

遗传学实验指导

遗传学实验指导

《遗传学》实验学习指导《遗传学》是生命科学中的中心学科。

同时也是一门实践性很强的学科。

它是指导育种工作的理论基础,在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。

对于现代从事生命科学的人,学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。

一实验要求:(一)实验前:预习实验内容,了解实验原理、实验目的,逐点分析实验操作过程,对每一个细节进行深刻的理解,不仅要知道实验该如何操作,而且要知道实验为什么要这样做,弄清实验操作过程中需要注意的细节,做到心中有数,以提高实验成功的可能性。

(二)实验操作过程中:一丝不苟,认真操作每一个环节,对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。

(三)实验后:对实验结果和数据进行及时总结整理。

结合所学的理论对实验结果进行分析,写出实验报告。

对成功的实验可以提出改进的方法或建议。

对于不成功的实验要分析失败的原因。

(四)强调动手能力的培养:在实验分组上,多数实验是以1人为组,单独操作。

对学生实验成绩的评定上,包括实验操作。

二实验教材及学时(一)实验教材:以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主,根据理论课所学内容,也采用了其它教材的个别实验。

如:《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。

(二)实验总学时:30三实验内容及注意事项:(一)实验内容:见下表:(二)实验目的意义及注意事项1 植物有丝分裂的观察目的:观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程,识别有丝分裂各个时期特点,加深对有丝分裂遗传学意义的理解。

掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。

注意事项:(1)根尖解离时间适合;(2)取材部位一定要准确,只有分生区的细胞才有分裂相(部位准);(3)取材料要少,有利于着色和细胞分散。

2 染色体的核型分析目的:学习植物染色体核型分析的过程,掌握植物染色体组型分析的方法。

注意事项:(1)核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞,因此,要求根尖的预处理要好,保证有较多的中期分裂相;(2)根尖的预处理应根据不同的药物,注意预处理药物的浓度、温度和时间;(3)制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动;(4)测量数据尽可能接近染色体的实际长度;3 减数分裂装片的制片与观察目的:(1)观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解;(2)掌握观察植物减数分裂的制片技术。

遗传学实验20种技术

遗传学实验20种技术

一、DNA提取1、实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。

在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠、十六烷基三甲基溴化铵(简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(简称SDS)等离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚,从而使DNA得以游离出来。

再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。

上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液。

二、RNA提取1、实验原理Trizol试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解蛋白质和其它成分,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,同时能保持RNA的完整性。

在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA2、操作步骤1、取植物嫩叶,液氮研磨,每1.5ml tube分装0.1克样品;2.每管加入0.5ml Trizol液,迅速混匀,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。

3、室温下静置5~10分钟以利于核酸蛋白质复合体的解离4、加入O.5mI的氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒,室温静置5分钟5、10000r/min离心10分钟6、取上清液(水相)转入一新的离心管,加入等体积异丙醇,室温放置10分钟,10000r/min离心10分钟。

7、弃去上清液,加入至少1ml的70乙醇,涡旋混匀,4℃下7500r/min离心5分钟。

8、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5—10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度。

然后将RNA溶于TE或DEPC处理过的水中,必要时可55℃—60℃水溶10分钟。

微遗传学实验指导-2012新

微遗传学实验指导-2012新

微生物遗传学实验指导大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变筛选和鉴定1. 实验原理在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,使基因发生突变,丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,因而它们不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长。

这样从野生型经诱变筛选得到的菌株,称为营养缺陷型。

筛选营养缺陷型菌株必须经过以下几个步骤:诱变处理、淘汰野生型、检出缺陷型、鉴定缺陷型。

由于本实验是以大肠杆菌为材料,所以根据细菌的特性分别说明筛选的步骤。

诱变剂的作用主要是提高突变频率,它分为物理和化学的二类。

物理诱变剂常用的有X射线、紫外线、快中子、γ射线等。

诱变处理首先是选择诱变剂,微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。

用诱变剂处理微生物,一般要求呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液,分布均匀,这样可以避免出现不纯的菌落。

用于诱变处理的微生物一般处于对数生长期,处于该期的细菌对诱变剂最敏感。

必须选择合适的剂量进行诱变处理,剂量的表示有二种,绝对剂量和相对剂量。

绝对剂量的单位以尔格/cm2表示,一般用相对剂量。

相对剂量与3个因素有关:诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)的功率、处理的时间。

前2个因素是固定的,所以通过处理时间控制诱变剂量。

处理不同微生物的最适剂量是不同的,须经预备实验确定。

经处理以后的细菌,缺陷型还是相当少的,必须设法淘汰野生型细胞,提高营养缺陷型细胞所占比例,以达到浓缩缺陷型的目的。

细菌中常用的浓缩法是青霉素法。

青霉素只杀死生长的细胞,对不生长的细胞没有致死作用。

所以在含有青霉素的基本培养基中野生型能够生长而被杀死,缺陷型不能生长被保存得以浓缩。

检出缺陷型的方法有逐个测定法、夹层培养法、限量补给法、影印培养法。

这里主要以逐个测定法为例进行说明。

把经过浓缩的缺陷型菌液接种在完全培养基上,待长出菌落后将每一菌落分别接种在基本培养基和完全培养基上。

凡是在基本培养基上不能生长而在完全培养基上能长的菌落就是营养缺陷型。

遗传学实验操作指导

遗传学实验操作指导

遗传学实验操作指导天津科技大学遗传学课程组2006.12目录遗传学实验教学大纲(修订稿) (1)实验一:摇蚊唾腺染色体观察 (4)实验二:小鼠骨髓细胞染色体标本制作 (6)实验三:人类染色体组型分析 (8)实验四:植物细胞有丝分裂观察及多倍体的诱发与鉴定 (10)附 录 (13)1.实验规则 (13)2.显微镜的使用方法 (14)3.显微镜的维护与保养 (15)4.实验报告的写作 (16)遗传学实验教学大纲一、制定本大纲的依据根据2006级生物技术专业培养计划和遗传学课程教学大纲制定本实验教学大纲。

二、本实验课程的具体安排实验项目的设置及学时分配序号 实验项目名称 内容简介(50字左右)实验学时实验要求实验类型实验类别每组人数1 摇蚊唾腺染色体的观察学习分离摇蚊幼虫唾腺的技术及其染色体的制片方法。

观察摇蚊唾腺染色体的结构特点。

3 必修综合基础 32 小鼠骨髓细胞染色体标本制作掌握小鼠骨髓细胞染色体标本的制作方法。

6 必修综合基础 33 人的染色体组型分析了解人类染色体形态大小和分类,掌握染色体核型分析的基本方法。

3 必修综合基础 34 植物细胞有丝分裂观察及多倍体的诱发与鉴定学习对植物组织、细胞的固定、解离、压片方法。

观察有丝分裂各时期的动态变化。

应用秋水仙素溶液诱发植物多倍体及掌握对多倍体的细胞学鉴定方法。

6 必修综合基础 3三、本实验课在该课程体系中的地位与作用遗传学实验是遗传学课程的重要组成部分,属于学科基础实验范畴。

作为与相关教学内容配合的实践性教学环节,应在遗传学理论课教学过程中开设。

学生应具有普通生物学、生物化学的基础知识。

四、学生应达到的实验能力与标准有丝分裂和染色体形态观察是遗传学研究的基础,学生通过实验应能够观察描述生物体有丝分裂行为和染色体核型分析的基本方法。

通过自行选择实验材料,自行设计实验,锻炼学生独立自主的科研能力。

五、讲授实验的基本理论与实验技术知识实验一摇蚊唾腺染色体观察1. 实验的基本内容学习剖取摇蚊唾腺及制片方法,识别多线染色体上的斑带。

遗传学实验

遗传学实验

遗传学实验引言遗传学是研究遗传原理和规律的科学,通过实验可以帮助我们更好地理解和应用遗传学的知识。

本文将介绍几个常见的遗传学实验,并详细讨论实验的步骤和结果。

实验一:显性遗传实验实验目的通过观察后代表现形状确定亲代基因表达方式。

实验步骤1.选取一对昆虫作为实验对象,确保它们具有不同的表现形状。

例如,可以选择黑色翅膀的昆虫A和白色翅膀的昆虫B。

2.让昆虫A和昆虫B进行交配。

3.观察并记录交配后代的表现形状。

实验结果根据观察结果,如果后代中出现了黑色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫A的显性基因;如果后代全是白色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫B的隐性基因。

实验二:基因突变实验实验目的检测和观察基因突变对个体表现的影响。

实验步骤1.选择一种含有某个基因的生物作为实验对象。

2.通过诱变剂处理生物体,诱发基因突变。

3.观察和记录突变个体与正常个体的差异。

实验结果根据观察结果,突变个体与正常个体在某些性状上会有明显的差异。

这些差异可以帮助我们了解基因的功能和作用。

实验三:基因型分析实验实验目的通过遗传标记和DNA分析来判断个体的基因型。

实验步骤1.提取个体的DNA样本。

2.选择适当的遗传标记进行PCR扩增。

3.将扩增产物进行电泳分析,观察带型。

4.与已知基因型的样本进行比对,判断个体的基因型。

实验结果通过电泳分析,我们可以得到个体的基因型。

这对于遗传研究和疾病诊断非常重要。

实验四:基因转导实验实验目的通过将外源基因导入细胞中,研究基因的功能和调控机制。

实验步骤1.选择目标细胞,如细菌或植物细胞。

2.构建外源基因的载体。

3.将载体导入目标细胞。

4.观察和记录导入细胞中外源基因的表达情况。

实验结果通过观察外源基因在目标细胞中的表达情况,我们可以了解基因的调控机制,并进一步应用于基因工程和农业生产。

结论遗传学实验是研究遗传学的重要手段,通过实验可以帮助我们更好地理解遗传原理和基因的功能。

本文介绍了显性遗传实验、基因突变实验、基因型分析实验和基因转导实验的步骤和结果。

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遗传学实验指导实验须知一、实验课的目的1.培养锻炼科学的思维方法,实事求是的科学态度和严格的科学作风,提高分析问题解决问题的能力。

2.通过实验加深对理论知识的理解,学习掌握基本的实验技术和实验技能,为今后学习和研究打下一定的基础。

3.培养学生爱好公物,爱护集体,团结互助的优良道德品质。

二、实验课要求1.课前必须预习,了解基本原理和主要步骤及意义,写出预习报告。

2.上课必须穿白大褂,带实验讲义和实验报告纸。

3.遵守实验室制度,注意安全(水、电、暖、强酸、强碱、有毒物质等)。

4.实验中要正规操作,动手动脑主动进行实验;掌握关键,力求得出准确结果;仔细观察,认真思考,及时做好记录;综合分析得出正确的结果。

5.在实验过程中不诉大声喧哗,有问题及时请教老师或同学。

6.器材、药品等按规定使用,严禁乱用乱放。

7.爱护仪器,在实验过程中因个人未能安实验要求操作而导致的器材损坏,按规章制度进行赔偿。

8.实验结束后,相关器材要彻底清洗干净,放到指定原位。

9.废弃物按要求分类收集、处理。

10.值日生要打扫干净实验台、地面,并负责关好门窗、检查水、电等。

11.因故不能上实验者应有请假手续。

实验1 植物染色体压片技术一、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

二、实验目的学习植物材料的固定方法和常规压片技术;观察染色体的动态变化。

三、实验材料洋葱(Aillum cepa)根尖四、实验器具和药品1.用具:染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。

2.药品:无水酒精,70%酒精,冰醋酸,对二氯苯或秋水仙素,醋酸钠,碱性品红,石炭酸,甲醛,山梨醇,二甲苯。

a卡诺固定液的配制:用3份无水酒精,加入1份冰醋酸(现配现用)。

b染色液的配制:配方Ⅰ.石炭酸品红(Carbol.fuchsin),先配母液A和B。

母液A:称取3g碱性品红,溶解于100mL的70%酒精中(此液可长期保存)。

母液B:取母液A 10mL,加入90mL的5%石炭酸水溶液(2周内使用)。

石炭酸品红染色液:取母液B 45mL,加入6mL冰醋酸和6mL 37%的甲醛。

此染色液含有较多的甲醛,在植物原生质体培养过程中,观察核分裂比较适宜,后来在此基础上,加以改良的配方Ⅱ,称改良石炭酸品红,可以普遍应用于植物染色体的压片技术。

配方Ⅱ:改良石炭酸品红。

取配方Ⅰ石炭酸品红染色液2-10ml,加入90-98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇(sorbitol)。

此染色液初配好时颜色较浅,放置二周后,染色能力显著增强,在室温下不产生沉淀而较稳定。

1N Hcl :浓HCl82.5ml→1000ml五、实验说明1.有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织,根尖取材容易,操作和鉴定方便。

根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料;2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。

3.预处理是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期。

预处理的方法有低温预处理和药物预处理。

(1)低温预处理将材料浸在蒸馏水中,放在1-4℃冰箱内离体处理24h。

此法效果很好,对染色体无破坏作用,染色体缩短均匀,简便易行,各种作物都适用。

(2)药物预处理:①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h,对抑制纺锤体活动效果明显,易获得较多的中期分裂相,且染色体收缩较直,有利于染色体结构的研究。

②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h,对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好,但对染色体小而多的植物来说不利于染色体的计数。

③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h,可以引起细胞粘度的改变,导致纺锤体活动受阻,使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。

缢痕区也较为清晰。

一般认为对中等或长染色体的植物较合适。

④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件下,根尖不离体处理5h,可获得大量的分裂相,是最值得首选的预处理方法。

4.固定是将新鲜的活组织从生物体取下后,立即投入固定剂中,借助化学药品的作用,使细胞保持原有形态、结构的一种手段。

其目的是:(1)迅速防止细胞死亡后的变化,防止自溶、腐败,尽量保持生长状态结构;(2)使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态;(3)使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定;(4)使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色;(5)防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。

常用的固定液有:酒精、甲醛水溶液、冰醋酸(0.3-0.5 )、AF液(90ml乙醇+10ml甲醛用于固定大块组织)、卡诺氏固定液(冰醋酸:氯仿:无水乙醇=1:3:6)、改良卡诺氏固定液(冰醋酸:无水乙醇=1:3)等。

固定液用量:组织块体积的20倍。

5.解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解,细胞壁软化或部分分解,使细胞和染色体容易分散压平,解离方法有酸解法和酶解法。

(1)酸解法是用盐酸水解根尖,步骤简便、容易掌握,广泛应用于染色体计数、核型分析和染色体畸变的观察。

根尖分生组织细胞的染色体还包在细胞壁中间。

(2)酶解法常用于染色体显带技术或姊妹染色单体交换等项研究,通过解离和压片,使分生细胞的原生质体,能够从细胞壁里压出,再经过精心的压片,使染色体周围不带有细胞质或仅有小量细胞质,致使多项制片措施直接作用于染色体。

6.压片时必需掌握以下几点:⑴压片材料要少,避免细胞紧贴在一起,致使细胞和染色体没有伸展的余地。

⑵用铅笔的橡皮头或小镊子的柄端轻敲盖玻片,使材料均匀分散,然后压片。

压片时用力要适当,不要移动盖玻片。

7.染色的原理是染料通过毛细作用或渗透作用进入组织内部;组织吸附染料;染料进入细胞,由于吸收作用而留在细胞内部。

染料分为碱性染料(苏木精、卡红、醋酸洋红、碱性品红等)和酸性染料(伊红Y、刚果红、苦味酸、酸性品红)两种,碱性染料染细胞核;酸性染料染细胞质。

六、实验步骤流程:固定好的根尖→水洗2-3次→1N HCl7-8min→水洗2-3次→取材(1/2分生区)→切碎→染色6-7min→加盖玻片→轻敲→压片→观察。

1.材料准备将洋葱放在加满水的广口瓶上,使其根茎部接触水面,然后转移到25-28℃的条件下培养。

待根尖长到2cm左右使,在上午9-10点剪取根尖备用。

2.预处理用0.1%或0.02%秋水仙素溶液中,浸泡处理3-4小时。

3.固定经过前处理的根尖放到卡诺固定液中,固定24小时。

转入70%酒精中,在4℃冰箱中保存待用,保存时间最好不超过二个月。

4.解离酸解:从固定液中取出洋葱根尖,用蒸馏水漂洗,放入1N HCl或酸解液(浓盐酸:95%乙醇=1:1)中,在60℃水浴中,解离8-10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在上,加上培养皿中。

5.压片把根尖放在清洁的载玻片上,用解剖针把根冠及延长区部分剪去,加少量染色液(几滴),染色10-20分钟,盖上盖玻片。

用镊子尖轻轻的敲打盖玻片,分生组织细胞就可铺展成薄薄的一层,再用毛边纸把多余的染色液吸干。

6.显微镜观察低倍镜下找到分生区细胞,其特点为等直径细胞。

细胞质浓厚,细胞核较大,占细胞体积的3/4。

可以观察到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体。

选取不同分裂时期的典型细胞,换高倍镜观察,注意细胞核染色体及纺锤体的变化动态。

7.封片。

把压好的玻片标本,放在干冰或冰箱结冰器时冻结。

然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开,用电吹风把玻片吹干后,滴上油派胶,加上盖玻片和载玻片封片,或经二甲苯透明后,滴中性树胶,加盖玻片封片,做成永久封片。

七、作业:1.制作具有丝分裂图像的细胞学片子1-2张。

2.经实验观察,洋葱有多少条染色体?3.绘制两种不同的有丝分裂分裂相。

八.讨论1.经实验观察,洋葱有16条染色体。

2.显微镜下观察到的洋葱细胞大多处于细胞分裂间期,原因是细胞分裂周期中间期维持时间较长,所以固定细胞时处于间期的细胞数量最多。

3.由于压片角度不同,处于分裂中期的细胞纺锤丝较难观察,染色体表现为充满整个细胞。

分裂前期细胞染色体呈丝状,非棒状,充满整个细胞。

处于后期及末期的细胞染色体明显分成两部分。

4.显微镜下观察到的某些细胞核中有明显的两种颜色,为染色不均匀造成,而非处于细胞分裂后期。

实验2 果蝇的饲养管理和性状观察一、实验原理果蝇(Drosophila melanogester)双翅目,果蝇属。

具完全变态。

果蝇在20~25℃时,每12天左右可完成一个世代,生活史较短;繁殖能力强,每只受精的雌果蝇可产卵400~500个。

培养果蝇的饲料来源广泛,价格便宜;果蝇常温下就可生长繁育,饲养容易;不同形态的突变型多达400个以上,便于观察分析;且染色体数目较少(2n=8),加之其唾腺染色体巨大,因此是遗传学研究中常用的实验材料。

二、实验目的了解果蝇的生活史,学会饲养果蝇;能够辨别果蝇雌雄性别及常见突变型;掌握实验中的处理方法和技术。

三、实验材料果蝇野生型品系:红眼、直刚毛、长翅、灰体(++、++、++、++)。

果蝇突变型品系:1.白眼、卷刚毛、小形翅(ww、sn3sn3、mm)2.长翅、黑檀体(++、ee)3.残翅、灰体(vgvg、++)4.白眼、灰体(ww、++)四、实验用具药品1.仪器用具:双目解剖镜、恒温箱、高压灭菌锅、天平、放大镜、培养瓶、白瓷板、镊子、纱布、吸水纸、牛皮纸、毛笔、油性笔。

2.原料:玉米粉、酵母粉、蔗糖、琼脂、蒸馏水。

3.药品:乙醚、70%酒精、丙酸五、实验步骤1.果蝇培养基的制备⑴带瓶塞三角瓶灭菌备用⑵玉米培养基配方(1000ml):表1 果蝇培养基配方玉米面红糖琼脂干酵母正丙酸85g 65g 8.5g 7g 5ml⑶⑶水溶琼脂→加红糖→加搅好的玉米面→煮沸→加水到1000ml→冷却→50℃左右加入酵母粉→加入正丙酸(防腐剂)。

2.果蝇操作⑴麻醉取一麻醉瓶,瓶口应与培养瓶大小相仿,取一棉花塞,在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚,将果蝇转入麻醉瓶内,翻转麻醉瓶使其瓶口朝上,迅速将滴有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口,约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。

注意:过度麻醉将导致果蝇死亡。

⑵搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶取新培养瓶一瓶,将棉塞略为松动,放置于右手侧,取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面,将培养瓶置于左手侧,拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端,再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起,以右手两指夹住棉塞外端,再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶瓶底,然后迅速盖上各瓶棉塞。

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