经典遗传学实验(绝对经典)

合集下载

2024年生物实验室记录遗传学实验

2024年生物实验室记录遗传学实验

2024年生物实验室记录遗传学实验2024年,生物学研究领域取得了巨大的进展,特别是在遗传学方面。

为了探索更多生物体的遗传信息,我们在实验室中进行了一系列遗传学实验。

本文将详细记录这些实验的过程、结果以及我们的思考。

实验一:遗传材料提取与纯化为了开展后续实验,我们首先需要从不同生物体中提取和纯化遗传材料。

我们选择了果蝇(Drosophila melanogaster)和小麦(Triticum aestivum)进行实验。

果蝇是经典的模式生物,而小麦是现实世界中重要的农作物。

首先,我们收集了成熟的果蝇和小麦样品,并通过机械切割和研磨将细胞破碎,释放遗传材料。

然后,我们使用盐溶液提取DNA,并通过离心和酒精沉淀将DNA纯化。

实验二:PCR扩增基因片段为了研究特定基因的序列,我们使用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目标基因片段。

我们选择了人类基因组中与乳糖耐受能力相关的基因为例子。

首先,我们设计了引物(引导基因扩增的特定片段),然后将引物与DNA模板和酶反应液混合。

接着,我们使用热循环仪进行PCR反应,重复多个温度循环,使DNA在每个温度阶段进行变性、结合和扩增。

实验三:凝胶电泳分析为了检测PCR扩增的基因片段,并对其进行大小和纯度分析,我们使用凝胶电泳技术。

首先,我们制备了凝胶,将PCR反应产物和DNA标准品加载到凝胶槽中,然后应用电场使DNA朝着阳极迁移。

根据DNA的大小,我们可以观察到不同位置的明亮带状条纹。

实验四:基因测序为了进一步了解基因的序列信息,我们使用基因测序技术。

我们选择了PCR扩增后的基因片段进行测序。

我们将PCR产物送往测序中心,并使用Sanger测序方法进行测序。

通过对测序结果的分析,我们可以获得基因的精确序列信息,从而深入研究遗传信息的变异和作用。

实验五:基因编辑为了研究特定基因的功能,我们使用CRISPR-Cas9基因编辑技术在果蝇中进行了基因敲除实验。

我们选择了果蝇翅膀发育相关基因作为实验对象。

遗传学实验

遗传学实验

遗传学实验
遗传学实验是指为了研究和探索遗传现象,使用科学方法进行的一
系列实验。

以下是一些常见的遗传学实验:
1.豌豆杂交实验:这是著名遗传学家孟德尔进行的实验,通过对豌
豆进行不同特征的杂交,观察后代的表现,推断出了遗传规律。

2.果蝇实验:果蝇是遗传学研究中常用的模式生物,通过对果蝇进
行突变体的观察和杂交实验,可以研究不同基因对个体表现的影响。

3.细菌转化实验:将外源DNA导入细菌细胞,观察其是否被细菌细胞接受和表达。

这个实验可以用于研究基因的功能和调控。

4.人类基因组研究:通过对人类基因组的测序和比较分析,可以发
现与人类疾病相关的基因变异,揭示人类遗传学的规律。

5.CRISPR/Cas9基因编辑技术:这是一种新兴的遗传学实验技术,通过对基因组进行精确编辑,可以研究基因的功能和疾病相关的基
因变异。

这些实验可以帮助科学家深入了解遗传现象,揭示基因的功能和调控机制,对疾病的研究和治疗也具有重要意义。

高中生物遗传经典实验教案

高中生物遗传经典实验教案

高中生物遗传经典实验教案
实验目的:通过观察果蝇的遗传规律,让学生了解基因的传递和表现。

实验材料:果蝇、果蝇布袋、显微镜、放大镜、培养皿、果蝇培养食物、果蝇培养箱等。

实验步骤:
1. 将果蝇放入培养箱中,保持温度恒定、通风良好。

2. 选择具有不同表型特征的果蝇进行交配,如红眼和白眼果蝇。

3. 观察果蝇的后代表型特征,记录下每代果蝇的表型。

4. 根据观察结果,总结果蝇的遗传规律,包括显性和隐性遗传等。

5. 尝试进行不同表型特征的果蝇杂交,观察其后代的表型,进一步加深对遗传规律的理解。

实验讨论:
1. 为什么果蝇具有不同的表型特征?
2. 遗传物质是如何在果蝇中传递和表现的?
3. 在实验中对果蝇的交配有何要求?交配结果出现了什么情况?
4. 遗传规律在人类中是否也存在,有何相似之处?
实验总结:
通过这次实验,我们对果蝇的遗传规律有了一定的了解,也深入了解了基因的传递和表现。

遗传规律是生物学中的重要内容,对我们理解生物学的基本原理和机制有着重要意义。


今后的学习和生活中,我们可以进一步探索和应用遗传规律,加深对生物学的理解和认识。

遗传学实验资料(一)

遗传学实验资料(一)

遗传学实验资料(一)实验一植物的有丝分裂和减数分裂观察一、实验目的1、观察植物细胞有丝分裂过程,识别有丝分裂的不同时期。

2、观察植物细胞减数分裂过程,识别减数分裂的不同时期。

3、学习使用高倍显微镜和生物绘图的方法。

二、实验原理有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。

在有丝分裂过程中,细胞核内染色体能准确地复制,并能有规律地分配到两个子细胞中去,使子细胞遗传组成与母细胞完全一样,从而可以推断生物性状的遗传与染色体的准确复制和均等分配有关,支配生物性状的遗传物质主要存在于细胞核内的染色体上。

高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点、幼叶等部位的分生组织。

减数分裂是形成性细胞前在性母细胞中进行的一种特殊方式的细胞分裂,通过减数分裂,体细胞内的染色体数目将比原来减少一半,如水稻n=12,玉米n=10,在减数分裂过程中,可以详细地观察到染色体的形态、数目、组成和染色体的鉴定和分析,在杂交育种中可以通过观察染色体配对的行为特征,鉴定是否远缘杂种、真假杂种和探求杂交不孕的原因;还可以通过染色体形态特征和染色体行为的变化,观察和分析生物的异常生长发育以至遗传性变异,如植物的雄性不育花粉败育及各种环境因素(物理、化学等)对于染色体的损伤引起的各种畸变等。

三、实验材料植物细胞有丝分裂和减数分裂永久装片。

四、实验步骤1、有丝分裂装片的观察。

2、减数分裂装片的观察。

五、实验报告1、用2B铅笔绘出植物细胞有丝分裂各个时期的示意图。

2、用2B铅笔绘出植物细胞减数分裂各个时期的示意图。

例如:(1)中期Ⅰ;(2)后期Ⅰ;(3)中期Ⅱ;(4)后期Ⅱ;(5)四分孢子实验二人染色体组型分析一、实验目的1、掌握染色体组型分析的各种数据指标。

2、学习染色体组型分析的基本方法。

二、实验原理定义:染色体组型又称核型,是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的体细胞内的整套染色体,按它们相对恒定的特征排列起来的图像。

核型模式图是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来,再按长短、形态等特征排列起来的图像。

人类遗传学的经典实验设计和案例分析

人类遗传学的经典实验设计和案例分析

人类遗传学的经典实验设计和案例分析近年来,人类基因组的解析已经越来越成为了科技行业的热门话题。

与此同时,人类遗传学也逐渐成为了一门引人入胜的科学。

人类遗传学旨在研究遗传基因、基因突变、基因组和表现型之间的关系。

在这篇文章中,我将介绍一些关于人类遗传学的经典实验设计和案例分析。

第一个经典实验设计是孟德尔的豌豆实验。

这个实验设计是在19世纪末期提出的,他的目的是研究遗传因素是如何传递给后代的。

孟德尔在他的实验中选择了豌豆来进行繁殖实验。

他从两个纯合子的豌豆植株中获得了不同的性状,例如花色、花形和种子形状。

然后将它们交叉,研究他们的第一代杂种的性状。

孟德尔的研究表明,遗传物质的不同方式是由遗传因子在每个后代中的不同分配决定的,而且这些遗传因子以稳定的遗传比率进行遗传。

接下来,我们看一下第二个经典实验设计——克雷布斯实验。

这个实验是在20世纪初期提出的,它旨在研究自然选择如何塑造生物的适应性特征。

克雷布斯选择了20只老鼠,将它们放在一个没有外界光线的箱子里。

然后,他安置了一只水瓶,并在水瓶边上安置了一个按钮,这个按钮需要老鼠按下,才能给它们提供水。

在整个实验期间,克雷布斯不会给老鼠提供食物,他旨在研究老鼠如何适应没有食物的条件下生活。

随着时间的推移,一些老鼠学会了按下按钮,并能获取水。

但是,一些老鼠并没有学会如何获取水,它们最终死亡。

这个实验向我们展示了适应性特征是如何形成和演变的。

在遗传领域中,德瓦克实验也是非常经典的研究案例。

德瓦克实验旨在研究基因突变如何影响生物体的特征。

德瓦克使用肺癌细胞来开展这个实验。

他使细胞分裂并将其分为两半,以研究突变后在细胞遗传物质中出现的特定特征。

他最终成功地发现了多个关键的基因突变并证实了基因突变在生物体遗传中起重要作用的假说。

在人类遗传学领域中,托马斯·亨特·摩根(Thomas Hunt Morgan)是一位备受尊敬的遗传学家。

他的研究发现了苍蝇的染色体和遗传组成,这些研究结果不仅揭示了苍蝇序列的细节,也揭示了基因在生物体中起多大的作用。

遗传学实验

遗传学实验

洋葱、大蒜的鳞茎,玉米、蚕豆的种子等。本 实验1 植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
实验1 植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
实验选用大蒜。 实验3 染色体组型分析
压片时应注意的问题有哪些?
实验4 果蝇唾腺染色体的观察
实验用品: 实验5 果蝇的形态观察
☺ 果蝇的自由组合杂交试验 2 画出在显微镜下看到的有丝分裂各时期的图像;
遗传学实验
☺ 植物染色体制片及有丝分裂观察 ☺ 大葱小孢子母细胞的减数分裂观察 ☺ 果蝇的形态观察及杂交试验 ☺ 果蝇的单因子杂交试验 ☺ 果蝇的自由组合杂交试验 ☺ 果蝇的伴性遗传杂交试验 ☺ 果蝇的三点测交试验 ☺ 两对非等位基因的相互作用研究 ☺ 染色体组型分析 ☺ 果蝇的唾腺染色体制片及观察 ☺ 植物原生质体的分离 ☺ 植物多倍体的诱发及鉴定
丝分裂及染色体行为的观察 ☺ 植物原生质体的分离
第三部分 研究性实验
7 压片:盖上盖玻片,在酒精灯上烤片。 ☺ 植物原生质体的分离 2 预处理:将剪取的新鲜材料于0. 实验4 果蝇唾腺染色体的观察 ☺ 植物原生质体的分离 3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理3~24小时。 药品:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。 实验3 染色体组型分析 第三部分 研究性实验
2 预处理:将剪取的新鲜材料于0.1%秋水仙素 溶液中室温下处理3~4小时。
3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理3~24小时。
4 解离:将冲洗后的根尖放入1mol/L的盐酸中, 室温下处理10~15min。
5 软化:将解离好的根尖冲洗后,放入45%醋 酸中软化10min左右。
请注意比较经过预处理和未经预处理的材料有何不同?

生物中学生遗传学实验

生物中学生遗传学实验实验名称:生物中学生遗传学实验实验目的:1. 了解遗传学的基本概念和原理。

2. 掌握实验中常用的遗传学实验方法。

3. 观察和分析生物遗传现象,培养学生的观察能力和科学思维。

实验材料:1. 白色的各自各分布在草地上的菊花2. 不同颜色的带有花纹的花盆(蓝色、绿色、红色)3. 一袋菜籽(或小咖啡豆)4. 塑料袋5. 水壶实验步骤:1. 准备工作:将菊花盆分别标记为A、B、C,分别计算每个菊花盆中的花是哪一种颜色的白色百分比。

2. 实验一:观察菊花颜色的遗传规律。

a) 在A盆中播种纯白色的菊花种子,并记录下来。

b) 在B盆中播种带有花纹的菊花种子,并记录下来。

c) 在C盆中混合播种纯白色和带有花纹的菊花种子,并记录下来。

d) 每天观察菊花苗的颜色,并记录下来。

e) 分析实验结果,讨论白色和花纹的遗传规律。

3. 实验二:观察菜籽颜色的遗传规律。

a) 将一袋菜籽分成两份,分别标记为D和E。

b) 在D袋中放入纯白色的菜籽,E袋中放入黑色的菜籽。

c) 每天观察菜籽的发芽情况,并记录下来。

d) 分析实验结果,讨论白色和黑色菜籽的遗传规律。

4. 实验三:观察植物生长的遗传规律。

a) 将一些菊花种子播种在不同颜色的花盆中(比如蓝色、绿色和红色),并进行记录。

b) 每天观察植物生长情况,并记录下来。

c) 分析实验结果,讨论不同颜色花盆对植物生长的影响。

实验结果与讨论:1. 实验一的结果表明,白色和花纹的遗传规律为(根据实际结果填写)。

2. 实验二的结果表明,白色和黑色菜籽的遗传规律为(根据实际结果填写)。

3. 实验三的结果表明,不同颜色花盆对植物生长的影响为(根据实际结果填写)。

实验总结:通过这次实验,我们深入了解了生物遗传学的基本概念和原理,并通过观察和分析生物遗传现象培养了学生的观察能力和科学思维。

同时,我们也明确了白色和花纹、白色和黑色菜籽、不同颜色花盆对植物生长的遗传规律。

这些实验结果对我们进一步研究生物遗传学和培养科学家的兴趣都具有重要意义。

经典遗传学实验(绝对经典)

3
丝串起放在盛清水的培养皿内培养,其它要求同上。剪取根尖的时间以上午 10 时左右为好。 (2)玉米(或黑麦、小麦、蚕豆)根类:先将种子浸泡一天,待吸水膨胀后再转移到铺有几 层滤纸(或吸水纸)的培养皿内,加水湿润,然后将种子均匀地摆放在滤纸上,盖上盖。放在 18~ 20℃黑暗条件下培养,待根长到 1~2cm 时,选健壮根尖于上午 10 时左右取下备用。 田间从植株上直接取根的方法适用于大部分禾本科植物,例如在麦类作物生长季长出的大量 不定根,比种子萌发的根更健壮,是观察有丝分裂的很好材料。 2.预处理:为了阻止纺锤体的活动,获得更多的中期分裂相,同时使染色体相对缩短,便于 染色体分散和计数,可对根尖进行预处理。如果只是为了观察有丝分裂各期染色体动态,可以不 进行预处理。 预处理的方法有冰冻预处理和药物预处理两种。 (1)冰冻预处理:将根尖浸泡在蒸馏水中,置于 1~4℃冰箱内或盛有冰块的保温瓶中冰冻 24 小时。这种方法对染色体无破坏作用,染色体缩短均匀,效果良好,简便易行,各种作物都适 用。 (2)药物预处理:常用的药物有 0.05~0.2%秋水仙素溶液、饱和对二氯苯溶液、0.002mol/L 8 -羟基喹啉等。预处理时,将根尖直接浸泡在药液中,在适宜的温度下处理一定的时间(表 1) 。 这些药物都能使染色体缩短,但同时对染色体也有一定破坏作用。使用时应注意处理的时间,小 麦、黑麦、大麦、圆葱和大蒜等处理 4 小时左右,棉花和水稻等处理 2 小时左右。处理的时间长 短同温度有很大关系。
二、实验材料和实验用品
1.材料:圆葱、大蒜、黑麦、玉米、小麦和蚕豆。 用品:显微镜、恒温箱、冰箱、水浴锅、分析天平、剪子、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、 滤纸、量筒、培养皿、烧杯、滴瓶、酒精灯、切片盒、标签等。多媒体系统(附显微演示) 。 2.药品:无水乙醇、95%乙醇、冰醋酸、蒸馏水、碱性品红、苏木精、秋水仙素、饱和对二 氯苯溶液、0.002mol/L 8-羟基喹啉、1mol/L 盐酸、4%铁矾水溶液、2%醋酸洋红染色液、2.5%纤 维素酶和 2.5%果胶酶混合液。

遗传学实验报告

遗传学实验报告
实验目的:
本实验旨在探究遗传学基本原理,通过实验观察遗传法则在果蝇身
上的表现,加深对遗传规律的理解。

实验材料:
1. 果蝇(分为红眼果蝇和白眼果蝇)
2. 实验器材:显微镜、显微镜玻片、显微镜盖片、透明胶带、移液
管等
实验步骤:
1. 将红眼果蝇和白眼果蝇分别放入不同的培养皿中,保证他们单独
繁殖
2. 观察果蝇后代的眼睛颜色,记录不同组合的后代眼睛颜色比例
3. 利用显微镜观察果蝇的染色体,了解不同基因的排列情况
4. 根据实验结果,总结遗传规律在果蝇身上的表现,比如显性基因、隐性基因、基因的组合等
实验结果:
通过实验观察,发现红眼果蝇与白眼果蝇杂交后代的眼睛颜色呈现
规律性分布,符合孟德尔遗传学原理。

红眼果蝇为显性红色基因(R)
与白眼果蝇为隐性白色基因(r)的杂交后代中,显性红色基因占三分之一,隐性白色基因占三分之二。

结论:
通过本次实验,我们进一步了解了遗传学的基本原理,即基因对特定性状的遗传规律。

不同基因间呈现显性与隐性的关系,基因的组合会影响后代特征的表现。

在遗传学研究中,对不同基因的遗传规律的研究是十分重要的,可以帮助我们更好地理解生物的遗传变异和进化规律。

综上所述,本实验为我们提供了一个直观且有趣的观察遗传规律的机会,通过不断实验与总结,我们能够更深入地探究遗传学领域的奥秘。

遗传学的研究对于生物多样性与进化研究有着重要的意义,希望在未来的研究中能够发现更多有关遗传的新知识。

遗传学实验

遗传学实验引言遗传学是研究遗传原理和规律的科学,通过实验可以帮助我们更好地理解和应用遗传学的知识。

本文将介绍几个常见的遗传学实验,并详细讨论实验的步骤和结果。

实验一:显性遗传实验实验目的通过观察后代表现形状确定亲代基因表达方式。

实验步骤1.选取一对昆虫作为实验对象,确保它们具有不同的表现形状。

例如,可以选择黑色翅膀的昆虫A和白色翅膀的昆虫B。

2.让昆虫A和昆虫B进行交配。

3.观察并记录交配后代的表现形状。

实验结果根据观察结果,如果后代中出现了黑色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫A的显性基因;如果后代全是白色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫B的隐性基因。

实验二:基因突变实验实验目的检测和观察基因突变对个体表现的影响。

实验步骤1.选择一种含有某个基因的生物作为实验对象。

2.通过诱变剂处理生物体,诱发基因突变。

3.观察和记录突变个体与正常个体的差异。

实验结果根据观察结果,突变个体与正常个体在某些性状上会有明显的差异。

这些差异可以帮助我们了解基因的功能和作用。

实验三:基因型分析实验实验目的通过遗传标记和DNA分析来判断个体的基因型。

实验步骤1.提取个体的DNA样本。

2.选择适当的遗传标记进行PCR扩增。

3.将扩增产物进行电泳分析,观察带型。

4.与已知基因型的样本进行比对,判断个体的基因型。

实验结果通过电泳分析,我们可以得到个体的基因型。

这对于遗传研究和疾病诊断非常重要。

实验四:基因转导实验实验目的通过将外源基因导入细胞中,研究基因的功能和调控机制。

实验步骤1.选择目标细胞,如细菌或植物细胞。

2.构建外源基因的载体。

3.将载体导入目标细胞。

4.观察和记录导入细胞中外源基因的表达情况。

实验结果通过观察外源基因在目标细胞中的表达情况,我们可以了解基因的调控机制,并进一步应用于基因工程和农业生产。

结论遗传学实验是研究遗传学的重要手段,通过实验可以帮助我们更好地理解遗传原理和基因的功能。

本文介绍了显性遗传实验、基因突变实验、基因型分析实验和基因转导实验的步骤和结果。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
[附]冷冻分片法:这种方法快速简单。对准备制作永久片的玻片,先用液态二氧化碳干冰冷冻, 或用冰冻致冷器进行冷冻,待完全冷冻结冰后,用刀片将盖玻片同载玻片分开,将载玻片和盖玻 片放在 37℃左右的温箱内烘干。取出后放在二甲苯内浸泡 10~20 分钟,滴加树胶封片即可。
四、作业和思考题
1.写出制片步骤流程图。 2.制作两张质量较好的临时片(有条件可制作永久片),并绘制减数分裂粗线期、终变期、 中 I、后 I、中 II、后 II 的图像。
二、实验材料和实验用品
1.实验材料 玉米雄花序 2.实用品 显微镜、解剖针、载玻片、盖玻片、镊子、培养皿、酒精灯、吸水纸、纱布、刀片、滤纸、 火柴、等。 3.实验药品 无水乙醇、95%乙醇、重铬酸钾、浓盐酸、浓硫酸、冰醋酸、二甲苯、加拿大树胶和洋红(或 苏木精)。
三、实验方法与步骤
1.取材:选取适当大小的花蕾,是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时 期不同。
(3)封片:片子从最后一级培养皿内取出后稍凉,于载玻片上原来加盖玻片的位置中间滴一 滴完整的加拿大树胶,然后翻转盖玻片(使有材料的一面朝下),按原来的方向和位置轻轻盖在树 胶上。要使盖玻片随着胶的扩展自然下沉,不要施加压力或移动盖玻片。然后平放在阴凉处晾干 再镜检。对于镜检符合要求的片子,在载玻片右端贴上标签,注明标本名称,制片日期。
实验一 植物花粉母细胞减数分裂制片和染色体观察
一、实验原理
减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次 的细胞分裂,第一次分裂是减数的,第二次是等数的。第一次分裂的前期较长,染色体变化较复 杂,可细分为 5 个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。染色体在减数分裂的行 为对遗传物质的分配和重组产生重大影响。
(2)脱水透明:用一端劈开的去磷头火柴棒夹住盖玻片(方向不变,材料朝上),放入第二 级培养皿中。而载玻片要翻转使有材料的一面朝上。然后依次逐级脱水,一般每级约 1~2 分钟。 如用第三种脱水剂每级约 20~30 秒钟。为了防止在脱水过程中细胞从片上脱落,在制片时可先在 盖玻片上涂一层蛋白甘油胶,在酒精灯上烘烤至冒出轻烟后,稍凉片刻盖在有材料的载玻片上。
高等植物在形成雄配子的过程中,花药内的小孢子母细胞(2n),经过减数分裂最终产生四个 小孢子。每个小孢子内的染色体数目已减半为 n。以后每个小孢子进一步发育为花粉粒。由于植物 花药取材容易,操作方便,一般作为减数分裂制片材料。在适宜的时期采集植物的花蕾,经固定 液杀死固定,使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理,制成减数分裂玻片标本,在显 微镜下进行观察,可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程(即染色体由双倍变为单倍体的过程), 研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。
遗传学实验指导
山东农业大学遗传学教研室 二零一六年
目录
实验一 植物花粉母细胞减数分裂制片和染色体观察 实验二 植物根尖压片技术 实验三 染色体组型分析 实验四 基因的分离、独立分配和互作,连锁基因的遗传分析 实验五 果蝇的形态鉴别和饲养管理 实验六 植物 DNA 的提取与定量分析 实验七 植物的 SSR 分析(待修改) 实验八 遗传连锁图谱构建和 QTL 分析(待修改)
2
实验二 植物根尖压片技术
一、实验原理
1
并立即滴醋酸洋红或醋酸铁矾苏木精染色液于花药上。用解剖针将花药横向切断,并从一端向切 口轻轻挤压花药,使花粉母细胞从切口处逸出。然后用镊子除尽花药壁等杂物。这是压片优劣的 关键步骤之一,如不去净残渣,则不容易把分裂的细胞压平,使染色体不容易分散开,并且在制 作永久片的过程中,细胞会从载玻片上大量脱落。去净残渣后,在低倍镜下进行初步镜检,如果 花粉母细胞处于减数分裂时期,即可加上盖玻片。加盖玻片时,先使盖玻片的一边放在载玻片上, 待染液布满整个边缘时,左手握镊子顶住盖玻片,右手握解剖针托住盖玻片轻轻放下。加上盖玻 片以后,如有多余染色液,可用吸水纸吸去;如染色液不能布满盖玻片,则在盖玻片一边稍加染 色液,然后在酒精灯上烤片。烤片时,用手平持片子在酒精灯上方来回移动,并经常将片子放在 手背上试温,以片子不烫手为宜,可反复进行多次。烤片是制片过程中的一项很重要的步骤。通 过烤片可使细胞质颜色变浅,而染色体能得到充分鲜明的着色。烤片以后可在盖玻片上加一小块 吸水纸,以拇指或用带橡皮头的铅笔轻压盖片。应注意不要使盖片移动。如果镜检发现染色体染 色太浅,可在盖玻片周围稍加染色液再烤;如果染色太深,可从盖玻片一边滴加 45%冰醋酸,在 另一边用吸水纸吸,让冰醋酸从盖玻片下流过直至细胞质颜色较浅而染色体着色明显清析为止。
4.制作永久片:要使片子能长期保存应用,可制成永久片。永久片的制作主要包括分片、脱 水透时和封片三个步骤。首先用培养皿(内置 U 型玻璃管或一根短玻棒)若干套编号,配制多级 脱水剂(常用脱水剂见附录二)。
(1)分片:准备制成永久片,首先使其翻转让盖玻片朝下浸入第一级培养皿内分片。让载玻 片的一端搭在短玻棒上,另一端和皿底接触,使盖玻片自然脱落,并标记载玻片和盖玻片原来相 对应的方向和位置。
玉米:在抽雄前两周左右(大喇叭口期),用手指从喇叭口处向下挤捏叶鞘,触到有松软感处, 即是雄花序所在部位。在该处用刀片纵向划一切口,用镊子取出花序分枝。此时雄花序先端小穗 颖长 4mm 左右,花药长 2~3mm,每一分枝中上部小穗发育最早。
取材时间一般在上午 9 时~10 时,不同材料间稍有差异。 2.固定:取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。在 4~15℃条件下,一般固定时间为 24 小时。固定后的材料先用 95%酒精漂洗至无醋酸气味,再移到 70%酒精中置于冰箱内保存。常用 的固定液是法氏固定液,在使用这种固定液时应注意现配现用,固定时不要在阳光下暴晒。 3.染色和压片:先将已固定的材料置于培养皿内并倒入少许保存液。用镊子摘取一个适当大 小的小穗或花蕾放在吸水纸上吸掉多余的酒精,然后放在载玻片中央。用解剖针挑出 2~3 个花药,
相关文档
最新文档