遗传学实验指导

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遗传学实验教学大纲

遗传学实验教学大纲

遗传学实验教学大纲一、实验目的本实验旨在通过实际操作,让学生掌握遗传学基本实验技能,深入了解遗传学的基本原理和方法,并培养学生的观察力、分析能力和解决问题的能力。

二、实验内容及步骤1. 实验前准备:- 确定实验室所需材料和设备,并检查其完好度。

- 将实验材料分类整理,确保有序,方便学生使用。

- 确定实验操作规范和安全注意事项,向学生作出详细讲解。

2. 实验一:显微镜观察染色体- 学生按照实验指导书的步骤,取得待观察的样本。

- 学生准备好显微镜和玻璃载玻片,将样本制作成干片,并放置于显微镜下观察。

- 学生观察各种细胞类型的染色体形态和数量,并记录相关数据。

3. 实验二:交配试验- 学生按照实验指导书的步骤,选择不同性状的实验材料,进行交配实验。

- 学生观察和记录各代子代的表型,并根据观察结果进行分析和推理。

4. 实验三:基因型检测- 学生准备好实验所需的基因型检测试剂和仪器。

- 学生将待测标本提取DNA,并根据实验步骤进行基因型检测。

- 学生记录检测结果,并进行数据分析和统计。

5. 实验四:变异诱发- 学生按照实验指导书的步骤,选择适当的变异诱发方法。

- 学生诱发变异,并观察和记录变异结果和表型。

- 学生根据观察结果进行数据分析和推理,探讨变异的原因和机制。

6. 实验后总结:- 学生针对每个实验进行总结和思考,分析实验结果和现象的原因,并与相关理论知识相对照。

- 学生撰写实验报告,包括实验目的、实验方法、实验结果和分析等内容。

三、实验要求1. 学生要严格遵守实验室规则和安全操作规范,确保实验过程安全。

2. 学生要准备充足,并提前预习实验内容,了解实验原理和相关背景知识。

3. 学生要认真观察实验现象,并及时记录相关数据和结果,保持实验结果的准确性。

4. 学生要积极参与实验讨论,与同学合作完成实验和分析,共同探讨问题和解决方案。

四、实验评估1. 实验报告:学生根据实验内容和观察结果撰写实验报告,包括实验目的、方法、结果及讨论等,并逻辑清晰、表达准确。

医学遗传学实验指导

医学遗传学实验指导

实验守则一、一般要求1、预习:学生在实验课前应认真预习本实验指导以及教材有关章节,必须对该次实验的目的要求、实验内容、基本原理和操作方法有一定的了解。

2、讲解:教师只对该实验内容的安排及注意事项进行讲解,让学生有充分的时间按实验指导的顺序进行独立的操作和观察。

3、独立操作与观察:实验一般都由学生独立进行,在实验中要按操作程序反复练习,以达到一定的熟练程度。

4、示教:有些实验备有示教。

其目的是帮助学生对某些较难的操作过程和观察材料给予演示,学生建立初步认识后,再独立操作,仔细观察。

5、作业:实验报告必须根据各人的观察,以实事求是和一丝不苟的精神忠实地记录、分析、综合。

不得抄袭教材或其他同学的报告。

实验报告一般应于实验结束时呈交。

它的形式可因实验内容而不同。

6、总结:实验结束后,一般由教师说明该次实验的主要收获及今后应注意的事项。

二、实验室规则和注意事项1、学生上实验课时必须携带教材、实验指导、实验报告纸和文具,进入实验室要求穿好工作服,按规定座位入座。

2、实验开始前要检查所用仪器、材料、实验用品是否完好齐全。

如有缺损及时向带课教师报告,自己不得随意调换仪器和实验用品。

3、实验时要遵守纪律,听从教师指导,保持肃静。

有问题时举手提问,严禁彼此谈笑喧哗或随意走动,也不得进行和实验无关的其他活动。

4、实验时要遵守实验操作规程,严格按照教师的安排和实验指导的要求进行。

操作要正规,观察要认真仔细,边做边看、边想,及时完成实验报告。

5、要爱护仪器、标本和器材设备,注意节约实验材料、试剂和水电。

如损坏了仪器或器材应主动报告,说明情况。

6、实验结束后,应自觉清理实验台面,认真清理好仪器、试剂及其他用品,放回原处。

值日生要负责清扫地面,收拾实验用品,处理垃圾,关好水电、门窗后再离开实验室。

7、实验课不得迟到、早退或无故缺课。

实验一正常人类染色体核型观察及分析一、实验目的1、熟悉人类染色体的数目及形态特征。

2、掌握非显带染色体的核型分析方法。

新医学遗传学实验指导3

新医学遗传学实验指导3

实验室规则医学遗传学是高等医学院校本科生的重要生物医学课程,医学遗传学实验是现代医学研究的基础之一,它正在渗透到基础医学和临床医学的各个领域之中。

医学科学的发展与实验技术的不断提高和创新密不可分,现代医学的发展要求医学生具有扎实的生物学基础和基本的实验操作能力。

为此,在医学遗传学实验中,同学们应该掌握基本操作技能,勤于动手,培养自己认识问题和解决问题的能力。

为了保证实验课的学习效果,特制订以下规则,请同学们共同遵守。

1. 不迟到、不早退。

一定要穿白大衣准时进入实验室,上课期间保持安静,不做与实验无关的事情。

2. 课前认真预习,了解实验目的、原理和方法,准备好实验用品(实验指导、绘图本、绘图笔、尺子、橡皮等)。

3. 实验时认真操作,仔细观察,做好实验记录,认真书写作业与思考,按时完成作业。

4. 操作时注意安全,不要擅自离开。

爱护各种仪器、设备、标本,如有损坏应及时向老师报告,主动登记,必要时按价赔偿。

5. 保持实验室整洁,实验完毕,主动清理好实验用品,放回原处。

6. 显微镜使用完毕后认真填写使用登记卡。

7. 值日生要清理实验用具,打扫卫生,并关好门、窗、水、电。

实验一人类的皮纹分析一实验原理皮纹学是一门起源于西方的应用科学,目前广泛应用于人类学、遗传学、法医学以及作为临床某些疾病的辅助诊断。

皮纹学(Dermatoglyphics)系指手指、手掌、脚掌等处皮纹的呈现形态。

皮纹包括指纹、掌纹和足纹。

人类的皮肤由表皮和真皮构成。

真皮乳头向表皮突起,形成许多排列整齐、平行的乳头线,此线称为嵴纹,嵴纹上有许多汗腺的开口。

突起的嵴纹相互又形成凹陷的沟。

这些凹凸的纹理就构成了人体的指(趾)纹和掌纹。

人体的皮纹既有个体的特异性,又有高度的稳定性。

手指末端腹面的皮纹称为指纹。

指纹是在三个月的胎儿时期形成的,形成后终生不变。

根据纹理的走向和三叉点的数目,可将指纹分为三种基本类型:弓形纹、箕形纹和斗形纹。

弓形纹(Arch,A):特点是嵴线由一侧至另一侧,呈弓形,无中心点和三叉点。

遗传学实验指导

遗传学实验指导

《遗传学》实验学习指导《遗传学》是生命科学中的中心学科。

同时也是一门实践性很强的学科。

它是指导育种工作的理论基础,在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。

对于现代从事生命科学的人,学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。

一实验要求:(一)实验前:预习实验内容,了解实验原理、实验目的,逐点分析实验操作过程,对每一个细节进行深刻的理解,不仅要知道实验该如何操作,而且要知道实验为什么要这样做,弄清实验操作过程中需要注意的细节,做到心中有数,以提高实验成功的可能性。

(二)实验操作过程中:一丝不苟,认真操作每一个环节,对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。

(三)实验后:对实验结果和数据进行及时总结整理。

结合所学的理论对实验结果进行分析,写出实验报告。

对成功的实验可以提出改进的方法或建议。

对于不成功的实验要分析失败的原因。

(四)强调动手能力的培养:在实验分组上,多数实验是以1人为组,单独操作。

对学生实验成绩的评定上,包括实验操作。

二实验教材及学时(一)实验教材:以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主,根据理论课所学内容,也采用了其它教材的个别实验。

如:《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。

(二)实验总学时:30三实验内容及注意事项:(一)实验内容:见下表:(二)实验目的意义及注意事项1 植物有丝分裂的观察目的:观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程,识别有丝分裂各个时期特点,加深对有丝分裂遗传学意义的理解。

掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。

注意事项:(1)根尖解离时间适合;(2)取材部位一定要准确,只有分生区的细胞才有分裂相(部位准);(3)取材料要少,有利于着色和细胞分散。

2 染色体的核型分析目的:学习植物染色体核型分析的过程,掌握植物染色体组型分析的方法。

注意事项:(1)核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞,因此,要求根尖的预处理要好,保证有较多的中期分裂相;(2)根尖的预处理应根据不同的药物,注意预处理药物的浓度、温度和时间;(3)制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动;(4)测量数据尽可能接近染色体的实际长度;3 减数分裂装片的制片与观察目的:(1)观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解;(2)掌握观察植物减数分裂的制片技术。

遗传学实验20种技术

遗传学实验20种技术

一、DNA提取1、实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。

在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠、十六烷基三甲基溴化铵(简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(简称SDS)等离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚,从而使DNA得以游离出来。

再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。

上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液。

二、RNA提取1、实验原理Trizol试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解蛋白质和其它成分,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,同时能保持RNA的完整性。

在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA2、操作步骤1、取植物嫩叶,液氮研磨,每1.5ml tube分装0.1克样品;2.每管加入0.5ml Trizol液,迅速混匀,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。

3、室温下静置5~10分钟以利于核酸蛋白质复合体的解离4、加入O.5mI的氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒,室温静置5分钟5、10000r/min离心10分钟6、取上清液(水相)转入一新的离心管,加入等体积异丙醇,室温放置10分钟,10000r/min离心10分钟。

7、弃去上清液,加入至少1ml的70乙醇,涡旋混匀,4℃下7500r/min离心5分钟。

8、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5—10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度。

然后将RNA溶于TE或DEPC处理过的水中,必要时可55℃—60℃水溶10分钟。

微遗传学实验指导-2012新

微遗传学实验指导-2012新

微生物遗传学实验指导大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变筛选和鉴定1. 实验原理在以微生物为材料的遗传学研究中,用某些物理因素或化学因素处理细菌,使基因发生突变,丧失合成某一物质(如氨基酸、维生素、核苷酸等)的能力,因而它们不能在基本培养基上生长,必须补充某些物质才能生长。

这样从野生型经诱变筛选得到的菌株,称为营养缺陷型。

筛选营养缺陷型菌株必须经过以下几个步骤:诱变处理、淘汰野生型、检出缺陷型、鉴定缺陷型。

由于本实验是以大肠杆菌为材料,所以根据细菌的特性分别说明筛选的步骤。

诱变剂的作用主要是提高突变频率,它分为物理和化学的二类。

物理诱变剂常用的有X射线、紫外线、快中子、γ射线等。

诱变处理首先是选择诱变剂,微生物诱变中最常用的物理诱变剂是紫外线。

用诱变剂处理微生物,一般要求呈单核的单细胞或单孢子的悬浮液,分布均匀,这样可以避免出现不纯的菌落。

用于诱变处理的微生物一般处于对数生长期,处于该期的细菌对诱变剂最敏感。

必须选择合适的剂量进行诱变处理,剂量的表示有二种,绝对剂量和相对剂量。

绝对剂量的单位以尔格/cm2表示,一般用相对剂量。

相对剂量与3个因素有关:诱变源和处理微生物的距离、诱变源(紫外灯)的功率、处理的时间。

前2个因素是固定的,所以通过处理时间控制诱变剂量。

处理不同微生物的最适剂量是不同的,须经预备实验确定。

经处理以后的细菌,缺陷型还是相当少的,必须设法淘汰野生型细胞,提高营养缺陷型细胞所占比例,以达到浓缩缺陷型的目的。

细菌中常用的浓缩法是青霉素法。

青霉素只杀死生长的细胞,对不生长的细胞没有致死作用。

所以在含有青霉素的基本培养基中野生型能够生长而被杀死,缺陷型不能生长被保存得以浓缩。

检出缺陷型的方法有逐个测定法、夹层培养法、限量补给法、影印培养法。

这里主要以逐个测定法为例进行说明。

把经过浓缩的缺陷型菌液接种在完全培养基上,待长出菌落后将每一菌落分别接种在基本培养基和完全培养基上。

凡是在基本培养基上不能生长而在完全培养基上能长的菌落就是营养缺陷型。

遗传学实验操作指导

遗传学实验操作指导

遗传学实验操作指导天津科技大学遗传学课程组2006.12目录遗传学实验教学大纲(修订稿) (1)实验一:摇蚊唾腺染色体观察 (4)实验二:小鼠骨髓细胞染色体标本制作 (6)实验三:人类染色体组型分析 (8)实验四:植物细胞有丝分裂观察及多倍体的诱发与鉴定 (10)附 录 (13)1.实验规则 (13)2.显微镜的使用方法 (14)3.显微镜的维护与保养 (15)4.实验报告的写作 (16)遗传学实验教学大纲一、制定本大纲的依据根据2006级生物技术专业培养计划和遗传学课程教学大纲制定本实验教学大纲。

二、本实验课程的具体安排实验项目的设置及学时分配序号 实验项目名称 内容简介(50字左右)实验学时实验要求实验类型实验类别每组人数1 摇蚊唾腺染色体的观察学习分离摇蚊幼虫唾腺的技术及其染色体的制片方法。

观察摇蚊唾腺染色体的结构特点。

3 必修综合基础 32 小鼠骨髓细胞染色体标本制作掌握小鼠骨髓细胞染色体标本的制作方法。

6 必修综合基础 33 人的染色体组型分析了解人类染色体形态大小和分类,掌握染色体核型分析的基本方法。

3 必修综合基础 34 植物细胞有丝分裂观察及多倍体的诱发与鉴定学习对植物组织、细胞的固定、解离、压片方法。

观察有丝分裂各时期的动态变化。

应用秋水仙素溶液诱发植物多倍体及掌握对多倍体的细胞学鉴定方法。

6 必修综合基础 3三、本实验课在该课程体系中的地位与作用遗传学实验是遗传学课程的重要组成部分,属于学科基础实验范畴。

作为与相关教学内容配合的实践性教学环节,应在遗传学理论课教学过程中开设。

学生应具有普通生物学、生物化学的基础知识。

四、学生应达到的实验能力与标准有丝分裂和染色体形态观察是遗传学研究的基础,学生通过实验应能够观察描述生物体有丝分裂行为和染色体核型分析的基本方法。

通过自行选择实验材料,自行设计实验,锻炼学生独立自主的科研能力。

五、讲授实验的基本理论与实验技术知识实验一摇蚊唾腺染色体观察1. 实验的基本内容学习剖取摇蚊唾腺及制片方法,识别多线染色体上的斑带。

遗传学实验

遗传学实验

遗传学实验引言遗传学是研究遗传原理和规律的科学,通过实验可以帮助我们更好地理解和应用遗传学的知识。

本文将介绍几个常见的遗传学实验,并详细讨论实验的步骤和结果。

实验一:显性遗传实验实验目的通过观察后代表现形状确定亲代基因表达方式。

实验步骤1.选取一对昆虫作为实验对象,确保它们具有不同的表现形状。

例如,可以选择黑色翅膀的昆虫A和白色翅膀的昆虫B。

2.让昆虫A和昆虫B进行交配。

3.观察并记录交配后代的表现形状。

实验结果根据观察结果,如果后代中出现了黑色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫A的显性基因;如果后代全是白色翅膀的昆虫,说明黑色翅膀是昆虫B的隐性基因。

实验二:基因突变实验实验目的检测和观察基因突变对个体表现的影响。

实验步骤1.选择一种含有某个基因的生物作为实验对象。

2.通过诱变剂处理生物体,诱发基因突变。

3.观察和记录突变个体与正常个体的差异。

实验结果根据观察结果,突变个体与正常个体在某些性状上会有明显的差异。

这些差异可以帮助我们了解基因的功能和作用。

实验三:基因型分析实验实验目的通过遗传标记和DNA分析来判断个体的基因型。

实验步骤1.提取个体的DNA样本。

2.选择适当的遗传标记进行PCR扩增。

3.将扩增产物进行电泳分析,观察带型。

4.与已知基因型的样本进行比对,判断个体的基因型。

实验结果通过电泳分析,我们可以得到个体的基因型。

这对于遗传研究和疾病诊断非常重要。

实验四:基因转导实验实验目的通过将外源基因导入细胞中,研究基因的功能和调控机制。

实验步骤1.选择目标细胞,如细菌或植物细胞。

2.构建外源基因的载体。

3.将载体导入目标细胞。

4.观察和记录导入细胞中外源基因的表达情况。

实验结果通过观察外源基因在目标细胞中的表达情况,我们可以了解基因的调控机制,并进一步应用于基因工程和农业生产。

结论遗传学实验是研究遗传学的重要手段,通过实验可以帮助我们更好地理解遗传原理和基因的功能。

本文介绍了显性遗传实验、基因突变实验、基因型分析实验和基因转导实验的步骤和结果。

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《遗传学实验》简介课程名称:遗传学实验课程性质:随课实验课程属性:基础课学时学分:学时16学分1面向专业:一、课程的任务和基本要求遗传学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程,是一门独立的实验课程,同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由基础操作性、综合性和设计性等多层次实验内容构成,目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。

在此基础上,进行一定比例的综合性、设计性实验,将实验理论和实验技能融为一体,从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。

本课程的任务是从个体、细胞水平揭示遗传学的基本现象与规律,培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术,并初步掌握现代遗传学实验操作技能,熟悉遗传学分析方法,同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。

二、实验项目植物染色体核型分析果蝇的培养及生活史和形态观察小鼠骨髓染色体的制片及观察人群中基因频率的调查人类巴氏小体观察三、有关说明1、与其它课程和教学环节的联系先修课程:动物学、植物学、生物化学、微生物学后续课程:分子生物学、基因工程、人类遗传学平行开设课程:细胞生物学2、教材和主要参考书目(1)教材:刘祖洞江绍慧遗传学实验高等教育出版社1987年第二版(2)主要参考书目①张文霞等编遗传学实验指导高等教育出版社2005 年版②张贵友等编普通遗传学实验指导清华大学出版社2003 年实验一1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察(3学时)一、教学基本要求:1. 掌握植物染色体压片法。

2. 掌握有丝分裂各时期的特征。

3. 掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法二、教学内容:1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察〖目的和要求〗本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法,了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。

〖实验原理〗有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。

分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中期、后期、末期)〖材料和方法〗洋葱或大蒜或种子根尖水浴锅、显微镜卡诺氏固定液、石炭酸品红(或醋酸洋红)染色液,1N盐酸(或0.5%果胶酶+纤维素酶),秋水仙素(0.1%)1、取材:大蒜、洋葱根尖,恒温箱2、预处理:药物处理(秋水仙素)或冷冻处理(冰箱)3、固定:卡诺氏固定液4、解离:恒温水浴锅,1N盐酸或0?5%的果胶酶和纤维素酶5、染色及压片:染色液(改良苯酚品红或醋酸洋红),载玻片、盖玻片6、染色体观察:显微镜7、永久封片(示范):二甲苯、中性树胶〖步骤〗1、取材:培养→(预处理)→切取(在分裂高峰期)2、固定:卡诺氏固定液12-24小时→70%的酒精中保存3、解离:水洗→盐酸60℃ 8-10’解离→水洗4、染色:切取分生区→吸水→染色液一滴,15分钟→分割压片,镜检〖作业〗1、绘出所观察到的有丝分裂图象,并注明时期。

2、预处理与未预处理的分裂相有何不同为什么?2、植物多倍体人工诱导实验二果蝇的形态、生活周期及其饲养(3学时)一、教学基本要求:1、能够辨别果蝇雌雄性别及常见突变型。

2、掌握实验果蝇的饲养以及实验中的处理方法和技术。

二、教学内容:〖目的和要求〗果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点, 是研究遗传学的好材料.通过这一实验 ,可以让学生了解果蝇生活史及各个阶段的形态特征,,雌雄性别特征,常见突变型的特征,掌握实验果蝇的饲养,以及实验的处理方法和技术,为果蝇的杂交实验做准备〖实验原理〗雄蝇体型较小,末端钝而圆.颜色深,腹背面有4个腹片,第一对足的跗节前端有性梳,而雌蝇体型较大,末端尖,颜色浅,腹背面的有5条黑色条纹。

腹面有6个腹片,无性梳。

〖材料和方法〗果蝇因饲养条件简单、发育时间短(25℃,10-12d)、染色体数目少(2n=4)、突变类型多、且多为形态突变、易观察等优点,常作为遗传学实验的首选材料。

但在果蝇的培养和保种过程中,常会出现培养基长霉,且一旦培养基长霉后,果蝇身上沾满了霉菌孢子,若将此果蝇接种到新的培养基中,大约经过4-5d,培养基将会重新长出霉菌来。

因此培养基长霉问题,对于培养和保种果蝇将是一件非常触手的事情。

如何防止培养基长霉以及长霉后如何处理,本文将做一探讨。

如何防止培养基长霉当环境温度不适应果蝇生长时(温度低于18℃),培养基接种后的7d内,特别容易长霉。

要避免长霉,应注意:⑴培养果蝇的器皿要严格消毒。

培养瓶洗干净后,自然凉干,再与棉塞一道进行高温干燥灭菌(120℃,30min)。

⑵培养基营养要全面。

果蝇培养基的种类很多,本实验室用的是玉米培养基,配方及配料如下:水750ml煮开,加琼脂6.2g,待琼脂溶解后加白糖62.5g,搅拌溶解后加调成糊状的玉米糊(玉米82.5g,用冷水调成糊状,如直接加入开水中,易起团),煮开2-3min,加酵母粉7g,加热1-2min,搅拌均匀后,移去火源,加丙酸2ml(起杀菌防霉的作用)。

培养基稍稍冷却后,倒入已灭菌的培养基瓶中,尽量不要让培养基粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余热的干燥箱中将瓶壁上的水蒸干。

⑶接种时消好毒。

在无菌室内接种,如没有无菌室,在接种前用75%酒精棉球擦双手一遍。

接种后,放入适宜果蝇生长温度的培养箱中培养果蝇(温度20-25℃),一旦下一代成蝇孵出来后,培养基就不易长霉。

长霉后的处理措施若培养基长霉后,由于霉菌孢子漂浮于培养瓶的整个空间,包括果蝇身上,如将此果蝇接种到新的培养基中,大约经过4-5d,培养基将会重新长出霉菌来,遇到该问题,解决的方法只有两种:一是不要这种果蝇,重新从其他人中接种未长霉的果蝇;二是采取措施杀死果蝇身上的霉菌孢子。

方法为:将带有霉菌孢子的成蝇倒入空培养瓶中,棉塞上倒适量的75%酒精,再将瓶口塞紧,利用酒精具有挥发性,挥发后的酒精充满整个瓶内,从而将果蝇身上的霉孢子杀死。

在操作上应注意两点:一是倒在棉塞上的酒精量要合适,过多果蝇易醉昏,过少杀死不了霉菌孢子;二是果蝇呆在空瓶内的时间要恰当,以2d为好。

〖作业〗1、观察比较雌雄果蝇的区别2、记下突变型的特征3、制备培养基把50或100ml的三角瓶(数目根据自己试验确定)洗干净,干燥。

(能够高温灭菌也好,似乎没那必要)配培养基。

培养基比例:蔗糖13g,琼脂1.5g,玉米粉17g,水(单蒸水就可以)180 ml。

乙酸2 ml(可少一点),酵母粉至少1.4g培养基配制步骤:(1)称取玉米粉17g装入烧杯1(要大一些的烧杯,如500 ml),量取水90 ml。

先加少量水于烧杯中,搅拌成均匀的糊状,再加入其余的水,搅拌均匀。

然后一边在电炉上加热,一边搅拌。

直到完全煮熟。

冒泡泡以后,火小点,免得溢出来。

冒泡泡以后还是要再煮好一会。

要充分煮熟,要不培养基在培养过程中,果蝇没有吃完就发酵了,果蝇会死的。

煮好了放在一边。

(2)称取蔗糖13g,琼脂1.5g装入烧杯2,量取水90 ml。

加入大半水于烧杯中,一边加热一边搅拌。

完全煮溶。

(3)把烧杯2中煮溶的蔗糖和琼脂倒入烧杯1中,用步骤2剩余的水冲一冲烧杯,也倒入烧杯1中。

(如果烧杯1小,就装不到了。

)然后搅匀,继续搅拌加热,直到沸腾,充分混匀。

(4) 待烧杯1稍凉。

这个时候把干燥好的三角瓶摆放旁边。

将至少1.4g酵母粉加入烧杯1搅匀,将培养基倒入三角瓶中(要用卖油翁的技术,这个你没问题,就是不要把培养基沾到瓶壁或周围,浪费也不好看)。

(按照敬老师的说法要待烧杯1凉到80度左右,我觉得稍凉就好了。

因为加入酵母粉后还搅拌,就更凉了。

倒入三角瓶时,到后边就太凉了有点凝固,不好倒,还会沾到瓶壁上。

)(5)把倒好的培养基放到超净工作台上,放2天,等待瓶壁和培养基上的水分挥发。

有水残留的话,果蝇放进去翅膀打湿,飞不起来,就翘翘了。

(我自己的做法是配培养基的时候少加10ml 的水,等待一天,没有完全干,但也可以用)由于果蝇是吃里面生长的酵母,所以培养基放上三天,有酵母生长了就可以接种果蝇了。

(6)我自己收集果蝇的方法:放一点水果在矿泉水瓶子中,至少要四五天才会有很多果蝇。

这几天的时间就赶快去准备其他的东西。

培养基弄好了,就把瓶子收起来,带实验室去接种。

果蝇的培养条件是20-25度,25度以上的温度不好的,不记得原因了。

20度以下生长慢。

实验三小鼠骨髓细胞染色体标本制作(4学时)一、实验目的和要求通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。

二、实验原理由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。

三、实验用品1.材料:小白鼠2.器具:注射器(1ml,5ml)、5号针头、解剖盘、解剖剪、镊子、玻璃吸管、10ml刻度的离心管、离心机、载玻片、盖玻片、显微镜、滤纸、擦镜纸、棉花、量筒、天平、恒温水浴锅3.药品:0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、Giemsa染液、0.01M磷酸缓冲液(PH6.8),0.85%生理盐水。

四、实验步骤1.预处理:实验前2.5-3小时,按每克体重注射0.02ml,给小白鼠腹腔注射秋水仙素。

2.断颈处死动物,解剖小鼠内生殖器官,鉴别雌雄性别。

3.剥取股骨,剔去肌肉组织,剪去两端的股骨头4.冲洗骨髓:吸取0.6ml生理盐水,注射器针头插入股骨一端,反复冲洗骨髓到8ml的离心管中. 5.低渗:加入4.4ml0.075MKCl溶液,37oC水浴低渗40分钟,中间(约20分钟)用吸管吹打一次,使细胞分散,悬浮于溶液中。

6.离心:1000rpm离心10分钟后弃去上清液,离心之前加1ml固定液并用吸管轻轻吹匀,进行预固定。

7.固定I:沿管壁慢慢加入固定液5ml,用吸管吹打成细胞悬液后,室温下静置30分钟,15分钟时吹打一次。

8.离心:1000rpm离心10分钟,弃上清液。

9.固定II:同固定I。

10.离心:同8离心后加0.3-0.5ml固定液,吸管吹打成细胞悬液。

11.滴片:用吸管吸取细胞悬液,滴在预冷的载玻片上,在酒精灯火焰上微微加热,室温晾干12.染色:10% Giemsa染液染色30分钟;镜检:低倍———高倍。

五、注意事项低渗与离心等步骤的操作要轻。

观察细胞的标准为:1.细胞完整,轮廓清晰,染色体分布在同一水平面上。

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