大叶钩藤中柯诺辛碱的含量测定

合集下载

钩藤不同部位生物碱类成分的含量测定及其质量评价

第49卷第8期2021年4月广州化工Guangzhou Chemical IndustryVol.49No.8Apr.2021钩藤不同部位生物碱类成分的含量测定及其质量评价刘小芬I,蔡洪鲍打王琼I,胡嘉璇打聂海澜I,蒋范任2(1益阳医学高等专科学校，湖南益阳413000；2益阳市食品药品检验所，湖南益阳413000)摘要：采用反相高效液相色谱法，对钩藤不同部位异钩藤碱、钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱4种生物碱类成分进行含量测定。

采用Gemini NX C18(250mmX4.6mm,5|im)色谱柱，以1%醋酸钱(A)-乙睛(B)为流动相进行梯度洗脱，流速l.OmL-min-1；检测波长为245nm；柱温25t；进样量10jl L o本方法简便可靠，专属性强，重现性好，适用于钩藤中生物碱的含量测定；钩藤不同部位生物碱类成分含量差异显著。

关键词：钩藤；异钩藤碱；钩藤碱；去氢钩藤碱；异去氢钩藤碱；反相高效液相色谱法；不同部位中图分类号：0657.72；R284.1文献标志码：B文章编号：1001-9677(2021)08-0153-03 Determination and Quality Evaluation of Alkaloids in Different Parts of Uncaria*LIU Xiao-fen,CAI Hong-kun1,WANG Qiong1,HU Jia-xuan,NIE Hai-lan,JIANG Fan-ren'(1Yiyang Medical College,Hunan Yiyang413000；2Yiyang Institute for Food and Drug Control,Hunan Yiyang413000,China)Abstract:The contents of isorhynchophylline；rhynchophylline,corynoxeine and isocorynoxeine in different parts of Uncaria were determined by RP-HPLG.The method was performed on a Gemini NX C18chromatographic column(250mmx 4.6mm,5|JLm),with1%ammonium acetate(A)-acetonitrile(B)as the mobile phase with gradient elution,the flow rate was1.0mL•min-1,the detect wavelength was245nm,the column temperature was25T,and the injection volume was10p,L.The method was simple,reliable,specific and reproducible.It was suitable for the determination of alkaloids in Uncaria.The contents of alkaloids in different parts of Uncariawere significantly different.Key words:uncaria;isorhynchophylline；rhynchophylline；corynoxeine；isocorynoxeine；RP-HPLC；different parts钩藤是《中国药典》収载品种，为茜草科植物钩藤干燥带钩茎枝，秋冬两季采收。

HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨

HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨目的：探讨钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法。

方法：采用RP-HPLC，对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法学进行考察，同时采用HPLC-ESI-MS研究钩藤碱和异钩藤碱在加热过程中的化学成分转化情况。

结果：钩藤碱在0.064～5.100 mg线性关系良好，精密度良好；当样品采用回流提取时，平均加样回收率87.51%～88.83%，提取回收率12.60%；当样品采用超声提取时，平均加样回收率99.48%～103.2%，提取回收率47.08%。

异钩藤碱在0.064～5.110 mg线性关系良好，精密度良好；当样品采用回流提取时，平均加样回收率107.9%～113.9%，提取回收率40.00%，当样品采用超声提取时，平均加样回收率97.00%～99.59%，提取回收率51.03%。

质谱分析结果表明回收率不合格的原因是钩藤碱在提取过程中大部分转化为异钩藤碱，有一小部分转化为未知成分；异钩藤碱在提取过程中转化为钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱及22-O-β-D-glucopyranosyl isocorynoxeinic acid 4种成分。

结论：HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱宜采用超声提取法，并应注意回收率问题。

标签：钩藤；钩藤碱；异钩藤碱；HPLC钩藤为茜草科植物钩藤Uncaria rhynchophylla、大叶钩藤U. rhynchophylla、毛钩藤Uncaria hirsuta、华钩藤U. sinensis或无柄果钩藤U. sessili fructus的干燥带钩茎枝[1]，主要分布于江西、广东、广西等地。

钩藤始载于《名医别录》，现仍为临床常用中药，主治小儿寒热，十二惊痫等[2-4]。

现代研究表明，钩藤的有效成分为吲哚类生物碱，主要为钩藤碱和异钩藤碱等，具有降血压、抗心律失常及抗血小板聚集和抗血栓形成作用[5-6]。

《中国药典》2010年版（一部）中钩藤的质量标准简单，未收录含量测定项。

HPLC法测定钩藤提取物中钩藤碱含量

HPLC法测定钩藤提取物中钩藤碱含量作者：张建奇金海燕来源：《科学与财富》2018年第35期摘要：建立反相高效液相色谱法测定钩藤提取物中钩藤碱的含量。

方法：采用奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-5mmol/L乙酸铵水溶液用氨水调pH=9.8（20：30：50）为流动相，检测波长为240nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。

钩藤碱在5～50μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

钩藤碱平均回收率分别为99.5%。

结论：本法简便、准确，可用于钩藤提取物中钩藤碱的含量测定。

关键词：钩藤提取物；含量；测定钩藤始载于《别录》，原名钓藤。

钩藤别名为吊藤（陶弘景）、钓钩藤（《滇南本草》）、金钩藤（《贵州民间方药集》）、挂钩藤（《药材学》）、钩耳（《湖南药物志》）等。

钩藤具有清热平肝，熄风止痉的功效。

《本草新编》记载：“钩藤，去风甚速，有风症者必宜用之。

但风火之生，多因于肾水不足，以致木燥火炎，于补阴药中，少用钩藤，则风火易散，倘全不补阴，纯用钩藤以祛风散火，则风不能息，而火且愈炽矣。

”钩藤具有抗炎、镇痛、抗肿瘤等多种药理作用[1-4]。

本文采用高效液相法对钩藤提取物中的钩藤碱的进行了含量测定。

1 仪器与试药1.1 仪器：VWR天平防震垫（北京慧龙环科环境仪器有限公司）；JJ-BF 0.001g天平（上海仁沃实业发展有限公司）；天星进样瓶清洗机TX-500型（北京天星科仪科技有限公司）；LC1620A高效液相色谱仪（河南郑州南北仪器设备有限公司）；长城狮鼎SHB-III型台式循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；Milli-Q Direct水纯化系统（上海力晶科学仪器有限公司）；新芝scientz-T超声波提取机（宁波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 色谱柱：奥泰公司C18色谱柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：钩藤碱。

高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱含量 (2)

大叶钩藤ＵｎｃａｒｉａｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａＷａｌｌ．类属茜草科钩藤属植物，为常用中药。自古用作清热平肝、息风镇惊药，用于治疗头晕目眩、惊痫抽搐、全身麻木等心脑血管和神经系统疾病，现已成为治疗高血压方剂中常用药物［１］。现代药理研究表明，钩藤药理作用的有效成分主要是生物碱，其中钩藤碱和异钩藤碱等吲哚类生物碱为主要有效成分。钩藤碱占总碱的２８．９％，毒性低，副作用小，具有良好的药用疗效［２］。由于钩藤碱的热稳定性较差，在８１℃时即有部分分解，其酯键受热易分解，并在极性条件下易转化为异钩藤碱，转化率在６０％以上［３］。因此，本实验未采用酸水提取法，而采用了有机溶剂提取法，对常用的有机溶剂乙酸乙酯、氯仿、乙醚、甲苯、石油醚与乙酸乙酯混合溶剂（５：３）对钩藤总生物碱的提取进行了实验研究，确定工业化提取的最佳溶剂，并对总生物碱进行分离纯化，得到钩藤碱并鉴定其纯度。
１实验部分
１．１仪器设备电热套；调压器；水泵；Ｓ１１－４－ Ⅱ／电热恒
温水浴锅；Ｘ－６显微熔点测定仪：北京泰克仪器有限公司；日本岛津ＬＣ－１０ＡＤ高效液相色谱仪；４８８２型三用紫外分析仪：上海顾村电光仪器厂；ｐＨＳ－２５型酸度计：上海伟业仪器厂；ＲＥ－５２Ｓ旋转蒸发仪：巩义市英予华仪器厂；各种型号的玻璃仪器。１．２试剂
２结果
２．１钩藤总生物碱不同提取溶剂的结果采取不同的溶剂对钩藤中的总生物碱进行提取，
Ｎｏ．８．２００７１５７
工艺技术
表１不同溶剂提取钩藤总生物碱的结果

HPLC法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量

HPLC法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量[摘要]目的建立中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量的高效液相色谱检测方法，为中药钩藤中有效成分的含量测定提供科学的参考。

方法高效液相色谱条件为：色谱柱 phenomenex c18 （250 nm ×4.0 nm， 5μm），流动相：甲醇-水（55∶45），紫外检测波长：254 nm，流速：1.0 ml/min，柱温：28℃，进样量：20μl。

结果以峰面积为纵坐标浓度为横坐标，计算得到钩藤碱和异钩藤碱回归方程分别为y=0.999 e + 6x-21 133，r2=0.9998和y=1.008 e+ 6x-13 556，r2=0.9999。

结果显示钩藤碱和异钩藤碱分别在0.244～1.534 μg和0.226～1.288 μg浓度范围内其浓度与峰面积具有良好的线性关系。

另外本法在精密度、稳定性、重复性上均取得了较好结果。

结论高效液相色谱法测定钩藤中藤碱和异钩藤碱含量，具有快速、简便、重复性好的特点，值得在中药含量测定上大力推广应用。

[关键词] 钩藤；钩藤碱；异钩藤碱；含量检测；高效液相色谱法[中图分类号] r284.1 [文献标识码] b [文章编号] 2095-0616（2013）13-97-02study of the content determination of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla by hplczhao xiaoli ma yanhenan province zhumadian institute for food and drugcontrol，zhumadian 463000，china[abstract] objective establish the hplc method to determine the contents of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla and provide scientific guidance for determining the contents of active ingredient in uncaria rhynchophylla. methods contents of rhynchophylline and isorhynchophylline was measured by hplc. column of diamonsi （250 nm×4.0 nm，5μm），solvent system：methanol︰h2o（55︰45），uv wave：254 nm，flow rate：1.0 ml/min，column temperature：28℃，injection volume：20μl. results we established the regression equation of rhynchophylline and isorhynchophylline y=0.999 e+6x-21133，r2=0.9998 and y=1.008 e+ 6x-13556，r2=0.9999，by making peak area as the ordinate and concentration as abscissa. moreover this method got good results in precision，stability and repeatability. conclusion the method that determining the contents of rhynchophylline and isorhynchophylline in uncaria rhynchophylla by hplc has the advantage on quick，simple，reproducible，and has a huge value in determining the contents of chinese traditional medicine.[key words] uncaria rhynchophylla；rhynchophylline；isorhynchophylline；content determine；hplc钩藤（uncaria rhynchophylla）是一种具有降血压、镇静、抗惊厥作用的传统中药[1]。

气相色谱(GC)法测定钩藤中钩藤碱的含量

于钩藤中生物碱相关含量测定，现在的研究多采用ＨＬ法Ｉ。ＰＣ、
本文采用气相色谱（ＧＣ）法测定钩藤中钩藤碱的的含量。该法简便、快速、准确，为钩藤质量控制标准的制定提供依据。可
ｗｉｎａｅａｅｒｃｖｒａｅｏ９２％，ｈｖｒｇＤｓ１３％．ｎｌｓｏＴｈｓｍｅｈｄｉｔｂｅｒｌｂｅｒｐｏｕｉｌ，ｎａｔａｖｒｇｅｏｅｙｒｔｆ９．１ｔｅａｅａｅＲＳｗａ．２ｈＣｏｃｕｉｎ：ｉｔｏｓｓａｌ，ｅｉｌ，ｅｒｄｃｂｅａｄｃｎａｂｓｄａｏｅｏｃｒａｑａｉｏｔｏｔｎａｄｅｅｏｏｅｐｎｉｇｂｓｓｅｕｅｓｆｒｈｆｎａｉｕｌｙｃｎｒｌａｄｒｓｏｄｖｌｐａｃｒｓｏｄｎａｉ．ｔｕｔｓｔ
【ｙｒｓＵｃｒ；ｃｒ — ｈｎｈｐｙｌｅＧＣＫｅｗｏｄ］ｎａｉＵｎａｉｒｙｃｏｈｌｎ；ａａｉ
钩藤为茜草科植物钩藤的带钩茎枝，作为常用的中药材之
一
国药品生物制品检定所，号：１６２２００，度大于９％）批１０７．０８４纯８；水为超纯水（臣氏双蒸水）屈，其他化学药品均为分析纯试剂。钩藤药材购自广惠和大药房，为茜草科植物钩藤的干燥带钩茎枝。
ｔｅａｒ：８￣Ｎｉｏｅｓｃｒｅａ．ｅｕｔ：ｈｎｈｐｙｌｅｉｅａｇｆ．４２１７ｇｌｅｒｅａｏｓｉ，．９８，ｅｒｔｅ２０Ｃ；ｔｇｎａａｉｇｓＲｓｌｒｙｃｏｈｌｎｔｎｅ２４￣．２ｎａｌｔｎｈｐ（＝０９９）ｍｐｕｒｒｒｓｉｎｈｒｏ０５２１ｉｇｒｉ

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析

ｍＬ，ｒｈｙｎｅｈｏｐｈｙｌｌｉｎｅｗａｓｇｏｏｄ．ｔｈｅｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｅｑｕａｔｉｏｎｏｆｒｔｈｅｔｉｍｅＹ＝８７．４７２９Ｘ－Ｏ．３６６６（ｒ＝０．９９９７），ＲＳＤ＜７．３％．Ｔｈｅ
世界中医药２０１６年７月第１１卷第７期
－ｌ３３１・
钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析
张恒饶坤林
（湖北省荆州市中心医院药学部，荆州．４３４０２０）
摘要目的：探讨钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用。方法：采取水煎液以及甲醇提取液的方式
ｍＬ，ｔｈｅｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎｅｑｕａｔｉｏｎ
ｆｏｒｔｈｅｔｉｍｅＹ：７６．７１７０Ｘ－Ｏ．０７２７（ｒ＝０．９９９８），ＲＳＤ＜８．７％；Ｉｎｔｈｅｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ２．０— ８０
对钩藤中的钩藤碱及异钩藤碱进行提取，并使用高效液相色谱系统分别对其提取的含量进行测定。结果：在２．５８Ｏｇ／ｍＬ的范围内钧藤碱的线性关系良好，此时的回归方程为Ｙ＝７６．７１７ＯＸ－Ｏ．０７２７（ｒ＝０．９９９８），ＲＳＤ＜８．７％；在２．０～８０ｍＬ的范围内异钧藤碱的线性关系良好，此时的回归方程为Ｙ＝８７．４７２９Ｘ－０．３６６６（ｒ＝０．９９９７），ＲＳＤ＜７．３％。甲醇

大叶钩藤生物碱类化学成分研究

第１卷第１５期
Ｖ０．５ＮｏＩ１．１
中
医
药
导
报
２００９年１月
Ｊｎａｙ２０ａｕｒ．０９
ＣｉｉｇＪｕｎｌｏｒｄｔｎｌＣｈｎｓｄｃｎｎｈｒａｙｕｄｎｏｒａｆＴａｉｏａｉｅｅＭｅｉｉｅａｄＰａｍｃｉ
ｂｃｌｒｆｒｙｈｏｏｏｍ．Ｔｅｈｍｉａｃｎｔｕｎｓｅｅｅａａｅａｄｅｅｔｄｙｕｆｄｙｈｃｅｃｌｏｓｉｅｔｗｒｓｐｒｔｄｎｒｐａｅｌｐｒｅｂｍｅｈｄｏｃｒｍａｏｒｐｙａｄｈｉｔｉｉｔｏｓｆｈｏｔｇａｈ，ｎｔｅｒｓｕｔｒｓｗｅｅｅｕｉａｅｙＵＶ．ＩｔｃｕｅｒｌｃｄｔｄｂｒＲ．ＭＳａｄＮＭＲ．ｓｌ：ｉｌａｏｄｅｅｂａｎｄａｄｔｅｒｄｎｉｅｓｃｒｎｘｎｎＲｅｕｔＳｘａｋｌｉｓｗｒｏｔｉｅｎｈｙｗｅｅｉｅｔｉｄａｏｙｏｉｅｆ
［ｅｒｓＵｃｒｃｏｈｌｌ；ｌａｏｓＣｒｎｘｎＫｙＷｏｄ】ｎａｉｍａｒｐｙａＷａ１Ａｋｌｄ；ｏｙｏｉｅａｌ．ｉ
大叶钩藤ｆｎ・ｉｍｃｐｙａＷａ１为茜草科钩藤属植Ｕ（ｒａｒｈ１ｌ】ａａｏ１．
甲醇溶液中测定；磁共振ＢｕｅＭ４０６０型核磁共核ｒｋｒＡ－０／０
ＳｕｄｏＡｌｌｉｎｓｉｕｎｔｎｃｒａＭａｒｐｙｌｔｙｎｋａｏｄＣｏｔｔｅｓｉＵｎａｉｃｏｈｌａＺＮｉｎｎＷＡｎ－ｏＨＥＧＪ－ｉａｆ。ＮＧＤｉｙ，ｇ

HPLC-ELSD法测定中药钩藤中钩藤碱的含量

ＨｕＬａｎｌａｎ，ＴａｎｇＪｉａｎｌｉｎ，ＸｕＹｉｎｇ，ＬｉＪｉｎｇｊｉｎｇ

（ＣｌｉｎｉｃａｌＰ＾口ｒ，。ｆ０ＺｏｇＢａｓｅ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＸｉｎｑｉａｏＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００３７，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｕｓｉｎｇＨＰＬＣ — ＥＬＳＤｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｒｈｙｎｃｈｏｐｈｙｌ１ｉｎｅｉｎａｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂ，Ｕｎ —
ｔｉｏｎｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｃｈａｎｇｅｄｆｒｏｍ２０ｔｏ６０ｗｉｔｈｉｎ２０ｍｉｎｂｙｕｓｉｎｇｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅ
ｔｈｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｗａｓｆｉｌｔｅｒｅｄｔｈｒｏｕｇｈａ０．２２／ａｍｍｅｍｂｒａｎｅ．ＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａｄｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８（４．６ｍｍ × ２００

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析

钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用分析张恒;饶坤林【摘要】目的：：探讨钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含量测定在预后中的应用。

方法：采取水煎液以及甲醇提取液的方式对钩藤中的钩藤碱及异钩藤碱进行提取,并使用高效液相色谱系统分别对其提取的含量进行测定。

结果：在2．5~80μg/mL的范围内钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=76．7170X-0．0727(r=0．9998),RSD<8．7%；在2．0 ~80μg/mL的范围内异钩藤碱的线性关系良好,此时的回归方程为Y=87．4729X-0．3666(r=0．9997),RSD<7．3%。

甲醇提取液的方式所提取钩藤碱和异钩藤碱的含量高于水煎液的方式,并且使用二十倍质量的甲醇量,24 h的冷侵时间以及60 min的超声时间最合适。

结论：使用甲醇进行提取在用于钩藤中钩藤碱及异钩藤碱中作用优异,对其质量的控制性好,重复性高,操作方法简单,可提高预后,值得在临床上应用推广。

%Objective:To explore the application of extraction and content determination in the prognosis of uncaria rhynchophyl-line and isorhynchophylline in Gambir Plant Nod. Methods:The uncaria rhynchophylline and isorhynchophylline extract was taken by water extract and methanol extract methods, and the content of the extract was determined by high performance liquid chroma-tography. Results:The good linear relationship of rhynchophylline was in the range of 2. 5~80μg/mL, the regression equation for the time Y=76. 717 0X-0. 072 7(r=0. 999 8),RSD<8. 7%; In the linear relationship between the range of 2. 0~80 μg/mL, rhynchophylline was good, the regression equation for the timeY=87. 472 9X-0. 366 6(r=0. 999 7), RSD<7. 3%. The content of rhynchophylline and isorhynchophylline extracted by methanol extraction liquid was higher than those extracted by the water. And the best way to extract the contents was under the condition of 20 times the maximum amount of methanol, 24 hours of the invasion of cold time and 60 min of sonication. Conclusion:The methanol extraction method is prominent in extracting in un-caria rhynchophylline and isorhynchophylline, with good quality control, high repeatability, simple operation, and effect of impro-ving prognosis, which is worthy of clinical application and promotion.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2016(011)007【总页数】4页(P1331-1333,1336)【关键词】钩藤碱;异钩藤碱;提取方法【作者】张恒;饶坤林【作者单位】湖北省荆州市中心医院药学部，荆州，434020;湖北省荆州市中心医院药学部，荆州，434020【正文语种】中文【中图分类】R284.2钩藤是一种传统中药，其种类众多，有钩藤、毛钩藤、大叶钩藤、华钩藤等，有15种，属于一种茜草科植物[1-2]。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

［３］国家药典委员会．中国药典，Ｉ部［ｓ］．北京：化学工业出版社，
２００５：１３７．
大叶钩藤中柯诺辛碱的含量测定
刘慧琼１，李国成２，卢绮雯１，王定勇１，陈燕忠３’
（１．广东药学院・药科学院，广东广州５１０００６；２．中山大学附属第二医院，广东广州５１０１２０；３．广东药学院药物研究所，广东广州５１０００６）摘要：目的高效液相色谱法测定大叶钩藤中柯诺辛碱的含量，为建立大叶钩藤的质量标准提供参考。方法采用Ｄｉｓ—
１．２
试药柯诺辛碱对照晶（购自广州来普达克生物技术有限
公司产品，纯度Ｉ＞９８％．批号：２００９０９２１）；甲醇（色谱纯，天津四友公司产品）；超纯水；三乙胺（分析纯，广州化学试剂厂）；二氯甲烷（分析纯，广州化学试剂厂）；大叶钩藤于２００８—１０采自广东省云浮市．由广东药学院曾常青教授鉴定为大叶钩藤Ｕｎｃａｒｉａ
ｍｒ，／ｍｌ
４％，样品含量的平均值
为０．２２４０％，含量的ＲＳＤ为２．２３％。２．８检测限与定量限精密量取线性项下柯诺辛碱５斗ｇ／ＩＩｌｌ对照品溶液定量稀释，以信噪比Ｓ／Ｎ为３：１，测得柯诺辛碱的的检
测限为０．５峭／ＩＩｌｌ，信噪比ＳＩＮ为ｌＯ：ｌ，测得柯诺辛碱的检测限
为２．５斗ｇ／ｍｌ。２．９加样回收率实验取已知含最的同一供试品溶液，分别精密加入不同浓度的柯诺辛碱对照品溶液，测定并计算回收率。结果见表１。
＞ ∈
参考文献：
［１Ｊａ一对照品色谱ｌ冬ｌ（柯诺ｆ碱）ｂ一样品色谱图圈Ｉ
２．５
国家药典委员会．中国药典，Ｉ部［Ｓ］．北京：化学工业出版社。
２００５：１８０．
［２］郑嘉宁，ｔ定勇．大叶钩藤生物碱类化学成分研究［Ｊ］．中医药导报，２００９，１５（１）：８０．［３］张荣，刘睿，刘片；德，等．钩藤中钩藤碱、异钩藤碱的提取与含皱测定［Ｊ］．中药新药与ｌ临床药理．２００９，２０（４）：３３８．［４］［５］仲崇林，赵为民，杨美林，等．反相高效液相色谱法测定植物钩藤中钩藤碱含昔［Ｊ］．应用化学，２００８，２３（９）：１０６１．
ｃｏｖｅｒｙ
Ｃ１Ｂ柱（２５ｃａ×４．６ｍｉｌｌ，５恤ｍ），流动相为甲醇：０．０２％三乙胺水溶液＝７０：３０（∥ｙ），流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波
长２４２ａｍ。结果测得大叶钩藤中柯诺辛碱的含量平均值为０．２２４０％，柯诺辛碱的平均回收率为９９．７％，ＲＳＤ＝１．８４％
（厅＝３）。结论大叶钩藤中柯诺辛碱的含量为０．２２４Ｏ％；该方法简便可行，重复性好，可为大叶钩藤药材的质量控制提供参考。
ａ一没药烯ｎ一杜松醇雪松烯（４－）一（ｚ）一长叶蒎烷棕榈醛金合欢摹丙酮
Ｃｔ５Ｈ２４ＣＩｓＨｚ６０Ｃ１５ＨｕＣ１５Ｈ２４Ｃ１６Ｈ３２０ＣｉｓＨ３００
占：垫盛筮丝趔
丝：箜
参考文献：
［１］广西壮族自治区革命委员会卫生局．广西本草选编（上册）［Ｍ］．南宁：广西人民出版社，１９７４：９２５．
中含量最高，性质稳定，初步药理实验表明柯诺辛碱也有较好的降血压活性。因此选用柯诺辛碱作为大叶钩藤药材质量的控制指标有一定优势。本文采用ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定大叶钩藤巾柯诺辛碱的含餐并建立测定方法，有助于大叶钩藤药材的质量控制，为
１
的带钩茎枝，广泛分布于我国南方各省，为常用中药。其性甘、凉，归肝、心包经，自古用作息风定惊、清热平肝药。临床多用于治疗肝风内动、惊痫抽搐、高热惊厥、感冒夹惊、／ｂＪＬ惊啼、妊娠子痫、头痛眩晕等症，现已成为治疗高血压病方剂中的常用药材卜。大叶钩藤所含化学成分主要为４种吲哚类生物碱：柯诺辛碱（ｅｏｒｙｎｏｘｉｎｅ）、柯诺辛碱Ｂ（ｃｏｒｙｎｏｆｉｎｅＢ）、异钩藤碱（ｉｓｏ—ｒｈｙｎ— ｅｈｏｐｈｙｌｌｉｎｅ）和钩藤碱（ｒｈｙｎｃｈｏｎｈｙｌｌｉｎｅ）、２。。在这４种生物碱成分中，钩藤碱和异钩藤碱很不稳定，容易相瓦转换．同时加热、溶刺处理或药材存放时Ｉ’日Ｊ对这两种成分会造成很大的破坏。因而选用钩藤碱或异钩藤碱作为大叶钩藤药材质量控制标准难以确保实验结果的真实与町靠性。笔者研究后发现柯诺辛碱在大叶钩藤
２０６。ｚ・Ｍ
川蚴卜：膏主冀之嚣卜Ｃ１５Ｈ２Ａ
１６１６．７８
二甲基一４一己烯基）一４一甲基苯酚（２２．８７％）；（Ｅ）一Ｂ一金合欢烯（８．３１％）；乙烯基一１一甲基一２．４一二（Ｉ一甲基醚）环己烷（６．８５％）；ｄ一金合欢烯（６．０５％）；ｌ，２，３，５，６，８ａ一六氢一４，７一二甲基一１一（１一甲基乙基）萘（５．４ｌ％）。４讨论白花九里明叶挥发油主要含萜类化合物、脂肪族化合物、芳香族化合物等，其中主要以萜类化合物为主。萜类化合物具有较强的生物活性，是医药、食品、化妆品工业的重要原料。对白花九里明挥发油的成分进行深入研究，可为开发利用白花九里明资源提供重要的科学依据。
ａ一金合欢烯
ＣＩｓＨ２４
２０６
６．０５
川，例当主警完二能为≥Ｃ１５Ｈ２４
２０６¨・２０６¨ｓ
２０６２２２２０６２０６２４０２６２０．３５１．５４１．５００．７９０．５５０．８１
…，．ｓｓ¨一当主：？：０二毪三躺Ｃ１５Ｈ２４
１９２１２２２３２５２９１８．４２２４．３４２４．５９２５．００３０．８８３５．７２
表ｌ加样回收率实验
样品量
ｍ／ｐ．ｇ８６．２９８６．２９８６．２９ｎ：３
加入量
测得量
回收率（％）
９８．４１０１．８９８．９
平均同收率（％）
９９．７
ＲＳＤ
ｍ／懈
７５．０８５．０１００．０
ｍ／蝎
１６０．１２１７２．８４１８５．２３
（％）
１．８４
３讨论３．１样品提取本实验采用氨水润湿，二氯甲烷冷浸后超声提取ｌｈ的方法，能较好的提取其中的生物碱成分，减少了其他成分对测定的干扰，回收实验证明提取方法良好。３．２分析波长的选择经紫外测定，柯诺辛碱的最大吸收波长为２４２ｎｍ，故选择２４２ｒｉｍ为最大吸收波长。３．３流动相的选择本研究在参照文献［３～５］的基础Ｌ，进行了流动相的选择，结果表明流动相为甲醇：水（含０．０２％三乙胺）＝７０：３０时，柯诺辛碱的峰形对称且能和其他成分良好分离。４结论本研究建立的高效液相色谱法，可测定大叶钩藤中柯诺辛碱的含量。本提取方法及检测分析方法具有简便准确、重复性好，易于掌握的特点，而且检测成分稳定可靠，是较理想的大叶钩藤的质最控制方法，町用于大叶钩藤药材及其复方制剂中柯诺辛碱的质域控制。
０ｇ，
ＭＥＤＩＣＩＮＥＡＮＤ
ＭＡＴＥＲＩＡ
ＭＥＤＩＣＡＲＥＳＥＡＲＣＨ２０１１
ＶＯＬ．２２ＮＯ．１
２．７样品测定分别取ｌ一５号供试品溶液进样２０ｔｄ，测量样品的ＨＰＬＣ图谱，见图１。每份测３次，将柯诺辛碱的峰面积代入标准曲线，测得ｌ一５号样品的柯诺辛碱含量分别为０．２１５
０．２２７３％，０．２２３７％。０．２２５Ｏ％，０．２２８７％，
临床用药提供一定的参考依据。仪器与试药
仪器ＳＨＩＭＡＤＺＵＬＣ—ＩＯＡＴ型高效液相色谱仪（日本岛津公司产品），ＳＰＤ—ＩＯＡＴ犁紫外一可见检测器（日本岛津公司产
１．１
品），ＨＷ一２０００色谱工作站。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ溶液过滤器，ＭｉＵｉｐｏｒｅ
０．４５岬滤膜，ＡＹｌ２０电子分析天平（ＳＨＩＭＡＤＺＵ公一Ｊ产品）。
从图ｌ及表ｌ可知，白花九里明挥发油中ＧＣ—ＭＳ分析确定了２９个色谱峰。通过ＨＰＭＳＤ化学工作站，结合Ｎｉｓｔ０５质谱图库和Ｗｉｌｅｙ２７５质谱图库，鉴定出了２３个匹配度Ｉ＞８０的化合物，占挥发油总量的９５．６５％。按峰面积归一化法计算求得各化学
［２］
中国科学院中国植物编辑委员会．中国植物志［Ｍ］．北京：科学出版社，１９７９：１３．
ｈ
大叶钩藤中柯诺辛碱的ＨＰＬＣ图
精密度实验精密吸取同一柯诺辛碱对照品溶液２０出，连
续进样６次，测得柯诺辛碱的峰面积ＲＳＤ为２．Ｉ％。结果表明仪器具有良好的精密度。
２．６
稳定性实验取同一供试品溶液，分别于Ｏ，２，４，６，８，２４
＋Ｅ英锋．魏璐雪，士保ｌ｝Ｉ，等．高效液相色谱测定钩藤中钩藤碱异钩藤碱含鞋［Ｊ］．药物分析杂志，１９９９，１９（１）：５６．
进样测定，结果显示，柯诺辛碱的峰面积的ＲＳＤ为２．９２％，表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。
・１６４・
万方数据
关键词：大叶钩藤；柯诺辛碱；高效液相色谱法ＤＯＩ标识：ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２０１１．０１．０８０中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ｂ文章编号：１００８－０８０５（２０１１）０１－０１６３－０２
大叶钩藤Ｕｎｃａｒｉａ
ｍａｃｒｏｐｈｙＵａ
Ｗａｌｌ．为茜草科植物大叶钩藤
ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌａ
Ｗａｌｌ．。Ｃ１８柱（２５ｃｍ×４．６
２方法与结果
２．１
色谱条件色谱柱为Ｓｕｐｅｌｅｏ
Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ
ｍｉｌｌ，５岬），流动相为Ｖ（甲醇）：Ｖ（体积分数为０．０２％三乙胺溶
・１６３・
பைடு நூலகம்万方数据
时珍国医国药２０１１年第２２卷第１期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ液）＝７０：３０，流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２４２ｎｍ，柱温３０℃。进样量２０ｍ。２．２对照品溶液的制备精密称取柯诺辛碱对照品０．００５加适量色谱纯甲醇溶解，并定容于５ｍｌ容量瓶，得到１．００的柯诺辛碱标准储备液。２．３供试品溶液的制备取大叶钩藤药材粉碎过４０目筛，精密称取２．００ｇ，装入５０ｒＩｌｌ具塞三角瓶，加入５ＩＩＩｌ氨水润湿，再加二氯甲烷４０Ｉｌｌｌ冷浸２４ｈ后，低温超声提取ｌｈ，过滤，滤液水浴浓缩至干，用色谱纯甲醇溶解并定容于２５ＩＩｌｌ容量瓶。混匀后用微孔滤膜过滤，平行做５份，作为１—５号供试品溶液。２．４标准曲线的制备精密吸取柯诺辛碱对照品储备液各ｌｏ，２０，４０，８０，１６０山置于１—５号２ｍｌ容量瓶中，分别用色谱纯甲醇定容，配制得系列对照品溶液。混匀后用微孔滤膜过滤，依次取上述溶液各２０１上１进样．做ＨＰＬＣ分析。见图１，以柯诺辛碱的色谱峰面积对浓度做标准曲线，回归方程为Ｙ＝２４３２２．９Ｘ＋１４３７１０．６，（ｒ：０．９９９６）。结果表明，柯诺辛碱在５．０—８０ｖａ／ｍｌ范围内呈良好线性关系。