生化试剂参数..共34页文档
生化试剂参数..
A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法：（两点速率法）样本与试剂反应不断消耗反应物，反应速度
不断减小，吸光度变化不断减小，在特定时间段内进行监测，该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比，如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度范围(Linearity） 线性度不能超过设定界限，超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足，检测结果会变低。
试剂线性范围（Dynamic Range/Technical Limit） 与试剂/样本比值有关，超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
生化试剂其他参数及意义
前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目，可根据项目要求选YES或NO，比较终点法 后两个读数点的差别，如果后一点比前一点的吸光度低，表示已经有 抗原过剩，样本应稀释后重测 方程式（Fomular） Y=aX+b a为截距，b为斜率。用于校正检测结果，一般a为1.000，b为0.000，
生化试剂主要参数及意义
测定波长（wavelength）： 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长（main
wavelength/primary wavelength ）
根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。
副波长（次波长sub
wavelength/second wavelength ）
生化试剂各机型参数确定
目录
体外诊断生化试剂应用参数
CHEMISTRY ACP ALB ALP ALT AM 货号270010036008201110060180006051000503601850111018018001803601870111050018005003600930TEST ACP ALB ALP ALT AM SAMPLE VOL．20371025 DILUTION0101000 REAGENT VOL.1-STEP250300270290250 DILUTION00000 2-STEP50[N] DILUTION00000 WAVE-LENGTH-1410600410340340 WAVE-LENGTH-2450700480410700 METHOD RATE END RATE RATE END REACTION+++--FIRST-POINT-160439 LAST-POINT-1166161616 FIRST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A LAST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A NO LAG-TIME YES NO YES YES NO TURBIDITY NO NO NO NO NO PROZONE CHECK NO NO NO NO NO REAGENT OD L-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 H 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 SERUM BLANK L N/A N/A N/A N/A N/A REAGENT OD H N/A N/A N/A N/A N/A MIN-OD-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 MAX-OD 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 LINEARITYDYNAMIC RANGE L00000 H8060100010001180 UNIT U/L g/L U/L U/L umol/L CORRELATION FACTORA=11111 B=00000 COUNT11111 DILUTION VOLUME00000 CONDENSE VOLUME00000 MONITOR SPAN11111 AGC POINT00000 K.FACTOR1308.42628.260780上述参数仅供参考，详情请参阅试剂说明及仪器说明。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版）抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度（μg/ml）链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph－* 10 10 2 5 10 5 100 10－－ 25 25 20 25 10 － 50－－－－－－ 2.5 － 550-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30注意事项：(1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装；（2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并设置阴性对照；（3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio（4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易挥发，有剧毒；（5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存；（6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整；(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
生化试剂参数
在特定的温度下，一般是37度，待测物质直接或是间接或试剂中的底物发生反应，使整个液体环境的吸光度或是颜色发生变化，这个变化可能是变深或变淡，根据朗伯比尔定律，然后我们用数字光电设备去监测发生的变化，把颜色转化成电信号再转化成数字，电脑再加以计算，套入我们预先设定好的公式，这样就有结果了。
*朗伯比尔定律又称比尔定律，是光吸收的基本定律，适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质，包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。
光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目,在我们生化分析上通俗的说就是光通过颜色均匀的液体光被吸收的多少或是颜色的变化和液体中物质的浓度成线性关系。
例如AST和GLU的检测原理：L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸—AST—草酰乙酸+ L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ —MDH— L-苹果酸+ NAD+ + H2ONADH在340nm有吸收峰，所以NADH的减少速度就可以反应出AST的含量葡萄糖 + H2O + O2 —葡萄糖氧化酶—H2O2 + 葡萄糖酸2 H2O2+ 4-氨基安替比林+酚—过氧化物酶—醌亚胺（红色）+ 4 H2O生成红色的醌亚胺在500nm波长就可以检测到。
一、分析方法的选择：常见的分析方法有:终点法,速率法。
1 终点法：一般分一点终点法和两点终点法，一点法其原理是经过一定反应时间后,反应达到平衡时进行的一点分析。
例如:溴甲酚绿法测定白蛋白均用该法。
对于反应快的物质选用一点终点分析法。
二点终点法，是用二点的吸光度之差进行计算。
2速率法：也叫速度法或连续监测法，多数用于酶活力的测定。
所有酶活力测定均选用速率法。
其原理是根据酶所催化反应的速率来测定酶活力的大小，实际操作时要注意反应的方向，正反应和负反应。
二、双波长测定中辅波长的选择：双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择第二波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸等的干扰。
例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340ｎｍ,对于溶血样品,血红蛋白在340ｎｍ有较强吸收,其吸光度同380ｎｍ处吸光度相同,选用380ｎｍ作辅助波长,可消除溶血对测定的干扰。
32种常用生化试剂的配制
试剂的配制（1） 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ．在15 mL浓硫酸中，溶解3g 2,4—二硝基苯肼。
另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。
然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中，搅动混合均匀即成橙红色溶液。
（若有沉淀应过滤）Ⅱ．将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。
配好后储于棕色瓶中，不易变质。
I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大，反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂，由于高氯酸盐在水中溶解度很大，因此便于检验水溶液中的醛且较稳定，长期贮存不易变质。
（2）饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。
然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中，加不含醛的无水乙醇25 mL，溶液呈透明清亮状。
由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质，所以上述溶液也可按下法配制：将研细的碳酸钠晶体（Na2CO3·10H2O）与水混合，水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。
然后在混合物中通入二氧化硫气体，至碳酸钠近乎完全溶解，或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中，至碳酸钠全部溶解为止。
配制好后密封放置，但不可放置太久，最好是用时新配。
（3）Schiff（希弗）试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐（也有叫碱性品红或盐基品红），放置冷却后，加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸，再用蒸馏水稀释到200 mL。
或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液，冷却后加人0．2g品红盐酸盐，溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色，用蒸馏水稀释至200 mL。
此外，也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中，冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失，加人0.5 g活性炭，振荡过滤，再用蒸馏水稀释至500 mL。
本试剂所用的品红是para-rossaniline（或称para-fuchsin,又称假红）。
此物与另一类似物rossaniline（或称fuchsin,称洋红）不同，现以它们的盐酸盐为例，对比结构式如下：C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色，被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂，其变化过程如下：C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处，倘若受热见光或露置空气中过久，试剂中的二氧化硫易失，结果又显桃红色，遇此情况，应再通入二氧化硫，使颜色消失后使用。
生化项目试剂技术要求
附件1：生化项目试剂技术要求生化项目开放试剂（同时适配AU2700、日立008AS、日立7180,按毫升报价）附件2：综合评分明细表附件3：采购文件书装订顺序采购文件书装订顺序1、封面（公司、项目、联系人、联系方式）2、目录3、品目及报价表（格式见附件3）4、规格型号、配置及偏离表（格式见附件3）5、企业营业执照（复印件）6、组织机构代码证、税务登记证（复印件）7、法定代表人授权书（原件，格式见附件3）暨经办人授权书，法定代表人、经办人身份证（复印件）8、生产厂家授权书（投标人不是生产厂家的）9、如是医疗器械，须提供“中华人民共和国医疗器械生产企业许可证”和“中华人民共和国医疗器械经营企业许可证”（复印件）10、如是医疗器械，须提供“医疗器械产品注册证和注册登记表”（复印件）11、如有产品质量和企业管理体系认证（考核），请提供的有效证明文件的复印或扫描件，质量管理体系认证包括FDA、CE、ISO等认证（提供中文翻译复印件）12、质量检测中心或法定机构出具的产品检测报告，性能自测报告，出厂检验报告的复印或扫描件13、如有其他证书：产品在技术、节能、安全、环保和自主创新方面获得的认证证书或制造厂家和产品所获国家级荣誉称号等复印或扫描件14、产品执行标准（提供产品注册标准：YZB等资料供评审）15、产品质量及货源保证书16、售后服务承诺书，包括质量保证范围，售后服务体系、人员培训计划等，并提供相关人员证明材料，要求见评分办法“售后服务”说明；17、如有，提供进口原材料证明书或产品报关资料等18、产品说明书或与投标医疗耗材型号一致的产品彩页资料和其他有关介绍资料。
19、业绩证明文件（用户名单及联系人与联系方式，格式见附件3），并提供相应证明文件，要求见评分办法“业绩”说明。
20、能满足采购人需求的配送及维保的证明文件。
如有物流公司配送，请提供配送证明材料：配送商基本情况、配送商营业执照复印件、配送商经营许可证复印件21、如有，国家规定的其它相关资质证明文件或其它涉及特许经营许可的须提供相关证书。
(完整word版)生物常规试剂的配制
附录1 生物实验室常用试剂的配制一、检验酸碱性的试剂1.酚酞试液取0.1g酚酞，溶解在100mL60～90%的乙醇溶液里，装在试剂瓶内密闭保存。
酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.甲基橙试液甲基橙是橙黄色粉末或晶状鳞片。
取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸馏水里制成。
当pH值由3.1～4.4时，颜色为红至黄色。
3.甲基红试液甲基红是红紫色晶体或红色粉末。
把0.1g甲基红溶在100mL60%乙醇里制得。
当pH值由4.4～6.2时，颜色由红色至黄色。
4.麝香草酚酞（百里酚酞）试液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL 90%乙醇里制得。
当pH值由9.4～10.6时，颜色为无色至蓝色。
5.溴甲酚紫指示剂将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中，加蒸馏水稀释至250mL制得。
当pH值由6.2～6.8时，颜色由淡黄色变为淡紫色，变色点在pH 6.7。
6.溴甲酚绿试液溴甲酚绿是黄色晶体或红棕色粉末。
把0.1g溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中，或把0.1g溴甲酚绿与2.9mL 0.05mol/L 氢氧化钠溶液研匀，用水稀释到100mL制得。
当pH值由3.8～5.4时，颜色由黄至蓝色。
7.甲基紫（结晶紫）试液把0.1g深绿紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。
当pH值由0.13～0.5时，颜色由黄至绿；pH值由1.0～1.5时，颜色由绿至蓝；pH值由2.0～3.0时，颜色由蓝至紫。
8.甲酚红指示剂把0.1g深红色的甲酚红溶解于100mL 50%的乙醇中，或将0.1g甲酚红与5.3mL 0.05mol/L氢氧化钠研匀，用水稀释到100mL制得。
当pH值由0.2～1.8时颜色由红至黄；pH值由7.0～8.8时，颜色由亮黄至紫红。
甲酚红指示剂遇少量二氧化碳，能快速变色，反应灵敏，效果明显。
9.刚果红试纸（红色）把 0.5g峋果红溶解于1L水中，加入5滴乙酸，滤纸用温热溶解液浸透后，取出晾干。
主要原料清单(生化试剂部分)
外购原料
包被抗原或抗体
C
-18℃
A
基因工程
酶标抗原或抗体
E
-18℃
A
基因工程
阴性血清
N
-18℃
A
符合标准
阳性血清
P
-18℃
A
符合标准
酶标微孔板
EM
常温防尘
A
卫生级
无水碳酸钠
IS-001
密闭、干燥
A
分析纯
碳酸氢钠
IS-002
密闭、干燥
A
分析纯
氯化钠
IS-003
密闭、干燥
A
分析纯
氢氧化钠
IS-004
BR
南方试剂厂
1ML、10ML、100ML
39
IgG抗体
BR
南方试剂厂
1ML、10ML、100ML
40
IgM 抗体
BR
南方剂厂
1ML、10ML、100ML
41
C3 抗体
BR
南方试剂厂
1ML、10ML、100ML
42
C4 抗体
BR
南方试剂厂
1ML、10ML、100ML
43
前白蛋白抗体
BR
南方试剂厂
1ML、10ML、100ML
密闭
A
分析纯
磷酸二氢钠
IS-005
密闭、干燥
A
分析纯
磷酸氢二钠
IS-006
密闭、干燥
A
分析纯
四硼酸钠
IS-007
密闭、干燥
A
分析纯
硼酸
IS008
密闭、干燥
A
分析纯
盐酸
IL-001