维生素B1标准品 杂质 对照品
维生素B1、B2的测定方法比较
维生素B1、B2的测定方法比较比较维生素B1、B2含量测定方法。
方法：采用紫外分光光度法中三种不同方法测定维生素B1、B2含量。
结果：1、按 E 值测标示量维生素B1：98.3 ± 2.51，维生素B2：94.8 ±0.308，复合维生素B片中维生素B1:102.1± 1.70，维生素B1平均回收率为100.4%，RSD为2.13%(n=6)，维生素B2平均回收率为94.9%，RSD为6.5%(n=6)。
2、标准曲线法维生素B1、B2浓度分别在3～18、1～8μg/ml范围内，均呈良好线性关系，标示量分别为：102.9±0.661，98.4±0.152。
3、双波长法测维生素B1标示量：94.2±1.97。
结论：三种方法用于维生素B1、B2含量测定，操作简便、快速、准确，精密度好。
近年来对维生素B1、B2测定方法报道较多，如高效液相色谱法[1,2]、流动注射化学发光法[3]、多元线性分光光度法[4]、荧光分光光度法[5]、毛细管电泳电化学法[6]、氧瓶燃烧电位滴定法[7]等。
这些方法操作麻烦、时间较长。
本文采用紫外分光光度法中按 E 值测定法、标准曲线法和双波长分光光度法，测定维生素B1、B2含量，并将三种方法进行比较。
三种方法均操作简便、快速、准确。
1 仪器和材料仪器：722型分光光度计DU-7紫外—可见分光光度计材料：维生素B1、B2对照品(购自Sigma 公司) ；维生素B1片(批号：20021202) 维生素B2片(批号：20021288-02)；复合维生素B片(批号：20021283-02)三种片剂均为昆明制药股份有限公司产品；冰醋酸、盐酸、氢氧化钠均为分析纯。
2 试验及结果2.1 维生素B1含量测定2.1.1 按E 值测定维生素B1标示量取本品 1 0 片，精密称取、研细，精密称取适量(约相当于维生素B125mg)，加盐酸(9 →1000)约70ml，振摇15min使之溶解，再加盐酸(9→1000)定容至100ml，摇匀，用干燥滤纸过滤，精密量取滤液5 m l，用盐西装盐酸(9 →1000)稀释至100ml，摇匀，扫描得最大吸收波长为246nm(图1)，在该波长处测定吸光度，按其吸收系数( )为421计算：A 为供试品在246nm 波长处测得的吸光度；D 为稀释倍数；W 为维生素B1片的平均片重；W样为称取的维生素B1片粉重；S标为标示量，测定结果(X ±SD)：98.3±2.51(n=7)。
维生素b1片含量测定的方法验证
维生素B1在体内参与糖代谢，对维持神经系统正常 功能和防止脚气病有重要作用。
维生素B1的测定方法
荧光分光光度法
01
利用维生素B1在特定波长下的荧光特性进行定量分析。
高效液相色谱法
02
通过色谱柱将维生素B1与其他杂质分离，再通过紫外检测器进
行定量。
微生物法
03
利用含有维生素B1的微生物培养基培养微生物，通过测定微生
维生素B1片含量测 定的方法验证
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
确定维生素B1片的含量
目的
通过实验测定，确定维生素B1片 中维生素B1的含量，为生产质量 控制和药品监管提供依据。
方法
采用高效液相色谱法（HPLC）进 行测定，通过色谱柱分离、检测 器检测，计算峰面积并外标法定 量。
采用合适的统计分析方法，如平 均值、标准差、变异系数等，对 数据进行分析和比较。
实验误差分析
误差来源
分析实验过程中可能产生的误差来源，如称量误差、滴定误差、 读数误差等。
误差传递
根据误差来源，计算误差对最终结果的影响，并评估误差传递的 规律和特点。
误差控制
针对误差来源，采取相应的措施，如使用高精度天平、规范操作 流程等，以减小误差对结果的影响。
05
CATALOGUE
结论
实验结论总结
实验结果表明，采用高效液相色谱法测定维生素B1片 的含量是可行的，该方法具有较高的准确度和精密度
，能够满足药品质量控制的测定要求。
输标02入题
在实验过程中，我们发现维生素B1片在波长为 246nm处有最大吸收，因此选择该波长作为检测波长 较为合适。
BJS201716保健食品中9种水溶性维生素的测定.doc
附件4保健食品中9种水溶性维生素的测定BJS 2017161范围本方法规定了保健食品中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺含量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于营养素补充剂类保健食品中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺含量的测定。
2原理试样经水提取后，采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。
3试剂和材料注：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1甲醇：质谱级。
3.1.2甲酸：质谱级。
3.1.3氨水：含量26%。
3.1.4冰醋酸。
3.1.5 浓盐酸。
3.1.6氨水（1+5）：量取100 mL 氨水（3.1.3）缓慢倒入500 mL 水中，混匀。
3.1.7 盐酸（0.01 mol/L）：吸取9 mL 浓盐酸（3.1.5），溶于1000 mL 水中。
吸取该溶液50 mL，用水稀释并定容至500 mL。
3.1.8 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1 mL用水稀释至1 000 mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。
3.1.9 0.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1 mL用甲醇稀释至1000mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。
3.2标准品维生素B1（硫胺素盐酸盐）、维生素B2、泛酸（泛酸钙）、维生素B6（吡哆醇）、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.3标准溶液配制3.3.1标准储备液（1 mg/mL）3.3.1.1维生素B1标准储备液：称取维生素B1标准品（3.2）0.1 g（精确至0.000 1 g），用0.01 mol/L 盐酸（3.1.7）溶解并定容于100 mL棕色容量瓶中。
3.3.1.2维生素B2、生物素、叶酸标准储备液：分别称取生物素、叶酸标准品（3.2）0.1 g（精确至0.000 1 g），加入30 mL氨水（3.1.6）溶解，甲酸调节pH值至7.0后，用水转移并定容至100 mL棕色容量瓶中。
维生素B1、B2的定性实验
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与讨论 • 实验总结与建议
01 实验目的
了解维生素B1、B2的性质
1
了解维生素B1、B2的物理性质，如溶解性、颜色 等。
2
了解维生素B1、B2的化学性质，如酸碱性、氧化 还原性等。
3
了解维生素B1、B2的生物学活性及其在人体内的 生理功能。
学习定性实验的方法
学习如何设计实验方 案，选择合适的实验 材料和设备。
学习如何观察实验现 象，记录实验数据， 分析实验结果。
学习如何进行实验操 作，包括样品处理、 试剂配制、实验步骤 等。
掌握维生素B1、B2的检测技术
掌握维生素B1、B2的检测方法， 如荧光法、色谱法、生化法等。
掌握各种检测方法的原理、操作 步骤和注意事项。
黄色针状结晶
维生素B2在结晶状态下也呈黄色针状，同样具有 特定的光学性质。
旋光性
维生素B2同样具有旋光性，可被旋光仪检测。
氧化还原性质
维生素B2具有氧化还原性，易被氧化剂氧化，可 在还原环境中稳定存在。
定性实验的原理
利用维生素B1和维生素B2的化学性质进行检测
通过观察反应现象，如颜色变化、沉淀生成等，判断是否存在维生素B1或维生素B2。
通过观察颜色变化来判断是否存在维生素B1和B2。
02
实验步骤
按照实验指导书进行操作，包括样品的提取、试剂的配置、颜色变化的
观察等步骤。
03
实验结果
通过观察颜色变化，判断样品中是否存在维生素B1和B2。
对实验的建议和改进
试剂纯度
操作规范
建议使用高纯度的试剂， 以降低实验误差。
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量前言维生素B1又称盐酸硫胺或抗神经炎素, 化学名为４-甲基-３-［（２-甲基-４-氨基-５-嘧啶基）甲基］-５-（２-羟基乙基）噻唑鎓盐酸盐。
为白色结晶或结晶性粉末。
在酸性溶液中很稳定, 在碱性溶液中易被氧化和受热破坏。
遇光和热效价下降，故应置于遮光、凉处保存, 且不宜久贮, 具有维持正常糖代谢的作用，在临床上常用于防治缺乏维生素B1所致的脚气病，也用于神经炎、消化不良等症的辅助治疗[1] 。
近年来测定维生素B1片含量的方法较多，如高效液相法[2] 、荧光分光光度法[3] 、毛细管电泳电化学法[4] 、氧瓶燃烧电位滴定法[5] 等。
这些方法操作麻烦、实验时间较长。
紫外分光光度法仪器较便宜，普及度高且操作较简便，此外，维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱性基团，可与酸成盐[6] 。
维生素B1分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收峰，故本次选用紫外分光光度法测定维生素B1含量，根据朗伯-比尔定律，利用紫外吸收光谱来进行定量分析，方法准确、简便、重复性好。
1. 仪器与试药1.1仪器紫外分光光度仪，分析天平，25mL棕色容量瓶，移液管。
1.2 试药维生素B1片；维生素B1生化试剂BR；0.1mol·L -1 HCl（自制）2．实验方法与结果2.1 样品预处理取维生素B1片20片（标示量为10.0mg），总重为1.23921g，其平均质量为61.96mg，充分研磨并混匀，称取3份样品置于25mL棕色容量瓶中，3份样品质量各为10.53mg、10.28mg、10.27mg，加0.1mol·L -1 HCl定容至25mL备用。
2.2对照品溶液配制维生素B1对照溶液：在分析天平上精密称取维生素B1 10.90mg置于25mL 棕色容量瓶，加0.1mol·L -1 HCl定容至25mL，作为维生素B1对照品储备液。
液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素
液相色谱-质谱法测定运动饮料中9种水溶性维生素施煜;林加如;辛希奕;郑曼冰【摘要】建立液相色谱-质谱法快速测定运动饮料中维生素B1、维生素B2、泛酸、维生素B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺9种水溶性维生素的方法.样品用水超声提取后,采用ACQUITY HSS T3液相色谱柱分离,以0.1％甲酸甲醇-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用质谱多反应监测扫描模式的选择性和特异性定量.9种水溶性维生素的质量浓度与色谱峰面积分别在各自范围内具有良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999.当称样量为2.00 g,定容体积为50 mL时,方法检出限为0.0250～0.0625μg/g,测定下限为0.10～0.25μg/g.样品的加标回收率为90.0％～102.3％,测定结果的相对标准偏差为0.9％～3.2％(n=7).该方法简便、快速、准确、灵敏,适用于运动饮料中水溶性维生素的测定.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2018(027)005【总页数】5页(P29-33)【关键词】液相色谱-质谱法;运动饮料;水溶性维生素【作者】施煜;林加如;辛希奕;郑曼冰【作者单位】广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041;广东省汕头市质量计量监督检测所,广东汕头 515041【正文语种】中文【中图分类】O657.7运动饮料是根据人体运动后的生理代谢状态而配制的饮料，主要含有糖类、氨基酸、电解质、维生素等成分［1–2］，能够有针对性地补充人体运动时丢失的营养元素，可为机体补充水分、电解质和能量，有助于保持或提高机体运动能力，延缓运动性疲劳的产生［3–4］，其中水溶性维生素能够提高人体新陈代谢，将运动饮料中的糖类物质转化为热量，可舒缓心情，缓解紧张感，令人精力充沛，从而提高人体的运动动力，但维生素摄入过多会引起肝脏、肾脏的代谢负荷［5–6］。
检测维生素c和维生素b1的化学方法
检测维生素c和维生素b1的化学方法
检测维生素C和维生素B1的化学方法主要有以下几种：
1. 线性比色法：该方法是采用维生素C和二硝基苯肼在适当条件下反应生
成橙红色化合物，然后根据产物的吸收光谱进行定量测定。
2. 高效液相色谱法：该方法是利用高效液相色谱仪分离维生素C并测定其
峰面积或峰高值，再与外标品进行比较计算出维生素C的含量。
3. 滴定法：该方法是利用碘液与维生素C发生化学反应，在反应过程中当
溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。
根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。
4. 荧光法：该方法是利用荧光光度计记录维生素C在特定波长下的荧光强度，通过与标准品比较，计算出样品中维生素C的含量。
5. 钼蓝比色法：该方法是利用维生素C与钼酸铵在酸性条件下反应生成蓝
色络合物（钼蓝），在660nm处有最大吸收，通过比色法测定样品中维生素C的含量。
6. 碘滴定法：该方法是利用碘和还原性维生素C反应，根据消耗的碘的量，可以计算出被测物质中还原性维生素C的含量。
这些方法各有优缺点，选择合适的检测方法取决于实验目的、样品类型和实验室条件。
维生素B1片的含量测定以及方法验证2
原有量mg
加入量mg
测得量mg
回收率mg
取供试品20片，精密称定，称取片粉适量（约相当于 维生素B125mg），一式5份，置100mL容量瓶中，加 盐酸溶液（9 → 1000）适量，振摇15min，再加盐酸 溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量 取滤液5mL，置另一100mL量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素 B112.5mg/mL的供试品溶液。另取维生素B1对照品适 量，用盐酸溶液（9 → 1000）稀释制成12.5ug/mL的 对照品溶液。照分光光度法在246nm处分别测定供试 品溶液和对照品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品 比较法分别进行计算，即得
浓度μg/mL 吸光度
7.5
10.0
12.5
15.0
17.55.91ug/mL的溶液，分 别在-20℃、-4℃、室温放置0min、15min、 30min、45min、60min、75min，然后在 246nm波长测的吸光度。
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约 相当于维生素B115mg），置100mL棕色容量瓶中， 共称9份。其中3份分别加入浓度为70.29ug/mL， 对照液50mL，3份分别加入浓度为101.53ug/mL， 对照液50mL，加盐酸溶液（9到1000）至刻度， 摇匀，精密量取上述溶液5.0mL置100mL量瓶中， 加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀，在 246nm的波长处测吸光度，计算含量，并求回收 率。
维生素B1
精密称取相当于维生素B1片粉25mg，置于100mL 量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）约70mL，摇 匀15min使维生素B1溶解，加同种溶剂稀释至刻度， 摇匀，用干燥滤纸过滤，精密量取5mL，置于一 100mL量瓶中，加同种溶剂稀释至刻度，摇匀，用 紫外分光光度法，在246nm波长测定吸收度，计 算含量。