克痛灵的毒性试验
克痛药膜皮肤给药的安全性评价
术刀作 井字形划破表皮 ， 以皮 肤 出现 轻微渗血 为度 ， 于破损
皮肤制备 当天开始实验。将克痛 药膜 （ １ ｍ ｌ ／ 只） 直接 涂于家
兔 背部 两侧脱 毛的皮 肤 区域 ， 赋 形 剂组 涂 以赋形 剂 （ １ ｍ ｌ ／ 只） ， 每 日３次 ， 观察家兔 的一般 活动表 现 ， 皮肤 黏膜 、 食量、 二便及 全身 中毒和死亡情况。每只家兔分笼饲养 ， 并 固定家 兔颈部 ， 以免舔食背部药 物 ， 使克痛药膜在背部保持完整 ， 并
主题词
克痛药膜／ 毒性
皮肤刺激性试验
投 药， 皮肤
兔
豚 鼠
克痛 药膜 系按涂膜剂 的剂型 开发的新 制剂 ， 由元胡 、 自
芷、 姜黄 、 大黄 、 焦栀 子、 黄柏 、 重楼 、 水 蛭、 莪术 、 血竭 、 冰片等 中药的 ６ ５ ％ 乙醇 提取液 以 Ｐ Ｖ Ｐ—Ｋ ３ ０为成 膜 基质 ， 添 加氮 酮、 甘油研制而成 的中药涂膜剂 ， 具有活血化瘀 、 消肿止痛等 作用。克痛药膜经患处 局部喷涂 ， 在肌 肤表面 片刻成膜 ， 不
检 查脱 毛部位皮肤是否因脱毛而受伤 ， 受伤皮肤不做完整皮
肤 的毒性试验 。 破损皮肤组 的家兔在皮肤消毒后 ， 用消毒手
取豚鼠 ３ Ｏ只 ， 雌雄 各半 ， 分为 ３组 ： 赋形 剂组 、 克 痛药膜 组、 ２ ， ４一二硝基 氯苯组 ， 每组 １ Ｏ只 。给 药前 ２ ４小 时 ， 将 豚 鼠背部两侧脱毛 ， 去毛 范围 ３ ｅ ｍ× ３ ｅ ｍ。致敏 接触 ： 将 受试
１ ． １ 动物
新西兰兔 ， 体重 （ ２ ． ０±０ ． ２ ） ｌ 【 ｇ ； 豚鼠， 体重 （ ２ ２ ０
±３ ０ ） ｇ ； 均由浙江 中医药大学实验动物 中心提供。
复方止痛药抗炎镇痛的药效学研究和初步安全性评价
复方止痛药的抗炎镇痛的药效学研究和初步安全性评价（1）动物：小白鼠，18~20g（雌雄个半）（2）造模：镇痛：小鼠扭体法抗炎：二甲苯耳肿胀法小鼠扭体法镇痛试验：取小鼠50只，体质量(18-20)g，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，即受试组(灌服剂量分别为A（高）、B（中）、C（低） g/kg )、阳性药（复方金银花颗粒）(灌服剂量10 g/kg )、空白对照组(生理盐水0.9%)。
将受试药用纯化水制成质量浓度分别为A、B、C g/mL 的溶液备用；复方金银花颗粒用纯化水制成0．5 g/mL 的溶液备用。
按组别灌胃给药0．2mL/(10 g)或同体积的生理盐水，每日一次，连续6 d，于最后一次给药1 h后，腹腔注射0．6% 醋酸0．2 mL／只，记录15 min内小鼠的扭体次数。
二甲苯致小鼠耳肿胀试验：取小鼠50只，分组及给药方法同上，于最后一次给药1 h后，右耳涂以二甲苯0．05 mI ／只，左耳作对照。
15 min后小鼠脱颈臼处死，沿耳廓基线剪下双耳，用6mm打孔器冲下左耳和右耳对称部位耳片，用电子分析天平称重，右耳与左耳质量之差即为肿胀度，右耳质量减去左耳质量再比上左耳质量即为肿胀抑制率。
（肿胀度抑制率=（给药组肿胀率-对照组肿胀率）/对照组肿胀率）(3)慢性毒性实验：方法和急性毒性试验基本相同，按小白鼠体重计算，在口服或腹腔注射剂量上为人用剂量的20－50倍，连续用3个月。
在用药期间，仔细观察试验动物的体重、进食量、进水量的变化，以及有无不良反应或死亡。
动物在试验前后，均应做血象、肝、肾等功能检查，以做对照。
试验中死亡或试验完毕的动物都要做解剖，观察内脏器管和组织切片检查。
根据试验结果，判断可否用于临床。
【注】①慢性毒性试验要设对照。
这是由于的饲养环境和健康情况的不同个体差异往往很大，给药后内脏的变化如无空白对照组做比较，常使实验结果难以判断。
②非经口服的药品，应注意须灭菌后作用，以免动物被染而影响结果。
医院制剂苗药伤科止痛液急性毒性实验研究
医院制剂苗药伤科止痛液急性毒性实验研究摘要】目的：本次试验对苗药伤科止痛液的急性毒性试验和皮肤刺激性试验进行研究。
方法：结合临床用药实际，考察多次用药于SD大鼠完整皮肤急性毒性的情况和对家兔完整皮肤的刺激性情况。
结果：连续给药14天后，动物均存活；大鼠外观、行为、呼吸状态、体位及姿势、对刺激的反应、大体剖检均未见明显异常；家兔皮肤均无水肿、渗血、炎细胞浸润等皮肤刺激性病理改变。
结论：在本次苗药伤科止痛液大鼠皮肤急性毒性试验中，大鼠给予最大给药量23.2g/kg体重，相当于临床用药量的200倍，未见明显毒性反应；药物对家兔多次皮肤刺激，肉眼观察未见实验动物皮肤充血、水肿，病理切片检查也未见刺激性病理变化，表明苗药伤科止痛液临床使用较安全，为临床应用提供了实验依据。
【关键词】苗药伤科止痛液；急毒实验；皮肤刺激性实验【中图分类号】R285 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）31-0336-02The hospital preparations miao medicine experience analgesic liquid acute toxicity experiment Wang XiaAffiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550003,China【Abstract】Objective The experiment of miao medicine &experience pain fluid to study the acute toxicity test and skin irritation test. Method With actual clinical medication, multiple drug use full skin acute toxicity in SD rats and the rabbit skin stimulus the full story. Results For 14 consecutive days, all animals survived; Appearance and behavior of rats, respiratory status, position and posture, response to stimuli, gross autopsy were not seen obvious abnormity; Rabbit skin no edema, bleeding, inflammatory cells infiltration skin irritation such as pathological changes. Conclusion The fluid in the miao medicine &experience pain rat skin acute toxicity experiment, the rat to give maximum dosage of 23.2 g/kg body weight, clinical dose equivalent to 200 times, no obvious toxic effects; Drugs of rabbit skin irritation for many times, macroscopic observation not seen experimental animal skin congestion, edema, pathological biopsy excitant pathological changes, not show that miao medicine &experience pain liquid clinical use is safe, provides experiment basis for clinical application.【Key words】Miao drug liquid experience pain; Urgent poison experiments; Skin irritation experiments“苗药伤科止痛液”是贵阳中医学院第二附属医院骨二科将传统苗医的医药理论与贵州道地药材相结合，配制以苗药为主的酊剂，由四块瓦、水冬瓜根皮等20余味中药组成，功效活血化瘀，消肿止痛。
急性毒性实验--生物谷
急性毒性试验(来源于生物谷)佚名试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。
一、啮齿类动物单次给药的毒性试验（一）试验条件1．动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。
选用其他动物应说明原因。
年龄一般为7-9周龄。
同批试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%。
实验前至少驯养观察1周，记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。
2．饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。
若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。
应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。
3．受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。
（二）试验方法：由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。
1．伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。
2．最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。
3．最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。
4．单次口服固定剂量方法（Fixed-dose procedure）。
选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。
实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。
如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。
根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。
镇痛药
氯胺酮用作麻醉药已有三十多年，由于副作用而使其应用受限。现已知其机制涉及多种受体，包括N－甲基－d－天冬氨酸（NMDA）和非－NMDA谷氨酸受 体，除此之外还有烟碱及毒蕈碱受体和阿片样物质受体。它与NMDA受体的非竞争性结合可能是主要的。氯胺酮不仅有麻醉和镇痛作用，当用其重复刺激脊髓背MDA受体有关。这使人们应用氯胺酮作超前镇痛产生很大兴趣。经验证明，静注小剂量氯胺酮复合硬膜 外吗啡可提高超前镇痛效果；硬膜外注射氯胺酮加吗啡和局麻药也可超前镇痛，但硬膜外注氯胺酮是否有脊髓毒性应进一步探索。小剂量静注氯胺酮（< 20 μg/kg/min）对术后镇痛有效。
阿片样物质受体产生的作用主要属抑制性，而激动剂则抑制腺苷酸环化酶（减少cAMP的生成），关闭N型电压控制的钙通道，开放钙依赖性钾离子通道，结果引 起超极化，从而降低神经兴奋性。另外，细胞内钙离子的改变也影响神经递质的释放和调节蛋白激酶的活性。据观察同时使用极小剂量的拮抗剂能显著增强阿片样物 质激动剂的镇痛效果，故应用超小量的纳络酮或纳美酚（长效吗啡拮抗剂）能显著减少病人术后吗啡用量，并减轻呕吐和瘙痒等副作用。
2非类固醇类抗炎药
（NSAIDs）通过抑制环氧化 酶（COX）而产生药理作用，COX有两种同工酶：COX－1和COX－2。应用NSAIDs治疗时的毒性作用大多是由抑制COX－1所引起，而抑制 COX－2有治疗作用。选择性抑制COX－2的化合物具有镇痛消炎作用，而且很少伴随胃和肾毒性。因为血小板上只有COX－1，因此选择性COX－2抑制 剂不影响止血功能。但越来越多的证据表明，这两种COX的生理病理的区别并不明显，其活性在很大程度上是交错重叠的。
(二) 阿片样物质与镇痛药
阿片样物质激动剂的主要副作用是呼吸抑制，它与κ受体相互作用则并不引起呼吸抑制，但 是，κ受体激动剂也产生另一系列副作用，包括对运动机能的损害、镇静、中枢神经系统失调及利尿等。最近报道首次应用新型μ、δ、κ混合阿片受体激动剂 （DPI 3290）对人体的研究，因为经动物实验已证实DPI 3290有很强的镇痛作用，但呼吸抑制却很小，所以对这种新阿片类药物需作进一步探索。另一种强效阿片类药物，14－甲氧美托酮，经狗实验已证实不引起呼 吸抑制，而且血压下降和心跳减慢也比舒芬太尼轻。14－甲氧美托酮很可能是μ和κ受体激动剂，因为其全部作用均可被纳曲酮拮抗。
克痛宁的分离纯化及其复方制剂工艺
克痛宁的分离纯化及其复方制剂工艺
曹宜生;刘志平;邓槐春;谢姣娥
【期刊名称】《华南国防医学杂志》
【年(卷),期】1994(0)4
【摘要】眼镜蛇神经毒素是一组小分子碱性蛋白,具有镇痛作用。
国内外研究得较早,早已有制剂用于临床,国外商品药名叫Cobro—xin,国内叫克痛宁。
克痛宁用于镇痛效果持久,不成瘾是其优点。
但起效缓慢、效能不太高的缺点,使其较长期来一直未能广泛应用。
且有的用后有轻微过敏症状及注射部位有硬结等,这可能是产品纯度不高的关系。
我们参考文献报道的离子交换柱层析分离纯化方法。
【总页数】3页(P31-33)
【关键词】制剂工艺;克痛宁;离子交换柱层析;分离纯化;眼镜蛇神经毒素;产品纯度;镇痛效果;碱性蛋白;镇痛作用;洗脱流速
【作者】曹宜生;刘志平;邓槐春;谢姣娥
【作者单位】军事医学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】TQ463
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1.大孔树脂分离纯化中药复方多糖的工艺研究 [J], 李赞阳;刘红;李炳奇;孙萍;谷新利
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蛇毒的应用
蛇毒的应用⒈蛇毒有何性质？蛇毒是毒蛇分泌出来的一种含有多种酶类的毒性蛋白质、多肽类物质，也是毒蛇咬人后引起中毒反应的物质。
新鲜的蛇毒为略带腥味的蛋清样粘稠液体，呈黄色、淡黄色、绿色，甚至无色。
新鲜时呈中性或弱酸性反应，放置稍久可变成碱性，含水量50%~75%，比重在1.030~1.080之间。
新鲜毒液接触空气易产生泡沫，室温下放置24小时易腐败变质，丧失起毒性。
冰箱中可以保持15~30天，在40℃保存时间较久，经过真空干燥或冷冻干燥处理后的蛇毒可于室温下保存20~30年，但毒性强度和一些酶的活性会不同程度的降低，遇水仍能溶解。
蛇读经紫外线及加热后毒性消失。
反能使蛋白质沉淀变性的强酸、强碱及重金属盐类，均能破坏蛇毒。
蛇毒还易受氧化剂、还原剂、蛋白水解酶类等的分解、破坏，从而失去其毒力。
经甲醛处理后也会丧失其毒性，但抗原仍能保留。
⒉蛇毒含有哪些成分？蛇毒的特点是成分复杂，不同的蛇种、亚种、甚至同一种蛇不同季节所分泌的毒液，其毒性成分仍存在一定的差异。
将蛇毒分离提纯，目前已知有神经毒素、心脏毒素、凝血毒素、出血毒素及酶类等主要成分。
此外，还含有一些小分子肽、氨基酸、碳水化合物、脂类、核苷、生物胺类及金属离子；其中一些具有生物活性，或与生物活性有一定关系。
蛇毒经纯化后，其毒性成分可比粗毒大5~20倍，毒性成分亦是各有不同。
⒊蛇毒有哪些药用价值？蛇毒有很高的药用价值。
药理研究证明，蛇毒中含有促凝、纤容、抗癌、镇痛等方面的药理功能成分。
能阻止和治疗中风、脑血栓的形成，还能治疗闭塞性脉经管炎、冠心病、多发性大动脉炎、肢端动脉痉挛、视网膜动脉、静脉阻塞等病症；蛇毒对缓解晚期癌症病人的症状亦有一定的作用，尤其是镇痛作用，已引起世人瞩目。
把蛇毒制成各种抗蛇毒血清，用于治疗各种毒蛇咬伤，有药到病除的显效，目前已得到广泛推广。
⒋蛇毒灾临床上有哪些应用？我国对蛇毒研究和临床应用的进展很快。
大量临床实践证明，蛇毒有以下的临床应用。
蛇毒及其生化效应
华南农业大学天然毒物的防范与利用——期末论文题目：蛇毒与其生化效应所在学院：经济管理学院专业班级：经济学类12级14班学号： 201231141408学生姓名：黎雁清任课老师：田永清蛇毒及其生化效应姓名：黎雁清学号：201231141408 专业：经济学类内容摘要：蛇广泛分布于世界各地，种类繁多。
自古以来，蛇毒一直是传统中医使用最广泛的中药材之一。
因此，对蛇毒中的生物活性成分的研究与开发一直是基础医学和制药工业关注的重要研究领域。
但毒蛇的种类繁多，结构复杂，中毒后的作用方式和反应都不同，所以，了解一些中毒后的救治措施还是很有必要的。
关键词：蛇毒；蛇毒成分；蛇毒的应用一、蛇毒的性质蛇毒是毒蛇的毒腺中分泌出来的一类含有多种酶类的毒性蛋白质, 是毒蛇咬伤后引起中毒的物质。
新鲜的蛇毒为略带腥味的蛋清样粘稠液体, 呈黄色、淡黄色、绿色、甚至无色。
新鲜的蛇毒呈中性或弱酸性反应, 久置可变为碱性。
蛇毒含水约50% ~ 75%, 密度为1. 03~ 1. 08之间。
新鲜毒液接触空气会产生泡沫, 室温下放置24h易腐败变质, 丧失毒性, 冰箱中可保存15~ 30d, 经过真空干燥或冷却干燥处理后的蛇毒在室温下可保存20~30年,但毒性强度和一些酶的活性会不同程度降低【1】。
蛇毒经紫外线照射或加热后毒性会剧减甚至消失, 凡能使蛋白质变性的强酸、强碱及重金属盐类均能破坏蛇毒的结构, 蛇毒还易受氧化剂、还原剂、蛋白质水解酶等的分解破坏从而失去毒性, 经甲醛处理后的蛇毒也会丧失毒性, 但抗原的免疫原性仍能保留【2】。
二、蛇毒的成分及毒理作用蛇毒的主要成分是有毒蛋白质、酶和多肽, 此外还含有小分子肽、氨基酸、碳水化合物、脂类、核苷酸、胺类及金属离子等。
蛇毒的特点是成分复杂, 不同的蛇种, 亚种, 甚至同一种蛇不同季节所分泌的蛇毒毒素成分也有差异。
目前已知的蛇毒主要有神经毒素、心脏毒素、凝血毒素、溶血毒素和细胞毒素等【3】。