高铁血红蛋白还原检测试剂盒(微板法)
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g；
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM；
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同，该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml，则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g； 0.3mM 的抗氧化物质，其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项： 1、 实验材料应尽量新鲜，样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行；如取材后不能立即 检测，也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难，亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称 T-AOC Assay Kit，是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法，其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ，呈现出明显的蓝色(紫色)，于 593nm 处有最大 的光吸收，在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力，由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素，并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM，因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应，本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液，细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
高铁血红蛋白鉴定试验
高铁血红蛋白鉴定试验1. 介绍高铁血红蛋白鉴定试验是一种用于检测高铁血红蛋白症的方法。
高铁血红蛋白症是一种罕见的遗传性疾病，患者的血液中存在异常形式的血红蛋白，导致氧气无法正常运输到身体各个组织和器官中。
2. 疾病背景高铁血红蛋白症是由HbM基因突变引起的。
正常情况下，人体内的血红蛋白主要由两种类型组成：氧合态（Fe2+）和去氧态（Fe3+）。
然而，在高铁血红蛋白症患者中，还存在一种异常形式的血红蛋白——高铁血红蛋白（MetHb），其中铁原子处于氧合态（Fe3+）。
由于高铁血红蛋白无法有效地与氧结合，患者体内无法正常运输氧分子。
这导致了一系列严重的健康问题，包括氧气供应不足、缺氧、疲劳、心血管疾病等。
3. 高铁血红蛋白鉴定试验原理高铁血红蛋白鉴定试验主要基于比色法。
该方法利用高铁血红蛋白与某种化学物质（如亚硝酸钠）反应产生的特定颜色进行判断。
具体步骤如下： 1. 取患者的静脉血样本。
2. 加入一定量的亚硝酸钠溶液，使高铁血红蛋白还原为正常的氧合态血红蛋白。
3. 加入某种指示剂（如二甲基苯胺），与还原后的血红蛋白反应生成特定颜色。
4. 通过比色计或分光光度计测量样本中的吸光度，进而确定高铁血红蛋白的含量。
4. 实验操作步骤4.1 准备工作•洗手并佩戴手套。
•准备所需试剂和设备：亚硝酸钠溶液、二甲基苯胺、比色计或分光光度计等。
4.2 样本处理1.取患者的静脉血样本，注意采用无菌操作。
2.将血样倒入试管中，避免气泡的产生。
3.加入适量的亚硝酸钠溶液，使高铁血红蛋白还原为正常的氧合态血红蛋白。
4.3 指示剂反应1.加入适量的二甲基苯胺指示剂。
2.震荡混合，确保试剂均匀分布。
4.4 比色测定1.将试管放入比色计或分光光度计中。
2.设置所需波长，并记录基准吸光度（如果需要）。
3.测量样品的吸光度值。
5. 结果解读通过测量样品的吸光度值，可以得到高铁血红蛋白的含量。
根据一般情况下正常人体内高铁血红蛋白含量较低，可以将其作为参考标准。
谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测试剂盒说明书 微量法
北京索莱宝科技有限公司谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1165规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体120mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入2.0mL蒸馏水，混匀。
产品说明：GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，GR是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一（通常昆虫中GR被TrxR取代）。
GR催化NADPH还原GSSG生成GSH，有助于维持体内GSH/GSSG比值。
GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用，此外GR还参与抗坏血酸－谷胱甘肽循环途径。
GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH，同时NADPH脱氢生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，相反NADP+在该波长无吸收峰；通过测定340nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率，从而计算GR活性。
自备仪器和用品：低温离心机、水浴锅、移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：称约0.1g组织，加入1.0mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm4℃离心10min，取上清液，待测。
二、GR测定操作：1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于25℃（普通物质）或者37℃（哺乳动物）中预热30min以上。
3.空白管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL试剂二，20μL试剂三，170μL试剂一，于340nm 测定10s和190s吸光度，记为A空1和A空2。
第1页共3页4.测定管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL试剂二，20μL试剂三，20μL上清液，150μL试剂一，于340nm测定10s和190s吸光度，记为A测1和A测2。
酶标仪微板凝集法检测血型的应用
酶标仪微板凝集法检测血型的应用建立Rh阴性稀有血型库需要从大量献血者中筛查，工作量大、检测成本较高。
而检测R h血型采用经典的试管法操作繁琐、肉眼判断结果缺乏客观性，不适合于大批量标本的检测；采用平板法也存在试验敏感性不足和不易标准化操作的缺点。
针对上述缺点，笔者经反复摸索，建立了微孔板—酶标仪微量法（微板法），经常规8650份标本的检测，符合率为100%。
1 材料与方法1.1 标本经EDTA-K2抗凝的无偿献血者全血标本。
1.2 试剂抗-D血型（中山生科公司）。
1.3 器材平底微孔反应板（国产）；ID2S-2型平板离心机；TITRAMAX 1011型振荡仪；Multis Kan MK3型酶标仪；进口微量移液器。
1.4 方法微板法：将抗-D血清25μl和稀释成一定比例的待检红细胞10μl加到平底微孔反应板中，用振荡仪在一定条件下振荡均匀，再经平板离心机以1000r/min，离心1min，再用振荡仪在一定条件下振荡悬浮。
凝集的红细胞块散于孔底，不凝集的红细胞呈混悬状态。
用酶标仪630nm波长自动扫描，获取每孔的相对透光率（Tc）。
试管法和平板法同常规血型鉴定方法。
2 结果2.1 振荡条件的选择在混匀及悬浮过程中各选8标本（阴、阳性标本各4孔），在微孔中用上述方法加入抗-D血清和红细胞，用5、6、7档不同振幅，振荡时间分别为5、1 0、15、20、25、30s，振幅大小与震荡时间成反比，最终选择混匀条件6档振幅15s，悬浮条件6档振幅20s。
2.2 凝集试验与非凝集试验结果与透光率的关系选40个凝集（Rh阳性）和20个非凝集（Rh阴性）标本，自然沉降后取红细胞从原浓度到1∶32稀释度做倍比稀释，然后每孔按上述方法重复测3次，得到每孔的平均Tc，见表1。
凝集试验中红细胞从原浓度到1∶3 2稀释度时与透光率呈线形关系（n=4，tr=0.98＞t0.01（4）=0.917,P＜0.01）；非凝集试验中红细胞从原浓度到1∶32稀释度时与透光率虽不是线形关系（n=3，tr=0.49＜t0.01（3）=0.959,P＞0.01），但其值在一定范围内波动，且随着稀释度的升高，透光率很快上升。
高铁血红蛋白还原试验比色法
高铁血红蛋白还原试验比色法1.实验原理有足量的NADPH存在下，反应液中的高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶（即细胞色素b”亦称黄酶素）还原成（亚铁）血红蛋白。
在体外，这一还原过程还需要递氢体亚甲基蓝的参与。
当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（GJD）含量正常时，由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH的数量足以完成上述还原反应。
当红细胞内GPD含量不足或缺乏时，高铁血红蛋白还原速度减慢，甚至不6能还原。
高铁血红蛋白呈褐色，在波长635nm处有吸收峰，可用分光光度计加以测定。
2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2类型：枸檄酸钠抗凝血（葡萄糖20mg）。
2.3标本采集：在试管中加入葡萄糖20mg,109mmo1∕1枸椽酸钠溶液0.2m1,静脉血1.8m1,混匀。
3.标本存放标本不宜存放。
4.标本运输常温条件下运输。
5.标本拒收标准抗凝剂不符合的、细菌污染的标本。
6.实验材料6.1.0.18mo1∕1亚硝酸钠和0.28mo1∕1葡萄糖混合溶液亚硝酸钠1.25g+葡萄糖5.Og+蒸储水加至100m1；贮存于棕色瓶中，放4℃冰箱，可保存1个月o6.20.4mmo1∕1亚甲基蓝溶液亚甲基蓝（含3个结晶水）0.15g+蒸储水加至100m1；先将亚甲基蓝放入乳钵中，加蒸储水少量研磨，待溶解后移到IOOm1容量瓶中，再加蒸储水至IoOnII 混匀过滤，此液可贮存3个月。
6.1.30.02mo1∕1磷酸盐缓冲液（pH7.4）磷酸氢二钠229.5mg+磷酸二氢钾52.2mg+蒸储水加至IOOn1I（或用0.0667mo1∕1pH7.4磷酸盐缓冲液稀释3倍。
6. 1.4109Imno1/1枸檬酸钠溶液（32g∕1）.7.仪器722分光光度计，使用方法见其操作与维护规程.SOP文件。
8操作步骤8.1将标本离心15min取出，调整血细胞与血浆比例为1:1后再混匀。
8.2取上述抗凝血1m1,加亚硝酸钠葡萄糖混合溶液和亚甲基蓝溶液各0.05m1,颠倒混合15次，使与氧气充分接触，加塞后放37。
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法)
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)简介：谷胱甘肽(glutathione ，GSH)存在于几乎身体的每一个细胞，参与细胞许多功能活动，是一种氧自由基消除剂。
还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)(Glutathione Assay Kit)是一种简单易行的检测还原型谷胱甘肽的试剂盒，其检测原理是待测样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)与发色底物DTNB 反应，产生稳定黄色的TNB 和GSSG ，获得样品的GSH 含量。
该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中还原型谷胱甘肽(GSH)含量。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 配制GSH 标准储存液：取10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH 2O ，溶解并混匀，即为还原型GSH 标准储存液(10mM)。
一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
2、 配制GSH 检测工作液：按下表配制GSH 检测工作液。
1个样品 10个样品 50个样品 GSH assay buffer 0.2ml 2ml 10ml DTNB 储存液2.5μl25μl125μl3、 配制NADPH 工作液：在本试剂盒提供的10mg NADPH 中加入1ml ddH 2O ，溶解并混匀，即为NADPH 储存液(10mg/ml)。
4、 准备样品：① 红细胞或血浆样品的制备：请尽量使用新鲜的血液进行测定。
离心，沉淀为红细胞，上清为血浆。
对于红细胞，用PBS 洗涤两次。
取约5红细胞沉淀或血浆，加入蛋白沉淀编号 名称TO1036 100T Storage试剂(A): 还原型谷胱甘肽(GSH)标准 10mg 4℃ 避光 试剂(B): GSH assay buffer 100ml RT 试剂(C): DTNB 10mg RT 避光 试剂(F): DMSO 1.5ml RT 避光 试剂(G): ddH 2O 30mlRT 避光 使用说明书1份工作液，充分Vortex振匀。
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)简介：铁是人体必需微量元素，总含量约为3270mg 。
铁分布较广，有67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中，参与铁的运输；骨骼和肌红蛋白中各存在2.59%和4.15%，储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合，因此测定血清铁时，首先需要Fe 3+与转铁蛋白分离。
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测，在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来，再被还原剂还原为Fe 2+，后者与亚铁嗪生成紫红色化合物，通过酶标仪检测562nm 处吸光度值，适用于检测血清、血浆样品中的总铁含量，即为总铁结合力(TIBC)。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：操作步骤(仅供参考)：1、 制备处理样品铁溶液和铁标准工作液。
4℃避光保存3个月有效。
2、 制备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于TIBC 的检测。
选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥有塞子的试管或者一次性无菌聚乙烯有盖子的离心管，离心，取上清液，待用。
3、 TIBC 检测：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥的试管或者一次性无菌聚乙烯的1.5ml 离心管，按下表操作。
编号 名称TC1011 100T Storage试剂(A): 铁标准(100μg/ml) 3ml 4℃ 避光 试剂(B): TIBC 铁标准稀释液 30ml RT 试剂(C): TIBC Assay buffer 25ml 4℃ 试剂(D): 亚铁嗪显色液 1ml 4℃ 避光 试剂(E): ddH 2O 1ml RT 试剂(G): 铁吸附剂 3gRT 使用说明书1份加入物 空白孔 标准孔 测定孔 ddH 2O/μl 75 — — 铁标准(2μg/ml)/μl — 75 — 待测样品/μl — — 75 Fe Assay buffer/μl200200200混匀，于562nm处，以空白孔调零，读取测定管吸光度(即血清空白)。
血红蛋白测定试剂盒(SLS-Hb法)产品技术要求ruierda
血红蛋白测定试剂盒（SLS-Hb法）适用范围：该试剂用于体外定量测定人全血中血红蛋白的含量。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1试剂（R）：100ml×2(200测试)；2. 性能指标【产品性能指标】1 试剂空白试剂空白吸光度值≤0.006。
2 线性区间测量范围[25,200]g/L,相关系数r≥0.99；相对线性偏差≤12%。
3准确度回收率90%～110%4分析灵敏度血红蛋白150g/L测定吸光度≥0.3705 测量精密度a）重复性变异系数≤10%。
b）批间差连续三批血红蛋白试剂盒测定同份血红蛋白液，其测定值的批间差≤10%。
【包装规格】试剂（R）：100ml×2(200测试)【主要组成成分】试剂（R）缓冲液：0.04mol、十二烷基硫酸钠60g/L、稳定剂0.05 mol【产品性能指标】1. 试剂空白：试剂空白吸光度值≤0.0062. 线性区间：测量范围[25,200]g/L,相关系数r≥0.99；相对线性偏差≤12%。
3. 准确度：回收率90%～110%4. 分析灵敏度：血红蛋白150g/L测定吸光度≥0.3705. 精密度：a) 重复性：CV≤10％。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1 试剂（R）：100ml×2(200 测试)；校准品：2ml×1（选配）；质控品：2ml×1（选配）1.2 组成成份：试剂（R）：缓冲液 0.04mol、十二烷基硫酸钠 60g/L、稳定剂 0.05 mol校准品：水基质，氰化高铁血红蛋白浓度为125g/L（目标浓度）。
质控品：水基质，氰化高铁血红蛋白浓度为116.3g-133.8g/L。
注：校准品、质控品浓度具有批差异性，详见标签。
2. 性能指标2.1 外观试剂为无色透明无沉淀及絮状浮物溶液。
校准品质控品为棕褐色液体。
2.2 装量试剂净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白试剂空白吸光度值≤0.006。
2.4 线性区间测量范围[25,200]g/L,相关系数 r≥0.99；相对线性偏差≤12%。
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高铁血红蛋白还原检测试剂盒(微板法)
简介：
红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz 小体等检测，Leagene 高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用Schumm 法，其检测原理是在有足够的NADPH 存在下，高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白，当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时，由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内G6PD 含量不足或缺乏时，高铁血红蛋白还原速度减慢，甚至不能还原。
高铁血红蛋白呈褐色，用分光光度计在635nm 波长处检测。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 离心管或试管
2、 水浴锅或恒温箱
3、 96孔板
4、 酶标仪
操作步骤(仅供参考)：
1、 取新鲜静脉血，加入Hb 抗凝剂，充分混匀。
2、 低速离心，取出，调整血细胞与血浆比例后再混匀。
3、 取上述抗凝血200μl ，加入Hb Assay buffer 和Hb 显色液l ，颠倒混匀，使与氧气充
分接触，加塞或密封后放置于37℃水浴锅或恒温箱中孵育。
混匀，取上述血液4μl 加入G6PD buffer200μl 。
上述操作，可见下表：
加入物(μl)
空白管
测定管
编号 名称
TC0213 100T Storage
试剂(A): Hb 抗凝剂 10ml 4℃ 试剂(B): Hb Assay buffer 1.0ml -20℃ 试剂(C): Hb 显色液 1.0ml 4℃ 避光 试剂(D): G6PD buffer 20ml
4℃ 使用说明书
1份
抗凝血200 200
Hb Assay buffer －10
Hb显色液10 10
混匀，放置于37℃水浴锅或恒温箱中孵育3h。
取上述反应液 4 4
G6PD buffer 200 200
4、混匀，室温放置，用酶标仪测定空白管和测定管吸光度，分别命名为S A和B。
5、向空白管加入Hb Assay buffer 10μl，混匀，室温放置5min，用分光光度计处再次测
定空白管吸光度命名为S T。
计算：高铁血红蛋白还原率(%)={1-(S A-B)/(S T-B)}×100%
参考区间：一般应超过75%
注意事项：
1、红细胞比容低于30%时，高铁血红蛋白还原率显著下降，需调整红细胞与血浆的比例。
2、样本不应有凝血或溶血，以免影响测定。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson三色染色液
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。