获取DNA、RNA和蛋白质序列信息
(/sites/gquery)可 以访问GenBank中的序列记录,Entrez是一个灵 活的数据库检索系统,可以检索35个数据库。 Entrez数据库包含来源于GenBank和其它资源的 DNA和蛋白序列,还包括基因组图谱、种群、进 化和环境序列序列数据集、基因表达数据、NCBI 分类学、蛋白结构域信息和来源于Molecular Modeling Database(MMDB)的蛋白结构数据库, 每个数据库经由PubMed和PubMed Central与学术 文献关联。
• 用FTP获取GenBank • NCBI以传统的纯文本文件格式发布GenBank,还
以ASN.1格式用以内部维护。通过NCBI匿名FTP ()站点可以获得每两个月的全 文公告和每天与EMBL和DDBJ数据更新内容,还 可以从印第安纳大学的镜像站点(ftp:///biomirror/genbank/)下载。在 “genbank”目录中的“daily-nc”文件夹中可以获 得纯文本的更新数据压缩文件。在GenBank FTP 站点的“tools”目录中提供转换每日更新数据集的 脚本。
其他重要的核酸序列数据库:
• dbEST • ncRNAdb • miRBase
• dbEST是GenBank中的一个子数据库,包含
来源于不同物种的表达序列数据和表达序 列标签序列的其它信息。 • 非编码RNA(ncRNA)数据库旨在提供非编 码RNA的序列和功能信息。非编码转录物不 编码蛋白质,但在细胞中起调节作用。目 前,该数据库包含来源于99种细菌、古生 菌和真核生物的30000多条单个序列。 • miRBase序列数据库是主要存放已发表的 microRNA(miRNA)序列和注释的数据库。
EMBL数据库
• EMBL核苷序列数据库(http://
/embl/)是欧洲主要的核苷 序列收集单位。这个数据库是由欧洲生物 信息中心EBI(欧洲分子生物学实验室 (EMBL)在德国海德堡的站点)维护的。
• EBI核苷数据来自基因组测序中心、个别科
学家、欧洲专利局、以及与合作伙伴DDBJ (Japan)和GenBank (USA)交换的数据。为 了达到最佳的同步性,每天 DDBJ/EMBL/GenBank之间都要交换最新的 数据。用户只要进入三者中任意一个数据 库都能得到最新数据。这三个数据库之间 坚持统一的文件指导方针,规范了数据库 登录的内容和语法。这种指导方针确保了 这些数据库的信息以一种便捷的格式进行 交换,它与当今的生物信息学软件兼容, 反映了分子生物学领域的发展。
第二节 蛋白质序列数据库
• • •
• GenBank是具有目录和生物学注释的核酸序
列综合数据库, 由美国国家医学图书馆 (NLM)的国家生物技术信息中心(NCBI) 构建、维护和管理。该中心位于美国马里 兰国家健康研究所(NIH)。NCBI构建 GenBank数据库的序列数据来至序列发现者 提交的序列、批量提交的表达序列标签 (EST)、基因组测序序列(GSS)和其它 测序中心的高通量数据,以及美国专利商 标局提供的已发表专利的序列数据。
DDBJ数据库
• 日本DNA数据库(DDBJ)是在亚洲唯一的核酸序
列数据库,是公认搜集研究者获得的核酸序列数 据库,并且,发放给数据提交者国际认证的核酸 序列编号。由于DDBJ每天将搜集的数据与EMLBank/EBI和GenBank/NCBI进行交换,使得三个核 酸数据库几乎在任何时候都享有相同数据。这种 几乎统一的数据库被称作“国际核酸序列数据库 (INSD)”。DDBJ主要收集来自日本研究者获得 的序列数据,但也收集数据和发放编号给任何其 它国家的研究者。
生物信息学(tics)
• 在生命科学研究中发展起来的一门由分子
生物学和计算机信息处理技术相结合,以 计算机为工具对生物信息进行储存、检索、 传播、模拟和分析的交叉学科,它利用数 据库技术和软件技术对大量积累的生物大 分子序列数据和实验测定的序列进行比较 和分析,揭示出生物大分子的分子结构、 功能和进化关系以及基因组构成与基因表 达等生物学事件对生命活动的影响。
根据数据库存储的内容可将生物信 息学数据库分为:
• 核酸、 • 蛋白质、 • 基因图谱、 • 结构、 • 文献等数据库
第二节 核酸序列数据库
• 一、GenBank数据库 • GenBank 是一个综合数据库,该数据库中
包含了已经公开的260000余种不同物种生 物的核酸序列,这些数据主要是由全世界 不同实验室和大规模测序计划提交给 GenBank的。
生物信息数据库种类 :
• 基因组数据库、 • 核酸和蛋白质一级结构序列数据库、 • 生物大分子(主要是蛋白质)三维空间结
构数据库、 • 以上述三类一次数据库和文献资料为基础 构建的二次数据库。
一次、二次数据库特点
• 一次数据库的数据量大、更新速度快、用
户面广,存在过多的甬余数据。 • 而二次数据库的容量比较小,更新速度也 没有一次数据库那样快,经过筛选后,避 免了过多的甬余数据。
• GenBank、EMBL、DDBJ组成国际核酸序列
数据库合作组织(INSDC),该组织成员远 程合作,每天相互交换数据以保证序列信 息的一致性和完整性。
检索GenBank数据
• Entrez检索系统 • BLAST 序列相似性搜索程序 • 用FTP获取GenBank 数据库
• Entrez系统 • 使用Entrez
• BLAST 序列相似性搜索 • 序列相似性搜索是GenBank数据最基本和使
用最多的分析方式。NCBI提供BLAST (/Blast.cgi) 系列程序检测一条查询序列与数据库所有 序列的相似性。BLAST搜索可以在NCBI网 站上运行,也可以在FTP站点下载独立的程 序集运行。
遗传信息的获取与分析
遗传信息的获取与分析遗传信息,是生物体遗传基因组中的重要组成部分,包括基因序列信息、基因表达信息、遗传变异信息等。
获取和分析遗传信息,是现代生物学科研的重要方向之一。
本文将从生物样品采集、DNA/RNA提取、基因测序、生物信息学分析等方面,介绍遗传信息的获取与分析过程。
一、生物样品采集样品采集是遗传信息获取的第一步。
不同生物样品的采集位置和方式不同,影响提取遗传信息的质量和效率。
比如,人类血液可以在静脉或指尖采集获得,而动物组织可以在屠宰场或动物实验室收集。
常见的生物样品包括外周血、组织、细胞、体液、粪便、土壤等。
在样品采集过程中,要注意保持样品的完整性和新鲜度,避免外部污染和自身降解。
二、DNA/RNA提取DNA和RNA是遗传信息的物质基础,它们存储和传递生物信息。
DNA包含人体的基因组,是人类遗传疾病的基础。
RNA则参与基因的转录和翻译,负责蛋白质的合成。
因此,DNA/RNA的提取是重要的遗传信息获取步骤。
DNA/RNA提取方法有多种,如化学法、机械法、磁珠法等。
其中,化学法是常用的方法之一。
其基本原理是将细胞裂解,使细胞内DNA/RNA与其他细胞成分分离。
主要使用酚-氯仿法、盐法、商业试剂盒等方法进行DNA/RNA提取。
此外,为了提高DNA/RNA的质量和纯度,还需要进行DNA/RNA检测和后续处理。
三、基因测序基因测序是遗传信息获取的重要手段之一。
它包括全基因组测序、外显子测序、RNA测序等项目。
通过基因测序可以获取基因序列、表达模式、遗传变异信息等,对生物学研究、医学诊断和药物开发等方面具有重要价值。
目前,常用的基因测序技术主要包括Sanger测序、下一代测序(NGS)和第三代测序技术。
Sanger测序是一种传统的标准测序技术,能够准确地检测单核苷酸变异或插入缺失等小的变化。
NGS技术则包括Illumina,454 Roche,Ion Torrent和Pac Bio等,它们具有高通量,快速且相对便宜的优点。
二代基因测序流程和试剂
二代基因测序流程和试剂的步骤和流程引言二代基因测序是一种高通量、高效率的基因测序技术,能够大规模地获取DNA或RNA的序列信息。
本文将详细描述二代基因测序的流程和试剂的步骤和流程,确保流程清晰且实用。
流程概述二代基因测序的流程可以分为样品准备、DNA或RNA提取、文库构建、聚合酶链式反应(PCR)、测序和数据分析等步骤。
下面将详细介绍每个步骤的具体操作和试剂使用。
1. 样品准备样品准备是整个二代基因测序流程的关键步骤,合理的样品准备可以保证后续步骤的顺利进行。
样品可以是组织、细胞、血液等,需要根据研究目的进行选择。
样品准备的步骤包括:1.1 样品收集根据研究目的选择合适的样品,并采用合适的方法进行收集。
例如,对于组织样品,可以通过手术获取;对于细胞样品,可以通过培养或离心分离等方法获取。
1.2 样品保存采集后的样品需要及时保存,以防止样品质量的降低。
常用的保存方法包括冷冻保存和固定保存。
冷冻保存可以使用液氮保存或低温冰箱保存,固定保存可以使用甲醛等试剂进行固定。
2. DNA或RNA提取DNA或RNA提取是获取样品中的核酸的关键步骤,常用的提取方法包括酚-氯仿法、盐酸法和商用试剂盒法等。
下面以商用试剂盒法为例进行介绍:2.1 样品裂解将样品加入裂解缓冲液中,通过离心等方法使细胞或组织破碎,释放出DNA或RNA。
2.2 蛋白酶处理加入蛋白酶将样品中的蛋白质降解,以便后续纯化DNA或RNA。
2.3 DNA或RNA纯化将裂解液加入商用试剂盒中,通过离心等方法将DNA或RNA与其他杂质分离。
根据试剂盒的不同,可以使用硅胶膜或磁珠等材料进行纯化。
2.4 洗脱DNA或RNA将纯化后的DNA或RNA从硅胶膜或磁珠上洗脱下来,得到纯化后的DNA或RNA。
3. 文库构建文库构建是将提取到的DNA或RNA转化为测序所需的文库,常用的文库构建方法包括PCR文库构建法和片段文库构建法。
下面以PCR文库构建法为例进行介绍:3.1 DNA片段制备将提取到的DNA通过限制性内切酶或超声波等方法制备成适当的片段。
生物信息学中的DNA和RNA序列分析方法
生物信息学中的DNA和RNA序列分析方法随着生物研究的发展,生物信息学逐渐成为了一个十分重要的学科领域,DNA和RNA序列分析是其中较为重要的一个方面。
DNA和RNA是生物体中的核酸,它们携带了生命的遗传信息,而对这些信息进行解读和分析就需要运用到生物信息学。
本文将为大家介绍生物信息学中的DNA和RNA序列分析方法。
一、基础知识在深入了解DNA和RNA序列分析方法之前,我们需要先了解一些基础知识。
1. DNA和RNA的基本结构DNA双链螺旋结构由核苷酸组成,其中核苷酸由磷酸、五碳糖核糖或脱氧核糖和一种氮碱基组成。
常见的氮碱基有腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)和胞嘧啶(C)。
RNA是由核苷酸组成的单链分子,比DNA少了胸腺嘧啶,而是由尿嘧啶(U)取代了。
2. DNA和RNA的编码DNA编码了基因信息,而RNA通过转录形成mRNA,再到翻译形成蛋白质。
在转录过程中,mRNA中的氮碱基按照特定的规则与DNA上的氮碱基匹配,即腺嘌呤与尿嘧啶配对,鸟嘌呤与胞嘧啶配对。
这种配对方式被称之为互补配对。
RNA与DNA的互补配对非常重要,因为它决定了RNA能够识别和复制DNA中的信息。
二、DNA和RNA序列分析方法DNA和RNA序列分析方法主要有以下几种。
1. 序列比对序列比对是指将两个或多个序列进行比较,找出它们之间的相似处和差异。
序列比对是进行生物信息学研究的基础,也是DNA 和RNA序列分析的核心方法。
序列比对有两种类型,全局比对和局部比对。
全局比对一般用来比较两个完整的序列,例如蛋白质序列。
局部比对一般用来比较一个序列中的一小段与另一个序列中的一小段。
2. 序列注释序列注释是指将序列上的功能信息注释到序列上。
一般情况下,序列注释会包括以下几个方面的信息:基因结构,包括外显子、内含子、UTR等;转录因子结合位点、启动子和增强子等调控元件;蛋白质结构,包括功能和结构域等;翻译起始和终止位点等。
序列注释需要利用已知的信息,例如已知的基因、蛋白质和调控元件等数据库信息。
NCBI功能详介
NCBI功能详介NCBI(National Center for Biotechnology Information)是美国国家生物技术信息中心,是全球最大的生物信息学数据库之一,也是生物医学研究领域最重要的资源之一、NCBI提供了广泛的生物学和医学数据库和工具,以帮助科学家们进行基因组学、蛋白质学、遗传学、药物研发等方面的研究。
NCBI的主要功能包括:1. PubMed:NCBI的PubMed是最大的生物医学文献数据库。
它收录了全球范围内的生物医学文献,并提供了非常强大的功能,以帮助科学家们找到自己感兴趣的论文。
3. BLAST:BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)是NCBI 提供的一种重要的生物信息学工具。
它可以用来比对生物序列(如DNA、RNA或蛋白质序列),以找到相似的序列或已知的序列。
BLAST对生物学研究非常重要,可以用于序列比对、功能注释、物种分类等各种应用。
4. Entrez数据库:Entrez是NCBI提供的一种综合性数据库工具,可以用来访问和多个数据库,如PubMed、GenBank、Protein、Nucleotide等。
用户可以使用Entrez来查找和获取各种类型的生物学数据,如文献、序列、蛋白质结构等。
5. PubChem:PubChem是一个提供生物化学信息的数据库,包含大量的有关化合物的实验数据、化学结构、药物作用等信息。
它可以帮助研究人员进行药物发现、化合物筛选和毒性评估等方面的研究。
6. dbSNP:DBSNP(Single Nucleotide Polymorphism Database)是一个用于存储和查询单核苷酸多态性数据的数据库。
它收集了全球范围内各种不同物种的单核苷酸变异信息,包括单核苷酸变异的位点、变异类型、频率等。
7. GEO:GEO(Gene Expression Omnibus)是一个用于存储和共享基因表达数据的数据库。
生物信息学在生物学中的应用
生物信息学在生物学中的应用生物信息学是将计算机科学、数学和统计学等多个学科应用于生物学的交叉学科,该领域的出现和发展可以极大地改善我们对生命的理解和治疗方法的改良。
本文将讨论生物信息学在生物学中的应用及其未来的潜力。
一、序列数据分析序列数据分析是生物信息学中最重要的应用之一,它用于从DNA、RNA和蛋白质序列中获取基因组和蛋白质的结构和功能信息。
序列数据分析的一个重要方面是序列比对。
基于序列比对,可以建立基因家族、进化关系等信息,并预测新基因的功能、生物进化过程等。
生物信息学工具已经广泛应用于人类基因组计划、花粉图谱计划以及各种微生物基因组计划中。
例如,在人类基因组计划中,已经识别出了数万个基因并确定了它们的序列。
此外,研究人员还可以在全球范围内比较这些序列,以识别共享高度保守的区域和突变位点。
这种分析不仅使我们更好地了解人类进化历史,而且还帮助发现在不同疾病中的遗传基础。
二、分子模拟分子模拟是生物信息学的另一个重要方面,它用于预测蛋白质、DNA或RNA分子的结构和稳定性。
在分子模拟中,研究人员利用大量计算机资源模拟分子运动和相互作用,并预测最稳定的分子结构。
通过分子模拟,我们可以根据已知的结构域分析分子的稳定性和函数,并预测未知结构的分子的稳定性和函数。
此外,分子模拟还可以帮助发现有潜力治疗癌症、糖尿病和其他疾病的化合物和蛋白质。
例如,研究人员利用抑制剂对HIV病毒进行了分子模拟,从而成功预测了具有对病毒活性的靶标化合物。
三、系统发育学生物信息学还可以应用于系统发育学,即基于物种生物大分子序列的进化关系研究。
在系统发育学中,一组序列的分析可以揭示生物进化过程的相对方向和时间尺度,进而更好地理解物种之间的关系。
通过对各种代表物种基因组序列的比较,可以直接推断出这些物种之间的进化关系。
形成这些进化关系的多项事件中最重要的是突变和基因组重构。
此外,研究人员还可以通过与化石记录的突变事件的结合来了解物种在演化过程中的特定历史,从而建立进化树和物种分类。
blast用法
blast用法BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)是一种常用的生物信息学工具,用于在数据库中搜索和比对生物序列(如DNA、RNA、蛋白质等)。
以下是使用BLAST的基本步骤和用法:1. 准备输入序列:首先,准备待查询的序列数据。
可以是DNA序列、蛋白质序列或其他类型的生物序列。
2. 选择BLAST程序:根据要比对的序列类型,选择合适的BLAST程序。
常见的BLAST程序包括blastn(用于DNA比对)、blastp(用于蛋白质比对)、blastx(用于DNA与蛋白质相互比对)等。
3. 选择数据库:确定要在哪个数据库中进行比对。
BLAST提供了多个数据库选项,如NCBI提供的nr数据库(非冗余蛋白质序列数据库)。
4. 运行BLAST:使用命令行或图形界面工具,输入BLAST命令或设置相应的参数进行比对。
例如,可以使用以下命令运行blastp程序进行蛋白质比对:```blastp -query input.fasta -db database -out output.txt```其中,`input.fasta`是输入序列文件,`database`是要比对的数据库,`output.txt`是输出结果文件。
5. 解析和分析结果:BLAST运行完成后,会生成比对结果文件。
可以使用相应的工具或脚本来解析、过滤和分析结果,以获取所需信息(如相似性、E值、比对长度等)。
6. 结果解释和进一步分析:根据比对结果,可以进一步解释和分析序列的功能、同源性等信息。
可以使用其他生物信息学工具和数据库来进一步研究和验证结果。
需要注意的是,BLAST具有多个参数和选项,可以根据具体的研究目的和需求进行调整和优化。
建议参考相关的文档、教程或使用BLAST 提供的帮助命令(如`blastn -help`)来了解更多详细的用法和参数设置。
ncbi使用指导
NCBI使用指导1. 什么是NCBINCBI(National Center for Biotechnology Information)是美国国家生物技术信息中心,是一个提供生物信息学相关服务的综合性数据库和资源平台。
NCBI的目标是收集、存储和分析全球生命科学研究数据,并为科学家和研究人员提供免费的访问和使用。
2. 注册和登录要使用NCBI提供的服务,首先需要注册一个账号。
在NCBI的官方网站上找到注册页面,填写相应的信息并创建账号。
注册成功后,可以使用注册邮箱和密码登录。
3. 常用功能介绍3.1 数据库搜索NCBI提供了多个数据库,包括PubMed、GenBank、BLAST等。
在首页可以看到这些数据库的链接。
通过点击相应的链接,可以进入对应数据库进行搜索。
3.1.1 PubMedPubMed是一个包含生命科学和医学文献的数据库。
在PubMed上可以搜索相关文献,并获取摘要或全文。
使用方法: - 在搜索框中输入关键词,点击搜索按钮。
- 在搜索结果页面中可以按照时间、相关度等进行排序。
- 点击文章标题可以查看详细信息。
- 可以通过邮箱将文章发送给自己或他人。
3.1.2 GenBankGenBank是一个包含DNA序列和相关注释信息的数据库。
研究人员可以在GenBank中搜索并下载DNA序列。
使用方法: - 在搜索框中输入关键词,点击搜索按钮。
- 在搜索结果页面中可以按照时间、相关度等进行排序。
- 点击序列编号可以查看详细信息。
- 可以将序列下载到本地。
3.1.3 BLASTBLAST是一种用于比对DNA、RNA或蛋白质序列的工具,可以找到与输入序列相似的序列。
使用方法: - 在搜索框中输入待比对的序列。
- 选择相应的数据库和参数设置。
- 点击搜索按钮,等待比对结果。
3.2 数据上传与下载NCBI允许用户上传自己的数据,并提供了相应的工具和接口。
同时,用户也可以从NCBI下载他人共享的数据。
NCBI_功能详细介绍
NCBI_功能详细介绍NCBI(National Center for Biotechnology Information,国家生物技术信息中心)是一个提供生物医学和基因组学研究数据的资源库和数据库。
NCBI的主要目标是促进和推动生物医学研究的发展,并为科学家、医生和公众提供相关信息。
NCBI提供了各种各样的数据库和工具,用于存储、检索和分析生物医学和基因组学数据。
下面是一些NCBI提供的主要功能的详细介绍:2. GenBank:GenBank是一个基因序列数据库,存储了全球范围内的基因序列数据。
研究人员可以通过GenBank获得基因序列和相关信息,用于基因功能研究、进化分析和生物信息学研究。
3. BLAST:BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)是一种常用的序列比对工具,用于比对给定的DNA、RNA或蛋白质序列与NCBI数据库中的序列。
BLAST可以帮助研究人员确定新序列的相关性,并找到与其相似的序列。
4. Entrez:Entrez是一个综合性的引擎,可以对NCBI的不同数据库进行全文。
研究人员可以通过Entrez进行文献检索、基因和蛋白质注释、序列比对等操作,方便地获取各类生物学数据。
5. PubChem:PubChem是一个化学物质数据库,存储了数百万种化合物的化学结构和相关信息。
研究人员可以通过PubChem化合物的属性、药理学和毒理学数据,以及相关的文献信息。
6. OMIM:OMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)是一个遗传疾病数据库,提供了人类遗传疾病的基因和表型信息。
研究人员可以通过OMIM了解各种遗传疾病的发病机制、遗传模式以及相关基因的功能。
7. RefSeq:RefSeq是一个参考序列数据库,存储了各个物种的基因组和转录组序列。
RefSeq提供了基因的注释信息,包括基因的外显子、内含子、启动子、终止子等区域的序列。
5第五章现代分子生物学研究方法——DNA、RNA及蛋白质操作技术
DNA的基本操作技术——核酸凝胶电泳 以琼脂糖凝胶电泳为例:
DNA的基本操作技术——核酸凝胶电泳
凝胶浓度的高低影响凝胶介质孔隙的大小,浓度越高,孔隙越小, 其分辨能力就越强。反之,浓度降低,孔隙就增大,其其分辨能力 就越弱。
DNA的基本操作技术——核酸凝胶电泳
溴化乙锭(ethidium bromide,EB)能插入到DNA或RNA分子的相 邻碱基之间,并在紫外灯光照射下发出荧光,所以常用EB来检测凝 胶介质中的核酸条带。
x 25 中的聚合酶可能很多正处于复制状态,
如果此时降到室温,将会影响最终产 率。所以再留出5分钟,以使正在复制 中的DNA能够复制完全,以合成更多 的目的分子。
DNA的基本操作技术——重组载体构建 PCR完成之后,需要有什么操作?
DNA的基本操作技术——重组载体构建
DNA的基本操作技术——重组载体构建
转化(transformation):是指重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合 进入受体细胞(一般指细菌),并在受体细胞内稳定维持与表达的 过程。
转染(transfection):是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而 获得新的表型的过程。(与转化类似,只是受体细胞不同)
转导(transduction):是指通过病毒(如λ噬菌体)颗粒感染宿主细 胞将外源DNA分子导入到受体细胞内并稳定遗传的过程。
DNA的基本操作技术——聚合酶链式反应技术
DNA的基本操作技术——聚合酶链式反应技术
常用的PCR反应体系:引物、DNA聚合酶、dNTP、模板、缓冲液。
常用的PCR反应程序:
预变性 95℃ 3 min
变性 95℃ 30 s
退火 55℃ 30 s
x 25
延伸 72℃ 1 min
DNA的粗提取与鉴定PCR蛋白质的提取与分离
两个α-肽链 血红蛋白 两个β一肽链 四个亚铁红素基团
一、血红蛋白的提取和分离 1.分离生物大分子的基本思路:
选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
2.蛋白质分离和提取的原理:
根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多 少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等,可以用来分离不同种类的 蛋白质。
方法步骤 1.制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液
加入物质
目的 ① ② ③ ④ ⑤
2.提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1 蒸馏水 3.溶解细胞核内的DNA 4.析出含 DNA 的黏稠物 5.滤取含 DNA 的黏稠物 6.将 DNA 的黏稠物再溶解 7.过滤含 DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的DNA 冷却的 95%的酒精 50 mL A:(1)向试管中加入0. 015 mol /L 的 NaCl 溶液 5mL (2)加入 DNA 9.DNA 的鉴定 (3)4 mL 二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入0.015mol/L 的 NaCl 溶液 5mL 2 mol/L 的 NaCl 溶液 20 mL 2 m1/L 的 NaCI 溶液 40mL 蒸馏水
答:前者是溶解DNA,后者是使DNA析出
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答:D
4.提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液 中的上清液? 答:DNA的提取,关键是对杂质的去除,由于 上清液是血液中的血浆部分,不含DNA,所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
二、方法与过程
1.制鸡血细胞液(活鸡鲜血经分离或沉淀获得)
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中,玻棒搅拌, 离心、分离或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL 2.提取DNA。 ⑴.提取血细胞核物质: ①取血细胞5-10mL+20mL蒸馏水,用玻棒沿一个方向 快速搅拌。 ②纱布过滤:滤液中含DNA和其他核物质,如蛋白质。 ③原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速 搅拌,机械加速血细胞破裂。 ⑵.溶解核内的DNA: 滤液+2mol/L的NaCl溶液40mL,玻棒沿一个方向 轻缓搅拌。
