发酵种子罐接种标准操作规程
种子罐接种和培育的流程
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1. 准备好种子罐和接种材料。
清洁并消毒种子罐和其他接种材料，如滤纸、培养基和移液器。
发酵的操作规程
发酵的操作规程发酵是一种利用微生物代谢产物进行食品加工、改变食品性质的传统技术。
下面是发酵的操作规程。
一、发酵前准备1. 确定所要制作的食品种类和所使用的微生物菌种。
2. 准备好所需的原材料，包括主要原料和辅助原料。
3. 准备好所需要的设备和器皿，包括发酵罐、发酵器、温度计、PH计等。
4. 对发酵设备进行清洗消毒，确保无细菌和微生物残留。
5. 对所需的原材料进行清洗处理，除去杂质和有害物质。
二、制作发酵基质1. 根据所选用的原料制作发酵基质，一般包括水、面粉、糖、盐等。
2. 按照一定的比例将原料混合均匀，加入适量的水进行搅拌，直到形成较为稠密的糊状物。
3. 将制作好的发酵基质放置在发酵罐中，盖上盖子，进行静置。
三、接种微生物菌种1. 根据所选用的微生物菌种进行培养，保证菌种活性和纯度。
2. 取适量的培养菌种，加入发酵基质中，进行均匀的混合。
3. 注意保持发酵基质的温度和PH值，确保菌种得到良好的生长环境。
四、发酵过程控制1. 控制发酵温度，一般根据菌种的适宜生长温度进行调节，保持在适宜的范围内。
2. 控制发酵时间，根据所制作食品的要求和菌种的生长特性，确定合适的发酵时间。
3. 监测发酵过程中的PH值和酸碱度，保持在适宜的范围内。
4. 监测发酵过程中的氧气含量，及时补充新鲜空气，保证菌种的氧气供应。
5. 定期对发酵过程进行观察和抽样检测，判断发酵的进程和品质。
五、完成发酵1. 根据发酵的需要和所制作食品的要求，确定发酵时间并进行定时监测。
2. 当发酵时间结束后，停止继续添加发酵基质或菌种，即可完成发酵过程。
3. 停止发酵后，对发酵食品进行冷却处理，降低食品的温度。
4. 对发酵食品进行质量检测，包括外观、口感、气味等方面的评估。
5. 根据发酵食品的要求和市场需求，进行进一步的加工和包装。
六、清洁消毒1. 发酵过程结束后，对使用的设备和器皿进行彻底的清洗。
2. 使用合适的清洁剂和消毒剂进行清洗和消毒。
发酵车间操作流程
发酵车间操作流程(一)种子罐操作1)种子罐有俩个分别为201 202 上班的第一件事就是把当天要进的种子罐里的水压掉其操作流程如下:1检查分配站其他阀门是否关闭下水阀门是否打开。
2然后关闭排气阀门。
3打开进空气阀门。
4最后打开移种隔膜阀。
2）水压完后接下来就进罐操作，其流程如下：1水压后关闭进空气阀，打开排气阀门，等压力掉零后再打开罐盖。
2用小管子加水，大概加到淹没第一个搅拌叶片。
3然后再加料其配方：2.4公斤酵母菌粉，4公斤甘油、4公斤豆粉、0.15公斤消泡剂。
先加酵母浸粉加水搅匀用量杯加入罐内，投料之前开搅拌转速为25，然后再把甘油豆粉消泡剂一起搅匀投入罐内，在秤的时候要先称甘油，然后豆粉，最后是消泡剂。
4投完料后再加水至360L。
5盖好盖子拧紧螺丝。
4）投完料后就是消毒操作，其流程如下：1罐盖盖好后打开预热阀门，同时关闭旁边的下水阀门，全开排气阀门，再关闭移种阀门。
然后再更换取样第一阀隔膜，跟移种阀旁边的小排气阀，这俩个每批都要换的。
2等温度升到80℃后再关闭其预热阀门打开旁边的下水阀门，接下来就进气。
3在进汽之前是否补料完成，等补完料才能进汽，首先从取样管那路进汽，开第一阀之前先排水，等水排完后再关小排气阀，之后全开第一阀进汽。
4开移种管那路蒸汽，大概开2∕3 同样在开第一阀之前要先排水。
5打开另外一路蒸汽，开2∕3 同样进汽之前要排水。
6开启接种阀大概开3—5圈。
7先关紧排气阀再开半圈。
8打开过滤器底下阀门，先开大冲一下再关小，俩个过滤器都一样，完了之后再重新检查一遍，确定无误在再去监控室看温度。
9等温度升到118℃后保压（一般116℃,117℃去保压，视情况而定温度上升的快就早点去保压，上升的慢就可以晚点。
）10保压的时候把保压阀先全关再开1∕3,俩个保压阀门都一样。
保压时间为30分钟（在保压的过程中要经常查看移种分配站压力是否为2公斤左右压力。
温度是否从118℃慢慢上升，如果上升的比较快就要把保压阀关小点，操作的过程要先关紧再开，要确保保压阀是开的,如果温度是缓慢的上升就不要急着去调，等升到120℃再视情况而定）。
发酵罐操作快速指南
发酵罐操作快速指南一、控制系统：工控机除发酵系统运行和发酵数据打印拷贝外不得作其他用途！运行数据拷贝前必须将优盘格式化，确保没有病毒带入控制系统！若因特殊原因计算机发生死机时可切断控制电源30秒后重新启动计算机，检查所有运行参数是否正确（计算机有停电数据保存功能）然后可以继续运行。
若需要在数据库中同步保存运行数据的则应该在菜单栏中连接数据库并根据需要指定保存路经。
特别注意不要忘记打开灭菌启动和发酵启动，否则执行机构不会动作！二、灭菌操作：1、夹套预热时应当先排出夹套存水，有夹套进空气阀的应打开通入压缩空气。
2、打开灭菌辅助程序进行正确的设定，不要忘记按开始按钮。
夹套进蒸汽前应关闭所有阀门，然后依次打开相应的操作阀门通入蒸汽。
3、罐体温度达到98℃时应切换阀门使蒸汽经底阀和移种阀进入罐内对底阀和移种阀消毒。
4、罐体温度达到设定的灭菌温度时应切换阀门使蒸汽经空气过滤器进入罐内。
5、以上操作时都应该注意调整好尾气阀的开度，一般只要微开保证蒸汽能够流动即可。
6、灭菌完毕后正向应该立即关闭进气隔膜阀和尾气调节阀保持罐内的压力！然后迅速关闭所有蒸汽阀门，打开空气系统吹干过滤器并随即调整好罐内压力和过滤器的压力，使过滤器的空气正向压力差达到0.1Mpa后再向罐内通气。
随着罐内温度的下降要随时调整通气压力和通气流量，保持符合要求的压力和流量。
操作时只要明确所要进行的操作内容并切换好相应的阀门就不会出现误操作。
三、冷却降温：1、灭菌完毕后通入无菌压缩空气后应及时调整循环系统的阀门位置进入控温状态并退出灭菌程序进入发酵程序，设定好发酵温度（不要忘记点击发酵启动）！2、当罐温降至100℃左右时打开冷水阀的手动“开”使冷却水进入夹套强制降温（注意自来水和冷冻水回流管路的阀门切换）！当温度降至70℃时可将按钮切换到“自动”进入自动控温。
3、机械搅拌发酵罐则还应该打开搅拌电机进入正常运行（顶盖温度未恢复常温前搅拌速度不得高于100rpm）。
种子罐火焰封口接种法
主 讲： 韩文清
生物制药专业《青霉素发酵技术》
知识回顾：
Байду номын сангаас
青霉素生产的种子制备
冷冻干燥孢子
斜面孢子
摇瓶液体培养种子
一级种子罐
制备过程示意图
安瓿管冷冻孢子→斜面孢子→大米孢子→ 一级种子→ 二级种子
完成四个转化，实现目标： 1、菌体数量：少→多(迅速) 2、细胞形态：孢子→菌丝体 3、培养基：固→液 4、容器：小 →大 （管→瓶→ 罐 ）
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
操作口诀
一、关进气，降罐压； 二、拧螺帽，点酒精； 三、倒菌种； 四、加螺帽，保罐压，调通风。
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
别离开吆，看看我们的操作吧
The End
种子罐液体培养基的加入及实消灭
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
接种材料准备
1、酒精火把、酒精棉、镊子、浸水棉线手 套 （？）。
2、培养好的液体摇瓶种（产黄青霉） （27°C，孢子培 养 40h，75-100r/min） 。
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
操作要领
一、关闭进气阀（无菌空气），降低罐压，约0.02MPa； 二、拧松接种口螺帽（留1-2扣），酒精火把置于接口， 点燃，拧掉螺帽，将菌种瓶口在火焰拔塞、过火； 此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（表压接 近于零，但不能为零）。 三、将菌种尽快倒入罐内（接种量10%）； 四、将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。罐压保持在 0.03MPa~0.07MPa，调节通风量。
新课题： 瓶→罐，如何接种？
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种子罐接种操作？
发酵车间操作规程
发酵车间操作规程一、引言发酵车间是生物制药企业中至关重要的环节之一，负责生产各类发酵产品。
为了确保生产过程的安全、高效和稳定，制定本操作规程，明确发酵车间的操作流程和标准，以保证产品的质量和生产的顺利进行。
二、适用范围本操作规程适用于发酵车间的所有工作人员，包括操作员、技术人员、管理人员等。
三、操作规范1. 工作人员准备(1) 工作人员应穿戴符合规定的工作服、工作帽、口罩、手套等个人防护用品，并保持清洁。
(2) 工作人员应按照规定的时间和地点进行签到，并接受必要的培训和考核。
2. 发酵罐准备(1) 发酵罐应在使用前进行清洁和消毒，确保无任何残留物。
(2) 检查发酵罐的各项设备和仪表是否正常运行，如有异常应及时报修。
3. 发酵菌种接种(1) 根据生产计划，准备好所需的菌种，并进行培养和激活。
(2) 在接种前，检查发酵罐的温度、湿度等参数是否符合要求。
(3) 将激活后的菌种按照比例加入发酵罐中，并确保均匀分布。
4. 发酵过程控制(1) 监控发酵罐内的温度、pH值、溶氧量等关键参数，及时调整和控制。
(2) 根据生产工艺要求，添加适量的营养物质和调节剂，以促进发酵过程。
(3) 定期取样进行微生物检测和产品分析，确保发酵过程的稳定性和产品质量。
5. 发酵结束处理(1) 当发酵过程达到预定终点时，停止供气和供料，并进行冷却。
(2) 停止发酵罐内的搅拌装置，并进行产品的收集和分离。
(3) 清洗发酵罐及相关设备，确保无残留物和污染。
6. 突发情况处理(1) 如发生突发情况，工作人员应立即停止操作，并向上级报告。
(2) 在突发情况得到解决之前，不得恢复操作。
四、安全措施1. 工作人员应严格遵守操作规程，不得擅自更改操作步骤或使用不合格的设备。
2. 发酵车间应设有灭火器和应急疏散通道，并定期进行演练和检查。
3. 工作人员应定期接受安全培训，了解和掌握应急处理措施和相关知识。
五、质量控制1. 发酵车间应建立完善的质量管理体系，确保产品符合相关标准和要求。
发酵罐的操作规程
发酵操作规程（空气系统，种子罐，发酵罐）：一,使用前的技术准备 1 . 上岗前的技术培训：发酵罐是机电一体化的高科技设备,因此; 操作人员上岗前必须进行技术培训,使他们熟悉整个系统的工作原理,管路, 阀门的操作程序,并对空压机,能正确操作使用.未经培训的人员,不得单独上岗操作. 2. 设备使用之前, 应先检查电源是否正常, 空压机, 循环水系统是否能正常工作. 3. 检查系统上的阀门, 接头及紧固螺钉是否拧紧. 4. 开动空压机, 用0.15Mpa 压力, 检查发酵罐, 过滤器, 管路, 阀门的密封性能是否良好,有无泄漏. 5. 溶氧仪, pH 仪, PLC 系统应根据使用说明书进行检查, 校正. 6. 上岗人员对上述各项必须能熟练操作.二,空消在投料前,气路,料路,发酵罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态. 1. 空气管路的空消( 1 ) 空气管路上有除水减压阀,和除菌过滤器.除水减压阀不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向除水减压阀的阀门KQF1 关死,使蒸汽通过蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器. (2) 空消过程中, 除菌过滤器下端的排气阀应微微开启, 排除冷凝水. (3) 空消时间应持续40 分钟左右,压力０.1Mpa, 设备初次使用或长期不用后启动时, 当最好采用间歇空消, 即第一次空消后, 暂定2～3小时再空消一次, 以便消除芽孢. (4) 经空消后的过滤器, 应通气吹干, 约30 分钟, 然后将气路阀门关闭. 2. 发酵罐空消(1)发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消. (2) 空消时, 应将罐上的接种口, 排气阀, 及料路阀门微微打开, 使蒸汽通过这些阀门排出, 同时保持罐压为0.13～0.15Mpa. (3) 空消时间为30 分钟, 特殊情况下, 可采用间歇空消. ( 4) 空消结束后, 应将罐内冷凝水排掉. 注意: 1.发酵罐空消时, 应将夹套内的水放掉, 空消时最好将夹套排水阀打开, 以防夹套水排不净. 2.空消时, 溶氧, pH 电极应取出, 可以延长其使用寿命.三,实消:实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程. 1. 空消结束后, 首先需将pH, Do 电极校正好后装入罐体中的接头中, 然后将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水. 2. 一般培养基的配方量以罐体全容积７０—７５%左右，根据培养基的泡沫而定。
(完整版)11发酵操作规程
发酵岗位工艺操作规程1.目的及适用范围1.1 本规定的目的是严格工艺操作，提高工作质量，保证安全文明生产。
1.2本规定适用于发酵工序消毒、接种、移种、温度控制、压力通气量控制、冷冻、取样、加热放罐、输送的过程控制。
2.相关文件:无3.发酵岗位使用专业术语3.1 延滞期：培养基接种以后，细胞并不立即生长繁殖，其细胞数在一定时期内无明显增加，这一阶段称为延滞期。
延滞期是细胞在环境改变后表现出来的一个适应阶段，这是一个静态到动态的过程，须缓慢控制，即用低转速来控制好溶氧。
3.2 对数生长期：细胞经过延滞期后适应了新环境，生理状态也较为活跃，细胞开始迅速繁殖，由于细胞以分裂方式繁殖，细胞数目呈几何级数增加，故称对数生长期。
进入对数生长期可提高转速满足菌种对氧的高呼吸要求。
3.3 稳定期：随着细胞的生长繁殖，培养基中营养物质渐趋耗尽，而代谢产物的逐渐增多，以及菌生长引起周围环境条件（如PH值、温度等）的变化，使的细胞的繁殖速度逐渐降低，当细胞的繁殖速率与死亡速率相等时，细胞生长进入稳定期，细胞浓度达到最大。
3.4 衰亡期：培养基中营养成分耗尽，代谢产物大量堆积，这时能够继续繁殖的细胞数越来越少直至为零，而死亡的细胞则越来越多，即活细胞数显著下降，故此时期称为衰亡期。
3.5 球状菌：球状菌又可细分为单球菌、双球菌、四连球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌。
3.6 杆状菌：3.6.1 按菌的长短细分为长杆菌和短杆菌。
3.6.2 按菌的粗细细分为粗杆菌和细杆菌。
3.6.3 按菌的相连个数细分为单杆菌、双杆菌、链杆菌。
3.7 螺旋状菌：螺旋状菌又可细分为弧菌和螺旋菌。
注：芽孢菌（又称内生孢子）不具有分类学上的意义，其只是细菌（一般为杆菌，球菌也有）在生长过程中细胞内部产生了一些圆状或椭圆状的空心，以抵抗不良环境对其的影响。
4.职责：4.1 认真执行本公司各项管理规定和规章制度。
4.2 严格按单体操作规程和设备操作规程操作，严禁超温、超压，违章操作。
发酵罐操作规程
发酵系统操作规程一、发酵前准备工作（1）检查电源是否正常，空压机、微机系统和循环水系统是否正常工作。
（2）检查系统上的阀门、接头及紧固螺钉是否拧紧。
（3）开动空压机，用0.15Mpa压力，检查种子罐、发酵罐、过滤器、管路、阀门等密封性是否良好，有无泄漏。
罐体夹套与罐内是否密封（换季时应重点检测），确保所有阀门处于关闭状态（电磁阀前方的阀门除外）。
（4）检查水（冷却水）压、电压、气（汽）压能否正常供应。
进水压维持在0.12Mpa，允许在0.15-0.2Mpa范围变动，不能超过0.3Mpa，温度应低于发酵温度10℃；单相电源AC220V±10%，频率50Hz，罐体可靠接地；输入蒸汽压力应维持在0.4Mpa，进入系统后减压为0.24MPa；空压机压力值0.8Mpa，空气进入压力应控制在0.25-0.30MP（空气初级过滤器的压力值）。
（5）温度、溶氧电极、PH电极校正及标定，详见触摸屏PH、DO的标定帮助。
（6）检查各电机能否正常运转（共4个）。
电磁阀能否正常吸合（整套系统共11个电磁阀）。
二、灭菌1.发酵系统安装好后的初次清洗罐内的清洗：酸碱罐、补料罐、种子罐可将罐体上方的法兰卸开，由操作工采用洁净布手动清洗，结束后排尽罐内的污水，在多冲洗几遍即可。
发酵罐的清洗可采用自来水管通过手孔向罐体内壁冲洗，当水位上升到搅拌轴的第二片叶轮时停止冲洗，开动电机搅拌清洗。
各管路的清洗，可以先采用清水冲洗，再根据相应功能采用相应的清洗介质（清洗管路时应以保护管路中的各种元件为前提），具体步骤可参考“空气管路的灭菌”。
如果发酵系统长时间不用或培养的菌体与上一批次的不相同时，可采用2%NaOH清洗，其他各罐也可以采用发酵罐的清洗方式清洗，清洗结束后应对发酵系统灭菌。
2.空气管路的灭菌（1）空气管路上的除菌过滤器，使用蒸汽通过减压阀（空气减压阀不能进行蒸汽灭菌，所以空气预过滤器不灭菌）、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。
10L发酵罐操作规程-简明
10JS发酵罐操作规程1.空罐准备工作1）清洗发酵罐后，盖紧罐盖，旋紧罐盖上压紧螺栓。
2）标定pH、DO电极，将电极插入罐体侧面的传感器接口内并及时的锁紧螺母，确保安装妥当，防止高压下传感器弹出伤人。
3）关闭发酵罐所有与外界相连接口的阀门。
4）装培养基，盖紧进料口。
2.灭菌1）预热（1）预先开启蒸汽发生器、空压机及水源开关（2）开搅拌器，调转速为200—300rpm，温度设为手动，进气三通阀抬到S档。
（3）开排气阀，开排夹套冷凝水阀。
其它所有阀门均为关闭（4）打开总蒸汽阀，打开夹套蒸汽阀，夹套进蒸汽，至培养基温度到98℃。
2）实罐灭菌：温度至98℃时进入实罐灭菌阶段。
（1）停搅拌，微开空气过滤器前的冷凝水阀，开二路蒸汽阀，待冷凝水排尽后，关闭冷凝水阀，三通阀换到F档，蒸汽进罐。
（2）当罐温达到100℃两分钟后，关闭排尾气阀，调节蒸汽阀，维持过滤器前压力为0.12—0.16Mpa，同时必须保证蒸汽阀有一定的开度，不得关死。
（3）达到预定温度时，打开排尾气阀，至有一定量蒸汽排出，关紧或微开夹套蒸汽阀，微开罐底阀（至视镜处培养基翻动有少量变化为宜），根据罐压和罐温变化的趋势，及时调节蒸汽阀和罐底阀。
罐压和罐温维持在预定范围内开始计时。
旋松接种口盖至有少量蒸汽冒出。
此阶段也可灭菌取样管。
3）灭菌完成及降温（1）保温结束后，旋紧接种口，旋紧罐底阀，关小排气阀，关紧取样器蒸汽阀。
（2）关闭一路、二路蒸汽阀，过滤器三通阀置于S档。
缓缓开启空气阀，开启排冷凝水阀。
利用空气吹干空气过滤器膜。
（3）关闭夹套排气阀，打开夹套进水阀和循环管线切断阀。
设定发酵温度，温度控制方式为“自动”，发酵罐进入自动降温。
100℃时可以开搅拌。
（4）打开尾气冷凝器水阀。
当罐压接近0.05Mpa时，过滤器冷凝水排尽后，关闭过滤器冷凝水阀，将三通阀放回F挡，空气进罐。
注意：在降温过程中，始终监视罐压，严禁压力掉零。
3.发酵当温度降至发酵所需温度时进入发酵阶段1）设置各发酵参数为发酵工艺值，此时标定溶氧电极为100%。
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1.0 目的：建立种子罐接种标准操作规程，对操作员工进行培训教育。
2.0 范围：适用于发酵工程部种子罐的接种操作。
3.0 定义：无
4.0 职责：接种操作者、车间主管对本规程负责，QA监督。
5.0 程序：
5.1 接种前准备工作：
5.1.1 在接种前半小时工艺通知值班人员关闭种子罐区窗户，后用1%新洁尔灭
喷洒种子罐区。
5.1.2 准备好1%新洁尔、75%酒精及无菌纱布；确认待接种罐运转正常，罐压在
0.03- 0.05MPa，罐温、pH在工艺要求范围内；接种口硅胶管的末端保
护完好并有活空气微排。
5.1.3 准备好接种用超净台，开启紫外灯，开启风机为高档，紫外灯照射30分
钟。
后关闭紫外灯，开日光灯待接种。
5.1.4 工艺员在接到菌种送来的接种瓶后，检查接种瓶气密性（硅胶塞、夹子
及硅胶管）完好。
5.2 接种：接种操作由工艺员执行，值班人员协助。
所有与接种有关人员在接种前
应洗净双手。
5.2.1 工艺员先用75%酒精消毒双手后，戴上无菌手套，再用75%酒精消毒。
5.2.2 将种子罐接种口末端与接种瓶口末端互相靠近，去除接种口末端纱布，
去除接种瓶口硅胶管末端纱布，将硅胶管口与接种口迅速对接，对接好
后用75％洒精无菌纱布捏紧硅胶管与接种口连接处，防止在按种过程中
管子脱落。
5.2.3 对接完毕，开启蠕动泵将摇瓶种子打入种子罐。
5.3.4 当摇瓶种子瓶里没有种子液进入胶管时，说明摇瓶种子已接完。
5.3.5 摇瓶种子接完后，罐压调至0.03Mpa及以上关闭接种口阀门（防止接种
瓶接种完毕后出现真空现象，导致外面空气进入超净工作台，造成超净
工作台污染），拔下种子罐接种口硅胶管，用沾75%洒精的无菌纱布绑好
接种口，同时将接种瓶硅胶管末端折起用纱布绑好（或用夹子夹好）。
种
子罐接种口硅胶管待清洁后留下批种子进罐用。
接种用硅胶管一个月更
换一次。
5.3.6 超净工作台清洁：按顺序从里到外、从上到下，用1%新洁尔灭纱布擦拭
超净工作台。
吹干后，关闭超净工作台风机。
5.3.7 接种完毕，摇瓶种子瓶由菌种带回清洗。
5.4 同值班人员进行交接，值班人员接收后马上调整相关参数至工艺要求范围，开
车运行。
5.5 各接种相关人员应填好接种记录。
6.0 相关文件:
6.1 硅胶管更换记录
7.0 修订简历:
备注：一个月更换一次。