CFSE细胞增殖实验
准备：
1.20ml预冷5%FBS(HI)-PBS
2.50ml 预冷MACS buffer
3.70um滤网
4.2.5ml RBC lysis
5.LS column
6.50ml 37度预热PBS
7.50ml 37度预热complete culture medium(RPMI 1640 +10% Heat
Inactivated FBS+10 mM HEPES+1 mMpenicilline streptomycin+ 50 mM 2-mercaptoethanol)
（一）CD3抗体包被
取96孔板每孔加入100ul 10ug/ml anti-CD3抗体（PBS）密封4度过夜。
（二）淋巴细胞获取
1.小鼠的脾脏结摘取于10ml 冷5%FBS-PBS中。
2.于70um滤网研磨滤过，500g 4度5min离心后弃上清。
3.2.5ml RBC lysis裂红5 min，10ml 冷5% PBS终止。
4.500g 4度5min 离心后弃上清，10ml MACS buffer重悬，计数。
留取105
个细胞进行FACS。
（三）磁珠分选naïve CD8a+ T细胞
1.Centrifuge cell suspension at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.
2.Resuspend cell pellet in 400 μL of MACS buffer per 108 total cells.
3.Add 100 μL of Naive CD8a+ T Cell Biotin-Antibody Cocktail per 108 total cells.
4.Mix well and incubate for 5 minutes in the refrigerator (2−8 °C).
5.Add 200 μL of MACS buffer per 108 total cells.
6.Add 200 μL of Anti-Biotin MicroBeads per 108total cells. Add 100 μL of CD44 MicroBeads per 108 total cells.
7.Mix well and incubate for an additional 10 minutes in the refrigerator (2−8 °C).
8.Wash cells by adding 10ml of MACS bufferper 108 cells and centrifuge at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.
9.Resuspend up to 108cells in 500 μL of MACS bu ffer.
10.Place LS column in the magnetic field of a suitable MACS Separator.
11.Prepare column by rinsing with 3 mL of MACS buffer.
12.Apply cell suspension onto the column. Collect flow-through
containing unlabeled cells, representing the enriched naive CD8a+ T cell fraction.
13.Wash column with 3 mL ofMACS buffer. Collect unlabeled cells that
pass through, representing the enriched naive CD8a+ T cells, and
combine with the flow-through from step 3.
14.Determine cell number.留取105个细胞进行FACS。
（四）CFSE预处理
1. Remove supernatant from the cell pellet.
2. Add CellTrace™ CFSE (1:1000 dilution in PBS) staining solution and gently resuspend the cells to 1*106/ml.
3. Incubate at 37°C for 20 minutes, protected from light.
4. Add 4 volumes complete culture medium and mix.
5. Incubate at 37°C for 5 minutes.
6. Pellet the cells and remove the supernatant.
7. Resuspend the cell pellet in fresh, pre-warmed complete culture mediumto 1*107/ml.
8.均分两份，其中一份加入2ug/ml anti-CD28，一份不加抗体。
9.包被板使用PBS洗涤一次，按105 -106个细胞／孔梯度接种，培养3天后上机。
CFSE染色方法
CFSE染色方法CFSE（Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester）染色方法是一种常用的荧光染色技术，通过这种方法可以追踪和分析细胞的增殖、分裂和活性等生理过程。
该方法利用CFSE荧光染料的特点，通过与细胞内的酯酶作用而形成的CFSE标记，来实现细胞的可见光荧光示踪。
1.准备CFSE染料溶液。
通常使用的浓度为5-10μM的CFSE染料溶液。
可以将CFSE染料溶于合适的溶剂中，如无菌PBS（磷酸盐缓冲盐水）或DMSO（二甲基亚砜）等。
2.处理待染细胞。
将需要染色的细胞分离出来，通常采用离心法获取细胞沉淀物。
接下来，将细胞悬浮液转移到培养基中。
3.CFSE染料标记。
将CFSE染料溶液与待染细胞混合，使其浓度达到适当的标记浓度。
染色时间一般为10-30分钟，但是时间过长或过短都有可能影响染料的有效标记。
染色完毕后，可以通过加入等体积的培养基来停止反应。
4.清洗和处理标记细胞。
将染色细胞通过离心去除无效的染料溶液，然后用新鲜的培养基洗涤细胞，去除未结合的染料。
5.扩增和培养标记细胞。
将清洗干净的细胞转移到含有适当培养基、生长因子和补充物的培养皿中，进行培养和扩增。
6.荧光显微观察。
通过荧光显微镜观察染色细胞，使用合适的荧光滤镜来观察CFSE荧光的发射。
CFSE染色方法的优势是可以追踪不同细胞的活动和增殖过程，如细胞分裂、生长速度等。
此外，该方法简单、可靠、重复性好，并适用于各种类型的细胞。
通过CFSE染色可以实现对细胞的定量和定性分析，对研究细胞增殖、分化、迁移等生命过程有重要意义。
总之，CFSE染色方法可以通过荧光示踪技术追踪和分析细胞的增殖和分裂过程。
通过上述实验步骤，可以成功地进行CFSE染色实验，并通过荧光显微镜观察和分析染色细胞的活动状态。
这项技术在生物学、生物医学和药物研发等领域有着广泛的应用前景。
CFSE细胞增殖实验
C F S E细胞增殖实验集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#准备：1.20ml 预冷5%FBS(HI)-PBS2.50ml 预冷MACS buffer3.70um滤网4. RBC lysis5.LS column6.50ml 37度预热PBS7.50ml 37度预热complete culture medium(RPMI 1640 +10% Heat InactivatedFBS+10 mM HEPES+1 mM penicilline streptomycin+ 50 mM 2-mercaptoethanol)（一）CD3抗体包被取96孔板每孔加入100ul 10ug/mlanti-CD3抗体（PBS）密封4度过夜。
（二）淋巴细胞获取1.小鼠的脾脏结摘取于10ml 冷5%FBS-PBS中。
2.于70um滤网研磨滤过，500g 4度 5min离心后弃上清。
3. RBC lysis裂红5 min，10ml 冷5% PBS终止。
4.500g 4度 5min 离心后弃上清，10mlMACS buffer重悬，计数。
留取105个细胞进行FACS。
（三）磁珠分选nave CD8a+ T细胞cell suspension at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.cell pellet in 400 μL of MACS buffer per 108 total cells.100 μL of Naive CD8a+ T Cell Biotin-Antibody Cocktail per 108 total cells.well and incubate for 5 minutes in the refrigerator (28 °C).5.Add 200 μL of MACS buffer per 108 total cells.6.Add 200 μL of Anti-Biotin MicroBeads per 108total cells. Add 100 μL of CD44 MicroBeads per 108 total cells.7.Mix well and incubate for an additional 10 minutes in the refrigerator (28 °C).8.Wash cells by adding 10ml of MACS buffer per 108 cells and centrifuge at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.9.Resuspend up to 108cells in 500 μL of MACS buffer.10.Place LS column in the magnetic field of a suitable MACS Separator.11. Prepare column by rinsing with 3 mL of MACS buffer.12.Apply cell suspension onto the column. Collect flow-through containingunlabeled cells, representing the enriched naive CD8a+ T cell fraction. 13.Wash column with 3 mL of MACS buffer. Collect unlabeled cells that passthrough, representing the enriched naive CD8a+ T cells, and combine with the flow-through from step 3.14.Determine cell number. 留取105个细胞进行FACS。
CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 说明书
CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 产品编号产品名称包装C1031 CFDA SE (细胞增殖示踪荧光探针) 5mg产品简介：CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester ，是一种近年来被广泛应用的细胞增殖检测用荧光探针，也可以用于细胞的荧光示踪。
基于CFDA SE 荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine 掺入、BrdU 标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。
使用CFDA SE 检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA-SE 的分子式为C 29H 19NO 11，分子量为557.47，CAS number 为150347-59-4。
CFDA SE 可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE ，CFSE 可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine 残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。
在加入荧光探针CFDA SE 后大约24小时，即可充分标记细胞。
被CFDA SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。
CFDA SE 标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE 标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。
采用CFDA SE 通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。
每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。
FlowJo分析细胞增殖
注册 |登录构建全球华人科学博客圈返回首页 RSS 订阅 帮助 FlowJo 分析细胞增殖已有 521 次阅读 2012-8-21 14:20 |个人分类:FlowJo 使用|系统分类:科研笔记|关键词:细胞增殖，数据分析，FlowJo ，CFSE ，博文FlowJo 分析细胞增殖CFSE 法检测细胞增殖的原理：CFSE(CFDA-SE)是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，CFSE 进入细胞后可以不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。
在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。
演示数据：Proliferation tutorial ：实验中所用的荧光染料为eFluor ® 670 Proliferation Tutorial Data.rarFlowJo 分析细胞增殖的步骤：1. 确定要分析的目标细胞群（下图为演示数据中的样本Sample 1）2. 打开增殖分析平台：到“工具”菜单栏中选择“细胞增殖”，打开增殖分析平台，将参数轴中的参数更换为本实验中所采用的APC_A::670Dye ，如下图所示：张千君加为好友 给我留言 打个招呼发送消息FlowJo 中文技术博客分享/u/FlowJo流式细胞技术相关资源分享，流式细胞数据分析，流式技术支持及培训博客首页动态记录博文相册主题分享好友留言板个人资料左边为拟合结果图，右边为各个统计数据，其中：RMS: root mean square error的缩写，反映的是拟合结果与实际数据的吻合程度，RMS数值越小，说明拟合结果越好。
3.打开增殖分析平台左下角的“Options”选项选项中各个参数的介绍：#Peaks：增殖峰的数目，默认的最大数目为8个。
随着细胞的分裂，子代细胞所含的CFSE荧光染料的量以2倍的比例递减，分裂到第七代的时候，第七代细胞的CFSE荧光强度只有原代细胞的1/128，可能低于细胞的自发荧光。
CFSE的配制和实验步骤
在使用前仔细阅读说明书-Cellstain-CFSE货号规格C375 1 mg荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。
其基本原理如下：CFSE是一种带有琥珀酰亚胺(NHS)的荧光染料，可以结合细胞内的蛋白质。
CFSE在结构上将酚羟基部位改造成AM体，所以自身不发荧光，荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，进入细胞内的CFSE的AM部位能被细胞内酯酶水解发出绿色荧光。
CFSE的琥珀酰亚胺(NHS)和细胞内蛋白质的氨基部位结合，固定在细胞内，不会漏出细胞外。
CFSE进入细胞后定位于细胞膜、细胞质和细胞核，在细胞核的荧光最强。
在细胞分裂增殖过程中，CFSE的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。
另外，CFSE标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。
建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、CFSE 的终浓度、培养时间等，找到最佳实验条件。
配制试剂：1、从冰箱中取出CFSE试剂，放至室温后再打开。
盛放CFSE的管子开盖前请轻弹管壁几次，让粉末充分落入管底，必要时可采用离心的方法。
2、1000mgCFSE溶解于360ul的DMSO，制成5mM的储存液，于-20℃避光保存，使用时，用无血清DMEM培养液稀释成5μM的工作液备用。
a) DMSO 需要保证新鲜无水，否则将会导致AM体水解，使荧光染料无法进入细胞，影响实验效果。
b) 由于CFSE母液遇水极易分解，所以建议分装保存，例如分装成5μl/管。
（方法：分装后用封口膜密封管口，再用锡箔纸包裹，最后和干燥剂一起用塑料袋密封，≦-20℃冷冻保存。
）c) CFSE 工作液应现配现用，因为CFSE吸水会分解，影响染色效果。
CFSE细胞增殖实验
C F S E细胞增殖实验Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998准备：1.20ml 预冷5%FBS(HI)-PBS2.50ml 预冷MACS buffer3.70um滤网4. RBC lysis5.LS column6.50ml 37度预热PBS7.50ml 37度预热complete culture medium(RPMI 1640 +10% Heat InactivatedFBS+10 mM HEPES+1 mM penicilline streptomycin+ 50 mM 2-mercaptoethanol)（一）CD3抗体包被取96孔板每孔加入100ul 10ug/mlanti-CD3抗体（PBS）密封4度过夜。
（二）淋巴细胞获取1.小鼠的脾脏结摘取于10ml 冷5%FBS-PBS中。
2.于70um滤网研磨滤过，500g 4度 5min离心后弃上清。
3. RBC lysis裂红5 min，10ml 冷5% PBS终止。
4.500g 4度 5min 离心后弃上清，10mlMACS buffer重悬，计数。
留取105个细胞进行FACS。
（三）磁珠分选nave CD8a+ T细胞cell suspension at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.cell pellet in 400 μL of MACS buffer per 108 total cells.100 μL of Naive CD8a+ T Cell Biotin-Antibody Cocktail per 108 total cells.well and incubate for 5 minutes in the refrigerator (28 °C).5.Add 200 μL of MACS buffer per 108 total cells.6.Add 200 μL of Anti-Biotin MicroBeads per 108total cells. Add 100 μL of CD44 MicroBeads per 108 total cells.7.Mix well and incubate for an additional 10 minutes in the refrigerator (28 °C).8.Wash cells by adding 10ml of MACS buffer per 108 cells and centrifuge at 300×g for 10 minutes. Aspirate supernatant completely.9.Resuspend up to 108cells in 500 μL of MACS buffer.10.Place LS column in the magnetic field of a suitable MACS Separator.11. Prepare column by rinsing with 3 mL of MACS buffer.12.Apply cell suspension onto the column. Collect flow-through containingunlabeled cells, representing the enriched naive CD8a+ T cell fraction. 13.Wash column with 3 mL of MACS buffer. Collect unlabeled cells that passthrough, representing the enriched naive CD8a+ T cells, and combine with the flow-through from step 3.14.Determine cell number. 留取105个细胞进行FACS。
CFSE示踪与流式细胞仪检测法研究环磷酰胺对T淋巴细胞增殖的影响
◇实验方法学◇CFSE 示踪与流式细胞仪检测法研究环磷酰胺对T 淋巴细胞增殖的影响包晶晶,林海霞,马 璟(上海医药工业研究院国家上海新药安全评价研究中心,上海 201203)收稿日期:2009-12-30,修回日期:2010-03-18基金项目:科技部“十一五新药创制”重大专项资助课题(No2008ZX093052006);上海市科委企业技术创新团队项目资助(No 08430516200)作者简介:包晶晶(1983-),女,硕士生,E 2mail:jjb19831@g mail .com;马 璟(1963-),女,博士,研究员,博士生导师,通讯作者,Tel:0212508003332106中国图书分类号:R 2332;R 329.24;R 331.125;R 979.1;R 979.5文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2010)06-0828-05摘要:目的 利用定量分析羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyflu 2orescein diacetate succini m idyl ester,CFSE )时间系列数据的方法研究淋巴细胞细胞增殖动力学及免疫抑制剂对淋巴细胞增殖抑制机制的研究。
方法 环磷酰胺造成小鼠免疫抑制模型,并用CFSE 染料给对照组和给药组动物的淋巴细胞染色,通过数学模型拟合法分析数据。
结果 对照组和给药组淋巴细胞增殖进入第一代分裂的时间分别是27117h 和22188h,每代细胞死亡率分别为20%和40%;进入分裂前的细胞半衰期分别为31153h 和43132h 。
结论 通过数学拟合法对CFSE 数据进行定量分析,探讨药物对淋巴细胞增殖影响的机制,该实验中的药物环磷酰胺抑制淋巴细胞增殖的方式可能是使细胞增殖时每代细胞的死亡率增加所致。
关键词:CFSE;定量分析;数学拟合;流式细胞仪;淋巴细胞增殖;环磷酰胺 传统的测定淋巴细胞增殖的方法只能通过细胞数量的变化来反映细胞增殖的的变化,不能更深入的洞察细胞增殖是如何被改变的。
基于CFSE染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立
本文受国家973计划(2005CB523202)资助作者简介:赵和平(1983年-),男,硕士,主要从事动物病毒疫苗效力评价研究;通讯作者及指导教师:仇华吉(1967年-),男,博士,研究员,主要从事分子病毒学与免疫学研究,E mail:huajiqiu@ 。
免疫学技术与方法基于CFSE 染色的猪淋巴细胞增殖试验方法的建立赵和平 孙 元 袁 远 仇华吉(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,哈尔滨150001)中国图书分类号 S852 文献标识码 A 文章编号 1000 484X(2009)02 0159 05[摘 要] 目的:建立一种方便可靠的评价猪只细胞免疫水平的试验方法。
方法:用终浓度分别为3、6、9和12 g/ml 的刀豆素A(Con A)刺激经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(C FSE)染色的猪外周血单个核细胞(PBMC)3、5和7天,然后用荧光标记的单克隆抗体对CD4+和CD8+细胞进行标记,最后利用流式细胞术分析。
结果:不同浓度ConA 刺激后,猪PB MC 增殖能力不同,Con A 浓度为6 g/ml 时CD4+和CD8+细胞的细胞分裂指数最大,用MTT 试验也获得相似结果。
对PB MC 刺激5天后进行分析相对较好。
结论:建立了一种基于活细胞染料C FSE 染色的猪淋巴细胞增殖试验方法,该方法可以在单个细胞水平上有效地分析刺激后CD4+和CD8+细胞亚群的增殖水平,进而评价细胞免疫水平。
[关键词] 猪淋巴细胞;细胞免疫;C FSE 染色;淋巴细胞增殖试验A method for detecting porcine lymphocyte proliferation based on CFSE stainingZ HAO He Ping ,SU N Yuan ,YU AN Yuan,QIUHua Ji.Division o f Swine Infectious Diseases,Harbin Veterinary Research Institute,The Chinese Academy o f Agricultural Sciences,Harbin 150001,China[Abstract] Objective:To develop a method to assess porci ne cell mediated immunity (CMI).Methods:PBMCs from pigs were stained wi th intracellular fluorescen t dye,CFSE,and stimulated wi th varied amounts of ConA (0,3,6,9,and 12 g/mL),and plated in 3replicate cul tures for 3,5,or 7days.Then CD4+cell and CD8+cells were labeled with fluorescent antibodies.Data were acquired using flow cytometry (FC M )and analyzed using CellQuest software.Results:Cell division indices of porci ne CD4+and CD8+cells were different when porcine PB MCs were sti mulated with different doses of ConA.The results were similar to those obtained by MTT method.Op timal results were obtained when porcine lymphocytes were s timulated for 5days.C onclusion:The CFSE based method developed in this study can be used to analyze the proliferation of di fferent cell subsets si multaneonsly.[Key w ords] Porcine lymphocytes;Cell mediated immunity;CFSE staining;Lymphocyte proliferation目前对我国养猪业危害最大的主要是一些病毒性疾病,这些疫病主要通过疫苗接种手段来控制。
CFSE增殖实验
CFSE增殖实验-江英骙PBMC增殖染色分2天第一天1.分PBMC，培养基为R10+双抗（100: 1），将细胞从15ml离心管转移至培养瓶中（大概5ml的培养基，不要超过培养瓶的线），37度孵箱培养1天，使单核细胞贴壁；2.CD3包被96孔平底板（eBioscience, functional的抗体，浓度为1mg/ml的CD3），PBS每1ml中加5ul的CD3，然后每孔铺100ul，用封口膜封板，避免污染，可用包装纸再包起来，4度冰箱过夜。
第二天1.收PBMC，将培养瓶中的细胞悬液转移至15ml离心管中（贴壁细胞不要）。
先计数，离心，1800rpm，10min，弃上清，用预热的PBS（37度水浴锅提前预热无菌PBS）洗一遍细胞，离心，1800rpm，10min，弃上清，将细胞打散（用手弹）；2.CFSE应用预热至37度的PBS 调整至工作浓度（1ul的CFSE ，用预热的PBS加至终体积为2ml），每10的7次细胞加1ml；（15ml离心管）3.细胞管中加入37度的CFSE 1ml ，混匀，并将试管壁反复吹洗（避免粘于试管壁的细胞未染色或染色量少造成染色不均匀）；4.37度水浴锅避光孵育15min，中间至少震荡一次（用手弹）；5.直接离心，1800rpm，10min；6.加入R10+双抗（加入量是之前加入CFSE体积的5倍以上），5到10ml重悬，37度孵箱孵育5min；7.离心，1800rpm，10min；8.再洗一遍，重复步骤79.R10+双抗重悬，计数；10.调整细胞浓度至1*10^6/ml，每孔加入细胞100ul11.每孔加入新鲜配制的培养基100ul（R10+双抗，1ml加入CD28 5ul），每孔的终体积为200ul；（此时的培养基不用37度预热）12.放入大细胞房培养7天，收细胞；13.可染CD3，CD4(注意做blank对照)，进行流式分析（CFSE为FL1通道，与FITC为一个通道）。
CFSE法检测刺激剂对淋巴细胞增殖与活化
素（ Ｐ Ｈ Ａ） 和佛 波酯 （ Ｐ ＭＡ） 培养７ ２ ｈ对淋 巴细胞分裂与增殖 的影 响． 并采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法检 测不 同刺激剂
对淋 巴细胞上 清 Ｉ Ｆ Ｎ ￣ ／ 质量浓度的影响． ０ ． １ ２ ５ ｍＬ的抗 Ｃ Ｄ ３ ／ ２ ８抗体和 ５或 １ Ｏ ｇ ／ ｍ Ｌ的 Ｐ Ｈ Ａ 可
ｏ ｆ Ｎｏ ｎ—Ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ｌ ａ Ｄｒ ｕ ｇ Ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｓ ｍ ｎｄ ａ Ｐ Ｋ ／Ｐ Ｄ Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ，Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｍａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ａｃ ａ ｄ ｅ ｍｙ ｏ ｆ
中图分 类号 ： Ｒ ４ ４ ６
文献标识码 ： Ａ
文章 编号 ： １ ６ ７ ２— ０ ９ ４ ６ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ２— ０ １ ２ ９— ０ ６
ＣＦＳ Ｅ— － ｌ ａ ｂ ｅ ｌ ｅ ｄ ｐｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｓ ｆ ｏ ｒ ａ ｓ ｓ ｅ ｓ ｓ ｍｅ ｎｔ ｏ ｆ Ｔ ｃ ｅ ｌ ｌ ｆ ｕｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎｄ ｕｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｄ ｉ ｆｅ ｒ ｅ ｎｔ ｓ ｔ ｉ ｍｕ ｌ ａ ｎｔ ｓ
Ｖ ｏ １ ． ３ ３ Ｎ ｏ ． ２
Ａ ｐ ｒ ． ２ ０ １ ７
Ｃ Ｆ Ｓ Ｅ法 检 测 刺 激 剂 对 淋 巴细胞 增 殖 与活 化
薛妮娜 坤 ， 董 凯 ， 来芳芳 ， 黄 蕊 ， 陈晓光ｈ
（ １ ．中国医学科学 院药物研究所 ， 天然药物活性物 质与功能 国家重点实验室／ 创新药物非Ｉ 临床药物 代谢及 Ｐ Ｋ ／ Ｐ Ｄ研究北京市重点实验 室 ， 北京 １ ０ ０ ０ ５ ０； ２ ．天津红 日药业股份有 限公 司 ， 天津 ３ ０ １ ７ ０ ０ ）