人肿瘤坏死因子α(TNF-α)说明书

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肿瘤坏死因子-α 正常水平

肿瘤坏死因子-α 正常水平

肿瘤坏死因子-α正常水平肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)是一种由活化的免疫细胞分泌的细胞因子,广泛参与了多种免疫和非免疫反应。

TNF-α可以激活、调节各类免疫细胞、介导细胞凋亡、促进炎症反应、改变代谢、参与器官发育、影响认知和情绪等多种生理和病理过程。

本文将重点介绍 TNF-α的正常水平及其相关参考内容。

正常水平TNF-α的正常水平会因年龄、性别、生理状态、环境因素等多种因素而异。

正常人体血清中 TNF-α的浓度大约是 1.6 -14.5 pg/mL,但这个水平也有很大的变异性。

此外,不同的检测方法和试剂盒也可能对 TNF-α的检测结果产生影响。

鉴于此,医生在判读检测结果时应该参考具体的医学指南并结合患者情况,以免产生误差。

参考值的设定通常是以健康人群的平均值为基准,多数实验室以3 pg/mL ~ 5 pg/mL为临界值。

当血清中 TNF-α的浓度超过临界值,则有可能存在某些炎症、感染、肿瘤等疾病。

当然,TNF-α检测结果应该与临床症状、其他病理检查结果等综合分析,不能单独作为诊断标准。

影响因素TNF-α的分泌受到多种生理和病理因素的影响。

以下是一些常见影响因素:1. 炎症和感染:TNF-α主要在炎症和感染状态下才会被大量产生。

细菌、病毒或其他致病微生物侵入机体后,会刺激免疫细胞分泌 TNF-α,以启动炎症反应并抵抗病原体。

2. 创伤和手术:创伤和手术也可以引起机体炎症反应,从而促进 TNF-α的分泌。

尤其是大面积的烧伤、创伤和手术后综合征等情况,TNF-α的水平会显著升高,并可能影响病情和预后。

3. 肥胖和代谢紊乱:一些研究表明,肥胖、2型糖尿病和代谢综合征等代谢紊乱疾病与 TNF-α的水平升高有关。

这可能是由于TNF-α与脂肪细胞、胰岛素、葡萄糖代谢等有关的机制。

4. 其他因素:其他因素如精神压力、某些药物、环境污染等也可能引起 TNF-α的变化,但目前仍需进一步研究证实。

TNF-a说明书

TNF-a说明书

人(human)肿瘤坏死因子a(TNF-a)说明书本试剂盒仅供研究使用标本:血清或者血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2~8℃干燥保存酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶 12.0毫升 2~8℃冷藏保存标准品 (Standard) 5瓶各1.0毫升 2~8℃冷藏保存呈色剂A (Substrate A) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存呈色剂B (Substrate B) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶 60.0毫升 2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶 15.0ml 2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、注意事项1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。

2.使用前应将盒内各试剂取出。

室温放置至少30分钟,3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。

4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。

不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。

6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。

7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。

8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。

三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。

2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。

肿瘤坏死因子TNFα

肿瘤坏死因子TNFα

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。

用纯化的人肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α,再与HRP标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定

响。因为 TNF-β 细胞毒生物学作用等很多生物学效应均与 TNF-α 相似。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子,不仅具有选择性 地杀伤某些肿瘤细胞,而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免 疫学检测方法。其中细胞毒生物学检测方法敏感性较高,最为常用;免疫学检测方法包括酶 联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫测定法。
(一) 原理: TNF-α 受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞,根据 TNF-α 与相应靶细胞结合后引 起不同的生物学效应,建立了多种检测 TNF-α 生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的 TNF-α 受体与 TNF-α 结合后,可导致这些肿瘤细胞的死亡,可通过检测对肿瘤细胞的杀伤 能力,来反映 TNF-α 的生物学活性。若这种肿瘤细胞先用 3H-TdR 标记,则被杀伤后3H-TdR 释放至细胞外,牽 I 通过测定肿瘤细胞释放3H-TdR 的量来反映 TNF-α 的杀伤活性。 (二) 操作步骤:
用 DYQ-Ⅱ型多头细胞收集器收集样品于 "9999"型玻璃纤维滤纸上
↓ 烤干后,进行 β 计数
结果判定:
1. TNF-α 作用 24h 后,在倒置显微镜下判定 50%L929 细胞杀伤的稀释度即为1个
TNF-α 活性单位。
2. 根据测得的 cpm 值按下列公式计数活性单位:
TNF-α 活性单位(U/ml)
对照组 cpm 值。
3. 胰蛋白酶和 DNA 酶浓度和消化时间要严格控制,犆?批酶均要摸索最适浓度和时间。
否则,消化时间过长或过短者会影响实验结果。
4. 为了增强检测系统的敏感性,在测定系统中加入放线菌素 D,但浓度不宜过大,一
般最终浓度为 0.5~1μg/ml。

TNF-a说明书

TNF-a说明书

人(human)肿瘤坏死因子a(TNF-a)说明书本试剂盒仅供研究使用标本:血清或者血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2~8℃干燥保存酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶 12.0毫升 2~8℃冷藏保存标准品 (Standard) 5瓶各1.0毫升 2~8℃冷藏保存呈色剂A (Substrate A) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存呈色剂B (Substrate B) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶 60.0毫升 2~8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶 15.0ml 2~8℃冷藏保存英文说明书,中文说明书各一份室温保存二、注意事项1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。

2.使用前应将盒内各试剂取出。

室温放置至少30分钟,3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。

4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。

不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。

6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。

7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。

8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。

三、实验前准备1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。

2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。

重组改构肿瘤坏死因子 注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书

重组改构肿瘤坏死因子 注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书

重组改构肿瘤坏死因子注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书注射用重组改构人肿瘤坏死因子治疗非小细胞肺癌患者下面是小编整理的注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书,欢迎阅读。

注射用重组改构人肿瘤坏死因子商品介绍通用名:注射用重组改构人肿瘤坏死因子生产厂家: 上海唯科生物制药有限公司批准文号:国药准字S2*******药品规格:50万IU*2支/盒药品价格:¥950元注射用重组改构人肿瘤坏死因子说明书【商品名称】天恩福【通用名称】注射用重组改构人肿瘤坏死因子【英文名】:InjectionofRecombinantMutantHumanTumorNecrosisFactor【汉语拼音】:ZhusheyongChongzuGaigouRenZhongliuhuaisiyinzi【主要成份】重组改构人肿瘤坏死因子【性状】白色或微黄色疏松体【适应症】天恩福与CAp化疗方案联合适用于经其他方法治疗无效或复发的晚期非小细胞肺癌患者。

【用法用量】仅可与CAp化疗方案使用。

每支用2ml注射用水溶解,肌肉注射,每次400万U/M2,第1-7天及第11-17天每天用药一次,21天为一个疗程,可试用两个疗程。

如无较明显效果,建议停止继续使用。

【不良反应】在天恩福的临床研究中,先后共有约450例受试者接受了天恩福的治疗,试验中,天恩福短疗程应用的近期不良反应主要表现为发热、感冒样症状,注射局部疼痛、局部红肿硬结、骨肌肉疼痛,发生率在80%左右。

4例受试者因发热不能耐受而中止治疗。

出现上述不良反应时,可采取相应的对症治疗措施。

天然肿瘤坏死因子为多效应细胞因子(见上述药理作用),改构后其性质和特点又可能会发生较复杂的变化,由此可能对造血系统、免疫系统及神经系统等产生不良反应和长期后续效应,特别是对某些肿瘤可能具有潜在的促进作用,以及发生与自身免疫性相关的疾病等,因此对天恩福可能发生的远期和潜在不良反应需给予密切关注。

【禁忌症】1.对天恩福所含成份过敏者禁用。

四正柏生物 人类TNF-α ELISA试剂盒说明书

REV20190712仅供研究,不用于临床诊断。

客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ......................................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................................. - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................................. - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................................. - 5 -其他实验材料 ......................................................................................................................................................... - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................................. - 5 -样本收集处理及保存方法 ..................................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................................. - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................................. - 7 -操作流程图 ............................................................................................................................................................. - 8 -操作要点提示 ......................................................................................................................................................... - 8 -结果判断 ................................................................................................................................................................. - 9 -结果重复性 ........................................................................................................................................................... - 10 -灵敏度 ................................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ................................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ............................................................................................................................................................... - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)说明书

人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。

用纯化的人肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α,再与HRP标记的肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

肿瘤坏死因子拮抗剂(TNF-α)治疗强直性脊柱炎临床不良反应观察-精品文档资料

肿瘤坏死因子拮抗剂(TNF-α)治疗强直性脊柱炎临床不良反应观察Tumor Necrosis Factor (TNF-alpha) Treatment of Ankylosing Spondylitis Clinical Adverse Reactions Observed/XU Gang.//Medical Innovation of China,2012,9(28):037-038【】Objective:To learn about the common and the rare adverse reactions taking place in the clinical treatment of ankylosing spondylitis with tumor necrosis factor (TNF) antagonist.Method:50 cases of patients were enrolled in this group receiving TNF antagonist (the product used in this group was Etanercept from Shanghai CP Guojian Pharmaceutical Co,Ltd) for treating ankylosing spondylitis.In addition,the incidence of adverse reactions and the common reverse reactions were observed.Result:Of the 50 patients received TNF antagonist for treating ankylosing spondylitis,first-dosage adverse reactions occurred in eight cases and medium or long-term adverse reactions occurred in 5 cases.Conclusion:The usage of biological agent in the treatment of ankylosing spondylitis is considered as a safe and efficaciousapproach,in which the occurrence and management of the adverse reactions should be concerned.First-author’s address:The Central Hospital of Xuzhou Datun Coal and Electricity Company,Xuzhou 221611,Chinadoi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.28.021强直性脊柱炎(AS)是一种慢性炎症性疾病,主要侵犯骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织及外周关节,并可伴发关节炎表现,严重者可发生脊柱畸形和强直。

Recombinant Human TNF alpha_AbMole中国_M9370说明书Protocol

产品说明Protocol分子量溶解性(25°C )DMSO N/A 分子式Water Soluble CAS 号Ethanol N/A储存条件2-8°C, dry, protect from light, sealed生物活性重组人肿瘤坏死因子α(Recombinant Human TNF α)是一个同源三聚体,它在生长调节、分化、炎性反应、病毒复制、肿瘤发生、自身免疫性疾病以及病毒、细菌、真菌和寄生虫感染中都起到重要的作用。

TNF α除了诱导肿瘤的出血性坏死外,还和肿瘤发生、肿瘤转移、病毒复制、败血性休克、发热、发炎和罗恩氏病、风湿性关节炎、器官移植排斥等自身免疫性疾病发生有关。

TNF α是一种在多种肿瘤细胞和其他特定靶细胞中具有细胞毒素效应的强效淋巴因子。

内毒素(Endotoxin )<0.01EU/ug 使用说明(Instructions )推荐使用浓度为 1000IU/ml 。

如需分装,可用注射用水、生理盐水、培养基或PBS 稀释,稀释后浓度保持在 100ug/mL 以上。

稀释后置于-20℃保存期 3 个月,-80℃保存期 6 个月。

不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(数据来源于FDA 指南)小鼠大鼠兔豚鼠仓鼠狗重量 (kg)0.020.15 1.80.40.0810体表面积 (m )0.0070.0250.150.050.020.5K 系数36128520动物A (mg/kg) = 动物B (mg/kg) ×动物B 的K 系数动物A 的K 系数例如,依据体表面积折算法,将白藜芦醇用于小鼠的剂量22.4 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将22.4 mg/kg 乘以小鼠的K 系数(3),再除以大鼠的K 系数(6),得到白藜芦醇用于大鼠的等效剂量为11.2 mg/kg 。

抑制剂化合物库CCK-8 / 蛋白酶抑制剂CocktailAbMole 中国Recombinant Human TNF α 目录号M9370化学数据所有产品仅供科研使用,严禁用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行实验。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
3.可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
操作步骤
浓度分别为(300 ng/L,200ng/L ,100ng/L,50 ng/L,25 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样
品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混
肿瘤坏死因子 α(TNF-α)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
肿瘤坏死因子 α,再与 HRP 标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过
彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化
成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子 α 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波
用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子 α(TNF-α)浓度。
试剂盒组成
1 20 倍浓缩洗涤液
50ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品(450ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板
12 孔×8 条
9 标准品稀释液
2ml×1 瓶
4 样品稀释液
人肿瘤坏死因子 α(TNF-α)酶联免疫分析(ELISA)研究使用。
药品名称:
通用名:人肿瘤坏死因子 α(TNF-α)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆、或其它组织液中肿瘤坏死因子 α(TNF-α)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子 α(TNF-α)水平。用纯化的人
大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 6.底物请避光保存。 7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 检测范围: 20ng/L -400 ng/L 规格: 96 人份/盒 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 个月
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标
准品 100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从第一孔、第二
孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl,
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉,再各取 50μl 分别加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各
取 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混
匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准
品稀释液 50μl,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl,
15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
计算 以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
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